妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病患者血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平變化及臨床意義

劉亞敏，陳燕，黎元莉

(三亞市人民醫(yī)院，海南三亞 572000)

妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病主要包括葡萄胎、侵蝕性葡萄胎、絨毛癌和部分少見的胎盤部位滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤。有數(shù)據(jù)顯示，大約15%的良性葡萄胎患者可進展成為侵蝕性葡萄胎或子宮外轉(zhuǎn)移，并可能經(jīng)過侵蝕性葡萄胎進展成為絨毛癌[1，2]。目前，雖然妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病的治療已取得較為滿意的療效，但其發(fā)病機制、惡變因素仍未得到明確闡明[3]。變異型細(xì)胞間黏附分子(CD44v6)是一種具有多結(jié)構(gòu)、多功能的細(xì)胞表面黏附分子，在機體的多種生理病理過程中均有參與，近年來國內(nèi)外均有報道指出，其對妊娠的維持和發(fā)展可產(chǎn)生一定影響作用[4，5]。此外，有學(xué)者指出，由于基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)系統(tǒng)在細(xì)胞外基質(zhì)的降解中發(fā)揮著重要作用，而滋養(yǎng)層細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的具有類似的增值、分化、侵襲能力，并認(rèn)為MMP系統(tǒng)可能在滋養(yǎng)細(xì)胞的生理病理過程中有所參與[6，7]。因此，本研究旨在探討在妊娠滋養(yǎng)疾病患者中血清CD44v6、MMP-2、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)的表達(dá)，并分析其對葡萄胎惡變的預(yù)測價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2013年10月～2015年10月本院收治妊娠期滋養(yǎng)疾病患者60例(觀察組)，年齡23～45(31.79±5.72)歲，其中葡萄胎47例，侵蝕性葡萄胎9例，絨毛膜癌4例。60例患者均符合《婦產(chǎn)科病理學(xué)》[8]的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)并通過病理學(xué)切片檢查確診，同時排除合并其他惡性腫瘤、未完成隨訪及臨床資料不完整者。另選擇同期在本院體檢健康婦女30例作為對照組，年齡22～47(32.03±5.40)歲，均無心、肝、腎、肺等功能障礙，婦科檢查無異常；其性別、年齡構(gòu)成與觀察組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P均>0.05)。

1.2 檢測方法 采集兩組受試者清晨空腹靜脈血5 mL，室溫下靜置30～60 min后以5 000 r/min離心10 min，提取上層血清置于冷凍箱內(nèi)儲存進行檢測。血清CD44v6的檢測使用酶聯(lián)免疫吸附法，試劑盒購于美國Bender Med Systems公司；血清MMP-2、TIMP-2的檢測使用放射免疫法，試劑盒購于北方免疫試劑研究所。操作方式均嚴(yán)格參照試劑盒說明書實施。

2 結(jié)果

2.1 不同類型妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病患者血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2變化 觀察組不同類型妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病患者及對照組間血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平均有統(tǒng)計學(xué)差異(P均<0.05)。葡萄胎、侵蝕性葡萄胎、絨毛癌患者血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平呈逐漸升高狀態(tài)，組間比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P均<0.05)。見表1。

表1 觀察組及對照組血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平比較±s)

注：與對照組比較，△P<0.05；與絨毛膜癌比較，#P<0.05；與侵蝕性葡萄胎比較，*P<0.05。

2.2 葡萄胎惡變和未惡變者血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平變化 47例葡萄胎患者隨訪2年，參照《婦產(chǎn)科病理學(xué)》[8]診斷標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)生惡變10例，未發(fā)生惡變37例，葡萄胎惡變患者血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平均高于葡萄胎未惡變患者(P均<0.05)。見表2。

表2 葡萄胎惡變和未惡變者血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平比較±s)

注：與未惡變比較，*P<0.05。

2.3 葡萄胎惡變患者的危險因素 將葡萄胎是否惡變作為因變量，血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2作為協(xié)變量，Logistic回歸分析結(jié)果顯示血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平升高均是葡萄胎惡變的危險因素(P均<0.05)。見表3。

表3 葡萄胎惡變危險因素的Logistic回歸分析

2.4 葡萄胎患者血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2相關(guān)性 Pearson直線相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清CD44v6水平與血清MMP-2、TIMP-2水平均呈正相關(guān)(r分別為0.721、0.882，P均<0.05)。

3 討論

惡性腫瘤細(xì)胞最重要的生物學(xué)特征之一是細(xì)胞和細(xì)胞之間、細(xì)胞和細(xì)胞外介質(zhì)之間出現(xiàn)黏附異常，這種黏附異?？墒鼓[瘤細(xì)胞由原發(fā)部位脫落并向周圍組織轉(zhuǎn)移、侵襲。CD44是近年來備受學(xué)者關(guān)注的細(xì)胞表面黏附分子，作為高度異質(zhì)性的單鏈跨膜糖蛋白，其廣泛分布于機體各個部位，可與透明質(zhì)酸等多種配體相互結(jié)合。CD44主要有標(biāo)準(zhǔn)型(CD44s)和變異型(CD44v)兩種類型，后者由于選擇性拼接方式的不同又包含著多種類型，其中作用最為關(guān)鍵的則是CD44v6[9，10]。CD44v6最早在動物實驗中發(fā)現(xiàn)。將大鼠轉(zhuǎn)移性胰腺癌細(xì)胞株的CD44vDNA轉(zhuǎn)染到非轉(zhuǎn)移的BSP73AS癌細(xì)胞株后，結(jié)果顯示后者出現(xiàn)了轉(zhuǎn)移，經(jīng)檢查發(fā)現(xiàn)CD44v6是轉(zhuǎn)移性胰腺癌細(xì)胞株中表達(dá)最強的CD44v[11]。Zavros[12]進一步研究發(fā)現(xiàn)，在胃癌、腸癌、肝癌、乳腺癌等多種惡性腫瘤中均檢測出CD44v6不斷升高，且和腫瘤的轉(zhuǎn)移、侵襲之間存在著密切聯(lián)系。但目前關(guān)于CD44v6在妊娠滋養(yǎng)疾病中的作用相關(guān)報道仍較少。本研究顯示，在葡萄胎、侵蝕性葡萄胎、絨毛癌患者中，CD44v6的表達(dá)呈不斷增長趨勢，且葡萄胎惡變患者CD44v6的表達(dá)明顯比未惡變的患者高。滋養(yǎng)細(xì)胞的浸潤過程和腫瘤十分相似，CD44v6表達(dá)的增加可導(dǎo)致滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤過度；CD44v6可與透明質(zhì)酸等配體相結(jié)合，獲得黏附性，更利于從水泡樣胎塊中獲得生長因子，進一步促使滋養(yǎng)細(xì)胞的惡性增長和血管內(nèi)皮細(xì)胞的黏附，加重疾病嚴(yán)重程度。

胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞疾病的共同點是滋養(yǎng)層出現(xiàn)異常。MMPs是一組對細(xì)胞外介質(zhì)具有降解作用高度保守的蛋白水解酶，可通過調(diào)節(jié)黏附、激活等方式參與體內(nèi)各種生理病理過程，尤其是腫瘤的轉(zhuǎn)移和侵襲，其中MMP-2是分布最為廣泛的類型[13，14]。而TIMPs可與MMPs之間發(fā)生非共價結(jié)合，對MMPs發(fā)揮特異性抑制作用。在機體正常狀態(tài)下，MMPs和TIMPs處于相對平衡的狀態(tài)，維持著細(xì)胞外介質(zhì)的更新和自穩(wěn)功能；但若細(xì)胞內(nèi)環(huán)境被打破后，這種平衡也會被隨之打破，加速基質(zhì)降解過程[15]。本研究顯示，妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病患者血清MMP-2、TIMP-2水平正常對照組明顯升高，且葡萄胎、侵蝕性葡萄胎、絨毛膜癌呈逐漸升高趨勢。葡萄胎惡變患者血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平均高于葡萄胎未惡變患者?；颊哐錗MP-2、TIMP-2水平的不斷升高，可通過降解細(xì)胞外介質(zhì)等途徑促使滋養(yǎng)細(xì)胞不斷向子宮內(nèi)膜侵襲，導(dǎo)致滋養(yǎng)細(xì)胞出現(xiàn)過度增殖、增生，促進疾病不斷進展。陸瑞等[16]研究也指出，MMP-2、TIMP-2在滋養(yǎng)細(xì)胞疾病中出現(xiàn)高表達(dá)的原因和滋養(yǎng)細(xì)胞的高侵襲能力相關(guān)，并認(rèn)為二者是滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移的重要分子標(biāo)志物。本研究Pearson直線相關(guān)性分析顯示，血清CD44v6水平與血清MMP-2、TIMP-2水平均呈正相關(guān)，三者相互協(xié)同共同參與妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病的發(fā)生和發(fā)展。因此，研究妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病患者血清CD44v6和MMP-2、TIMP-2水平變化可為早期預(yù)測葡萄胎惡變提供新的思路。