P16與Ki67在宮頸病變中表達(dá)的臨床意義

周文超1，趙衛(wèi)紅

(1.山西衛(wèi)生健康職業(yè)學(xué)院，山西 太原 030012；2.山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院，山西 太原 030002)

宮頸癌是女性臨床常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率僅次于乳腺癌，嚴(yán)重威脅著女性的生活和工作。近年來，隨著人們生活習(xí)慣的改變與社會(huì)壓力的增加，宮頸癌的發(fā)病率逐年上升，并呈現(xiàn)年輕化的趨勢(shì)。宮頸癌的發(fā)病是一個(gè)漸進(jìn)的過程，有研究顯示由正常宮頸發(fā)病進(jìn)展為宮頸癌需要約8～12年，其發(fā)病、進(jìn)展及預(yù)后同腫瘤抑制基因P16及增殖細(xì)胞核抗原Ki67具有重要關(guān)系[1]。本研究通過免疫組化方法，觀察P16、Ki67在正常宮頸組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌內(nèi)的表達(dá)情況，分析二者與宮頸疾病發(fā)生的關(guān)系，現(xiàn)將結(jié)果匯報(bào)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究選取山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院2017年收治的106例已行宮頸活檢或手術(shù)的患者為研究對(duì)象，年齡27～72歲，平均(42.6±6.8)歲?；颊呔?jīng)宮頸活檢或手術(shù)切除標(biāo)本，依據(jù)2014年第四版WHO女性生殖器官腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)，其中子宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)患者70例，包括CIN I患者21例，CIN II患者25例，CIN III患者24例；子宮頸癌患者36例，全部患者在接受采集標(biāo)本前均未接受放射治療、化學(xué)治療及免疫治療。同時(shí)另選取醫(yī)院同期15例正常宮頸組織作為對(duì)照組。

1.2 方法

本實(shí)驗(yàn)標(biāo)本均采用甲醛進(jìn)行固定，石蠟包埋后切片，每片厚度4μm，采用Envision免疫組化方法進(jìn)行處理染色，陽性對(duì)照選用已知的陽性切片，陰性對(duì)照參照物選用PBS緩沖液進(jìn)行。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)

本實(shí)驗(yàn)以患者宮頸活檢結(jié)果或標(biāo)本病理檢查為診斷標(biāo)準(zhǔn)，切片由兩位不同的副主任以上職稱病理醫(yī)師閱片，診斷結(jié)果統(tǒng)一時(shí)作為最終診斷，診斷有差異時(shí)請(qǐng)另一副主任以上職稱病理師會(huì)診并商議最終診斷。P16染色陽性表達(dá)部位為細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)，表現(xiàn)為棕黃色的顆粒。Ki67表達(dá)部位主要在細(xì)胞核，表現(xiàn)為棕黃色顆粒形態(tài)。兩種表達(dá)情況均根據(jù)染色細(xì)胞的多少與強(qiáng)弱，按照四級(jí)定量法，陰性(-)為<5%，弱陽性(+)為5%～25%，陽性(+ +)為26%～50%，強(qiáng)陽性(+ + +)為>50%[2]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本研究全部數(shù)據(jù)均采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，其中計(jì)數(shù)資料以率(%)表示，兩組間數(shù)據(jù)比較采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行。數(shù)據(jù)間相關(guān)性分析采用spearman等級(jí)相關(guān)法進(jìn)行分析，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 P16在正常宮頸組織及宮頸病變中的表達(dá)情況

在正常宮頸組織(對(duì)照組)中P16表達(dá)為陰性，伴隨宮頸病變的不斷加重，P16在CIN I、CIN II、CIN III、子宮頸癌中的陽性率分別為57.14%、80.00%、87.50%、100.00%，P16在正常組織中的表達(dá)同子宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)、子宮頸癌相比較，陽性率明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 P16在正常宮頸組織及宮頸病變中的表達(dá)情況

注：1)為CIN與正常宮頸組織比較，χ2=30.17，P<0.05；

2)為子宮頸癌與正常宮頸組織比較，χ2=46.30，P<0.05

2.2 Ki67在正常宮頸組織及宮頸病變中的表達(dá)情況

在正常宮頸組織(對(duì)照組)中Ki67表達(dá)為陽性率為6.67%，伴隨宮頸病變的不斷加重，Ki67在CIN I、CIN II、CIN III、子宮頸癌中的陽性率分別為61.90%、84.00%、91.67%、100.00%，P16在正常組織中的表達(dá)同子宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)、子宮頸癌相比較，陽性率明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 Ki67在正常宮頸組織及宮頸病變中的表達(dá)情況

注：1)為CIN與正常宮頸組織比較，χ2=26.84，P<0.05；

2)為子宮頸癌與正常宮頸組織比較，χ2=41.75，P<0.05

2.3 P16、Ki67的表達(dá)與宮頸病變的關(guān)系

P16宮頸病變的的檢測(cè)中其敏感性為83.96%(89/106)，采用spearman相關(guān)分析，在子宮頸病變的檢測(cè)中，P16的表達(dá)與子宮頸病變嚴(yán)重程度呈正相關(guān)(r=0.692,P<0.05)。Ki67宮頸病變的的檢測(cè)中其敏感性為90.57 %(96/106)，采用spearman相關(guān)分析，在子宮頸病變的檢測(cè)中，Ki67的表達(dá)與子宮頸病變嚴(yán)重程度呈正相關(guān)(r=0.343,P<0.05)。

3 討論

宮頸癌是臨床上常見的一種婦科惡性腫瘤，其發(fā)病、發(fā)展是一個(gè)緩慢、漸進(jìn)的過程，近年來的臨床研究顯示，宮頸癌的發(fā)病呈現(xiàn)出上升且年輕化的趨勢(shì)。在早期的宮頸病變中，其臨床表現(xiàn)往往因不具備特異性而被忽視或漏診，尤其是對(duì)于無癥狀及體征的早期宮頸病變。臨床上為進(jìn)行宮頸病變篩查常用的方法為液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查和雜交捕獲Ⅱ代法人乳頭瘤病毒(HPV HC-Ⅱ)檢測(cè)，液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查方法帶有一定的主觀性質(zhì)且受診斷醫(yī)師的水平影響，檢測(cè)結(jié)果存在一定的誤差；HPV檢測(cè)只能檢測(cè)HPV的感染情況，對(duì)于HPV在感染細(xì)胞中的存在狀態(tài)不能提示，同時(shí)有研究顯示，大部分HPV感染患者為亞臨床型或者是自限性感染，90%的感染患者可以清除HPV自愈。因此臨床研究一直在研究如何采用特異度與敏感性較高的標(biāo)志物輔助臨床篩查，從而提高臨床診斷的準(zhǔn)確率。

P16作為一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因1994年由Kamp報(bào)道，其在腫瘤中缺失、突變等均會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞增殖周期出現(xiàn)紊亂，從而導(dǎo)致細(xì)胞無限增殖甚至發(fā)生癌變，有研究顯示其在多種惡性腫瘤中失活或缺失[3]。近年來臨床研究顯示P16在宮頸癌及癌前病變中幾乎100%出現(xiàn)過度表達(dá)，其不僅與癌癥有關(guān)，與上皮內(nèi)瘤變亦有密切關(guān)系[4]。本研究結(jié)果顯示，在正常宮頸組織(對(duì)照組)中P16表達(dá)為陰性，伴隨宮頸病變的不斷加重，P16在CIN I、CIN II、CIN III、子宮頸癌中的陽性率逐漸增高，P16宮頸病變的的檢測(cè)中其敏感性為83.96%，在子宮頸病變的檢測(cè)中，P16的陽性表達(dá)與子宮頸病變嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。Ki67作為細(xì)胞增殖活性的一種標(biāo)志物，其陽性表示表示細(xì)胞發(fā)生增殖的活性，有研究發(fā)現(xiàn)，Ki67在正常宮頸組織、CIN以及宮頸癌中的表達(dá)呈現(xiàn)逐漸增高的態(tài)勢(shì)[5]，本研究結(jié)果顯示隨著宮頸病變的不斷加重Ki67表達(dá)的陽性率逐漸增加，Ki67的陽性表達(dá)與子宮頸病變嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。

綜上所述，P16及Ki67在宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌中具有較高的敏感性，對(duì)于子宮頸癌及癌前病變的檢測(cè)、判斷具有重要意義，可以作為臨床診療中的重要依據(jù)，有利于疾病的早期發(fā)現(xiàn)與治療。