腸肝循環(huán)對家兔膽固醇排泄影響的研究

田衛(wèi)軍 俞生 趙玉文 姜元寶 龍成科 余小華

[摘要] 目的 通過建立腸肝循環(huán)模型及阻斷腸肝循環(huán)，研究家兔膽固醇腸肝循環(huán)的存在及其顯著性。 方法 本實(shí)驗(yàn)設(shè)置實(shí)驗(yàn)組與對照組，進(jìn)行高膽固醇飲食與普通飲食差異飼養(yǎng)，通過建立腸肝循環(huán)模型及阻斷腸肝循環(huán)，利用膽固醇氧化酶法分別測定實(shí)驗(yàn)組與對照組血清膽固醇濃度，通過6個月數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，研究膽固醇的腸肝循環(huán)現(xiàn)象。 結(jié)果 通過6個月數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，A、C兩組家兔血清膽固醇濃度逐步上升，C組家兔后兩個月高膽固醇血癥表現(xiàn)明顯，A組家兔血清膽固醇濃度上升幅度較C組弱，高膽固醇血癥表現(xiàn)不明顯，A組與C組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；D組家兔血清膽固醇濃度稍有上升，但上升幅度不明顯，B組血清膽固醇濃度上升幅度較D組明顯，B組與D組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。以每組家兔血清膽固醇濃度為縱坐標(biāo)，以時間為橫坐標(biāo)，繪制血清TC-時間線狀圖，C組較A組家兔血清膽固醇上升趨勢明顯，B組較D組家兔血清膽固醇上升趨勢明顯。 結(jié)論 家兔膽固醇腸肝循環(huán)現(xiàn)象存在，通過阻斷家兔腸肝循環(huán)，對降低家兔血清膽固醇含量具有一定作用，從而為進(jìn)一步研究阻斷腸肝循環(huán)降低人體膽固醇含量提供理論基礎(chǔ)，為臨床上通過阻斷膽固醇腸肝循環(huán)途徑治療高膽固醇血癥提供新思路，為藥品研發(fā)指引方向。

[關(guān)鍵詞] 高血脂；高膽固醇血癥；膽固醇；腸肝循環(huán)

[中圖分類號] R96 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-9701（2018）15-0034-03

Study on the effect of enterohepatic circulation on cholesterol excretion in rabbits

TIAN Weijun1 YU Sheng1 ZHAO Yuwen2 JIANG Yuanbao1 LONG Chengke1 YU Xiaohua3

1.Emergency Center， Shannan Peoples Hospital in Tibet Autonomous Region， Shannan 856000， China； 2.Huaibei Miner General Hospital Group， Huaibei 235000， China； 3.Department of Vasculocardiology， Shannan Peoples Hospital in Tibet Autonomous Region， Shannan 856000， China

[Abstract] Objective To study the existence and significance of cholesterol-intestinal hepatic circulation in rabbits by establishing a model of enterohepatic circulation and blocking enterohepatic circulation. Methods In this experiment， the experimental group and the control group were set up to conduct high-cholesterol diets and ordinary diets for differential feeding. By establishing a model of enterohepatic circulation and blocking enterohepatic circulation， cholesterol oxidase method was used to measure serum cholesterol concentration in the experimental group and the control group respectively. Based on the statistical analysis of the data for 6 months， the phenomenon of enterohepatic circulation of cholesterol was studied. Results Based on the data of 6 months， the serum cholesterol concentrations of rabbits in groups A and C were gradually increased. After two months， the hypercholesterolemia was significant in the rabbits in group C. The increase degree of serum cholesterol concentration in the rabbits in group A was weaker than that in group C. Hypercholesterolemia had no obvious effect. There was statistically significant difference between group A and group C （P<0.05）； serum cholesterol concentration in rabbits in group D was increased slightly， but the increase was not significant. The increase of serum cholesterol concentration in group B was more significant than that of group D. There was a statistically significant difference between group B and group D（P<0.05）. The serum TC-time line graph was plotted with the serum cholesterol concentration in each group as the ordinate and the time as the abscissa. Compared with group A， the serum cholesterol was increased significantly in group C. Compared with group D， the serum cholesterol in group B was increased significantly. Conclusion This experiment shows that the cholesterol enterohepatic circulation phenomenon exists in rabbits. By blocking the enterohepatic circulation in rabbits， it has a certain effect on lowering the content of serum cholesterol in rabbits. This will provide a theoretical basis for further studying the role of blocking enterohepatic circulation in reducing cholesterol levels in the body. It provides new ideas for the clinical treatment of hypercholesterolemia by blocking the cholesterol enterohepatic circulation in clinical practice and points a direction for drug development.

[Key words] Hyperlipidemia； Hypercholesterolemia； Cholesterol； Enterohepatic circulation

被分泌到膽汁內(nèi)的藥物及其代謝產(chǎn)物經(jīng)由膽道及膽總管進(jìn)入腸腔，經(jīng)膽汁排入腸腔的藥物部分可再經(jīng)小腸上皮細(xì)胞吸收經(jīng)肝臟進(jìn)入血液循環(huán)，這種肝臟、膽汁、小腸間的循環(huán)稱腸肝循環(huán)（enteroheptic cycle，ETC）。腸肝循環(huán)是體內(nèi)一種特殊生理現(xiàn)象，藥物ETC現(xiàn)象在臨床上具有不同的意義，藥物ETC的存在可使藥物出現(xiàn)雙峰或多峰現(xiàn)象，有助于提高藥物的生物利用度，內(nèi)源性物質(zhì)和毒性物質(zhì)ETC現(xiàn)象則使人體長時間蓄積而帶來危害。阻斷腸肝循環(huán)（interruption of enterohepatic circulation，IETC）就是阻斷具有ETC特性物質(zhì)在腸道內(nèi)的重吸收過程，使其ETC過程受到抑制，降低藥物在人體內(nèi)負(fù)荷的原理。

本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用家兔作為實(shí)驗(yàn)對象，通過建立腸肝循環(huán)模型及阻斷腸肝循環(huán)，研究膽固醇腸肝循環(huán)的存在及其顯著性，從而為臨床上通過阻斷膽固醇腸肝循環(huán)途徑治療高膽固醇血癥及藥品研發(fā)提供理論基礎(chǔ)和現(xiàn)實(shí)依據(jù)。

1 對象與方法

1.1 研究對象

2017年8月～2018年2月本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用家兔作為實(shí)驗(yàn)對象，設(shè)置實(shí)驗(yàn)組與對照組，通過建立腸肝循環(huán)模型及阻斷腸肝循環(huán)，利用膽固醇氧化酶法分別測定實(shí)驗(yàn)組與對照組血清膽固醇濃度，比較各組家兔血清膽固醇濃度隨時間變化情況，建立血清膽固醇濃度-時間曲線觀察各組家兔血清膽固醇濃度隨時間變化的增幅，研究膽固醇腸肝循環(huán)的存在及其顯著性。

1.2 方法

①雄性家兔40只，體重（2.0±0.2）kg，健康狀況良好，均等；分為A、B、C、D四組，每組10只。分別編號A1～10、B1～10、C1～10、D1～10，B、D兩組每日喂飼普通兔糧3次，A、C兩組在每日喂飼普通兔糧3次的基礎(chǔ)上，每只家兔添加20 g雞蛋黃。②分別做A、B兩組家兔近肝臟處的膽總管插管和近肝胰壺腹處的膽總管插管，近肝臟處的膽總管插管留置生物儲存囊儲存膽汁。③每次進(jìn)食后1 h取A、B兩組家兔近肝臟處的膽總管插管生物儲存囊儲存的膽汁，采用30 min勻速注入對方的近肝胰壺腹處的膽總管插管。④分別于實(shí)驗(yàn)前及實(shí)驗(yàn)后1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月，抽取A、B、C、D四組家兔靜脈血，測定膽固醇濃度，每組10只家兔血清膽固醇濃度作為記錄數(shù)據(jù)。追蹤實(shí)驗(yàn)6個月。

1.3觀察指標(biāo)

C組為A組對照組，D組為B組對照組。觀察對比各組家兔血清膽固醇濃度隨時間變化情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料以（x±s）表示，A組與C組、B組與D組分別配對t檢驗(yàn)；P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。并以每組血清膽固醇濃度為縱坐標(biāo)，以時間為橫坐標(biāo)，繪制血清TC-時間線狀圖，觀察對比各組家兔血清膽固醇濃度隨時間變化趨勢。

2 結(jié)果

2.1 A組與C組家兔血清膽固醇濃度隨時間變化比較

A、C兩組家兔血清膽固醇濃度逐步上升，C組家兔后2個月高膽固醇血癥表現(xiàn)明顯，A組家兔血清膽固醇濃度上升幅度較C組小，高膽固醇血癥表現(xiàn)不明顯。A組與C組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 B組與D組家兔血清膽固醇濃度隨時間變化比較

D組家兔血清膽固醇濃度稍有上升，上升幅度不明顯；B組血清膽固醇濃度上升幅度較D明顯。B組與D組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.3血清TC-時間線狀圖

以每組家兔血清膽固醇濃度為縱坐標(biāo)，以時間為橫坐標(biāo)，繪制血清TC-時間線狀圖。C組較A組家兔血清膽固醇上升趨勢明顯，B組較D組家兔血清膽固醇上升趨勢明顯（封三圖7）。

3討論

本實(shí)驗(yàn)為研究膽固醇腸肝循環(huán)的存在及其顯著性的實(shí)驗(yàn)，分為實(shí)驗(yàn)組與對照組，進(jìn)行高膽固醇飲食與普通飲食差異飼養(yǎng)，通過建立腸肝循環(huán)模型及阻斷腸肝循環(huán)，研究血清膽固醇濃度隨時間的變化。通過6個月數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，C組家兔血清膽固醇濃度逐步上升，后2個月高膽固醇血癥表現(xiàn)明顯，A組家兔血清膽固醇濃度逐步上升，但由于被阻斷腸肝循環(huán)，其血清膽固醇濃度上升幅度較C組小，高膽固醇血癥表現(xiàn)不明顯，A組與C組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；D組家兔血清膽固醇濃度稍有上升，上升幅度不明顯，B組家兔由于通過腸肝循環(huán)模型接受來自于A組家兔的膽汁，其血清膽固醇濃度上升幅度較D組明顯，B組與D組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。以每組家兔血清膽固醇濃度為縱坐標(biāo)，以時間為橫坐標(biāo)，繪制血清TC-時間線狀圖，C組較A組家兔血清膽固醇上升趨勢明顯，B組較D組家兔血清膽固醇上升趨勢明顯，表明家兔膽固醇腸肝循環(huán)現(xiàn)象存在，且具有一定的顯著性。通過阻斷家兔腸肝循環(huán)，對降低家兔血清膽固醇含量具有一定作用，從而為進(jìn)一步研究阻斷腸肝循環(huán)降低人體膽固醇含量提供理論基礎(chǔ)及指導(dǎo)。

高脂血癥是人體脂肪代謝異常的表現(xiàn)，是導(dǎo)致動脈粥樣硬化的主要因素，是引起心腦血管病主要原因之一。高血脂主要分為三類：高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥和混合性高脂血癥。膽固醇可轉(zhuǎn)化為膽汁酸經(jīng)腸道排出體外，未代謝的膽固醇留在血液中可能會堆積起來，特別是飽和脂肪酸的攝取量多時，因?yàn)轱柡椭舅釙p少接受器的數(shù)目，并且阻礙細(xì)胞吸收正常的膽固醇量，從而引起高膽固醇血癥。目前高膽固醇血癥尚無很好的治療方法，主要通過膳食治療、增加運(yùn)動以及辛伐他汀片等降脂藥物治療，且預(yù)后較差，尤其對于家族性高膽固醇血癥更無徹底治療方法。

膽固醇腸肝循環(huán)具有一定的顯著性，阻斷家兔腸肝循環(huán)，對降低家兔血清膽固醇含量具有一定作用，為臨床上通過阻斷膽固醇腸肝循環(huán)途徑降低體內(nèi)膽固醇含量提供新思路，為治療高膽固醇血癥開辟新途徑。膽固醇腸肝循環(huán)為肝臟、膽汁、小腸間的循環(huán)，若通過人為干預(yù)，阻斷小腸循環(huán)環(huán)節(jié)，使進(jìn)入小腸的膽固醇經(jīng)腸道排除體外，不再經(jīng)小腸上皮細(xì)胞吸收而是經(jīng)肝臟進(jìn)入血液循環(huán)，從而可降低人體膽固醇含量。可使用藥物阻斷小腸循環(huán)環(huán)節(jié)，使用對膽固醇具有結(jié)合作用或分解作用的藥物，藥物進(jìn)入小腸后，與腸道內(nèi)的膽固醇結(jié)合或者分解膽固醇為其他物質(zhì)，從而排出腸道。本實(shí)驗(yàn)為臨床上通過阻斷膽固醇腸肝循環(huán)途徑治療高膽固醇血癥提供理論基礎(chǔ)和新思路，為相關(guān)藥品研發(fā)指引方向。

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（收稿日期：2018-02-05）