間日瘧原蟲感染導(dǎo)致儀器法血常規(guī)散點(diǎn)圖異常1例臨床分析

劉玲玲,魏麗晶,劉 娟,陳顯秋

(吉林大學(xué)第一醫(yī)院 檢驗(yàn)科，吉林 長春130021)

1 病例資料

中年男性，急性起病。以“發(fā)熱、頭痛”為主要臨床表現(xiàn)。入院檢查：血常規(guī)：白細(xì)胞2.28×109/L，中性粒細(xì)胞百分比0.86，血小板38×109/L，C-反應(yīng)蛋白66.87 mg/L；尿常規(guī)：尿蛋白2+，尿潛血±，尿亞硝酸鹽 陽性。有瘧疾流行區(qū)居住史，2011、2017年曾患有瘧疾。

輔助檢查：血常規(guī)：白細(xì)胞2.28×109/L，中性粒細(xì)胞百分比0.86，淋巴細(xì)胞百分比0.10，嗜酸性粒細(xì)胞百分比0.00，紅細(xì)胞3.90×1012/L，血紅蛋白114 g/L，紅細(xì)胞比容0.326 L/L，血小板40×109/L，血常規(guī)出現(xiàn)儀器報(bào)警：Q-flag報(bào)警寄生蟲感染紅細(xì)胞；IG%為6%；WDF通道和WNR通道白細(xì)胞結(jié)果嚴(yán)重不一致，白細(xì)胞計(jì)數(shù)WDF通道為6.84×109/L，WNR通道為2.28×109/L。血瘧原蟲鏡下檢查：見間日瘧原蟲滋養(yǎng)體期、配子體期和裂殖體期，紅細(xì)胞感染率1.4%。

鏡下分類200個白細(xì)胞，未發(fā)現(xiàn)幼稚粒細(xì)胞，中性粒細(xì)胞百分比0.45，淋巴細(xì)胞百分比0.09，嗜酸性粒細(xì)胞百分比0.00，鏡下見瘧原蟲感染紅細(xì)胞120個/100個白細(xì)胞。

圖1 正常白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖(正面) 圖2 瘧原蟲感染散點(diǎn)圖(正面) 圖3 正常白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖(側(cè)面)

2 討論

間日瘧原蟲是一類以蚊蟲傳播為媒介，危害人體的寄生蟲。人被感染后罹患瘧疾。瘧原蟲多分布在非洲及其他熱帶和亞熱帶地區(qū)，我國東北地區(qū)少見。近年隨著人口流動性大，我國東北地區(qū)的瘧疾發(fā)病率呈上升趨勢，以輸入性傳播為主，如何快速、準(zhǔn)確的篩查、鑒別間日瘧原蟲，是對我地區(qū)檢驗(yàn)人員的挑戰(zhàn)。

間日瘧原蟲生活史分3期，只有紅細(xì)胞內(nèi)期發(fā)生在紅細(xì)胞內(nèi)，能在外周血中被發(fā)現(xiàn)。紅細(xì)胞內(nèi)期瘧原蟲從滋養(yǎng)體、裂殖體到配子體的生長過程中,被寄生的紅細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA含量逐漸增加，感染的紅細(xì)胞體積也在變化。目前，所有的血細(xì)胞分析儀均不能準(zhǔn)確檢測出瘧原蟲，但可以根據(jù)其提供的異常報(bào)警信息，對血液樣本進(jìn)行進(jìn)一步的血涂片鏡檢，以確定是否瘧原蟲感染。眾所周知，SYSMEX XN-9000

圖4 瘧原蟲感染散點(diǎn)圖(側(cè)面) 圖5 WNR通道散點(diǎn)圖 圖6 不同時期間日瘧原蟲鏡下形態(tài)

系列血細(xì)胞分析儀可以提供數(shù)十種報(bào)警信息及檢測參數(shù)，選擇哪些參數(shù)及信息作為提示瘧原蟲感染的有效篩選指標(biāo)就變得尤為重要。有報(bào)道，WDF通道中嗜酸性粒細(xì)胞區(qū)域的異常散點(diǎn)圖能快速、簡便地篩查瘧原蟲[1，2]。曾素根等報(bào)道顯示網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測通道(RET)的異常散點(diǎn)圖可提示瘧原蟲感染[3]。

SYSMEX XN9000血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)是以流式細(xì)胞技術(shù)為基本原理，用散射光信息(前向散射光FSC、側(cè)向散射光SSC)和核酸熒光信息(側(cè)向熒光SFL)對待檢細(xì)胞進(jìn)行分析，實(shí)現(xiàn)對白細(xì)胞的計(jì)數(shù)和分類。前向散射光(FSC)反映細(xì)胞的大小，側(cè)向散射光(SSC)反映細(xì)胞內(nèi)容物的復(fù)雜程度，側(cè)向熒光(SFL)反映細(xì)胞內(nèi)核酸含量。正常白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖(正面、側(cè)面)見圖1和圖3。

WDF通道用于白細(xì)胞白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，正常紅細(xì)胞經(jīng)WDF通道溶血劑作用后，細(xì)胞膜被破壞，細(xì)胞內(nèi)Hb溶解，不會影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)。由于WDF通道溶血劑作用比較弱，瘧原蟲感染的紅細(xì)胞不會被溶血劑破壞。不同感染階段的紅細(xì)胞對WDF白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖的干擾也不同，瘧原蟲小滋養(yǎng)體期感染紅細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)容物的復(fù)雜程度和細(xì)胞體積小于中性粒細(xì)胞，核酸含量與中性粒細(xì)胞類似，但其細(xì)胞內(nèi)容物的復(fù)雜程度和核酸含量弱于嗜酸性粒細(xì)胞，這一部分感染的紅細(xì)胞在WDF散點(diǎn)圖上會出現(xiàn)在中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞之間的區(qū)域，見圖2(A)；瘧原蟲大滋養(yǎng)體期和配子體期感染紅細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)容物的復(fù)雜程度和核酸含量與中性粒細(xì)胞類似，但體積略小于中性粒細(xì)胞，這一部分感染的紅細(xì)胞在WDF散點(diǎn)圖上會出現(xiàn)在中性粒細(xì)胞的內(nèi)側(cè)，見圖4(A)；而瘧原蟲裂殖體感染紅細(xì)胞其細(xì)胞內(nèi)容物的復(fù)雜程度與中性粒細(xì)胞類似，熒光強(qiáng)度強(qiáng)于中性粒細(xì)胞，這一部分感染的紅細(xì)胞在WDF散點(diǎn)圖上會出現(xiàn)在中性粒細(xì)胞的右上方，即幼稚粒細(xì)胞區(qū)域，見圖2(B)，圖4(B)。

WNR通道用于白細(xì)胞計(jì)數(shù)和嗜堿性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，WNR通道溶血劑作用強(qiáng)于WDF通道溶血劑，能夠破壞瘧原蟲感染的紅細(xì)胞的細(xì)胞膜，使感染紅細(xì)胞變?yōu)楹携懺x的裸核，裸核的體積和核酸含量均低于白細(xì)胞，散點(diǎn)圖上出現(xiàn)在白細(xì)胞的左下方，見圖5，不會干擾白細(xì)胞的計(jì)數(shù)和嗜堿性粒細(xì)胞的計(jì)數(shù)。

SysmexXN-9000血液分析儀進(jìn)行瘧原蟲感染患者血常規(guī)檢測時，不同感染階段對白細(xì)胞結(jié)果的影響不同，利用其“特征性”的散點(diǎn)圖提示信息，對篩查瘧原蟲感染具有較好的臨床實(shí)用價(jià)值。