丹參川芎嗪注射液中丹參總酚酸的含量測定分析*

袁 園

(河南省中醫(yī)藥研究院 ，河南 鄭州 450004)

丹參總酚酸是丹參中的活性成分，對血小板有較好的抑制作用，還具有抗脂質(zhì)過氧化、纖維蛋白溶解、抗凝等功能，可以對患者的微循環(huán)進行改善，通過多種途徑對患者的心肌進行保護[1]。丹參川芎嗪注射液主要是由丹參總酚酸提取物與鹽酸川芎嗪復(fù)合而成的制劑，可以對患者的動脈血管進行保護，同時可以起到養(yǎng)護心臟以及對冠狀動脈擴張的作用，在心肌梗死患者以及心肌缺血患者治療中的應(yīng)用價值較高。丹參川芎嗪注射液中丹參總酚酸的質(zhì)量直接對其治療的質(zhì)量造成影響[2]，因此，對丹參川芎嗪注射液進行相應(yīng)的質(zhì)量控制，對患者治療的療效進行保障意義重大。本文主要對丹參川芎嗪注射液中丹參總酚酸的含量測定方法進行了實驗研究。

1 藥品、試劑與儀器

丹參川芎嗪注射液，貴州拜特制藥有限公司產(chǎn)品，批號20150819，20160319，20160321。丹參總酚酸對照品，購自中國藥品生物制品檢定所，批號111562-200605。UV-2550紫外分光光度計，日本島津公司產(chǎn)品。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的制備

2.1.1 對照品溶液的制備

將丹參總酚酸對照品經(jīng)P2O5干燥減壓處理24 h，精密稱取25.00 mg，置100 mL的量瓶中，用適量的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，吸取10 mL稀釋至100 mL，制成1 mL中含 25.00 μg的溶液，作為對照品溶液。

2.1.2 供試品溶液的制備

精密量取丹參川芎嗪注射液10 mL，置60 mL分液漏斗中，加入用鹽酸(0.1 mol/L)飽和的醋酸乙酯50 mL，振搖提取，分取醋酸乙酯溶液，水浴蒸干，殘渣加甲醇溶解并定量轉(zhuǎn)移至25 mL量瓶，加甲醇稀釋至刻度，精密量取10 mL，以體積分數(shù)為100 mL /L 的甲醛溶液稀釋至100 mL，搖勻，濾過，取濾液作為試品溶液。

2.1.3 空白樣品溶液的制備

按丹參川芎嗪注射液處方比例，取除丹參總酚酸提取物外的甘露醇與鹽酸川芎嗪的混合物，照2.1.2項下方法制備空白對照溶液[3]。

2.2 波長的選擇

將對照品、供試品溶液、陰性對照溶液和空白對照溶液分別在190～500 nm的范圍內(nèi)放置，進行光譜掃描，結(jié)果：供試品溶液與對照品溶液均在283 nm處有強吸收，陰性對照溶液在283 nm處吸收較為微弱，對照品和供試品溶液均在305 nm處吸收較強，以此對丹參總酚酸的含量進行測定。測定結(jié)果顯示：空白對照溶液在305 nm處不存在吸收的情況。因此，305nm處不會對丹參總酚酸含量的測定造成影響，可以對位丹參總酚酸含量測定的波長[4]。

圖1 對照品、供試品和空白對照品的紫外吸收光譜圖

2.3 線性關(guān)系

精密稱取丹參總酚酸對照品5.00 mg，置100 mL的量瓶中；加入適當?shù)乃芙獠⑾♂屩量潭?；分別吸取0.5，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0 mL，置于10 mL的量瓶中；以體積分數(shù)為100 mL /L 的甲醛溶液進行稀釋并搖勻。將此溶液和空白對照溶劑放置在305 nm的波長處測定吸光度，并進行線性分析，得到線性方程為：A=0.014 4C-0.000 9，r=0.9999。結(jié)果顯示：丹參總酚酸對照品線性范圍在2.5～50.00 μg/mL之間，其質(zhì)量分數(shù)和吸收度之間線性關(guān)系較好。

2.4 穩(wěn)定性試驗

取丹參川芎嗪注射液樣品，按2.1.2項下方法制成供試品，分別于放置0，10，20，40，60，120，240，360 min，在305 nm處對吸光度進行測定，吸光度的RSD為0.62%。結(jié)果顯示：供試品溶液在放置360 min之內(nèi)，具有較好的穩(wěn)定性。

2.5 重現(xiàn)性

取同一批丹參川芎嗪注射液樣品，制備5份供試品溶液，測定結(jié)果顯示，丹參總酚酸的含量平均值為每mL含0.418 mg，RSD為1.40%，表明丹參川芎嗪注射液的重現(xiàn)性良好。

2.6 加樣回收率

精密吸取已知含量為0.43 g/L的丹參川芎嗪注射液樣品5 mL，吸取6份，分別加入 2.1 g/L的丹參總酚酸對照品溶液1 mL，以下按2.1.2項下丹參總酚酸的含量測定方法進行測定。結(jié)果顯示：丹參川芎嗪注射液的平均回收率為99.63%，RSD為1.37%。

2.7 3批樣品測定

按2.1.2項下方法測定3批樣品中丹參總酚酸的含量，結(jié)果見表1。

表1 3批丹參川芎嗪注射液樣品測定結(jié)果 g·L-1

3 討 論

丹參川芎嗪注射液是丹參總酚酸與鹽酸川芎嗪提取后的復(fù)方制劑，鹽酸總酚酸與鹽酸川芎嗪的最大吸附波長較為相近，因此，采用分光光度法對丹參總酚酸的含量進行測定。常規(guī)情況下，丹參川芎嗪注射液中丹參總酚酸含量的測定會受到鹽酸川芎嗪的干擾，但是丹參總酚酸在醋酸乙酯中易溶，而鹽酸川芎嗪在水中易溶。因此，本文主要采用酸性醋酸乙酯萃取的方法制備供試品溶液，能夠有效對丹參總酚酸與鹽酸川芎嗪進行分離[5]。

有研究表明，硝酸鋁與丹參總酚酸可以形成絡(luò)合物，其在一定程度下，可以對波長進行紅移，利用此特點可以將鹽酸川芎嗪對丹參總酚酸的干擾作用消除。但是，研究發(fā)現(xiàn)，硝酸鋁與丹參總酚酸所形成的絡(luò)合物，其穩(wěn)定性較差，不適合應(yīng)用于丹參川芎嗪注射液中丹參總酚酸的測定[6]。

綜上所述，分光光度法應(yīng)用在丹參川芎嗪注射液丹參總酚酸含量測定中，具有較高的應(yīng)用價值，其操作較為簡單，在丹參川芎嗪注射液質(zhì)量控制中的應(yīng)用效果較好，值得推廣。