苦丁茶冬青扦插繁育技術(shù)研究

顧文亮 莊輝發(fā) 王輝 張翠玲 朱紅英 譚樂(lè)和

摘 要 以苦丁茶冬青當(dāng)年生半木質(zhì)化的枝條作為扦插材料，通過(guò)對(duì)比試驗(yàn)研究植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、處理時(shí)間和營(yíng)養(yǎng)土配方與組合等對(duì)苦丁茶冬青扦插生根和裝袋移栽的影響。結(jié)果表明，使用300 mg/L、pH 6.5的萘乙酸（NAA）溶液處理 8.0 h以上對(duì)苦丁茶冬青插穗的生根效果最佳，移栽的營(yíng)養(yǎng)土采用黃泥、河沙、椰糠和牛糞并添加復(fù)合肥后混勻堆放熟化，對(duì)苦丁茶冬青種苗的裝袋存活效果較好。

關(guān)鍵詞 苦丁茶冬青 ；扦插 ；繁育

中圖分類(lèi)號(hào) S339.4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A Doi：10.12008/j.issn.1009-2196.2018.04.007

Abstract Semi-lignified shoots of Ilex kudingcha C. J. Tseng were selected for cuttings， and treated with different plant growth regulators to analyze the effects of the regulators， treatment duration and soil nutrient formula on the rooting of the cuttings and the survival rate of the cuttings transferred into bags. The results showed that the cuttings treated with pH6.5 NAA solution at 300 mg/L for 8.0 h had optimal rooting effect. The nutrient soil for bag-raising of the cuttings was prepared by mixing yellow mud， river sand， coconut coir and cow dung with compound fertilizer and allowing the mixture well composted. This composted mixed nutrient soil had good effect on the survival of Ilex kudingcha C. J. Tseng in the bags.

Key words Ilex kudingcha C. J. Tseng； cutting； propagation

苦丁茶冬青（Ilex kudingcha C. J. Tseng）是享譽(yù)盛名的藥食同源飲料植物，其產(chǎn)品具有多種保健功效，在中國(guó)有著悠久的飲用歷史，長(zhǎng)期以來(lái)受到了人們的廣泛關(guān)注?？喽〔瓒嘀饕植加诤Ｄ先砙1]，廣東英德、肇慶和大埔，廣西南寧周邊、大新、天等、龍州，以及云南部分地區(qū)等[2]?？喽〔瓒嗟睦先~與嫩芽均可藥食兩用，用開(kāi)水泡漬后別具風(fēng)味，先苦后甘且回味久長(zhǎng)，其產(chǎn)品可長(zhǎng)期飲用無(wú)任何毒副作用，能強(qiáng)心健體，尤以降壓減肥和清熱解毒而倍受廣大消費(fèi)者青睞。研究證明，苦丁茶冬青葉片中含有熊果酸、芳香油、苦丁茶甙元、α-香樹(shù)脂、β-谷甾醇、綠原酸等多種功能組分[3]。這些有效功能成分具有止痛、抑菌、解痙、降壓、清熱降火、止渴生津、解毒消炎、強(qiáng)心利尿、抗輻射、抗癌防癌等多種藥用功效和保健作用[4]。

近年來(lái)，隨著苦丁茶產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，苦丁茶冬青種苗質(zhì)量參差不齊且退化嚴(yán)重，逐漸成為影響產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的重要因素?？喽〔瓒喾N子需要6～8個(gè)月的后熟期才能萌發(fā)，發(fā)芽率一般在50%以下[5]，此外還存在實(shí)生苗性狀變異較大的問(wèn)題。因此，目前生產(chǎn)上用的苦丁茶冬青種苗通常是直接從野生植株上剪取枝條進(jìn)行扦插，隨后再經(jīng)過(guò)多代扦插繁育而成的，種苗的農(nóng)藝性狀與品質(zhì)性狀差異很大，導(dǎo)致后期苦丁茶產(chǎn)品的產(chǎn)量與品質(zhì)無(wú)法保證。苦丁茶冬青作為木本喬木植物使其扦插生根較困難，且種苗扦插繁育的生根率與移栽成活率均較低。因此，需要盡快研發(fā)出一種行之有效的苦丁茶冬青種苗扦插繁育技術(shù)。

1 材料與方法

1.1 材料

用于制作插穗的苦丁茶冬青枝條取自萬(wàn)寧市南橋鎮(zhèn)香料飲料研究所高龍基地內(nèi)種植多年的植株，選用當(dāng)年半木質(zhì)化的枝條作為插條。根據(jù)枝條生長(zhǎng)實(shí)際情況，靈活將插條剪成適當(dāng)規(guī)格的插穗，合適插穗的長(zhǎng)度約15～20 cm，直徑約0.6～1.0 cm。每個(gè)插穗保留3～4片葉片，同時(shí)每片葉片減去1/2的面積并保留葉柄。為利于萌發(fā)新葉，通常將每個(gè)插穗保留2個(gè)以上的腋芽，插穗的上切口距離腋芽上方2.0 cm處，下切口距離腋芽下方5～10 cm處，插穗的切口整齊且無(wú)破裂。剪好的插穗先在清水中清洗5 min，便于除去雜物，將約20～30支插穗捆為一小捆待用。試驗(yàn)處理所用的藥劑為吲哚丁酸（IBA）、ABT生根粉（50%吲乙·萘乙酸可溶性粉）和萘乙酸（NAA）。

1.2 方法

1.2.1 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類(lèi)及濃度對(duì)扦插生根的影響

將剪好的插穗用不同濃度的IBA、ABT生根粉和NAA浸泡插穗基部處5 cm以上，處理時(shí)間為1 h，以清水處理作為對(duì)照（CK）。每個(gè)處理約30根插穗，共設(shè)3次重復(fù)，采用單因素完全隨機(jī)排列。

1.2.2 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理時(shí)間對(duì)扦插生根的影響

將剪好的插穗用pH 6.5、濃度為300 mg/L NAA浸泡插穗基部處5 cm以上，分別處理0.5、1.0、2.0、4.0和8.0 h。每個(gè)處理約30根插穗，共設(shè)3次重復(fù)，采用單因素完全隨機(jī)排列。

1.2.3 營(yíng)養(yǎng)土種類(lèi)及配比處理對(duì)移栽存活的影響

將剪好的插穗用pH 6.5、濃度為300 mg/L NAA浸泡插穗基部5 cm以上處理8.0 h。在沙床上將插穗育苗生根約50～60 d后，采用100%黃泥、100%河沙、50%黃泥+50%河沙、50%黃泥+50%椰糠、50%河沙+50%椰糠和30%黃泥+30%河沙+30%椰糠+10%牛糞等不同營(yíng)養(yǎng)土種類(lèi)及配比的處理方式，將生根的插穗分別裝袋至上述營(yíng)養(yǎng)土組合中。每個(gè)處理約30根插穗，共設(shè)3次重復(fù)，采用單因素完全隨機(jī)排列。

1.2.4 扦插生根期管理

選擇用河沙作為基質(zhì)的苗床，扦插前2～3 d用50%多菌靈可濕性粉劑500～800倍液或80%代森錳鋅可濕性粉劑800～1 000倍液等藥劑噴淋苗床進(jìn)行消毒。插穗深度為插穗總長(zhǎng)的1/5至1/4，插穗的密度以插穗葉面不重疊為度，扦插完后立即將苗床澆透水一次。在苗床上搭高50～60 cm的無(wú)色塑料薄膜拱棚，并在頂部設(shè)置遮光度為80%的遮陰網(wǎng)蓋頂，每隔1～2 d定期澆水保持苗床濕度在85%以上，如遇連續(xù)干旱或持續(xù)高溫天氣應(yīng)當(dāng)視情況通風(fēng)降溫控制拱棚內(nèi)溫度在30～32 ℃。

1.2.5 移栽煉苗期管理

插穗育苗30～40 d噴施少量葉面肥，50～60 d待腋芽萌生且根長(zhǎng)至3 cm以上時(shí)可以裝到12 cm（寬）×16 cm（高）的塑料營(yíng)養(yǎng)薄膜袋中，將袋裝苗成行排列于苗床中，用河沙填補(bǔ)袋裝苗底部縫隙。將裝袋的插穗苗繼續(xù)放在無(wú)色塑料薄膜拱棚內(nèi)生長(zhǎng)約1～2周，定期澆水保持拱棚內(nèi)濕度在85%以上，并視情況通風(fēng)降溫控制拱棚內(nèi)溫度在30～32 ℃，待插穗種苗長(zhǎng)高至20～25 cm時(shí)即可移到拱棚外煉苗，隨后移栽。

1.3 數(shù)據(jù)分析

在30～60 d每間隔3～5 d記錄愈傷形成時(shí)間、生根時(shí)間和新葉萌發(fā)時(shí)間，在苗床上扦插50～60 d以后統(tǒng)計(jì)各處理插條的生根數(shù)和根長(zhǎng)，統(tǒng)計(jì)平均生根率、生根數(shù)、根長(zhǎng)以及抽生新葉數(shù)，插穗裝袋移栽后統(tǒng)計(jì)移栽存活率并觀察植株長(zhǎng)勢(shì)。采用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類(lèi)及濃度對(duì)扦插生根的影響

由表1可知，不同種類(lèi)的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)苦丁茶冬青插穗的生根率有著較大的差異，采用NAA處理的平均生根率最高，為69.61%；IBA處理的平均生根率次之，為58.41%；ABT生根粉處理的平均生根率最低，為43.82%。隨著不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理濃度的提高，NAA、IBA和ABT生根粉3種處理的生根率均呈逐漸升高趨勢(shì)，且300 mg/L處理的生根率最高，分別為86.33%、66.37%和53.26%。不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理的苦丁茶冬青插穗的愈傷形成時(shí)間也有著較大的差異，采用NAA處理的平均愈傷形成時(shí)間最短，為42.50 d；IBA處理的平均愈傷形成時(shí)間次之，為50.00 d；ABT生根粉處理的平均愈傷形成時(shí)間最長(zhǎng)，為52.50 d。隨著不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理濃度的提高，NAA、IBA和ABT生根粉3種處理的愈傷形成時(shí)間均是隨著處理濃度的升高而呈逐漸下降趨勢(shì)。因此，對(duì)于苦丁茶冬青的扦插生根而言，以生根率和愈傷形成時(shí)間作為衡量指標(biāo)，NAA和IBA作為植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑均較適宜，而ABT生根粉則不適合。

由表2可知，采用不同種類(lèi)的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理的苦丁茶冬青插穗的生根情況有著較大的差異，在平均生根時(shí)間方面，采用NAA處理的平均生根時(shí)間最短，為51.25 d；IBA處理的平均生根時(shí)間次之，為58.75 d；ABT生根粉處理的平均生根時(shí)間最長(zhǎng)，為62.50 d。在平均生根數(shù)方面，采用NAA處理的平均生根數(shù)最多，為16.25條；ABT生根粉處理的平均生根數(shù)次之，為13.25條；IBA處理的平均生根數(shù)最少，為11.75條。在平均根長(zhǎng)方面，NAA處理的平均根長(zhǎng)最長(zhǎng)，為4.94 cm；ABT生根粉處理的平均根長(zhǎng)次之，為4.24 cm；IBA處理的平均根長(zhǎng)最少，為2.76 cm。因此，對(duì)于苦丁茶冬青的扦插生根而言，綜合考慮生根率、生根情況、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度以及愈傷形成時(shí)間和生根時(shí)間等多個(gè)因素，300 mg/L的NAA處理對(duì)苦丁茶冬青的扦插生根效果較好，適合作為植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑用于苦丁茶冬青種苗的扦插繁育。

2.2 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理時(shí)間對(duì)扦插生根的影響

由表3可知，NAA不同處理時(shí)間對(duì)苦丁茶冬青插穗的扦插生根影響不同，5種處理時(shí)間對(duì)插穗生根率的影響有著較大的差異，8.0 h處理的效果較好，生根率達(dá)到81.47%，而0.5、1.0、2.0和4.0 h處理的效果一般，生根率分別為38.17%、41.63%、43.58%和61.74%。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，8.0 h處理的愈傷形成時(shí)間和生根時(shí)間均最短，且生根數(shù)最多、根長(zhǎng)也最長(zhǎng)。因此，采用8.0 h處理對(duì)苦丁茶冬青扦插生根的效果較好，較長(zhǎng)時(shí)間的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理適合用于苦丁茶冬青種苗的扦插繁育。

2.3 營(yíng)養(yǎng)土種類(lèi)及配比處理對(duì)移栽存活的影響

由表4可知，不同營(yíng)養(yǎng)土配方與組合的處理對(duì)苦丁茶冬青插穗的裝袋移栽后存活效果不同，30%黃泥+30%河沙+30%椰糠+10%牛糞的處理效果較好，新葉萌發(fā)時(shí)間短，抽生新葉多，移栽存活率高，且移栽后的生活力也最強(qiáng)。100%黃泥和50%黃泥+50%河沙2種處理的效果次之，100%河沙、50%黃泥+50%椰糠和50%河沙+50%椰糠3種處理的效果則較差。因此，采用30%黃泥+30%河沙+30%椰糠+10%牛糞的營(yíng)養(yǎng)土配方與組合對(duì)苦丁茶冬青插穗裝袋移栽后的存活效果最好，該組合適合用于苦丁茶冬青種苗的扦插繁育。

3 討論與結(jié)論

針對(duì)苦丁茶的種苗繁育研究已較為廣泛，采用莖段離體培養(yǎng)可以快速繁殖種苗，但無(wú)法通過(guò)愈傷組織再分化出植株[6]；也可以采用液插法實(shí)現(xiàn)苦丁茶的快速繁殖，但由于液插法的插穗長(zhǎng)期浸泡在溶液中，供氧不足導(dǎo)致插穗發(fā)根較慢且根系生長(zhǎng)也較慢[7]。因此，后期研究多集中于采用常規(guī)插穗處理的方式繁育苦丁茶種苗，ABT1號(hào)生根粉對(duì)苦丁茶插穗生根有較好的促進(jìn)效果，但濃度過(guò)低或處理時(shí)間不夠，對(duì)苦丁茶插穗生根的促進(jìn)效果均不佳，處理濃度過(guò)高會(huì)使插穗受到藥害[8]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，用200 mg/L的ABT生根粉處理苦丁茶嫩枝插穗2 h，生根率最高可達(dá)50.6%[9]；采用500 mg/L的ABT1號(hào)生根粉蘸5 s后用營(yíng)養(yǎng)杯短穗扦插，連同營(yíng)養(yǎng)杯出圃后成活率可達(dá)98%以上[10]；在全光照噴霧扦插環(huán)境下，用ABT1號(hào)生根粉速蘸處理可使得生根率達(dá)33%～72%[11]。除此之外，采用吲哚丁酸（IBA）、萘乙酸（NAA）處理苦丁茶插穗近年來(lái)也有報(bào)道，但處理濃度相對(duì)生根粉而言較低[12～13]。

在植物的扦插繁殖中，樹(shù)齡對(duì)扦插生根率有著較大的影響[14～15]，作為大型喬木的苦丁茶冬青，其樹(shù)齡較大的枝條由于木質(zhì)化程度較高通常難以生根，生根效率較低且耗時(shí)較長(zhǎng)。本研究依據(jù)苦丁茶冬青的生長(zhǎng)特性，著重從植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和營(yíng)養(yǎng)土2個(gè)方面進(jìn)行控制，并與插穗制備、激素選擇、扦插環(huán)節(jié)、苗床管理等方面進(jìn)行工藝組合，提供了一種行之有效的扦插方法。本研究發(fā)現(xiàn)使用300 mg/L、pH 6.5的NAA處理8.0 h以上對(duì)苦丁茶冬青插穗的生根效果最佳，且移栽的營(yíng)養(yǎng)土宜采用黃泥、河沙、椰糠和牛糞并添加復(fù)合肥后混勻堆放熟化。整套扦插方法不僅操作簡(jiǎn)單，而且育苗周期短，生根率和移栽成活率高，獲得的種苗具有更強(qiáng)的生長(zhǎng)力，形成了一套行之有效的苦丁茶冬青種苗扦插繁育方法，為優(yōu)良苦丁茶冬青種苗在栽培生產(chǎn)上大面積推廣奠定基礎(chǔ)。

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