鱖魚嗜水氣單胞菌的分離鑒定及藥敏試驗

邱 燕 梅廣海

嗜水氣單胞菌廣泛分布于池水、淤泥等自然環(huán)境，常引起魚、鱉、鰻、牛蛙等水生動物敗血癥或局部感染，導致水產(chǎn)動物大量死亡，給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成經(jīng)濟損失。目前對嗜水氣單胞菌引起的疾病多采用抗生素防治，本文通過藥物敏感試驗，選擇性使用抗生素，從而減少藥物殘留、降低細菌耐藥性以及對水環(huán)境的污染等。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病料的采集。取病體鱖魚4個樣、鱖魚養(yǎng)殖池水樣16份，2016年9月2日在海安縣雅周鎮(zhèn)迥垛村鱖魚養(yǎng)殖基地采集。

1.1.2 主要試劑。培養(yǎng)基、BD Crystal陰性板條及藥敏試驗板條均購自南京菲恩醫(yī)療科技有限公司。

1.2 試驗方法

1.2.1 病魚的剖檢。肉眼觀察鱖魚體表變化，解剖病死鱖魚，分析各內(nèi)臟的病癥。

1.2.2 病原菌的分離培養(yǎng)。無菌采取鱖魚表面和內(nèi)臟組織以及養(yǎng)殖水樣，分別接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，28℃恒溫培養(yǎng)24h，挑取單個菌落進一步純化。

1.2.3 病原菌的鑒定。根據(jù)革蘭氏染色結(jié)果，使用BD Crystal陰性板條來鑒定其生化特性，從而確定鑒定菌種。

1.2.4 藥敏試驗。對分離的四株嗜水氣單胞菌進行藥敏試驗，將分離菌株制成0.5麥氏的菌懸液，取0.1mL注入藥敏板條，28℃恒溫培養(yǎng)24h，觀察細菌生長情況。使用藥物為：硫酸新霉素、氟苯尼考、恩諾沙星、甲砜霉素、鹽酸環(huán)丙沙星、紅霉素、鹽酸土霉素和強力霉素。

2 結(jié)果

2.1 病死鱖魚的剖檢結(jié)果。病魚體表出血，剖開后內(nèi)臟正常，內(nèi)容物較少。

2.2 病原菌鑒定結(jié)果。共分離四種菌株，鑒定結(jié)果均為嗜水氣單胞菌。

2.3 藥敏試驗結(jié)果。試驗結(jié)果如表1顯示，氟苯尼考和鹽酸環(huán)丙沙星對嗜水氣單胞菌顯示出較強的抑菌效果，紅霉素和鹽酸土霉素抑菌效果不明顯。

表1 各種抗菌藥物對嗜水氣單胞菌的最低抑菌濃度（MIC值）mg/L

3 討論

本試驗中通過病原菌分離培養(yǎng)，分離出四種菌株，生化鑒定初步鑒定為嗜水氣單胞菌，通過對四種菌株的藥敏試驗，氟苯尼考和鹽酸環(huán)丙沙星對嗜水氣單胞菌有較強的抑菌效果，由于鹽酸環(huán)丙沙星屬于禁用漁藥，實際應用中可采用氟苯尼考。由于不同的養(yǎng)殖區(qū)域、養(yǎng)殖品種、用藥方法都會使病原菌因藥物環(huán)境不同而產(chǎn)生耐藥性差異，給疾病的預防帶來了困難，因此對嗜水氣單胞菌等引起的細菌性疾病的防治既要考慮病原菌對藥物的敏感性，也要根據(jù)水產(chǎn)用藥的相關(guān)規(guī)定合理用藥。