中草藥發(fā)酵物對南美白對蝦生長、肝臟抗氧化酶活性的影響

齊國山 郭 冉 張 靜 沈慶洲 申 亮

近幾十年來，我國已成為全球第一水產(chǎn)養(yǎng)殖大國，然而不合理的集約化養(yǎng)殖方式帶來諸多病害。每年因病害造成多達百億的直接經(jīng)濟損失，因此研發(fā)有效預(yù)防及治療藥物已刻不容緩。傳統(tǒng)藥物易富集、有殘留、污染水體，抗生素抗藥性嚴(yán)重，不宜大量使用。中草藥發(fā)酵物與其他藥物相比，利用率高、預(yù)防效果好、徹底、無毒、環(huán)境友好、成本低，近年來逐漸得到重視。

南美白對蝦（Penaeus vannamei Boone），是我國水產(chǎn)養(yǎng)殖的主要品種之一，隨著病害肆虐，近年來有一些研究將中草藥添加到白對蝦飼料中有一定效果，但適口性差、配伍不合理等問題，始終無法解決。因此，本研究擬將中草藥經(jīng)發(fā)酵解決上述問題，通過對白對蝦生長效果進行調(diào)查，研究本中草藥發(fā)酵物的添加效果。

表1 飼料配方

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗藥材 中草藥發(fā)酵物的制備：2g枯草芽孢桿菌+1g飼料酵母+2g德氏乳桿菌加入到中草藥復(fù)合物（大黃24g，黃芪18g，黃芩18g，茵陳30g，大蒜40g）混勻，將混合物加入到300g麥麩（已過50～60目篩）混勻，混合物與300g面粉（已過50～60目篩）混勻，加水使水分達到40%，混勻，加入到發(fā)酵罐進行固態(tài)密封發(fā)酵（T：30～34℃，3h通氣一次，每次10min，絕氧30h后，繼續(xù)發(fā)酵60h），低溫干燥，粉碎過80目篩，包裝備用。

1.1.2 試驗魚苗及分組 選擇健康、大小一致的白對蝦600尾，暫養(yǎng)，按每桶50尾放蝦（蝦大小為5±0.2g），隨機分配到四個處理組（0%中草藥發(fā)酵物組為對照組、1.0%中草藥發(fā)酵物組、4.0%中草藥發(fā)酵物組、8.0%中草藥發(fā)酵物組）的12個400L養(yǎng)殖桶中進行45d養(yǎng)殖效果實驗。

1.2 方法

1.2.1 飼料配制 表1為符合白對蝦營養(yǎng)需求的飼料配方?；A(chǔ)飼料配方基礎(chǔ)上分別添加0、1.0%、4.0%、8.0%的中草藥發(fā)酵物，即為對照組（0%CHMFE組）、1.0%CHMFE組、4.0%CHMFE組、8.0%CHMFE組飼料。飼料原料經(jīng)粉碎過80目篩，經(jīng)配料、混合，擠壓制粒，制成直徑1mm顆粒。

表2 飼料中添加中草藥發(fā)酵物對白對蝦生長效果的影響（平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤，n=3）1,2

表3 肝臟酶的活性測定（平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤，n=3）1,2

1.2.2 投喂管理 每天8：00、16：00投喂，定期換水，充氣。記錄飼料投喂量，如有殘餌，吸出，烘干并記錄。定期檢測水質(zhì)，水質(zhì)條件如下：pH值7.5、氨氮＜0.1mg/L、亞硝酸鹽＜0.02mg/L、溶氧＞5mg/L。每天檢查是否有死蝦，如有撈出，稱重記錄。

1.2.3 肝臟酶活性測定

超氧化物岐化酶（SOD）活性測定；過氧化氫酶（CAT）活性測定。

1.2.4 計算

增重率（%）=100×（末重-初重）/初重；

平均增重=末重/末尾數(shù)-始重/始尾數(shù)；

特定生長率=100×（ln末重-ln始重）/養(yǎng)殖天數(shù)；

料比=攝食量/增重量；

成活率=100×末尾數(shù)/初尾數(shù)；

肝體比=100×肝臟重/魚體重；

酶活=[（0.07-樣液速率）/0.07×100%]/50%×反應(yīng)液總體積×樣液稀釋倍數(shù)/樣液體積

1.2.5 數(shù)據(jù)處理 用spss13.0對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析。

2 結(jié)果與分析

飼料中添加中草藥發(fā)酵物（CHMFE）對白對蝦生長效果的影響見表2。與對照組相比，添加中草藥發(fā)酵物對白蝦的末重、增重率、特定生長率、成活率均有顯著提高（p＞0.05）。而添加中草藥發(fā)酵物對肝體比也有顯著升高（p＜0.05），對料比有先降后升的影響，1.0%添加組顯著低于對照組（p＜0.05），8.0%添加組顯著高于對照組（p＜0.05）。

添加中草藥發(fā)酵物對白對蝦肝臟超氧化物歧化酶和過氧化氫酶的影響見表3?？梢姡S著飼料中中草藥發(fā)酵物的增加，羅非魚肝臟超氧化物歧化酶和過氧化氫酶均逐漸顯著升高（p＜0.05） 。

3 討論

中草藥在水產(chǎn)養(yǎng)殖上有廣泛應(yīng)用。如檉柳、金銀花、連翹、五倍子、大黃、黃芩、龍膽草、當(dāng)歸、川芎、柴胡、枳殼等中草藥在促進草魚、鯽魚、鱸魚、泥鰍、羅非魚、白對蝦等動物的攝食與生長方面有較多的研究報道。大黃、黃芪、茵陳、黃芩及大蒜因成本較低，效果較好，是在水產(chǎn)養(yǎng)殖上常用的中草藥。

通過結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)，添加1.0%～4.0%的中草藥發(fā)酵物顯著提高了白對蝦的末重、增重率和特定生長率等?？梢?，添加中草藥發(fā)酵物對于改善白蝦的生長與攝食是有明顯效果的，這與姚紅梅等、謝麗玲等直接添加中草藥復(fù)合物的研究結(jié)果是一致的。水產(chǎn)品形態(tài)參數(shù)直接關(guān)系到其銷售經(jīng)濟價值，本中草藥發(fā)酵物的添加使肝體比明顯提高，可能與中草藥在保肝護肝方面的作用有關(guān)。肝臟超氧化物歧化酶和過氧化氫酶對于體內(nèi)自由基清除，預(yù)防衰老和DNA分子損傷保護起重要作用。本研究中，羅非魚肝臟超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性隨著飼料中中草藥發(fā)酵物含量增加均顯著升高。據(jù)中藥文獻記載，大黃有瀉熱毒，破積行瘀，黃芪有行氣托毒，消腫生肌，黃芩有清熱燥濕，解毒安胎，茵陳有清濕熱退黃之效，其中含有的皂苷、生物堿及揮發(fā)性有機酸等主要有效物質(zhì)能夠保肝護肝，從而最終間接保護和促進了肝臟的功能和健康。