病理技術(shù)HE染色在病理診斷中的應(yīng)用研究

顧平

【摘 要】目的：分析和探討病理技術(shù)HE染色在病理診斷中的應(yīng)用效果。方法：選擇本院在2013年1月-2016年3月間病理科收治的700石蠟切片為研究主體。觀察其中350例HE染色技術(shù)改進(jìn)后的染色標(biāo)本組織學(xué)質(zhì)譜，記為A組，并對剩余350例HE染色技術(shù)未改進(jìn)前的染色標(biāo)本進(jìn)行觀察，記為B組。對比兩組的染色結(jié)果。結(jié)果：A組中，脂肪組織、骨、子宮內(nèi)膜、胃鏡活檢和胃腸肝膽等染色結(jié)果與B組相比，有明顯差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：臨床病理檢查是病情診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，而HE染色技術(shù)對于病理檢查的正確性而言至關(guān)重要。所以，應(yīng)在臨床中完善HE染色技術(shù)，并采取正確操作，從而提高切片質(zhì)量，提高臨床診斷和治療方案的正確性。

【關(guān)鍵詞】病理技術(shù)；HE染色技術(shù)；病理診斷；應(yīng)用效果

【中圖分類號】R319 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B 【文章編號】1672-3783（2018）07-03--01

臨床病理診斷的使用范圍較廣，其診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性與技師切片、處理質(zhì)量，醫(yī)師診斷水平等因素存在較大關(guān)聯(lián)[1]。診斷過程中，任一環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，都會使診斷結(jié)果發(fā)生嚴(yán)重偏差。在病理學(xué)檢查中，常見問題有組織脫水不徹底、標(biāo)本固定時間過長或過短、試劑濃度不規(guī)范等，嚴(yán)重影響到制片質(zhì)量，提高了診斷難度[2]。制片技術(shù)改進(jìn)是臨床病理診斷中的熱點(diǎn)話題，有研究顯示，HE染色技術(shù)的診斷效果較佳。本次研究旨在分析病理技術(shù)HE染色在病理診斷中的應(yīng)用效果，并得到以下結(jié)論：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院在2013年1月-2016年3月間病理科收治的700石蠟切片為研究主體。將所有切片進(jìn)行規(guī)范化操作，并進(jìn)行HE染色，觀察其中350例HE染色技術(shù)改進(jìn)后的染色標(biāo)本組織學(xué)質(zhì)譜，記為A組，并對剩余350例HE染色技術(shù)未改進(jìn)前的染色標(biāo)本進(jìn)行觀察，記為B組。包括脂肪組織、胃腸和骨等石蠟切片，每組中，脂肪組織94例、骨組織70例、子宮內(nèi)膜60例、胃鏡活檢86例，胃腸肝膽40例，對比兩組的染色結(jié)果。

1.2 方法

B組HE染色方法：將手術(shù)室作為臨床標(biāo)本的選擇范圍，技術(shù)人員應(yīng)保證取材精準(zhǔn)，充分掌握不同組織在固定、染色與脫水時間等方面的要求，確保制片質(zhì)量。在制作小標(biāo)本時，應(yīng)縮短固定與脫水時間，而脂肪組織則需延長固定時間。在給予硬組織切片時，應(yīng)選用全新的切片刀，保證切片安全性。采用人工染色方法，技術(shù)人員應(yīng)先使用二苯甲進(jìn)行切片染色中的去蠟工作。每次操作5min，連續(xù)去蠟3次。使用無水酒精進(jìn)行蠟脫水洗操作，分別為無水酒精清洗1min，操作2次；90%酒精，清洗1min，85%酒精清洗1min，自來水清洗2min。用蘇木精進(jìn)行染色，時間為3-5min，再經(jīng)1%的酸性酒精進(jìn)行5-10s的分化，用自來水清洗2min，放入稀氨水反藍(lán)。這時技術(shù)人員應(yīng)觀察細(xì)胞核的染色深度，若深度較淺，則需進(jìn)行再次分化或是染色。利用伊紅液進(jìn)行30s染色，時間可根據(jù)實(shí)際情況加以調(diào)整，用85%酒精清洗20s，90%酒精清洗30s，95%酒精，清洗1min，無水酒精清洗2min。經(jīng)3次二苯甲透明2min后，使用中性樹膠進(jìn)行封片。

A組HE染色改進(jìn)方法：標(biāo)本大小不同，應(yīng)給予不同的固定、染色和脫水處理，制作過程中應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的具體特點(diǎn)調(diào)整制片方法。保證細(xì)胞核被染成藍(lán)色，細(xì)胞間質(zhì)呈粉色或桃紅色，膠原纖維呈淡粉紅色，嗜酸性顆粒呈紅色，紅血球呈橘紅色，彈力纖維呈亮粉紅色，蛋白性液體呈粉紅色。脂肪組織與骨組織應(yīng)在烤片完成后進(jìn)行降溫處理，溫度以室溫為宜，再進(jìn)行染色，可確保組織不脫落。在染色時，蘇木精因多次稀釋，其PH值已發(fā)生變化。經(jīng)試驗(yàn)后，可裝載30張切片的單個染色架，可在水洗干燥后20s，放入蘇木精。染色十架后，應(yīng)加入2滴冰醋酸，保持染色體的一致性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 數(shù)據(jù)通過SPSS17.0軟件加以處理，兩組的染色標(biāo)準(zhǔn)率用（%）表示，經(jīng)x2檢驗(yàn)，若P<0.05，說明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

A組中，脂肪組織、骨、子宮內(nèi)膜、胃鏡活檢和胃腸肝膽等染色結(jié)果與B組相比，有明顯差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），如表1。

3 討論

臨床病理檢查中，組織染色質(zhì)量直接關(guān)乎到診斷結(jié)果和治療方案的選用。臨床操作中，細(xì)胞核染色質(zhì)量決定了染色整體質(zhì)量，染色組織在物理+化學(xué)共同作用下完成，需注重染色中的每個細(xì)節(jié)[3]。細(xì)胞與組織HE染色質(zhì)量受到取材時間、操作等影響較大，應(yīng)選用相應(yīng)方法與工具進(jìn)行操作，避免發(fā)生組織結(jié)構(gòu)變化。此外，被送入檢驗(yàn)科的全部組織應(yīng)立即進(jìn)行固定，保證組織和活體成分的形態(tài)不被破壞，同時避免組織在制片時發(fā)生自溶[4]。在組織結(jié)構(gòu)受到破壞或是消失后，制片質(zhì)量便會大幅降低，因此應(yīng)在制片全程做好組織結(jié)構(gòu)保護(hù)[5]。

研究中，A組的脂肪組織、骨、子宮內(nèi)膜、胃鏡活檢和胃腸肝膽等染色結(jié)果均好于B組（P<0.05）?？梢姡谂R床中完善HE染色技術(shù)，且保證正確操作，可以大幅提高切片質(zhì)量，促進(jìn)臨床診斷和治療方案的合理化發(fā)展，可推廣。

參考文獻(xiàn)

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