EDTA抗凝對(duì)凝聚胺交叉配血結(jié)果的影響分析

黎海江，馮學(xué)冠，符曉玲，楊藝偉，黃 植

交叉配血是輸血前必須檢查的項(xiàng)目之一，其結(jié)果的準(zhǔn)確性直接影響著輸血治療的安全。近年來(lái)，凝聚胺試驗(yàn)廣泛應(yīng)用于交叉配血中，并且與其他交叉配血方法如卡式法、微柱凝膠法等比較，具有靈敏度和特異性高、配血符合率高的優(yōu)點(diǎn)[1-2]。但是在交叉配血時(shí)，由于補(bǔ)體的激活，可能導(dǎo)致溶血或凝集不全的現(xiàn)象發(fā)生，干擾試驗(yàn)結(jié)果。EDTA抗凝劑可與鈣離子及鎂離子螯合，從而抑制補(bǔ)體的激活，可減少溶血的發(fā)生，使得交叉配血的成功率和準(zhǔn)確性增高[3]。目前有關(guān)EDTA抗凝血樣對(duì)凝聚胺交叉配血結(jié)果影響的相關(guān)報(bào)道較少，本研究比較了采用EDTA抗凝與無(wú)抗凝劑血樣的凝聚胺交叉配血結(jié)果，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 血樣采集 選擇醫(yī)院2017年1～12月進(jìn)行輸血治療的患者120例，輸血治療前每例抽取靜脈血液標(biāo)本2管，各2 ml。1管采用EDTA抗凝真空采血管（江西洪達(dá)醫(yī)療器械集團(tuán)有限公司，規(guī)格2 ml），1管為不加任何抗凝劑的真空采血管（生產(chǎn)廠家及規(guī)格同上），4℃保存，6 h內(nèi)完成測(cè)定。排除肝硬化、血液系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤患者。其中血型鑒定為A型、AB型、B型、O型各30例；男性62例，女性58例；年齡 18～72（43.2±23.6）歲。 本研究已通過(guò)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，所有患者在納入研究前均簽署知情同意書(shū)。

1.2 主要試劑 凝聚胺試劑盒購(gòu)自上海博普生物技術(shù)有限公司，內(nèi)含低離子強(qiáng)度溶液（LIM）、凝聚胺溶液、重懸液、陽(yáng)性對(duì)照及陰性對(duì)照?？笰、抗B標(biāo)準(zhǔn)血清購(gòu)自北京中聯(lián)安華科技公司。

1.3 配血實(shí)驗(yàn) 對(duì)每管樣本與同血型及不同血型供血樣本進(jìn)行凝聚胺交叉配血，具體操作步驟按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：樣本混合后1 min內(nèi)不能被懸浮液散開(kāi)為凝集；無(wú)紅細(xì)胞凝集或1 min內(nèi)能被懸浮液散開(kāi)，顯微鏡下觀察證實(shí)紅細(xì)胞無(wú)凝集為不凝集；凡出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的溶血判定為溶血。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，每例2管血樣結(jié)果以配對(duì)資料形式表示，進(jìn)行配對(duì)資料χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 同血型交叉配血結(jié)果及溶血發(fā)生率 同血型交叉配血結(jié)果顯示，每例2管血樣主側(cè)與次側(cè)均無(wú)凝集；EDTA抗凝血樣主側(cè)與次側(cè)均無(wú)溶血發(fā)生，而無(wú)EDTA血樣中有6例主側(cè)與次側(cè)均發(fā)生溶血，二者溶血率有顯著差異（P＜0.05，表1）。

表1 同血型交叉配血結(jié)果比較［n（%）］

2.2 不同血型交叉配血結(jié)果及溶血發(fā)生率 分別將每管血樣與其他3種不同血型進(jìn)行交叉配血，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，無(wú)論有無(wú)EDTA抗凝，血樣主側(cè)或次側(cè)均出現(xiàn)凝集；EDTA抗凝血樣主側(cè)或次側(cè)均無(wú)溶血發(fā)生，而無(wú)抗凝血樣中有14例次主側(cè)或次側(cè)均發(fā)生溶血，二者溶血率也有顯著差異（P＜0.05，表2）。

表2 不同血型交叉配血結(jié)果比較［n（%）］

3 討論

凝聚胺同血型交叉配血相合表現(xiàn)為無(wú)凝集無(wú)溶血，只有在這種情況下，輸血是最安全可靠的[4]。但由于多種因素影響，如血樣中存在不規(guī)則抗體、凝集素、自身抗體、溶血、抗凝劑等，可能會(huì)造成與同血型交叉配血不合發(fā)生，影響輸血的可靠性和安全性[5]。本組資料對(duì)每位患者均采取有無(wú)EDTA抗凝的采血管采取2管血樣，構(gòu)成配對(duì)資料，避免了血樣本身因素對(duì)交叉配血結(jié)果的影響，更具有對(duì)比性。

EDTA是一種常用的血液抗凝劑，用于血型鑒定或交叉配血時(shí)，能夠有效抵抗血液的自身凝集，保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。本研究發(fā)現(xiàn)，有無(wú)EDTA抗凝血樣與同血型交叉配血時(shí)均不出現(xiàn)凝集，與不同血型的供血交叉配血時(shí)均發(fā)生凝集，表明EDTA抗凝不影響交叉配血的結(jié)果，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[6]。然而，無(wú)抗凝血樣在與同血型或不同血型交叉配血時(shí)，溶血的發(fā)生率較EDTA抗凝血樣均增高，表明EDTA抗凝有助于防止溶血的發(fā)生。交叉配血時(shí)，溶血的發(fā)生主要原因在于補(bǔ)體的激活，補(bǔ)體的激活需要鈣離子及鎂離子的參與，而EDTA能與鈣鎂離子相結(jié)合，從而抑制補(bǔ)體的激活，抑制溶血的發(fā)生。有研究表明，EDTA抗凝較加熱法更有助于抑制補(bǔ)體的激活，減少溶血的發(fā)生[3]。本組資料中，EDTA抗凝血樣無(wú)論與同血型或不同血型供血樣本交叉配血過(guò)程中均無(wú)溶血現(xiàn)象發(fā)生，表明EDTA抗凝有助于減少凝聚胺交叉配血過(guò)程中溶血的發(fā)生，增加了交叉配血結(jié)果的可靠性。

綜上所述，EDTA抗凝有助于防止凝聚胺交叉配血過(guò)程中溶血的發(fā)生，提高結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，值得臨床推廣應(yīng)用。