藥物水光注射治療黃褐斑對(duì)患者CK10、SOD及MDA表達(dá)水平的影響

李卉 胡霜紅 王娟

[摘要]目的：探討藥物水光注射治療黃褐斑的療效及對(duì)患者細(xì)胞角蛋白10（Cytokeratin 10，CK10）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）及丙二醛（Malondialdehyde，MDA）表達(dá)水平的影響。方法：選取筆者醫(yī)院2016年5月-2017年5月收治的黃褐斑患者160例，隨機(jī)分為傳統(tǒng)組與藥物組，每組80例。傳統(tǒng)組采用傳統(tǒng)穴位注射法治療，藥物組采用藥物水光注射治療。觀察兩組患者額部病損皮膚基底上層CK10表達(dá)程度、血清SOD、MDA水平并進(jìn)行比較分析。結(jié)果：治療后，藥物組與傳統(tǒng)組CK10表達(dá)程度明顯減弱，藥物組明顯低于傳統(tǒng)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。藥物組與傳統(tǒng)組SOD表達(dá)水平均顯著升高，藥物組明顯高于傳統(tǒng)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。藥物組MDA水平明顯低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；傳統(tǒng)組MDA下降不明顯，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。藥物組總有效率為93.75%顯著高于傳統(tǒng)組的75.00%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：應(yīng)用藥物水光注射治療黃褐斑，可降低病損皮膚基底上層CK10表達(dá)程度，改善血清SOD和MDA水平，療效較好。

[關(guān)鍵詞]水光注射；黃褐斑；細(xì)胞角蛋白10；超氧化物歧化酶；丙二醛

[中圖分類號(hào)]R758.4+2 [文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A [文章編號(hào)]1008-6455（2018）07-0075-03

Abstract： Objective To investigate the effect of drugwater injection in the treatment of chloasma and the effect on the expression level of cytokeratin 10 （Cytokeratin 10， CK10）， superoxide dismutase （Superoxide dismutase， SOD） and malondialdehyde （Malondialdehyde， MDA） in patients. Methods 160 cases of Chloasma in our hospital from May 2016 to May 2017 were randomly divided into the traditional group and the drug group， 80 cases in each group. The traditional group used the traditional acupoint injection，and the drug group with drug water injection. The expression level of CK10，serum SOD and MDA in the upper basal layer of skin onforehead were compared between the drug group and the traditional group. Results After treatment， the expression level of CK10 in the drug group and the traditional group was significantly reduced， and the drug group was significantly lower than that in the traditional group， the differences were statistically significant（P<0.05）. The expression levels of SOD in both the drug group and the traditional group were significantly increased， and the drug group was significantly higher than the traditional group（P<0.05）. The level of MDA in the drug group was significantly lower than that before the treatment（P<0.05）. There was no significant difference in MDA in the traditional group（P>0.05）. The total effective rate in the drug group was 93.75%， which was significantly higher than that in the traditional group（75.00%，P<0.05）. Conclusion The treatment of Chloasma with drug water injection can reduce the expression level of CK10 on the upper basal layer of skin lesions， improve the level of serum SOD and MDA， and improve the curative effect.

Key words： water injection； chloasma； CK10； SOD； MDA

黃褐斑主要表現(xiàn)為黃褐色及淡黃色斑片，主要在兩頰和前頰部分，屬于獲得性色素沉著皮膚病[1]?；瘖y品使用不當(dāng)、日曬、精神因素及避孕藥等均是黃褐斑的主要誘因，多發(fā)于中青年女性?，F(xiàn)臨床主要通過(guò)內(nèi)服藥物、外用脫色劑及光化學(xué)手段對(duì)黃褐斑進(jìn)行治療，盡管治療效果明顯，但由于部分患者存在較強(qiáng)的局部刺激甚至灼傷皮膚，具有較明顯的副作用甚至較高的復(fù)發(fā)率[2-3]。穴位注射以傳統(tǒng)經(jīng)絡(luò)理論為基礎(chǔ)，將已提純藥物注射至經(jīng)絡(luò)，對(duì)硬皮病、白塞氏綜合征等國(guó)際疑難病均具有優(yōu)良效果，與針灸治療作用機(jī)理存在差別[4]。研究[5-6]提示藥物水光注射通過(guò)特制注射工具吸起皮膚并利用負(fù)壓將藥物注射至靶向部位的療法，具有并發(fā)癥少，臨床療效高等特點(diǎn)，但關(guān)于黃褐斑的臨床研究資料較少。故此，本研究探討了藥物水光注射和穴位注射治療黃褐斑的療效及對(duì)患者CK10、SOD及MDA表達(dá)水平的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料：選取筆者醫(yī)院2016年5月-2017年5月收治的黃褐斑患者160例，均為女性，隨機(jī)分為傳統(tǒng)組與藥物組，每組80例。傳統(tǒng)組采用傳統(tǒng)穴位注射法治療，藥物組采用藥物水光注射治療。傳統(tǒng)組平均年齡（38.73±5.42）歲，平均病程（5.76±1.05）歲；藥物組平均年齡（37.25±6.39）歲，平均病程（5.63±0.98）歲。兩組患者病程等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)[7]

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)皮膚組織病理檢測(cè)確診黃褐斑的患者：面部呈淡褐色至深褐色、對(duì)稱性分布且界限清楚的斑片，無(wú)炎癥和鱗屑；女性多見(jiàn)，青春期后多發(fā)；癥狀不明顯；夏重冬輕有季節(jié)性；②近3個(gè)月未接受相關(guān)治療者；③患者及家屬均知情同意。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：①血友病患者；②免疫功能低下者；③合并惡性腫瘤、嚴(yán)重臟器功能不全、血液系統(tǒng)疾病者；④妊娠或哺乳期婦女；⑤有認(rèn)知功能障礙者，如精神病患者。

1.3 治療方法

1.3.1 穴位注射法：取顴髎、四白為注射點(diǎn)；額部皮損選陽(yáng)白；太陽(yáng)穴處皮損則太陽(yáng)穴為注射點(diǎn)；鼻部皮損選迎香；眉間皮損選印堂；下頦皮損選承漿；可根據(jù)皮損可多選或單選?；颊咂脚P碘伏消毒注射穴位3遍后，無(wú)菌紗布擦拭，注射器（5ml）抽取復(fù)方當(dāng)歸注射液，美容注射用小針頭（30G）進(jìn)行面部穴位注射，每穴0.4ml注射并按壓片刻；注射器原配針頭注射肝俞、氣海、血海、三陰交，每穴0.5ml并按壓片刻；1次/周，4個(gè)月/療程，共治療4個(gè)月[8]。

1.3.2 藥物水光注射：全臉外敷厚度約3mm的復(fù)方利多卡因，保鮮膜包被1h后碘伏消毒3遍，生理鹽水溶液沖洗后，水光注射儀套上水光槍頭，20%負(fù)壓，模式為Dose very fast；針長(zhǎng)0.6～1.2mm定點(diǎn)給藥復(fù)方當(dāng)歸注射液2ml；患者仰臥位，負(fù)壓吸起皮膚，在黃褐斑皮損區(qū)域注射，直至皮損區(qū)被腫起的小皮丘全覆蓋，剩下的藥液不重疊從面上部、面中部、面下部依次注射，直至注射完；1次/月，共治療4個(gè)月[9]。

1.4 觀察指標(biāo)及檢查方法：SP法檢測(cè)并比較藥物組與傳統(tǒng)組患者額部病損皮膚基底上層CK10表達(dá)程度：石蠟切片脫蠟水化后室溫10min靜置；抗原修復(fù)；室溫10min羊血清封閉，滴加CK10抗體于濕盒中，室溫下1h，PBS洗片；滴加二抗，10min室溫放置，PBS洗片；滴加鏈霉菌抗生物素-過(guò)氧化物酶，10min室溫放置，PBS洗片；DAB顯色、蘇木素復(fù)染及梯度乙醇脫水，封片后顯微鏡觀察[10]。

取患者治療前后空腹靜脈血，離心后分離血清，酶聯(lián)免疫法檢測(cè)血清SOD、MDA水平，試劑盒均購(gòu)于南京建成生物研究所，試驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.5 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：治愈：色斑消失，面積消退≥90%；顯效：色斑消失或變淡，面積消退介于60%～89%；有效：色斑變淡，面積消退介于30%～59%；無(wú)效：色斑無(wú)明顯變化，面積消退≤30%。總有效率=（治愈+顯效+有效）例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：應(yīng)用SPSS 20.0分析處理數(shù)據(jù)資料，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述，組間比較采用t檢驗(yàn)；等級(jí)資料用非參數(shù)檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后CK10表達(dá)比較：治療前藥物組與傳統(tǒng)組CK10比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；治療后藥物組與傳統(tǒng)組CK10表達(dá)程度明顯減弱，藥物組明顯低于傳統(tǒng)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 兩組患者治療前后SOD表達(dá)水平比較：治療前藥物組與傳統(tǒng)組SOD比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；治療后藥物組與傳統(tǒng)組SOD表達(dá)水平均顯著升高，藥物組明顯高于傳統(tǒng)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 兩組患者治療前后MDA水平比較：治療前藥物組與傳統(tǒng)組MDA水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；治療后藥物組MDA水平明顯低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；治療后傳統(tǒng)組MDA下降不明顯，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表3。

2.4 兩組患者臨床療效比較：藥物組總有效率為93.75%顯著高于傳統(tǒng)組的75.00%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表4。典型病例見(jiàn)圖1～4。

3 討論

黃褐斑屬于慢性疾病多為面失所養(yǎng)而成，具體發(fā)病機(jī)制尚存在分歧，發(fā)病機(jī)制主要可分為以下兩點(diǎn)：①黃褐斑多位于表皮層，主要為表皮黑色素增多[11]；②黃褐斑表皮黑色素存在明顯增多[12]。肝脾腎三臟器功能失調(diào)致使氣血無(wú)法尚榮于面是黃褐斑的主要病機(jī)，患者多存在肝腎不足、腎水不充及腎陰虧虛進(jìn)而導(dǎo)致虛火上炎及水火不濟(jì)等病機(jī)，穴位注射技術(shù)對(duì)多種慢性病均具有滿意療效，但部分患者因治療次數(shù)頻繁對(duì)正常的工作和生活均造成了一定影響[13]。

研究[14]提示藥物水光注射可以對(duì)皮膚有效補(bǔ)水，使皮膚更有光澤，有提升緊致、改善細(xì)紋的效果；與藥物聯(lián)合作用，可有效改善色斑、痘印、敏感、抗衰等。本次注射過(guò)程中使用復(fù)方當(dāng)歸注射液（由當(dāng)歸、川芎、紅花組成），可有效調(diào)暢氣機(jī)；當(dāng)歸種的壬二酸、阿魏酸可保護(hù)膜脂質(zhì)不受氧化，具有抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用并拮抗自由基對(duì)組織的損傷，改善血液循環(huán)，促進(jìn)色素吸收[15]。

角蛋白可在細(xì)胞內(nèi)形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，屬于上皮細(xì)胞的主要蛋白和結(jié)構(gòu)蛋白，可隨細(xì)胞分化程度的升高逐漸增加分子量，與多種皮膚病關(guān)系密切[16]。本研究結(jié)果顯示，治療后藥物組與傳統(tǒng)組患者CK10水平明顯減弱，藥物組減弱更明顯。上述結(jié)果說(shuō)明藥物水光注射治療黃褐斑，可更有效地降低病損皮膚基底上層CK10表達(dá)程度。研究發(fā)現(xiàn)黑色素顆粒的轉(zhuǎn)運(yùn)和合成可受到多種蛋白的調(diào)節(jié)影響，其由角質(zhì)細(xì)胞分化后逐漸排出體外，藥物水光注射復(fù)方當(dāng)歸注射液中的當(dāng)歸、川芎、紅花合用具有活血通經(jīng)、祛瘀止痛、調(diào)理生機(jī)的作用；能夠降低CK10表達(dá)，降低皮膚的分化程度和細(xì)胞代謝速率，進(jìn)而延緩皮膚老化。

相關(guān)研究[17]提示黃褐斑患者M(jìn)DA水平較高，SOD水平降低，這提示黃褐斑患者存在強(qiáng)烈的過(guò)氧化反應(yīng)，這可能是加重黃褐斑病情的重要因素。MDA具有顯著細(xì)胞毒性，屬于脂質(zhì)過(guò)氧化終產(chǎn)物，可準(zhǔn)確反映機(jī)體的自由基損傷程度；SOD能顯著抑制機(jī)體氧自由基活性、減輕氧化應(yīng)激損傷進(jìn)而消除新陳代謝的有害物質(zhì)。本研究結(jié)果顯示治療后兩組患者的SOD水平顯著升高，藥物組明顯高于傳統(tǒng)組；藥物組MDA水平明顯降低，傳統(tǒng)組MDA水平下降不明顯。復(fù)方當(dāng)歸注射液中的川芎嗪能明顯升高SOD活性，降低黃褐斑患者過(guò)氧化脂質(zhì)（LPO）含量，對(duì)治療黃褐斑臨床實(shí)用價(jià)值較高，川芎嗪在50～400ng/ml較低的相對(duì)安全濃度可有效降低酪氨酸酶活性，抑制黑素細(xì)胞增殖，進(jìn)而減少黑素合成。水光注射將藥物注射于中胚層，可以幫助滋養(yǎng)肌表腠理，改善局部皮膚的血供營(yíng)養(yǎng)情況，淡化色斑，故而對(duì)黃褐斑的治療效果更好。

綜上所述，藥物水光注射治療黃褐斑，可降低病損皮膚基底上層CK10表達(dá)程度，改善血清SOD和MDA水平，提高治療效果。

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[收稿日期]2018-04-25 [修回日期]2018-06-07

編輯/朱婉蓉