甲基強(qiáng)的松龍對(duì)強(qiáng)直性脊柱炎患者外周血IL—23/IL—17及Th17/Treg的影響

孫曉濤 田惠 李軍霞 羅靜 張曉英 郭建瑞 高崇 李小峰

[摘要] 目的 探討甲基強(qiáng)的松龍（Methylprednisolone，MP）治療對(duì)強(qiáng)直性脊柱炎（Ankylosing spondylitis，AS）患者外周血單核細(xì)胞（Peripheral blood mononuclear cells，PBMCs）IL-23、IL-17基因表達(dá)及Th17、Treg細(xì)胞分布狀態(tài)的影響及意義。 方法 選取30例活動(dòng)期AS患者為實(shí)驗(yàn)組，予短期大劑量MP治療，治療方案為2.5～4 mg/kg，Qd，每個(gè)療程3～4 d，間隔3～4 d，2～3個(gè)療程；選取30例正常人作為對(duì)照組，予等體積生理鹽水，給藥時(shí)間、方式同前。RT-PCR檢測(cè)對(duì)照組及MP治療實(shí)驗(yàn)組前后PBMCs IL-23 P19 mRNA、IL-17A mRNA表達(dá)水平，F(xiàn)CM檢測(cè)PBMCs Th17、Treg細(xì)胞分布狀態(tài)，分析其與臨床癥狀、疾病活動(dòng)性指標(biāo)的相關(guān)性。 結(jié)果 1.實(shí)驗(yàn)組Th17細(xì)胞分布及IL-23、IL-17基因表達(dá)治療高于對(duì)照組，與BASDAI、夜間痛、血沉、CRP指標(biāo)之間呈正相關(guān)；實(shí)驗(yàn)組Treg細(xì)胞分布低于對(duì)照組，與上述指標(biāo)呈負(fù)相關(guān)。2.實(shí)驗(yàn)組Th17細(xì)胞分布、IL-23基因表達(dá)及IL-17基因表達(dá)之間互呈正相關(guān)，IL-23基因表達(dá)和Treg細(xì)胞分布呈負(fù)相關(guān)，Th17細(xì)胞分布和Treg細(xì)胞分布呈負(fù)相關(guān)；3.實(shí)驗(yàn)組經(jīng)MP治療后BASDAI、BASFI、夜間痛、血沉、CRP較治療前均下降，IL-23、IL-17基因表達(dá)及Th17細(xì)胞分布較治療前均下降，Treg細(xì)胞分布較治療前上升；以上差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論 IL-23/IL-17軸、Th17/Treg細(xì)胞失衡可能參與AS的發(fā)病及病情活動(dòng)，而MP可通過(guò)抑制促炎因子IL-23、IL-17分泌、糾正Th17/Treg失衡改善AS臨床癥狀并降低疾病活動(dòng)度。

[關(guān)鍵詞] 強(qiáng)直性脊柱炎；甲基強(qiáng)的松龍；IL-17；IL-23；Th17；Treg

[中圖分類號(hào)] R593.23 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2018）15-0029-05

Influence of methylprednisolone on IL-23/IL-17 and Th17/Treg of peripheral blood in patients with ankylosing spondylitis

SUN Xiaotao TIAN Hui LI Junxia LUO Jing ZHANG Xiaoying GUO Jianrui GAO Chong LI Xiaofeng

Department of Rheumatology， Second Hospital of Shanxi Medical University， Taiyuan 030000， China

[Abstract] Objective To investigate the influence and significance of methylprednisolone（MP） on the genetic expression and distribution of peripheral blood mononuclear cells（PBMCs） IL-23 and IL-17 as well as Th17 and Treg in patients with ankylosing spondylitis（AS）. Methods 30 patients in the active period of AS were selected as study group and treated with short-term and high-dose MP. The treatment regimen was 2.5-4 mg/kg， Qd， 3-4 d/course， 3-4 d interval and 2-3 courses. 30 healthy persons were selected as control group and given isometric normal saline by the same administration time and method.RT-PCR test was used to assess the expression of PBMCs IL-23 P19 mRNA and IL-17A mRNA， and FCM was used to assess the cell distributions of PBMCs Th17 and Treg in control group and study group before and after treatment. Associations of them with clinical symptoms and indicators of disease activity were analyzed. Results 1.Cell distribution of Th17 and genetic expression of IL-23 and IL-17 in study group were higher than those in control group， and positively associated with BASDAI， hypnalgia， erythrocyte sedimentation rate（ESR） and CRP.Cell distribution of Treg in study group was lower than that in control group， and negatively associated with indicators mentioned above. 2.In study group， cell distribution of Th17， genetic expression of IL-23 and genetic expression of IL-17 were positively associated with each other， and the genetic expression of IL-23 and the cell distribution of Th17 were negatively associated with the cell distribution of Treg respectively. 3.In study group， BASDAI， BASFI，hypnalgia，ESR and CRP after treatment were lower than those before treatment while cell distribution of Treg after treatment was higher than that before treatment. All the differences above were statistically significant.Conclusion The axis of IL-23/IL-17 and the unbalance of Th17/Treg could be involved in the attack and disease activity of AS.MP could improve the clinical symptoms of AS and reduce the disease activity by inhibiting the secretion of proinflammatory factors IL-23 and IL-17， and correcting the unbalance of Th17/Treg.

[Key words] Ankylosing spondylitis； Methylprednisolone； IL-17； IL-23； Th17； Treg

強(qiáng)直性脊柱炎是一種常見(jiàn)的炎性風(fēng)濕系統(tǒng)疾病，主要累及中軸關(guān)節(jié)如脊柱和骶髂關(guān)節(jié)，可引起典型炎性腰背痛，導(dǎo)致患者關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)和功能障礙使患者的生活質(zhì)量嚴(yán)重下降。但是與風(fēng)濕系統(tǒng)其他疾病如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎不同，用于治療強(qiáng)直性脊柱炎的藥物較少，根據(jù)ASAS/EULAR關(guān)于強(qiáng)直性脊柱炎的管理建議，通常僅予非甾體抗炎藥物（Non-steroidal anti-inflammatory drugs，NSAID）緩解疼痛，療效欠佳時(shí)加用腫瘤壞死因子α拮抗劑（Anti-TNFα），而針對(duì)強(qiáng)直性脊柱炎的外周表現(xiàn)，在上述用藥基礎(chǔ)上同時(shí)予緩解病情的抗風(fēng)濕性藥物（disease modifying anti-rheumatic drug，DMARD）及糖皮質(zhì)激素[1]。至今為止，研究發(fā)現(xiàn)有30%～40%的患者接受上述治療方案后仍處于疾病活動(dòng)期[2-3]，因此，尋找新的治療策略成為當(dāng)前治療AS急需解決的問(wèn)題。目前，在自身免疫性疾病方面，Th17細(xì)胞和Treg細(xì)胞之間的平衡為發(fā)病機(jī)制作出新的解釋[4]，且大劑量糖皮質(zhì)激素對(duì)于治療活動(dòng)性AS患者的有效性已經(jīng)得到證實(shí)[5]。本實(shí)驗(yàn)旨在探討MP治療對(duì)與活動(dòng)性AS患者PBMCs IL-23、IL-17基因表達(dá)水平及Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞分布狀態(tài)的影響及意義，嘗試為MP用于今后AS的治療尋找理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合Vander Linden等在家族和人群調(diào)查的基礎(chǔ)上于1984年提出修改的紐約標(biāo)準(zhǔn)（MNY標(biāo)準(zhǔn)）[6]，年齡18～60歲，強(qiáng)直性脊柱炎疾病活動(dòng)指數(shù)（Bath Ankylosing Spondylitis Disease Activity In-ex，BASDAI）≥4 分[7]。排除標(biāo)準(zhǔn)[8]：除外有心肌梗死病史、腦梗死病史、不受控制的動(dòng)脈高血壓病史、糖尿病病史、腎臟病史或肝臟病史、明確糜爛或胃腸道潰瘍性病史、出血史、支氣管哮喘病史或其他慢性疾病加重期，病毒性肝炎，艾滋病毒感染，腫瘤或血液系統(tǒng)疾病、孕婦。30例實(shí)驗(yàn)組患者均于2014年8月～2015年1月就診于我科明確診斷為AS，其中男21例，女9例，年齡18～54歲，平均（35±12）歲。對(duì)照組為相匹配30例正常人，男18例，女12例，年齡23～56歲，平均（32±10）歲。參與該實(shí)驗(yàn)的每位受試者均簽署激素使用知情同意書，且本研究已取得倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，嚴(yán)格按照臨床試驗(yàn)規(guī)范進(jìn)行。

1.2 方法

1.2.1 干預(yù)措施 實(shí)驗(yàn)組予短期大劑量注射用甲潑尼龍琥珀酸鈉注射液（規(guī)格40 mg，Pfizer Manufacturing Belgium NV，國(guó)藥準(zhǔn)字H20130301）靜脈滴注治療，方案2.5～4 mg/kg，1次/d，每個(gè)療程3～4 d，間隔3～4 d，2～3個(gè)療程，同時(shí)予胃黏膜保護(hù)劑。對(duì)照組予等體積生理鹽水，給藥時(shí)間、方式同前。

1.2.2 填寫AS病例調(diào)查表以及BASDAI、BASFI表格 所有AS患者均在醫(yī)生指導(dǎo)下填寫AS病例調(diào)查表及BASDAI、BASFI表格，采用BASDAI、脊柱痛VAS評(píng)估患者的臨床癥狀及體征，采用BASFI、夜間痛VAS評(píng)估患者軀體功能，采用枕墻距、指地距、胸廓活動(dòng)度、Schober試驗(yàn)評(píng)估患者骨骼及肌肉活動(dòng)度，監(jiān)測(cè)ESR、CRP、肝腎功。

1.2.3 測(cè)定PBMCs IL-17、IL-23基因表達(dá)水平、Th17、Treg細(xì)胞分布狀態(tài)

1.2.3.1 分離PBMCs 安靜狀態(tài)下取靜脈血8 mL，分別置于2支肝素鋰抗凝管中，采用Ficoll密度梯度分離法分離PBMCs。

1.2.3.2 熒光定量PCR（real-time PCR）測(cè)定IL-23、IL-17基因表達(dá) ①總RNA抽提與定量：收集提純后的PBMCs 1×106個(gè)/mL，按試劑盒說(shuō)明書（TaKaRa）步驟抽提總RNA，紫外分光光度計(jì)測(cè)定RNA含量。②反轉(zhuǎn)錄-PCR：按試劑盒說(shuō)明，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。③擴(kuò)增引物設(shè)計(jì)：以 GAPDH作為內(nèi)參基因，檢索NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)獲得目的基因IL-23p19、IL-17A的全長(zhǎng)序列，Oligo6設(shè)計(jì)相應(yīng)引物，引物均由上海生工生物有限公司合成。見(jiàn)表1。④RT-PCR：采用SYBRR Premix EX TaqTM Ⅱ（Tli RNaseH Plus）（TaKaRa），使用PRISM 7300型熒光定量PCR儀器（ABI，美國(guó)）檢測(cè)，CT值是PCR儀檢測(cè)到反應(yīng)體系中熒光信號(hào)的強(qiáng)度值，ΔCT實(shí)驗(yàn)組=（CT，目的基因-CT，管家基因）實(shí)驗(yàn)組，ΔCT對(duì)照組=（CT，目的基因-CT，管家基因）對(duì)照組，ΔΔCT=ΔCT實(shí)驗(yàn)組-ΔCT對(duì)照組，2-ΔΔCt即為兩組的差異。

1.2.3.3流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定Th17細(xì)胞 ①細(xì)胞培養(yǎng)：收集提純后的PBMCs，以每孔1×106個(gè)/mL細(xì)胞種于48孔板中，加入PMA（2 μL），Iono（10 μL）刺激，放入37℃無(wú)菌細(xì)胞培養(yǎng)箱中，1 h后向細(xì)胞懸液中加1 μL高爾基阻斷劑，孵育4～6 h后收集細(xì)胞。②細(xì)胞標(biāo)記：以CD4-FITC設(shè)門，固定，破膜，應(yīng)用IL-17A PE（5 μL）標(biāo)記Th17細(xì)胞。③流式細(xì)胞儀檢測(cè)：采用FACSCalibur流式細(xì)胞儀（Becton Dickinson公司，美國(guó)）檢測(cè)Th17細(xì)胞百分率，以Cell Quest軟件獲取、分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

1.2.3.4 流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定Treg細(xì)胞 ①細(xì)胞標(biāo)記：以CD4-FITC設(shè)門，固定，破膜，用CD25 APC（5 μL）、FOXP3 PE（5 μL）標(biāo)記Treg細(xì)胞。②流式細(xì)胞儀檢測(cè)：所用流式細(xì)胞儀及分析軟件同Th17。具體操作參照試劑說(shuō)明書步驟。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述，計(jì)數(shù)資料以率描述，所有數(shù)據(jù)均進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布者組間比較采用t檢驗(yàn)，否則采用秩和檢驗(yàn)。相關(guān)性采用Spearman秩相關(guān)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)組治療前與對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組接受MP治療前后IL-17、IL-23基因表達(dá)水平及Th17、Treg細(xì)胞分布狀態(tài)比較

實(shí)驗(yàn)組治療前與對(duì)照組相比，IL-17、IL-23基因表達(dá)及Th17細(xì)胞分布明顯升高，Treg細(xì)胞分布明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；實(shí)驗(yàn)組接受MP治療后與治療前相比IL-23基因表達(dá)、IL-17基因表達(dá)、Th17細(xì)胞分布較治療前下降，Treg細(xì)胞分布較治療前升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)封三圖3～6、表2。

2.2 實(shí)驗(yàn)組IL-17、IL-23基因表達(dá)水平及Th17、Treg細(xì)胞分布與各臨床指標(biāo)的相關(guān)性分析

實(shí)驗(yàn)組IL-17基因表達(dá)與所評(píng)估指標(biāo)呈正相關(guān)，IL-23基因表達(dá)除與BASFI評(píng)分無(wú)顯著相關(guān)性外，與其余指標(biāo)呈正相關(guān)；實(shí)驗(yàn)組Th17細(xì)胞分布與所評(píng)估指標(biāo)呈正相關(guān)，實(shí)驗(yàn)組Treg細(xì)胞分布除與BASFI評(píng)分無(wú)顯著相關(guān)性外，與其余指標(biāo)呈負(fù)相關(guān)。見(jiàn)表3。

2.3 實(shí)驗(yàn)組PBMCs IL-23、IL-17基因表達(dá)水平與Th17、Treg分布狀態(tài)的相關(guān)性分析

實(shí)驗(yàn)組IL-23基因表達(dá)、IL-17基因表達(dá)、Th17細(xì)胞分布之間互呈正相關(guān)，IL-23基因表達(dá)、Th17細(xì)胞分布與Treg細(xì)胞分布呈負(fù)相關(guān)，而IL-17基因表達(dá)與Treg細(xì)胞分布之間無(wú)明顯相關(guān)性。見(jiàn)表4。

2.4 實(shí)驗(yàn)組MP治療前后臨床指標(biāo)變化

MP治療前后對(duì)實(shí)驗(yàn)組所有患者脊柱痛、夜間痛、BASDAI評(píng)分、BASFI評(píng)分、胸廓活動(dòng)度、枕墻距、指地距、Schober試驗(yàn)進(jìn)行評(píng)估記錄，統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)接受治療后以上指標(biāo)均有所改善（P<0.05）。見(jiàn)表5。

2.5不良反應(yīng)

經(jīng)MP治療后實(shí)驗(yàn)組患者出現(xiàn)2例血壓升高，1例輕度肝功能異常，2例上呼吸道感染，2例血糖升高，3例睡眠障礙。經(jīng)對(duì)癥處理后，所有癥狀均好轉(zhuǎn)。給藥前后動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)血、尿常規(guī)及腎功能，均未見(jiàn)明顯異常，無(wú)嚴(yán)重不良事件發(fā)生。1年后對(duì)患者進(jìn)行電話隨訪，結(jié)果如下：2例患者失訪，2例患者癥狀反復(fù)，余患者均規(guī)律復(fù)診，無(wú)炎性下腰痛、足跟痛等AS相關(guān)臨床癥狀，復(fù)查血常規(guī)、血沉、肝腎功能均未見(jiàn)明顯異常，無(wú)骨質(zhì)疏松、心血管疾病及嚴(yán)重不良事件發(fā)生。

3 討論

針對(duì)實(shí)驗(yàn)組疾病復(fù)發(fā)的問(wèn)題，臨床上仍采用免疫抑制劑、生物制劑及非甾體藥物的治療方案，院外建議患者長(zhǎng)期鍛煉、定期復(fù)診，同時(shí)在隨診階段，根據(jù)患者病情調(diào)整口服藥物劑量。分析2例患者臨床癥狀反復(fù)發(fā)作的原因，可能與其自行停服藥物相關(guān)。關(guān)于AS患者遠(yuǎn)期療效及MP治療的副作用仍需長(zhǎng)期隨訪觀察。

AS是脊柱關(guān)節(jié)?。⊿PA）中最常見(jiàn)的亞型，是一種主要累及中軸關(guān)節(jié)的慢性炎癥性疾病。既往隊(duì)列研究顯示，國(guó)內(nèi)AS患病率為0.3%，發(fā)病年齡為（29.2±11.4）歲，男女比例為2.7：1[9]。該病以炎性腰背痛、不對(duì)稱的外周關(guān)節(jié)炎和附著點(diǎn)炎為主要特征。最常見(jiàn)的關(guān)節(jié)外表現(xiàn)是葡萄膜炎、牛皮癬、炎癥性腸病。該病可導(dǎo)致腰背及四肢多關(guān)節(jié)疼痛、僵硬以及終末期的關(guān)節(jié)融合，致殘率極高，給患者、家庭及社會(huì)帶來(lái)了沉重的精神和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[10，11]。

既往大部分學(xué)者認(rèn)為Th1和Th2在自身免疫性疾病中具有不可替代的炎癥效應(yīng)，然而，自1995年發(fā)現(xiàn)IL-17以來(lái)，越來(lái)越多的焦點(diǎn)關(guān)注在IL-17/IL-23軸和Th17和Treg細(xì)胞的平衡[4]。Th17細(xì)胞是一類可以分泌多種特異性細(xì)胞因子（如IL-17、IL-17F、IL-21和IL-22）的T細(xì)胞亞型，上述細(xì)胞因子均參與介導(dǎo)炎癥反應(yīng)。研究證明，在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、系統(tǒng)性硬化癥、銀屑病和炎性腸病等各種自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制中，IL-17均起到關(guān)鍵作用[12-13]。

IL-17不僅可以與IL-6和IL-1協(xié)同促進(jìn)Th17細(xì)胞的分化，且能促進(jìn)Th17細(xì)胞分泌炎性細(xì)胞因子[14]。Treg細(xì)胞也是T細(xì)胞的亞型之一，以高表達(dá)IL-2受體α鏈（CD25）和Foxp3轉(zhuǎn)錄因子為特征。目前對(duì)Treg細(xì)胞的作用尚不明確，但越來(lái)越多的證據(jù)表明Foxp3 + Treg細(xì)胞可以通過(guò)直接或間接的途徑抑制免疫應(yīng)答[15]。Th17細(xì)胞與Treg細(xì)胞之間存在相關(guān)性，如TGF-β的刺激可同時(shí)誘導(dǎo)兩者的分化，但與IL-6或IL-21結(jié)合后，則起到抑制Treg細(xì)胞的效果[16]。分子水平上，F(xiàn)oxp3與RORγt和RORα物理結(jié)合相互拮抗可能是Th17細(xì)胞與Treg細(xì)胞之間相互作用的基礎(chǔ)[17]。此外，HIF1α可以結(jié)合并增強(qiáng)RORγt的表達(dá)促進(jìn)Th17細(xì)胞的分化，同時(shí)又可以通過(guò)抑制Foxp3的表達(dá)進(jìn)而減少Treg細(xì)胞的分化[18]。生理情況下，兩種T細(xì)胞亞型之間的平衡維持了免疫系統(tǒng)的穩(wěn)定，但兩者關(guān)系的破壞會(huì)導(dǎo)致一系列自身免疫性疾病[19]。Th17細(xì)胞是高表達(dá)IL-17的CD4+T細(xì)胞亞群之一，IL-23可以刺激其擴(kuò)增并維持其活性，在抗原刺激的作用下，IL-23表達(dá)增加，進(jìn)而促進(jìn)Th17細(xì)胞分化，誘發(fā)自身免疫性疾病[20]。Th17分化受Th1、Th2調(diào)控，在AS中存在Th1、Th2平衡偏移狀況。Treg細(xì)胞是具有免疫耐受作用的CD4+T細(xì)胞，可通過(guò)下調(diào)IL-23、IL-17表達(dá)水平或通過(guò)其特異轉(zhuǎn)錄因子Foxp3來(lái)抑制Th17細(xì)胞分化[21]，其數(shù)量及功能異常可導(dǎo)致自身免疫性疾病發(fā)生[22]。不可否認(rèn)，越來(lái)越多的證據(jù)表明IL-17/IL-23軸，Th17和Treg細(xì)胞的平衡參與了強(qiáng)直性脊柱炎的發(fā)病[23]。

本研究顯示，AS PBMCs IL-23、IL-17基因的表達(dá)、Th17細(xì)胞分化較正常人升高，而Treg細(xì)胞活性低于正常人，與之前的研究結(jié)果一致[24]，說(shuō)明其在AS的發(fā)病機(jī)制中起了重要的作用。AS尚無(wú)明確的疾病緩解標(biāo)準(zhǔn)，缺乏有效治療方案，目前常用的有非甾體類抗炎藥、柳氮磺吡啶腸溶片、糖皮質(zhì)激素（Glucocorticoid GC）、生物制劑等。在20世紀(jì)80年代后期，低劑量的糖皮質(zhì)激素首次用于非甾體類抗炎藥物治療效果不佳的患者。迄今為止，糖皮質(zhì)激素對(duì)自身免疫性疾病的治療效果已經(jīng)被大量研究所證實(shí)[25]，但由于其副作用和長(zhǎng)期使用存在的藥物毒性，多數(shù)患者仍然拒絕激素的治療方案。Rumiantseva等[26]給予患者短期大劑量糖皮質(zhì)激素治療，均可以觀察到迅速的疾病緩解，41%的患者可以持續(xù)3個(gè)月，其中9%的患者臨床指標(biāo)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，因此得出短期大劑量糖皮質(zhì)激素對(duì)于多數(shù)活動(dòng)性AS患者療效顯著且具有良好的耐受性的結(jié)論，與Richter等[27]的結(jié)論一致，其認(rèn)為MP不僅具有迅速緩解炎癥的作用，還有持續(xù)的免疫效應(yīng)。Haibel等[5]在AS患者口服強(qiáng)的松治療的隨機(jī)雙盲對(duì)照臨床研究中，結(jié)果顯示高劑量組（50 mg/d）及低劑量組（20 mg/d）BASDAI評(píng)分較安慰劑組均有所改善，且高劑量組（50 mg/d）改善程度優(yōu)于低劑量組。

甲基強(qiáng)的松龍是糖皮質(zhì)激素的一種，因其起效快、作用持久且副作用偏小，被廣泛應(yīng)用于治療大多數(shù)炎性風(fēng)濕系統(tǒng)疾病上，療效顯著[28]。且目前已有研究表明，大劑量的MP靜脈注射可以通過(guò)增加活動(dòng)期SLE患者Treg細(xì)胞的數(shù)量來(lái)阻止疾病的進(jìn)展[29]。近10年，對(duì)AS治療的相關(guān)基礎(chǔ)研究表明：MP對(duì)于AS患者療效確切，可明顯改善AS患者臨床癥狀、體征、炎性指標(biāo)，靜脈大劑量治療時(shí)臨床指標(biāo)改善程度明顯優(yōu)于小劑量口服激素，且安全性較好，在難治性AS患者尤為明顯。我們前期研究同時(shí)證明MP可通過(guò)抑制促炎因子 IFN-γ、TNF-α等的分泌，調(diào)節(jié)Thl、Th2細(xì)胞失衡狀態(tài)從而發(fā)揮療效，并能顯著緩解AS的眼部受累癥狀，與既往研究結(jié)論一致[30]。

綜上，在AS發(fā)病機(jī)制中，IL-23、IL-17基因表達(dá)的改變、Th17/Treg失衡可能參與其發(fā)病，MP可通過(guò)抑制IL-17、IL-23基因表達(dá)，改變Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞數(shù)量進(jìn)而影響Th17/Treg平衡，可能是MP治療AS相關(guān)機(jī)制之一，為AS治療提供了新思路。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Braun J，Van DBR，Baraliakos X，et al. 2010 update of the ASAS/EULAR recommendations for the management of ankylosing spondylitis[J]. Annals of the Rheumatic Diseases，2011，70（6）：896-904.

[2] Davis JC，Hejded MVD，Barun J，et al. Efficacy and safety of up to 192 weeks of etanercept therapy in patients with ankylosing spondylitis[J]. Annals of the Rheu-matic Diseases，2008，67（3）：346-352.

[3] Heijded VD，Schiff MH，Sieper J，et al. Adalimumab effectiveness for the treatment of ankylosing spondylitis is maintained for up to 2 years：long-term results from the ATLAS trial[J]. Annals of the Rheumatic Diseases，2009，68（6）：922.

[4] Miossec P，Korn T，Kuchroo VK. Interleukin-17 and Type 17 Helper T Cells-NEJM[J]. New England Journal of Medicine，2009，361（9）：888.

[5] Haibel H，F(xiàn)endler C，Listing J，et al. Efficacy of oral prednisolone in active ankylosing spondylitis：results of a double-blind，randomised，placebo-controlled short-term trial[J]. Annals of the Rheumatic Diseases，2014，73（1）：243-246.

[6] Linden SVD，Valkenburg HA，Cats A. Evaluation of diagnostic criteria for ankylosing spondylitis. A proposal for modification of the New York criteria[J]. Arthritis & Rheumatology，1984，27（4）：361-368.

[7] Garrett S，Jenkinson T，Kennedy LG，et al. A new approach to defining disease status in ankylosing spondylitis：the Bath Ankylosing Spondylitis Disease Activity Index[J]. Journal of Rheumatology，1994，21（12）：2286.

[8] Gaydukova IZ，Rebrov AP，Poddubnyi DA. [Efficacy and safety of intravenous methylprednisolone in the treatment of patients with active ankylosing spondylitis：results of a 12-week，prospective，open-label，pilot（METALL） study][J].Ter Arkh，2015，87（5）：47-52.

[9] Qian Q，Xu X，He H，et al. Clinical patterns and characteristics of ankylosing spondylitis in China[J]. Clinical Rheumatology，2017，36（7）：1561.

[10] Kotsis K，Voulgari PV，Drososa A，et al. Health-related quality of life in patients with ankylosing spondylitis：a comprehensive review[J].Expert Review of Pharmacoeconomics & Outcomes Research，2014，14（6）：857-872.

[11] Machado MA，F(xiàn)effe F，Moura CS，et al. Costs of Drug Therapy in Patients with Ankylosing Spondylitis in Brazil[J].Rheumatology & Therapy，2016，3（2）：353-361.

[12] Human interleukin-17：A T cell-derived proinflammatory cytokine produced by the rheumatoid synovium（p963-970）[J]. Arthritis & Rheumatism，2010，42（5）：963-970.

[13] Wang X，Wang G，Gong Y，et al. Disruption of Circulating CD4+T-Lymphocyte Subpopulations in Psoriasis Patients is Ameliorated by Narrow-Band UVB Therapy[J].Cell Biochemistry & Biophysics，2015，71（1）：499.

[14] Valdez P，Ooyang W. The Roles of IL-22 and Its Related Family Members in the Pathogenesis of Psoriasis[M/Valdez2011].//JIANG S. TH17 Cells in Health and Disease. City：Springer New York，2011：445-462.

[15] Kim YM. Regulatory T Cells in the Human Immune System[J].Korean Journal of Otorhinolaryngology-Head and Neck Surgery， 2010， 53（12）： 737.

[16] Korn T，Bettelli E，Oukka M，et al. IL-17 and Th17 Cells[J].Annual Review of Immunology，2009，27（1）：485-517.

[17] Mercer F，Unutmaz D. The biology of FoxP3：a key player in immune suppression during infections，autoimmune diseases and cancer[J]. Adv Exp Med Biol，2009，665：47-59.

[18] Tsun A，Chen Z，Li B. Romance of the three kingdoms： RORgammat allies with HIF1alpha against FoxP3 in regulating T cell metabolism and differentiation[J]. Protein & Cell，2011，2（10）： 778-781.

[19] Cantrell D. T cell metabolism and differentiation[J]. Immunology，2014，143（44）： 17-17

[20] Mease PJ. Inhibition of interleukin-17，interleukin-23 and the TH17 cell pathway in the treatment of psoriatic arthritis and psoriasis[J]. Current Opinion in Rheumatology，2015，27（2）：127.

[21] Josefowicz SZ，Lu LF，Rudensky AY. Regulatory T Cells：Mechanisms of Differentiation and Function[J]. Annual Review of Immunology，2012，30（1）：531.

[22] Miyara M，Gorochov G，Ehrenstein M，et al. Human FoxP3+ regulatory T cells in systemic autoimmune diseases[J]. Autoimmunity Reviews，2011，10（12）：744-755.

[23] Wang C，Liao Q，Yihe HU，et al. T lymphocyte subset imbalances in patients contribute to ankylosing spondylitis[J]. Experimental & Therapeutic Medicine，2015，9（1）：250-256.

[24] Fan B，Li X，Kan Z，et al. Expression of T-helper 17 cells and signal transducers in patients with psoriasis vulgaris of blood-heat syndrome and blood-stasis syndrome[J]. Chinese Journal of Integrative Medicine，2015， 21（1）：10-16.

[25] Regel A，Sepriano A，Baraliakos X，et al. Efficacy and safety of non-pharmacological and non-biological pharmacological treatment： a systematic literature review informing the 2016 update of the ASAS/EULAR recommendations for the management of axial spondyloarthritis[J].Rmd Open，2017，3（1）：e000397.

[26] Rumiantseva O，Bochkova A，Liginova E，et al. Intravenous high dose glucocorticoids in patients with ankylosing spondylitis[J]. Терапевтичесκийархив，2006，78（12）：71-75.

[27] Richter MB，Woo P，Panayi GS，et al. The effects of intravenous pulse methylprednisolone on immunological and inflammatory processes in ankylosing spondylitis[J]. Clinical & Experimental Immunology，1983，53（1）：51-59.

[28] Fendler C，Baraliakos X，Braun J. Glucocorticoid treatment in spondyloarthritis[J]. Clinical & Experimental Rh-eumatology，2011，29（5 Suppl 68）： S139.

[29] Mathian A，Jouenne R，Chader D，et al. Regulatory T Cell Responses to High-Dose Methylprednisolone in Active Systemic Lupus Erythematosus[J]. Plos One，2015，10（12）： e0143689

[30] Hedayatfar A，Hashemi H，Asgari S，et al. Comparison of efficacy and ocular surface toxicity of topical preservative-free methylprednisolone and preserved prednisolone in the treatment of acute anterior uveitis[J]. Cornea，2014， 33（4）：366-372.

（收稿日期：2018-01-16）