東莞地區(qū)男性生殖道HPV感染率及基因型分布特點(diǎn)分析

鐘陽(yáng)青 ，陳艷清 ，肖翔 ，陳劍云 ，邵錦歡 ，張達(dá)秀

(東莞市塘廈醫(yī)院，1、檢驗(yàn)科；2、皮膚科，廣東 東莞 523722)

人乳頭瘤病毒（Human Papilloma Virus，HPV）感染是女性發(fā)生宮頸癌的必要病因，也是一部分女性陰道癌、外陰癌、口咽癌、肛門(mén)癌的重要病因[1]。男性HPV感染者在向其性伴侶傳播病毒過(guò)程中扮演重要角色[2]，HPV感染本身也會(huì)對(duì)男性生殖健康產(chǎn)生一定的影響如尖銳濕疣、口腔癌、陰莖癌、肛門(mén)癌[1，3]，同時(shí)HPV感染會(huì)對(duì)男性精液質(zhì)量及DNA完整性產(chǎn)生影響，導(dǎo)致男性不孕不育[4-6]。目前已知HPV的基因亞型有100多種，其中最常見(jiàn)的有23中，根據(jù)其致癌危險(xiǎn)性大小將其分為低危型和高危型， 低危型包括 HPV6、11、42、43、81 型，高危型包括 HPV16、18、31、33、35、45、51、52、56、58、61、66、68、73、82、83 型，HPV 不同基因亞型可以引起不同的疾病[7-9]。HPV基因型在不同地區(qū)、不同人種的分布不同[10-11]，因此調(diào)查本地區(qū)男性HPV的感染情況和基因型分布特點(diǎn)，可以為臨床疾病的診療提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 回顧性分析2015年5月至2017年5月到廣東省東莞市塘廈醫(yī)院進(jìn)行檢查的尖銳濕疣、自訴高危行為男性生殖道分泌物標(biāo)本，HPV基因分型檢測(cè)結(jié)果。共分析1147例標(biāo)本，年齡7~84歲，平均年齡31.1±8.2歲。

1.2 儀器試劑 DNA快速提取試劑盒，PCR擴(kuò)增儀，PCR-RDB試劑盒，分子雜交箱。以上試劑設(shè)備均由深圳亞能公司提供。

1.3 方法

1.3.1 所有標(biāo)本采集由臨床醫(yī)師完成，這些標(biāo)本來(lái)自于男性患者尖銳濕疣皮損部位的拭子或組織，分別取自男性包皮、冠狀溝、尿道口、肛周等處。采集的標(biāo)本放入深圳亞能生物技術(shù)有限公司提供的HPV23分型專用采集管中，標(biāo)本送達(dá)檢驗(yàn)科后保存，7d內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)過(guò)程嚴(yán)格按照深圳亞能公司HPV試劑盒和PCR擴(kuò)增儀說(shuō)明書(shū)的規(guī)定進(jìn)行操作。擴(kuò)增產(chǎn)物通過(guò)反向斑點(diǎn)雜交（RDB）技術(shù)檢測(cè)常見(jiàn) 23 中 HPV 基因亞型，包括 HPV6、11、42、43、81、16、18、31、33、35、45、51、52、56、58、61、66、68、73、82、83 型。

1.3.2 統(tǒng)計(jì)指標(biāo) 2015年5月至2017年5月HPV的總體感染率，各基因型的總體出現(xiàn)頻率，將數(shù)據(jù)按照患者年齡進(jìn)行分組，小于20歲一組，21~40歲為一組，大于40歲為一組，統(tǒng)計(jì)分析各年齡段的感染率和基因亞型的出現(xiàn)率，單一HPV基因亞型和多重亞型感染率等。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和處理。計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行比較，以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV感染的總體情況 本次研究共分析1147例樣品檢測(cè)結(jié)果，其中陽(yáng)性669例，陰性478例，陽(yáng)性率58.33%?；颊吣挲g分布在7～84歲，平均年齡31.1±8.2歲，其中小于20歲組61例，21～40組946例，大于41組140例。

2.2 HPV基因型分布特點(diǎn) 因?yàn)榇嬖贖PV多重感染的情況669例陽(yáng)性患者中23種HPV基因亞型共出現(xiàn)了1168項(xiàng)次，其中低危型以HPV6、11、43型為主，分別占總陽(yáng)性率的29.97%、16.52%、5.99%，高危型以 HPV16、52、59 型為主，分別占總陽(yáng)性率的7.02%、5.22%、3.77%。各基因型分布特點(diǎn)詳見(jiàn)圖1。

圖1 23種HPV基因亞型分布情況

2.3 單一型與多重感染 1147例標(biāo)本中共有669例陽(yáng)性標(biāo)本，其中單一型感染者392例，占總陽(yáng)性率的58.59%，二重及以上感染者277例，占總陽(yáng)性率的41.41%。單一型感染中共檢出19種HPV基因亞型，其中HPV6型209例，占53.32%，HPV11型 90例，占 22.96%，HPV43型，占 3.32%，HPV33、73、81、83四種型別沒(méi)有檢測(cè)出。多重感染23種HPV基因亞型均有檢出，其中HPV6型141例，占18.17%，HPV11型 103例，占 13.27%，HPV16型70例，占9.02%。男性HPV感染以單純低危型感染為主，占總陽(yáng)性率的55.01%，其次為高低危型混合感染，占45.00%%，單純高危型感染最低，占14.35%。男性HPV感染以單一感染為主，單一感染中以單純低危型感染為主，多重感染以高低危型混合感染為主。詳見(jiàn)表1。

2.4 不同年齡段HPV感染情況 檢測(cè)的1147例樣品按照年齡分組，小于20的61例，其中陽(yáng)性45例，占73.77%，以多重感染為主，占62.22%，21～40歲組946例，其中陽(yáng)性537例，占56.77%，以單一型感染為主，占60.71%，大于41歲組140例，其中陽(yáng)性87例，占62.14，以單一型感染為主，占56.32%。小于20歲組HPV陽(yáng)性率高于21～40歲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.65，P＜0.05），其余組兩兩比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=2.59，P＞0.05），詳見(jiàn)表 2。

表1 HPV不同感染模型列表

3 討論

人乳頭瘤病毒屬乳頭多瘤空泡病毒科乳頭瘤病毒屬，是一類感染表皮和粘膜麟狀上皮的小病毒。迄今為止已發(fā)現(xiàn)人乳頭瘤病毒有100多個(gè)基因型，多數(shù)是無(wú)害的，有30多種可以通過(guò)性傳播方式致病， 以 HPV6、11、16、18、31、33 型感染為多見(jiàn)。這30多種基因亞型又可分為低危型和高危型，低危型引起的生殖道、宮頸、陰蓮、直腸等處損害的主要病原[10]，—般不會(huì)癌變，而高危型通常整合到宿主基因組中，研究證實(shí)其持續(xù)或反復(fù)感染是導(dǎo)致女性宮頸癌的主要致病因素[11]。目前大量在女性HPV與宮頸癌的關(guān)系中有大量的研究和成果，但是對(duì)男性HPV感染的情況研究較少。

表2 各年齡組HPV感染情況

本研究回顧性分析2015年5月至2017年5月來(lái)我院就診的尖銳濕疣、自訴高危行為男性生殖道分泌物HPV基因分型檢測(cè)結(jié)果。共分析1147例檢測(cè)結(jié)果，其中陽(yáng)性標(biāo)本數(shù)為669例，陰性標(biāo)本478例，陽(yáng)性率為58.33%。田欣欣[12]等對(duì)我國(guó)山東地區(qū)的男性HPV感染率進(jìn)行調(diào)差，陽(yáng)性率為57.8%，與本結(jié)果相似，而董正蓉[13]等對(duì)廣東地區(qū)的性病門(mén)診患者進(jìn)行調(diào)查發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性率為43.4%。差異可能來(lái)自標(biāo)本采集方式、采集部位等[14-16]。

本研究因?yàn)榇嬖贖PV多重感染的情況，669例陽(yáng)性患者中23種HPV基因亞型共出現(xiàn)了1168項(xiàng)次，其中低危型以HJPV6、11、43型為主，分別占總陽(yáng)性率的 29.97%、16.52%、5.99%，高危型以HPV16、52、59型為主，分別占總陽(yáng)性率的7.02%、5.22%、3.77%。陽(yáng)性標(biāo)本中單一型感染者392例，占總陽(yáng)性率的58.59%，二重及以上感染者277例，占總陽(yáng)性率的41.41%。單一型感染中共檢出19種HPV基因亞型，其中HPV6型209例，占53.32%，HPV11型90例，占22.96%，HPV43型13例（多少例？），占 3.32%，HPV33、73、81、83 四種型別沒(méi)有檢測(cè)出。多重感染23種HPV基因亞型均有檢出，其中HPV6型141例，占18.17%，HPV11型 103例，占 13.27%，HPV16 型 70 例（漏了“例”？ ），占9.02%，研究結(jié)果與國(guó)內(nèi)其他學(xué)者的結(jié)果相似[17-19]。

本研究將所有數(shù)據(jù)按照年齡分組，共分為3各組，小于20的61例，其中陽(yáng)性45例，占73.77%，以多重感染為主，占62.22%，21～40歲組946例，其中陽(yáng)性537例，占56.77%，以單一型感染為主，占60.71%，大于41歲組140例，其中陽(yáng)性87例，占62.14，以單一型感染為主，占56.32%。三組中小于20歲組陽(yáng)性率高于21～40歲組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但是其余兩兩比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），田欣欣[12]等的研究表明＜20 組與＞20～組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與董正蓉[13]等的研究亦有差異，者可能與研究對(duì)象、標(biāo)本采集部位、方法、地區(qū)等因素有關(guān)[20]。

綜上所述，東莞地區(qū)高危行為男性HPV感染率較高，以小于20歲組感染率最高，感染以HPV6、11、16型感染為主，以單純低危型感染為主，其次為高低危型混合感染，單純高危型感染最低，而多重感染以高低危型混合感染為主。