LncRNA CCAT1通過(guò)調(diào)控MYC蛋白的表達(dá)激活MAPK信號(hào)通路影響胃癌細(xì)胞的生物學(xué)行為①

余南榮 曾 祥 徐厚巍 藍(lán)俊松

(廣州醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院胃腸腫瘤外科，廣州510095)

胃癌是消化系統(tǒng)中最常見(jiàn)的高度侵襲性惡性腫瘤，其發(fā)病率和死亡率逐年上升[1]。 據(jù)統(tǒng)計(jì)，每年中國(guó)有35 000例的胃癌患者死亡，多數(shù)死于胃癌晚期遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[2]。目前胃癌的具體發(fā)病原因不明，接受常規(guī)藥物治療的胃癌患者的中位生存期不足15個(gè)月[3]。為了改善目前胃癌的診療狀態(tài)，研究針對(duì)胃癌發(fā)病和轉(zhuǎn)移機(jī)制將可能對(duì)未來(lái)的治療策略產(chǎn)生實(shí)質(zhì)性影響，為胃癌患者的治療提供有效方法。

長(zhǎng)鏈非編碼RNA(lncRNA)影響多種細(xì)胞的重要生物過(guò)程，例如腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移[4]。 lncRNA的異常表達(dá)和具體作用方式與不同的腫瘤類(lèi)型有關(guān)[5]。 例如，HOTAIR在乳腺腫瘤中高表達(dá)，并可通過(guò)染色質(zhì)阻遏蛋白靶向特定的基因組位點(diǎn)來(lái)促進(jìn)乳腺癌的轉(zhuǎn)移[6]。還有研究指出，與hnRNP-K相關(guān)的lncRNA-p21作為p53依賴性的阻遏物參與轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的調(diào)控[7]。 lncRNA MALAT1涉及細(xì)胞生長(zhǎng)和腫瘤轉(zhuǎn)移的調(diào)節(jié)行為，其下游有眾多靶基因，不同的激活途徑參與不同行為的調(diào)控[8]。上述發(fā)現(xiàn)表明，lncRNAs可能作為腫瘤發(fā)生的重要調(diào)控者，盡管目前多數(shù)lncRNAs在特定人類(lèi)腫瘤中的表達(dá)調(diào)控及其與腫瘤發(fā)生相關(guān)的機(jī)制尚未完全清楚。

MYC癌基因的表達(dá)是廣泛存在的，且其相關(guān)機(jī)制是極其復(fù)雜的，并且可以在多個(gè)水平上進(jìn)行調(diào)節(jié)，包括增強(qiáng)子、啟動(dòng)子、轉(zhuǎn)錄因子和染色質(zhì)狀態(tài)等[9,10]。人類(lèi)8q24區(qū)域包括含有形成染色質(zhì)環(huán)的增強(qiáng)子的基因組，MYC啟動(dòng)子由數(shù)十個(gè)堿基組成，這些染色質(zhì)相互作用在前列腺癌、乳腺癌和結(jié)直腸癌中，具有明顯的組織特異性[11]。在結(jié)腸癌中，MYC蛋白(MYC-335)上游335 kb的位點(diǎn)與MYC啟動(dòng)子之間存在一個(gè)高效轉(zhuǎn)錄因子，可以直接促進(jìn)結(jié)腸癌轉(zhuǎn)錄因子4(TCF4)的激活，影響結(jié)腸癌的轉(zhuǎn)移[12]。重要的是，缺乏MYC-335的小鼠對(duì)結(jié)腸腫瘤具有一定的抗性，表明MYC在結(jié)腸癌中扮演一定的促癌作用[13]。

最近的研究表明，lncRNA CCAT1的致癌活性部分是通過(guò)靶向蛋白的激活在膽囊癌和肝細(xì)胞癌中發(fā)揮作用。本實(shí)驗(yàn)預(yù)測(cè)結(jié)果顯示，生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)(Starbase v2.0)中共揭示有22種可能的靶向蛋白與lncRNA CCAT1直接相關(guān)。其中，MYC蛋白可能通過(guò)激活MAPK信號(hào)通路在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中發(fā)揮促癌作用[14]。 因此，我們假設(shè)lncRNA CCAT1通過(guò)調(diào)控MYC在胃癌中表達(dá)激活MAPK信號(hào)通路發(fā)揮關(guān)鍵作用。 在本研究中，我們旨在探討lncRNA CCAT1在人胃癌細(xì)胞中的表達(dá)和相關(guān)生物學(xué)功能。 此外，還研究了CCAT1和MYC之間的相互作用，以揭示其基本機(jī)制。

1 材料與方法

1.1材料 在本地醫(yī)院獲得肺癌患者書(shū)面知情同意后，采集胃癌組織樣本和癌旁正常組織樣本，本研究獲得醫(yī)學(xué)院審查委員會(huì)的批準(zhǔn)。蠟包埋的腫瘤樣品用于免疫組織化學(xué)研究。人類(lèi)胃癌SGC-7901、AGS和HCG-27細(xì)胞購(gòu)自復(fù)旦大學(xué)細(xì)胞培養(yǎng)中心，所有細(xì)胞在補(bǔ)充了高葡萄糖的Dulbecco′s改良伊格爾培養(yǎng)基(DMEM，UT，USA)中培養(yǎng)。 含有10%胎牛血清(Gibco，Gaithersburg，USA)，鏈霉素(100 mg/ml)和青霉素(100 U/ml)的培養(yǎng)基。 所有細(xì)胞保持在含有5%CO2的潮濕氣氛的37℃培養(yǎng)箱中。

1.2方法

1.2.1PCR分析 使用miR Vana miRNA分離試劑盒從胃癌組織和對(duì)照癌旁正常組織中分離總RNA。使用Nano-2000分光光度計(jì)測(cè)定RNA濃度和純度。反應(yīng)條件按照cDNA合成試劑盒使用說(shuō)明進(jìn)行設(shè)置。反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性10 min、95℃變性15 s、60℃退火32 s，循環(huán)50次后檢測(cè)其溶解曲線，檢測(cè)完成后，通過(guò)計(jì)算機(jī)系統(tǒng)自動(dòng)分析各樣本Ct值，然后采用2-ΔΔCt計(jì)算lncRNA的相對(duì)表達(dá)量。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。CCAT1引物序列：5′-CCATTCCATTC-ATTTCTCTTTCCTA-3′(正向)和5′-GGCGTAGGCGATTGGGGATCG-3′(反向)。MYC引物序列：5′-ATTTAAGGAGCGGATTTAGC-3′(正向)和5′-TTTTC-GAGTCGAAACACACT-3′(反向)。

1.2.2細(xì)胞轉(zhuǎn)染 根據(jù)制造商的說(shuō)明使用Lipofectamine2000試劑盒(Invitrogen)進(jìn)行轉(zhuǎn)染。 對(duì)于CCAT1(CCAT1-siRNA)模擬物和NC模擬物(NC)的siRNA購(gòu)自Transheep(Transheep，Shanghai，China)。 CCAT1的siRNA序列是5′-CCATTCCATTCATTTCTCTTTCCTA-3′。根據(jù)制造商的說(shuō)明，使用Lipofectamine2000(Invitrogen)進(jìn)行HCG-27細(xì)胞轉(zhuǎn)染并與CCAT1-siRNA模擬物共轉(zhuǎn)染。

1.2.3蛋白質(zhì)印跡測(cè)定 使用RIPA緩沖液提取總細(xì)胞裂解物，通過(guò)配置12%十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)，并轉(zhuǎn)移到PVDF膜，用5%脫脂奶粉封閉，并在4℃下與一抗(濃度1∶1 000)一起孵育過(guò)夜。 隨后，將膜與二抗孵育，最后用ECL底物試劑盒檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.2.4劃痕愈合實(shí)驗(yàn) 將轉(zhuǎn)染細(xì)胞和對(duì)照組細(xì)胞培養(yǎng)至生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期。 使用200 μl無(wú)菌移液器尖端以標(biāo)準(zhǔn)方式將單層細(xì)胞劃傷創(chuàng)建無(wú)細(xì)胞區(qū)域。將培養(yǎng)基吸出并用新鮮的完全培養(yǎng)基代替，然后將細(xì)胞在37℃孵育24 h。24 h后記錄并拍照細(xì)胞遷移情況。在每個(gè)實(shí)驗(yàn)條件下以5個(gè)隨機(jī)間隔測(cè)量遷移角化細(xì)胞之間的遷移殘余間隙，以與原始擦傷寬度的百分比作為比較數(shù)據(jù)。

1.2.5Transwell侵襲實(shí)驗(yàn) 使用24孔板進(jìn)行細(xì)胞侵襲測(cè)定。將轉(zhuǎn)染細(xì)胞和對(duì)照組細(xì)胞培養(yǎng)至生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期，重新懸浮在具有無(wú)血清培養(yǎng)基中并以每孔1×104個(gè)細(xì)胞的密度加入到上室中，底部室含有補(bǔ)充有10%胎牛血清(FBS)和正常濃度的生長(zhǎng)因子的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。培養(yǎng)24 h后，通過(guò)抽吸基質(zhì)膠去除上部孔中的細(xì)胞并用棉簽擦拭膜的頂部。使用差異快速染色試劑將膜下側(cè)的細(xì)胞固定，進(jìn)行染色。在光學(xué)顯微鏡下以40×的放大倍數(shù)使用每個(gè)膜的5個(gè)顯微鏡場(chǎng)的圖像計(jì)數(shù)細(xì)胞侵襲數(shù)目。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.2.6通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)量化細(xì)胞凋亡 收獲轉(zhuǎn)染的和對(duì)照細(xì)胞，用冷PBS洗滌2次并重懸于結(jié)合緩沖液中。 然后將細(xì)胞用FITC Annexin V凋亡檢測(cè)試劑盒(BD Bioscience，Bedford，USA)在室溫黑暗中染色30 min。 細(xì)胞凋亡檢測(cè)使用流式細(xì)胞儀(Becton Dickinson，Mountain View，USA)在1 h內(nèi)測(cè)定。

1.2.7細(xì)胞周期分析 流式細(xì)胞術(shù)(FCM)進(jìn)行細(xì)胞周期分析，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)胰蛋白酶消化程序收獲生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期的轉(zhuǎn)染和對(duì)照細(xì)胞，用PBS洗滌，并在4℃用75%乙醇固定過(guò)夜。 次日將細(xì)胞與RNA酶在37℃孵育30 min。 然后將細(xì)胞用碘化丙錠染色30 min。 收集培養(yǎng)物并使用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期。 數(shù)據(jù)表示為在細(xì)胞周期的G0/G1、S和G2/M期細(xì)胞的百分比分布。

1.2.8熒光素酶實(shí)驗(yàn)分析 用CCAT1模擬物和NC模擬物將MYC野生型(WT)和MYC突變型(MUT)報(bào)道質(zhì)粒與HGC-27細(xì)胞共轉(zhuǎn)染。 使用Lipofectamine2000將熒光素酶質(zhì)粒轉(zhuǎn)染進(jìn)入細(xì)胞中，使用海腎熒光素酶質(zhì)粒進(jìn)行實(shí)驗(yàn)對(duì)照。在轉(zhuǎn)染48 h后針對(duì)海腎熒光素酶活性測(cè)定相對(duì)熒光素酶活性，并且使用雙熒光素酶報(bào)道基因測(cè)定系統(tǒng)(Promega，Madison，USA)測(cè)量熒光素酶活性。

2 結(jié)果

2.1CCAT1在胃癌組織和細(xì)胞系中表達(dá)情況 為了探索CCAT1在胃癌中的表達(dá)水平及檢測(cè)情況，首先通過(guò)qPCR檢測(cè)了胃癌組織和癌旁正常組織中CCAT1的表達(dá)情況。 如圖1所示，與正常組織相比，在腫瘤組織中觀察到lncRNA CCAT1的表達(dá)水平升高[(0.98±0.16)vs(0.21±0.06)，P<0.05]。然后測(cè)量3種胃癌細(xì)胞系(SGC-7901、AGS和HCG-27)中l(wèi)ncRNA CCAT1的表達(dá)情況，結(jié)果顯示HCG-27細(xì)胞系中的lncRNA CCAT1表達(dá)顯著高于其他細(xì)胞系(P<0.05)。

2.2MYC在胃癌組織中的表達(dá)和lncRNA CCAT1的關(guān)系 為了探討MYC是否在胃癌中存在變化，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)qPCR檢測(cè)了MYC在胃癌組織和癌旁正常組織中的表達(dá)。如圖2所示，與癌旁正常組織相比，MYC在胃癌組織中的表達(dá)顯著下調(diào)[(0.69±0.13)vs(0.27±0.15)，P<0.05]。 此外，MYC表達(dá)與相對(duì)lncRNA CCAT1的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(圖2)。盡管MYC和lncRNA CCAT1之間的相互關(guān)系得到了證實(shí)，但lncRNA CCAT1和MYC之間的調(diào)控關(guān)系需要進(jìn)一步驗(yàn)證。

2.3雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)檢測(cè)lncRNA CCAT1和MYC之間的調(diào)控關(guān)系 本實(shí)驗(yàn)用Starbase 2.0軟件預(yù)測(cè)了相關(guān)蛋白MYC可能是CCAT1的靶點(diǎn)，圖3A顯示lncRNA CCAT1和MYC之間有相似的結(jié)合位點(diǎn)，兩者具備可能的調(diào)控關(guān)系。通過(guò)qPCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染了NC和CCAT1后的HCG-27細(xì)胞中MYC表達(dá)活性的差異。結(jié)果顯示(圖3B)，與NC組相比，轉(zhuǎn)染了CCAT1后的野生型MYC蛋白的熒光活性明顯降低，而突變型MYC蛋白的熒光活性降低不明顯(P<0.05)。表明lncRNA CCAT1可以參與MYC蛋白的表達(dá)活性的調(diào)控過(guò)程，表明MYC蛋白是lncRNA CCAT1的靶標(biāo)，lncRNA CCAT1和MYC蛋白的結(jié)合位點(diǎn)是功能性位點(diǎn)。

圖1 qPCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)lncRNA CCAT1在胃癌組織和細(xì)胞系中表達(dá)情況Fig.1 qPCR assay detects lncRNA CCAT1 expression in gastric cancer tissue and cell linesNote: *.P<0.05；**.P<0.01.

圖2 MYC在胃癌組織中的表達(dá)情況和lncRNA CCAT1之間的關(guān)系Fig.2 Relationship between MYC expression in gastric cancer and lncRNA CCAT1

2.4lncRNA CCAT1對(duì)胃癌細(xì)胞凋亡行為的影響 為了探索lncRNA CCAT1在胃癌發(fā)生中可能的生物學(xué)意義，本實(shí)驗(yàn)評(píng)估lncRNA CCAT1對(duì)胃癌細(xì)胞凋亡和周期的影響。首先使用lncRNA CCAT1-siRNA抑制其表達(dá)水平，通過(guò)qPCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)慢病毒對(duì)CCAT1的抑制效率達(dá)到85%以上，且和NC組對(duì)比有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明后續(xù)實(shí)驗(yàn)的抑制效果明顯可靠。圖4顯示了lncRNA CCAT1在胃癌HCG-27細(xì)胞中的敲除后對(duì)其凋亡情況的影響，右上和右下象限代表凋亡壞死細(xì)胞數(shù)目，結(jié)果顯示抑制lncRNA CCAT1的表達(dá)后可以一定程度上促進(jìn)胃癌HCG-27細(xì)胞的凋亡。同時(shí)圖5結(jié)果顯示了抑制lncRNA CCAT1的表達(dá)可以誘導(dǎo)G0/G1期的細(xì)胞周期停滯并促進(jìn)細(xì)胞凋亡。 上述結(jié)果表明lncRNA CCAT1的表達(dá)下調(diào)在胃癌細(xì)胞系中發(fā)揮一定的腫瘤抑制作用。

圖3 LncRNA CCAT1和MYC之間的調(diào)控關(guān)系Fig.3 Regulation of lncRNA CCAT1 and MYCNote: A.Bioinformatics predicts the binding site between lncRNA CCAT1 and MYC；B.Dual luciferase assay assayed the regulatory relationship between lncRNA CCAT1 and MYC.*.P<0.05.

圖4 LncRNA CCAT1對(duì)胃癌細(xì)胞凋亡行為的影響Fig.4 Effects of lncRNA CCAT1 on apoptosis of gastric cancer cellsNote: *.P<0.05.

2.5lncRNA CCAT1對(duì)胃癌細(xì)胞遷移和侵襲行為的影響 為了確定lncRNA CCAT1表達(dá)后的胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為是否有相應(yīng)的變化，將NC模擬物和CCAT1-siRNA分別轉(zhuǎn)染進(jìn)入胃癌細(xì)胞后，評(píng)估NC組和CCAT1-siRNA組細(xì)胞遷移和侵襲的變化。 如圖6所示，與NC組相比，CCAT1-siRNA組細(xì)胞遷移能力受到一定程度的抑制[48 h(24.6±3.2)vs(17.4±2.1)，P<0.05;72 h(42.3±5.9)vs(76.3±7.2)，P<0.05]。 圖7所示，與NC組相比，CCAT1-siRNA組細(xì)胞侵襲能力受到一定程度的抑制[(178.6±12.3)vs(42.6±8.6)，P<0.05]?；谏鲜鼋Y(jié)果，本實(shí)驗(yàn)證實(shí)lncRNA CCAT1的表達(dá)可以直接影響胃癌細(xì)胞的遷移和侵襲行為。

圖5LncRNACCAT1對(duì)胃癌細(xì)胞周期的影響

Fig.5EffectoflncRNACCAT1ongastriccancercellcycle

Note: *.P<0.05.

圖6 LncRNA CCAT1對(duì)胃癌細(xì)胞遷移行為的影響Fig.6 Effects of lncRNA CCAT1 on migration of gastric cancer cellsNote: *.P<0.05

圖7LncRNACCAT1對(duì)胃癌細(xì)胞侵襲行為的影響

Fig.7EffectoflncRNACCAT1oninvasivenessofgastriccancercells

圖8 LncRNA CCAT1對(duì)MAPK信號(hào)蛋白影響的情況Fig.8 Effect of lncRNA CCAT1 on MAPK signaling proteinsNote: *.P<0.05.

2.6LncRNA CCAT1對(duì)MAPK信號(hào)通路的激活情況 通過(guò)Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)lncRNA CCAT1對(duì)胃癌細(xì)胞中MAPK通路蛋白表達(dá)水平的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示(圖8)：轉(zhuǎn)染了CCAT1-siRNA后，ERK1、jnk和p38MAPK蛋白的表達(dá)水平相比NC組均明顯降低[(1.51±0.21)vs(0.61±0.07)，P<0.05；(1.75±0.16)vs(0.43±0.07)，P<0.05；(1.25±0.07)vs(0.53±0.09)，P<0.05]，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明抑制lncRNA CCAT1后可以調(diào)控下游ERK1、jnk和p38MAPK蛋白的表達(dá)，抑制ERK1、jnk和p38MAPK的表達(dá)水平，調(diào)控相應(yīng)的MAPK信號(hào)通路的功能。

3 討論

目前惡性腫瘤手術(shù)切除及同步放化療可以盡可能減輕患者的痛苦，延長(zhǎng)生命，是治療惡性腫瘤患者的主要手段，但預(yù)后相對(duì)較差[15]。因此，迫切需要尋找一種新的有效治療腫瘤患者的方式，相關(guān)生物分子治療模式是相對(duì)研究熱點(diǎn)。

長(zhǎng)鏈非編碼RNA(lncRNAs)是一種非編碼RNA轉(zhuǎn)錄因子，由200多個(gè)核苷酸組成[16]。越來(lái)越多的研究表明lncRNAs是腫瘤中的重要調(diào)節(jié)因子，并且證實(shí)了lncRNAs可能作為競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源RNA(ceRNA)或分子來(lái)調(diào)控miRNA的轉(zhuǎn)錄表達(dá)[17]。例如，HOTAIR、H19、CASC2、NEAT1、XIST或CRNDE等lncRNA可以通過(guò)調(diào)控miR-326靶向因子參與細(xì)胞行為的調(diào)控[18]。另有研究指出miR-675[19]、miR-21[20]、miR-155[21]和miR-186[22]均是lncRNA CCAT1的靶向因子。Wang等[23]研究指出lncRNA CCAT1可調(diào)節(jié)MYC蛋白的激活，并在直腸癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移中起重要作用。此外，異常表達(dá)的lncRNA CCAT1促進(jìn)膠質(zhì)瘤[24]、肝細(xì)胞癌[25]、乳腺癌[26]中的細(xì)胞增殖和遷移。然而，lncRNA CCAT1在胃癌中的生物學(xué)作用及其分子機(jī)制尚不完全清楚。

MYC蛋白是眾多l(xiāng)ncRNAs和miRNAs 的下游作用靶點(diǎn)[27]。然而，目前沒(méi)有相關(guān)研究檢測(cè)人類(lèi)胃癌組織樣本或胃癌細(xì)胞系中的MYC的表達(dá)及作用。MYC可以激活相關(guān)信號(hào)通路途徑，參與細(xì)胞轉(zhuǎn)移侵襲行為，維持通路啟動(dòng)子和增強(qiáng)子的激活情況[28]。

在這項(xiàng)研究中，逐步證明lncRNA CCAT1在胃癌組織和細(xì)胞系中高度表達(dá)，抑制lncRNA CCAT1可促進(jìn)胃癌細(xì)胞體外凋亡情況，可以在一定程度上抑制胃癌細(xì)胞的遷移和侵襲行為。另外，lncRNA CCAT1可與胃癌組織和細(xì)胞系中低表達(dá)的MYC蛋白有直接的調(diào)控關(guān)系。我們目前的研究表明lncRNA CCAT1表達(dá)在胃癌組織和細(xì)胞系中上調(diào)，提示lncRNA CCAT1可能與胃癌的發(fā)展密切相關(guān)。此外，通過(guò)證實(shí)抑制lncRNA CCAT1可以促進(jìn)胃癌細(xì)胞的凋亡行為，促進(jìn)細(xì)胞凋亡并誘導(dǎo)G0/G1期的細(xì)胞周期停滯，表明lncRNA CCAT1在胃癌中發(fā)揮了明顯致瘤作用。我們的研究結(jié)果為lncRNA CCAT1在人胃癌中的功能研究提供了可靠的證據(jù)。

同時(shí)本實(shí)驗(yàn)的研究還顯示了MYC在惡性腫瘤中的低表達(dá)水平，其可能作為靶標(biāo)的腫瘤抑制劑發(fā)揮作用。最近的研究表明，MYC可以參與JAK/STAT通路的激活而抑制乳腺癌的進(jìn)展過(guò)程[29]。Shu等[30]已經(jīng)報(bào)道MYC可以通過(guò)靶向Wnt/β-catenin信號(hào)抑制口腔鱗狀細(xì)胞癌的增殖和侵襲。在近期研究中，Macias等[31]發(fā)現(xiàn)MYC可以通過(guò)靶向MDM2來(lái)抑制細(xì)胞遷移和侵襲。因此，本實(shí)驗(yàn)根據(jù)生物信息學(xué)可以推斷l(xiāng)ncRNA CCAT1的敲低通過(guò)上調(diào)MYC在人胃癌細(xì)胞中的表達(dá)進(jìn)而激活MAPK信號(hào)通路抑制胃癌細(xì)胞的遷移和侵襲。未來(lái)我們擬繼續(xù)研究lncRNA CCAT1的表達(dá)與胃癌患者的預(yù)后的可能關(guān)系，通過(guò)大樣本量的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)合目前研究結(jié)果，為證實(shí)lncRNA CCAT1在胃癌的診斷、治療中作用機(jī)制提供一定的理論支持，表明lncRNA CCAT1有發(fā)展成為胃癌新型分子標(biāo)志物的潛在可能。