義安區(qū)體檢HPV—DNA篩查結(jié)果分析

楊軍 王翠平 李龍 張劍 常中寶 申夢來

摘 要：目的 分析銅陵市義安區(qū)高危型HPV-DNA篩查結(jié)果，探討HPV-DNA的臨床價值。方法 對2016年3月～2016年5月義安地區(qū)1165例21～65歲婦女采用HPV-DNA檢測篩查。結(jié)果 1165例標本中HPV-DNA陽性率為8.07%，共檢測15種基因型，其中HPV52基因型感染率最高為1.89%，HPV11基因型感染率最低為0.09%，HPV單一感染發(fā)生率6.70%，二重HPV感染率0.94%，三重HPV感染率0.43%。結(jié)論 定期進行HPV-DNA檢測，可以預(yù)測發(fā)生宮頸癌的風(fēng)險，HPV分型檢測對宮頸癌篩查具有重要的臨床價值。

關(guān)鍵詞：HPV-DNA；HPV分型；基因型；宮頸癌

中圖分類號：R737.33 文獻標識碼：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.14.041

文章編號：1006-1959（2018）14-0136-03

Abstract：Objective To analyze the results of high risk HPV-DNA screening in Yian district，Tongling city，and to explore the clinical value of HPV-DNA.Methods From March 2016 to May 2016，1165 women aged 21 to 65 in Yian district were screened by HPV-DNA.Results The positive rate of HPV-DNA in 1165 cases was 8.07%，and 15 genotypes were detected.The highest HPV52 genotype infection rate was 1.89%，and the lowest HPV11 genotype rate was 0.09%.The incidence of HPV single infection was 6.70%，double HPV infection rate was 0.94%，the triple HPV infection rate was 0.43%.Conclusion HPV-DNA detection on a regular basis can predict the risk of cervical cancer and HPV typing has important clinical value for cervical cancer screening.

Key words：HPV-DNA；HPV typing；Genotype；Cervical cancer

人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是球形DNA病毒，能感染人體的表皮和黏膜組織，表現(xiàn)為尋常疣、生殖器疣（尖銳濕疣）等癥狀。隨著性病中尖銳濕疣的發(fā)病率的上升和國家大力提倡的“兩癌”篩查，人乳頭瘤病毒（HPV）感染越來越引起人們的關(guān)注。根據(jù)世界衛(wèi)生組織估計，全世界每年有超過47萬新發(fā)宮頸癌病例[1]。宮頸癌是亞太區(qū)許多國家，包括中國，第二常見及全球第三常見的女性癌癥。目前HPV感染在我國十分常見，每年約有13萬人發(fā)病，防治形勢十分嚴峻。HPV-DNA檢測應(yīng)用于宮頸癌前病變的檢測已經(jīng)取得了良好的效果，已成為當(dāng)前臨床研究的熱點。故本文回顧性分析我中心在2016年3月～5月檢測的1165例HPV標本，探討HPV分型檢測對宮頸癌篩查的意義及臨床價值，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1研究對象 統(tǒng)計2016年3月～5月送檢合肥金域醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司實驗診斷部基因診斷室的義安區(qū)HPV體檢標本1165例，年齡25～64歲，平均年齡（30.54±5.82）歲。

1.2樣本的采集與處理 用深圳亞能生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的專用宮頸脫落細胞采集器采集宮頸脫落細胞，標本采集后冷藏保存，經(jīng)公司的冷鏈運輸當(dāng)日送達實驗室檢測。

1.3檢測方法 試劑盒由亞能生物技術(shù)有限公司提供，嚴格按試劑盒說明書操作。一次性檢測15 種HPV型別，包含低危型的HPV6、11和高危型的HPV（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59 和68型）。

1.4統(tǒng)計學(xué)分析 使用SPSS18. 0軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料以（x±s）表示，行t檢驗，計數(shù)資料以（%）表示，行？字2 檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1義安地區(qū)1165例標本HPV感染年齡分布 1165例標本陽性率為8.07%（94/1065），其中30歲以下陽性率最高為14.95%（16/107），41～50歲女性陽性率最低為5.89%，見表1。

2.2義安地區(qū)HPV感染者基因型分布及HPV多重感染狀況 共檢測15種基因型，其中HPV52基因型感染率最高為1.89%，HPV11基因型感染率最低為0.09%，見表2。HPV感染者中，單一HPV感染78例，占6.70%，二重HPV感染11例，占0.94%，三重HPV感染5例，占0.43%，見表3。

3討論

宮頸癌是一種嚴重危害婦女健康的惡性腫瘤。宮頸癌的發(fā)生率在所有癌癥中排名第七位，而在婦女中排名第三，僅次于乳腺癌和大腸癌。在發(fā)展中國家，宮頸癌婦女五年存活率低于50%，而在發(fā)達國家，五年存活率是66%左右。研究發(fā)現(xiàn)HPV感染與宮頸癌關(guān)系密切，尤其13種高危型HPV（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59 和68）感染與宮頸癌的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)[2]，從高危人乳頭瘤病毒感染到宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）再到宮頸癌的發(fā)生需要10年時間，因此，宮頸癌前病變的篩查非常有必要。HPV感染與宮頸癌及癌前病變問題具有密切的臨床相關(guān)性，HPV持續(xù)感染是宮頸癌及癌前病變發(fā)展的必要條件，對HPV感染問題進行積極的預(yù)防治療有助于及早對患者開展診斷和治療，對于預(yù)防宮頸癌的發(fā)生有重要的現(xiàn)實意義[3]。

本次篩查對1165例女性標本進行檢測，共檢出94例陽性，陽性率為8.07%，30歲以下陽性率最高為14.95%，41～50歲女性陽性率最低為5.89%，與嚴粉琴等[4]報道的HPV陽性率為10.95%相似，但與Zeng Z等[5]報道的HPV陽性率為21.7%有差異，這可能是由于研究對象的不同，本研究為體檢樣本，選取的為健康女性樣本。本研究結(jié)果，在HPV陽性人群中，高危型感染率排在前3位依次是HPV52（1.89%），HPV58（1.29%），HPV68（1.03%），吳明燕的研究[6]HPV52、HPV16、HPV58三種亞型最多見，且在亞洲國家52型和58型更為常見[7]，與本中心的篩查結(jié)果一致。HPV檢測可以幫助臨床醫(yī)生能更好的找出感染者，判斷她們的患癌的風(fēng)險和周期，針對有早期病變的可以及時治療，需要密切追蹤的可以預(yù)防癌變的發(fā)生。大部分宮頸病變患者都能檢測到HPV-DNA病毒，說明高危HPV-DNA病毒檢測在篩查宮頸癌及癌前病變中的靈敏度較高，并且陰性預(yù)測值也非常高。大量的研究證實，高危型HPV-DNA病毒檢測的陰性預(yù)測值可達99.0%[8]。本研究中，HPV單一感染的發(fā)生率為6.70%，二重HPV感染率為0.94%，三重HPV感染為0.43%，HPV多重感染并不會明顯增加宮頸癌及高鱗狀上皮內(nèi)病變風(fēng)險，但多重高危HPV感染要比單HPV感染致病性強，而高低?；旌细腥镜膶m頸致病性比單一HPV感染更弱[9]，宮頸癌的發(fā)生與HPV亞型感染總數(shù)多少無關(guān)，可能與高危亞型感染的致病力或協(xié)同力有關(guān)[10]。

HPV的篩查試劑和方法不少，主要分為分型的和不分型的。分型的目前以亞能生物的PCR反向點雜交法和透景生物的流式熒光法為主；不分型的以凱杰生物的第二代雜交捕獲技術(shù)（HC2）為主，HC2是這些方法中唯一不需要PCR（聚合酶鏈式反應(yīng)）進行樣本DNA擴增的；當(dāng)然，介于分型和不分型之間，還有一個比較重要的篩查方法是羅氏cobas 4800 HPV檢測，能檢測HPV16型、18型和其它12個高危型（HPV 31， 33， 35， 39， 45， 51， 52， 56， 58， 59， 66 和 68），其分型是能單獨把HPV16、18分出來了，HPV16、18在所有導(dǎo)致宮頸癌的高危HPV中占到了70%。但是，這些篩查方法無法避免“假陽性”的出現(xiàn)，因為HPV的感染大多數(shù)人都是一過性的，靠自身免疫是可以清除的，如果患者在自身免疫清除前檢查出感染HPV，會給患者造成困擾。要想解決這一問題，我們需要了解HPV致病的機理。HPVDNA的結(jié)構(gòu)區(qū)域中E2是負性調(diào)控E6、E7區(qū)域，E6、E7是癌基因，HPVDNA整合到宿主細胞DNA是癌變的最終結(jié)果，同時也破壞了E2調(diào)控區(qū)，造成癌基因E6、E7的過表達。E6抑制 p53基因而阻斷凋亡，E7 抑制pRB基因使細胞周期失控，大量的細胞周期失控而成為癌細胞。HPVDNA E6E7 mRNA的檢測可以降低篩查中假陽性率。許多研究者提出對E6、E7癌蛋白表達過程中反映其轉(zhuǎn)錄活性的E6/E7 mRNA進行檢測可能更能預(yù)測病情的進展[11，12]。

總之，宮頸癌的篩查工作任重道遠，目前細胞學(xué)檢查聯(lián)合HPVDNA的檢測仍然是主流的檢測手段，針對篩查陽性的患者分流、確診及后續(xù)的治療需要探索更為科學(xué)合理的檢測方法。

參考文獻：

[1]韓欽，郭紅燕.宮頸癌篩查方案的研究進展[J].微創(chuàng)醫(yī)學(xué)，2016，11（2）：216-219.

[2]李萌輝，李世霞，劉俊田.兩種高危型HPV檢測方法在宮頸癌早期篩查中的應(yīng)用[J].中國腫瘤臨床，2013（21）：1300-1303.

[3]蘇燕燕.宮頸癌及其癌前病變與HPV感染的相關(guān)臨床分析[J].中外女性健康研究，2016（2）：236-237.

[4]嚴粉琴，耿建祥，肖微，等.已婚女性宮頸上皮細胞中人乳頭瘤病毒基因分型2000分析[J].實用婦產(chǎn)科雜志，2012，5（28）： 390-393.

[5]Zeng Z，Marshall A R，He X，et al.Prevalence of High-Risk Human Papillomavirus Infection in China：Analysis of 671，163 Human Papillomavirus Test Results From China's Largest College of American Pathologists-Certified Laboratory[J].American Journal of Clinical Pathology，2016，145（5）：622.

[6]吳云燕，裘明利.女性高危型人乳頭瘤病毒感染分布情況研究[J].中國實用婦科與產(chǎn)科雜志，2017（1）：122-124.

[7]邢金芳，賈莉婷，張霞，等.女性生殖道人乳頭狀瘤病毒多重感染的基因譜研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014，24（8）：1832-1834.

[8]楊雨卿，席彥東，王曉玲.高危HPV-DNA測定聯(lián)合LPT在宮頸病變篩查中的應(yīng)用[J].寧夏醫(yī)學(xué)雜志，2014，29（18）：3006-3009.

[9]王樂.HPV多重感染與宮頸癌及高度鱗狀上皮內(nèi)病變的相關(guān)性[J].中國婦幼保健，2017，32（16）：3753-3756.

[10]夏凌志，彭杰雄，連麗琴，等.女性宮頸HPV多重感染與宮頸病變臨床分析[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2016，32（12）：1909-1911.

[11]Argyri E，Tsimplaki E，Daskalopoulou D，et al.E6/E7 mRNA expression of high-risk HPV types in 849 Greek women[J].Anticancer Research，2013，33（9）：4007-4011.

[12]Tjalma WA，Depuydt CE.Cervical cancer screening：which HPV test should be used--L1 or E6/E7[J].European Journal of Obstetrics Gynecology&Reproductive; Biology，2013，170（1）：45-46.

收稿日期：2018-5-8；修回日期：2018-5-20

編輯/雷華