血漿NO和HMGB1對評估CO中毒遲發(fā)性腦病的預測價值

陳建霞，莊美平，繆 羽，陳麗娟

一氧化碳（CO）中毒是臨床常見窒息性氣體中毒，遲發(fā)性腦病是CO中毒最為嚴重并發(fā)癥，發(fā)病率約為10%～30%，近年來有上升趨勢[1]。一般CO中毒遲發(fā)性腦病患者在救治后可能歷經(jīng)一段正常期，隨后突然出現(xiàn)以癡呆為主的精神障礙表現(xiàn)，病理改變以腦白質(zhì)廣泛脫髓鞘為特點，伴神經(jīng)元缺失，臨床診斷困難，目前尚無確切手段可預測CO中毒遲發(fā)性腦病的發(fā)生、發(fā)展[2]。近年來發(fā)現(xiàn)，一氧化氮（NO）與腦缺氧缺血病理改變存在密切關(guān)聯(lián)[3]。也有學者指出，高遷移率族蛋白1（HMGB1）過度釋放可能加重機體炎癥反應，引起多器官功能衰竭，在腦組織缺氧缺血及腦水腫發(fā)生過程中有重要作用[4]?；诖?，為探討血漿NO、HMGB1在預測CO中毒遲發(fā)性腦病發(fā)病中的臨床價值，本研究對70例CO中毒患者及40例正常健康人展開了相關(guān)研究，現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇2015年1月～2017年2月醫(yī)院收治的70例CO中毒患者，納入標準：有CO氣體接觸史；符合職業(yè)性急性化學物中毒診斷及分級標準[5]；血 CO 血紅蛋白（COHb）濃度＞10%；CO 接觸時間1～16 h；有不同程度的昏迷表現(xiàn)；研究對象或家屬簽署知情同意書，經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準。排除標準：其他原因所致昏迷者；既往有腦血管病史、腦外傷史者；合并神經(jīng)血管病變者；合并全身代謝功能異常者；合并自身免疫性疾病者；合并原發(fā)性心肝腎肺器質(zhì)性功能障礙者。按是否發(fā)生遲發(fā)性腦病分為腦病組（n=32）與無腦病組（n=38）。腦病組中，男 20 例，女 12 例；年齡 20～74（36.0±12.9）歲；CO氣體接觸時間（6.7±1.4）h。無腦病組中，男22例，女 16 例；年齡 18～75（36.1±13.0）歲；CO 氣體接觸時間（6.5±1.3）h。另選擇同期來醫(yī)院體檢的40例正常健康人作為對照組，均經(jīng)體格檢查身體健康，無心、腦、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病。其中男26例，女14例；年齡 19～73（37.5±12.5）歲。

1.2 檢測指標 CO中毒患者入院第1、5、10 d均采集肘靜脈血4 ml，對照組于體檢晨間8:00左右抽取肘靜脈血4 ml，低溫離心后留取血漿待測。采用亞硝酸鹽還原酶比色法測定NO濃度，試劑盒購自深圳晶美生物工程有限公司；采用酶聯(lián)免疫分析法檢測HMGB1濃度，試劑盒購自美國Sigma公司。均嚴格參照試劑使用說明進行操作。

1.3 統(tǒng)計學方法應用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件分析，計數(shù)資料用例和百分率表示，進行χ2檢驗；計量資料以±s表示，均行正態(tài)性和方差齊性檢驗，不符合正態(tài)分布變量進行自然對數(shù)轉(zhuǎn)化使其呈正態(tài)或近似正態(tài)分布，多組比較采用方差分析，組內(nèi)行LSD-t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血漿NO水平比較 腦病組、無腦病組NO水平均低于對照組（P＜0.05）；與入院第1 d比較，入院第5、10 d腦病組與無腦病組血漿NO水平均上升（P＜0.05），且腦病組均低于無腦病組（P＜0.05）。 見表 1。

2.2 各組血漿HMGB1水平比較 腦病組、無腦病組HMGB1水平均高于對照組（P＜0.05）；與入院第1 d比較，入院第5、10 d腦病組與無腦病組血漿HMGB1水平降低（P＜0.05），且腦病組均高于無腦病組（P＜ 0.05），見表 2。

3 討論

CO中毒是致殘率、致死率較高的窒息性氣體中毒，位于我國職業(yè)與非職業(yè)危害前列[6]。CO與血紅蛋白親和力較強，在吸入人體后可與血紅蛋白結(jié)合形成COHb，使得與氧結(jié)合的血紅蛋白減少，引起低氧血癥，造成急性CO中毒，引起心臟、腎臟、神經(jīng)系統(tǒng)、骨骼肌等器官受損。同時CO中毒對人體各器官功能損害快速而廣泛，且以代謝旺盛的心臟、大腦受損最為明顯，突出表現(xiàn)為腦水腫、腦組織軟化及變性壞死等[7]。CO中毒后，遲發(fā)性腦病則為其嚴重并發(fā)癥，是由于CO中毒使腦組織嚴重缺氧，引起腦神經(jīng)組織、腦細胞變性，繼發(fā)腦血管病變，影響患者智能水平，增加死亡風險[8]。但目前對CO中毒后遲發(fā)性腦病尚無客觀早期預測指標，而盡早確診CO中毒遲發(fā)性腦病則可為其臨床診療爭取更多的時間，有助于改善患者預后。

表1 各組血槳NO水平比較（μmoI/L）

表2 各組血槳HMGB1水平比較（ng/mL）

杜文賢[9]指出，免疫炎癥損傷在CO中毒遲發(fā)性腦病發(fā)病過程中有重要作用。也有研究發(fā)現(xiàn)，CO中毒遲發(fā)性腦病患者血清較多炎癥因子水平較急性CO患者及正常健康人高[10]。HMGB1是近年來發(fā)現(xiàn)的新型致炎細胞因子，在諸多惡性腫瘤及膿毒癥患者均可檢出血清HMGB1表達上調(diào)[11]。其為一類豐富的核內(nèi)DNA結(jié)合蛋白，廣泛分布于細胞內(nèi)外，參與細胞核酸結(jié)構(gòu)維持及基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)，在細胞外主要以旁分泌或自分泌的形式作用于內(nèi)皮細胞及免疫細胞表面受體，趨化靶細胞移動，促進多類趨化因子、黏附分子及炎癥細胞釋放，破壞細胞上皮屏障，引起機體炎癥反應，在敗血癥、自身免疫性疾病、創(chuàng)傷性休克等病理過程中均有重要作用[12]。Li等[13]建立腦缺血再灌注損傷大鼠模型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，HMGB1表達水平的變化貫穿早期缺血中心至半暗帶遲發(fā)性神經(jīng)元凋亡過程，介導腦缺血再灌注損傷過程。本研究發(fā)現(xiàn)，CO中毒遲發(fā)性腦病患者與單純CO中毒患者血漿HMGB1水平均高于正常健康人，表明HMGB1所誘導的免疫及炎癥反應在CO中毒中有重要作用，可能參與CO中毒后遲發(fā)性腦病的發(fā)生和發(fā)展。

NO則為內(nèi)源性血管舒張因子，在維持血管張力、舒張血管平滑肌方面有重要作用。在病理狀況下，NO表達降低，可引起血管舒張功能受損，導致內(nèi)皮細胞增殖、血小板聚集，造成血管狹窄或堵塞。Ochi等[14]研究發(fā)現(xiàn)，急慢性缺氧患者均伴NO合酶水平降低，導致血管內(nèi)皮細胞釋放NO減少。也有學者對缺氧大鼠NO合酶進行監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，缺氧可抑制血管內(nèi)皮細胞NO表達活性，導致NO合酶水平降低[15]。而CO中毒后組織缺氧較為嚴重，同時CO可抑制紅細胞內(nèi)糖酵解，導致血液缺氧，進一步引起內(nèi)皮細胞腫脹，加重內(nèi)皮細胞損傷，導致NO合成及分泌減少。本研究發(fā)現(xiàn)，腦病組、無腦病組NO水平均低于對照組（P＜0.05），且腦病組均低于無腦病組（P＜0.05），提示NO缺乏與CO中毒遲發(fā)性腦病的發(fā)生關(guān)系密切。

綜上所述，CO中毒遲發(fā)性腦病患者伴明顯血漿NO水平降低，HMGB1水平上升，兩者動態(tài)變化可作為預測CO中毒患者發(fā)生遲發(fā)性腦病的重要依據(jù)。