• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    HPLC同時測定黑老虎藥材中2種三萜酸的含量

    2018-09-17 09:32:20彭富全陳明權(quán)何風雷楊能英蔣向軍農(nóng)根林
    中國醫(yī)藥導報 2018年22期
    關(guān)鍵詞:三萜氧基開環(huán)

    彭富全 陳明權(quán) 何風雷 楊能英 蔣向軍 農(nóng)根林

    [摘要] 目的 建立黑老虎中12-乙酰氧基黑老虎酸和開環(huán)新五味子酸A的含量測定方法。 方法 采用超聲法提取藥材,色譜柱為Atlantis T3-C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流動相為乙腈-0.1%磷酸水溶液(80∶20),檢測波長:210 nm,流速1.0 mL/min,柱溫為30℃。 結(jié)果 12-乙酰氧基黑老虎酸進樣量在0.0157~0.3140 μg與峰面積值呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系(r = 0.9998),平均回收率為100.4%,相對標準差(RSD)為2.58%(n = 6);開環(huán)新五味子酸A進樣量在0.0848~1.6960 μg與峰面積值呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系(r = 0.9999),平均回收率為101.1%,RSD為1.21%(n = 6)。 結(jié)論 該方法準確、簡便、重復性好,可用于黑老虎藥材中12-乙酰氧基黑老虎酸和開環(huán)新五味子酸A的含量測定。

    [關(guān)鍵詞] 黑老虎;12-乙酰氧基黑老虎酸;開環(huán)新南五味子酸A;高效液相色譜

    [中圖分類號] R284.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210(2018)08(a)-0031-04

    [Abstract] Objective To establish a method for the determination of 12-acetoxycoccinic acid and seco-neokadsuranic acid A in root of Kadsura coccinea. Methods Ultrasonic method was used to extract the herbs. HPLC chromatographic conditions included the Atlantis T3-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm) column, using acetonitrile-0.1% phosphoric acid solution (80∶20) as the mobile phase at a flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 310 nm and the column temperature was maintained at 30℃. Results The calibration curve of 12-acetoxycoccinic acid was in good linearity over the range of 0.0157-0.3140 μg (r = 0.9998). The average recovery was 100.4% with RSD of 2.58% (n = 6). And the calibration curve of seco-neokadsuranic acid A was in good linearity over the range of 0.0848-1.6960 μg (r = 0.9999). The average recovery was 101.1% with RSD of 1.21% (n = 6). Conclusion The method is accurate, simple, reproducible, and can be used to determine the content of 12-acetoxycoccinic acid and seco-neokadsuranic acid A in the root of Kadsura coccinea.

    [Key words] Kadsura coccinea; 12-acetoxycoccinic acid; Seco-neokadsuranic acid A; High performance liquid chromatography

    黑老虎為五味子科南五味子屬植物厚葉五味子Kadsura coccinea(Lem.)A.C. Smith的干燥根,別名冷飯團、布福娜、緋紅南五味子、過山龍?zhí)佟@地風等,主要分布于我國廣東、廣西、福建等嶺南地區(qū),以及越南、緬甸等東南亞國家[1]。味辛、性溫,具有行氣活血、祛風止痛的功效,主要用于治療風濕痹痛、痛經(jīng)、脘腹疼痛、跌打損傷等;常用于胃、十二指腸潰瘍、慢性胃炎、急性胃腸炎、風濕性關(guān)節(jié)炎等病[2],為名優(yōu)中成藥“舒筋健腰丸”“壯腰健腎丸”等產(chǎn)品的主要原料藥之一?,F(xiàn)代研究表明,黑老虎主要含有木脂素和三萜類化合物,它們具有抗肝炎、抗HIV病毒、抗腫瘤、抗氧化、血小板活化因子拮抗作用及對血管平滑肌的舒張作用等藥理活性[3-5]。

    目前,《廣東省中藥材標準》等地方標準對黑老虎的質(zhì)量控制項中,僅有性狀鑒別、顯微鑒別及薄層鑒別,無“含量測定”項[2]。近年來,國內(nèi)外許多學者對黑老虎的研究主要集中于繁殖、栽培、化學成分及藥理作用等方面,其中,有效活性成分一直都是研究的重點[6-18]。文獻調(diào)研可知,木脂素類和三萜類是黑老虎的主要生物活性成分,其中三萜酸類成分“12-乙酰氧基黑老虎酸”具有顯著的抗HCV活性,可用于制備抗丙肝病毒的藥物[19];“開環(huán)新五味子酸A”也具有一定的抗癌活性[20],而關(guān)于黑老虎中三萜酸類成分定量分析的文獻尚未見報道。本研究首次建立了高效液相色譜法(HPLC)同時測定不同產(chǎn)地黑老虎中兩種三萜酸(12-乙酰氧基黑老虎酸、開環(huán)新五味子酸A)的含量,以期為黑老虎藥材的資源合理開發(fā)及品質(zhì)評價提供科學依據(jù)。

    1 儀器與試藥

    1.1 儀器

    Agilent 1200高效液相色譜議(美國安捷倫公司);Atlantis T3-C18色譜柱(4.6 mm×250 mm,5 μm,美國安捷倫公司);Agilent DAD檢測器(美國安捷倫公司);Millpore simplicity-67120型超純水器(美國密理博公司);BS110S型萬分之一電子分析天平(德國賽多利斯公司);WXJ型粉碎機(上海凱旋中藥機械制造有限公司);KQ-100DV超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。

    1.2 試藥

    對照品12-乙酰氧基黑老虎酸(上海一林生物科技有限公司,批號:20171011,純度98%);對照品開環(huán)新南五味子酸A(上海一林生物科技有限公司,批號:20171011,純度98%),由該公司從黑老虎藥材中分離得到晶體化合物,通過對其進行結(jié)構(gòu)解析、鑒定,發(fā)現(xiàn)該化合物的光譜數(shù)據(jù)、理化常數(shù)與文獻[20]報道的seco-neokadsuranic acid A完全一致,因此,可以確定黑老虎中也具有開環(huán)新南五味子酸A成分。乙腈(Fisher,色譜純);冰醋酸(天津市科密歐化學試劑有限公司,色譜純);液相用水超純水,其他試劑均為分析純。

    8個黑老虎藥材樣品,分別采自廣東(S1~S4號)、廣西(S5~S6號)、福建(S7~S8號),以上樣品均經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學中藥鑒定教研室主任黃海波副教授鑒定為五味子科南五味子屬植物冷飯團Kadsura coccinea(Lem.)A.C. Smith的根。樣品具體信息見表1。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 HPLC色譜條件

    色譜柱為Atlantis T3-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),流動相為乙腈-0.1%磷酸水溶液(80∶20)。檢測波長:210 nm;流速1.0 mL/min;柱溫為30℃;進樣量:10 μL。在該條件下,混合對照品及黑老虎樣品的色譜圖見圖1。

    2.2 供試品溶液的制備

    取黑老虎樣品粉末0.50 g(過60目篩),精密稱定,置100 mL錐形瓶中,精密加入95%乙醇50 mL,稱定重量,超聲提取45 min,放冷至室溫,補重,0.22 μm微孔濾膜濾過,即得。

    2.3 對照品溶液的制備

    分別精密稱取12-乙酰氧基黑老虎酸1.57 mg,開環(huán)新五味子酸A 8.48 mg對照品,置100 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,制成質(zhì)量濃度分別為15.7、84.8 μg/mL的混合對照品溶液。4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    2.4 線性關(guān)系考察

    分別精密吸取上述混合對照品溶液1、2、5、10、15、20 μL,按“2.1”項色譜條件下進樣分析,以各成分峰面積 Y為縱坐標,以進樣量X(μg)為橫坐標,繪制標準曲線,并求出12-乙酰氧基黑老虎酸和開環(huán)新五味子酸A的回歸方程分別為Y = 0.2321X + 0.101(r = 0.9998)和Y = 0.4719X + 0.1502(r = 0.9999)。結(jié)果顯示,12-乙酰氧基黑老虎酸和開環(huán)新五味子酸A的進樣量分別在0.0157~0.3140 μg和0.0848~1.6960 μg之間與峰面積值呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

    2.5 精密度試驗

    精密吸取混合對照品混合溶液10 μL,按“2.1”項下色譜條件連續(xù)進樣6次,測得峰面積積分值,計算相對標準偏差(RSD),結(jié)果12-乙酰氧基黑老虎酸的RSD為1.35%,開環(huán)新五味子酸A的RSD為0.96%,提示儀器的精密度良好。

    2.6 穩(wěn)定性試驗

    取供試品溶液,分別在0、3、6、12、24、48 h按“2.1”項下色譜條件進行測定,記錄峰面積,計算得12-乙酰氧基黑老虎酸峰面積的RSD為1.62%,開環(huán)新五味子酸A的RSD為1.07%,提示供試品溶液在48 h內(nèi)穩(wěn)定。

    2.7 重復性試驗

    精密稱取同一供試樣品6份,按“2.2”項下方法制備供試品溶液,按“2.1”項下色譜條件進行HPLC分析。測得峰面積積分值,計算相對標準偏差,結(jié)果12-乙酰氧基黑老虎酸峰面積的RSD為1.97%,開環(huán)新五味子酸A的RSD為1.21%,提示方法重復性良好。

    2.8 加樣回收試驗

    精密稱取已測定的黑老虎藥材(編號:S5)粉末0.50 g,共6份,分別精密加入12-乙酰氧基黑老虎酸對照品溶液(濃度為0.038 mg/mL)和開環(huán)新五味子酸A對照品溶液(濃度為0.482 mg/mL)各1 mL,按供試品溶液制備方法制備,進樣10 μL,注入HPLC色譜儀,測其峰面積,計算回收率。12-乙酰氧基黑老虎酸平均回收率為100.4%,RSD為2.58%(n = 6),開環(huán)新五味子酸A平均回收率為101.1%,RSD為1.21%(n = 6)。見表2。

    2.9 樣品的測定

    取不同產(chǎn)地黑老虎樣品,按“2.2”項下方法制備供試品溶液,按“2.1”項下色譜條件測定含量,結(jié)果見表3。從表3可以得知,8個產(chǎn)地黑老虎中2種三萜酸的含量存在明顯差異,不同產(chǎn)地藥材中12-乙酰氧基黑老虎酸的含量大小依次為福建永定>廣西防城港>廣西恭城>廣東懷集>廣東始興>福建武平>廣東蕉嶺、廣東佛岡,而開環(huán)新南五味子酸A的含量大小依次為廣西防城港>廣東蕉嶺>廣西恭城>福建武平>福建永定>廣東始興>廣東懷集>廣東佛岡,其中12-乙酰氧基黑老虎酸、開環(huán)新南五味子酸A含量均較高的產(chǎn)地為廣西防城港(0.076、0.964 mg/g),較低的為廣東佛岡(0.001、0.235 mg/g)。

    3 討論

    3.1 HPLC色譜條件的優(yōu)化

    3.1.1 流動相的確定 比較了甲醇-水、乙腈-水及在流動相中添加一定濃度的磷酸等流動相組成,使用甲醇-水、乙腈-水系統(tǒng)進行洗脫,各峰的對稱性和分離度差;而使用甲醇-0.1%磷酸水溶液系統(tǒng)進行洗脫,各峰的保留時間較長;以乙腈-0.1%磷酸水溶液系統(tǒng)為流動相進行洗脫,被分析物的峰對稱性好,分離度滿足要求,保留時間也較理想。故實驗選用乙腈-0.1%磷酸水溶液系統(tǒng)作為流動相。

    3.1.2 檢測波長的選擇 將三萜酸混合對照品溶液注入HPLC儀器,應用DAD檢測器在190~400 nm波段掃描,再與單組份對照品溶液相對照,發(fā)現(xiàn)兩種三萜酸組分的最大紫外吸收波長均為200 nm;但在此波長下,溶劑末端吸收較嚴重,基線不夠理想。為提高信噪比,保證基線平穩(wěn),消除噪音對定量分析的影響,故選擇210 nm為檢測波長。

    3.2 供試品溶液制備方法的優(yōu)化

    考察了甲醇、75%甲醇、95%乙醇等提取溶劑,結(jié)果顯示,3種提取溶劑的提取量不存在顯著性差異;因此,選擇安全系數(shù)較大的95%乙醇作為提取溶劑。比較了采用95%乙醇超聲提取30、45、60 min 的效果,結(jié)果顯示,30 min的提取率低于45 min的提取率,而45、60 min的提取量不存在顯著性差異,因此選擇95%乙醇超聲提取45 min作為制備供試品溶液的方法。

    3.3 小結(jié)

    實驗測定了8個不同產(chǎn)地黑老虎藥材中12-乙酰氧基黑老虎酸和開環(huán)新南五味子酸A的含量,結(jié)果顯示,不同產(chǎn)地藥材中兩種三萜酸的量之間均存在明顯差異,可能與藥材采收時間、儲藏時間、生長年限以及生長環(huán)境等因素有關(guān),具體原因有待于進一步研究。

    本研究首次建立了HPLC法同時測定黑老虎藥材中12-乙酰氧基黑老虎酸和開環(huán)新南五味子酸A等兩種三萜酸類成分的量,方法簡便、準確、穩(wěn)定性好,為黑老虎藥材質(zhì)量控制提供了一定的參考。

    [參考文獻]

    [1] 中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志[M].北京:科學出版社,1996:252-261.

    [2] 廣東省中藥材標準編輯委員會.廣東省中藥材標準[M].廣州:廣東科技出版社,2004:188-189.

    [3] 舒永志,成亮,楊培明,等.黑老虎的化學成分及藥理作用研究進展[J].中草藥,2011,42(4):805-813.

    [4] 梁忠厚,范適,宋光桃,等.黑老虎的研究進展[J].湖南生態(tài)科學學報,2017,4(3):52-56.

    [5] 李賀然.新型羊毛甾烷類化合物、其制備方法及抗癌用途:中國,CN101607886A[P].2009-12-23.

    [6] 楊銳培,王潔,王德勤,等.黑老虎栽培技術(shù)及其混偽品鑒定研究進展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學,2018,46(8):26-28.

    [7] 劉乘風,李少軍,楊彥輝.野生黑老虎人工種植技術(shù)研究[J].林業(yè)與生態(tài),2017(12):33-34.

    [8] 梁忠厚,李有清.湖南低海拔地區(qū)黑老虎引種試驗研究[J].湖南生態(tài)科學學報,2018,5(1):28-31.

    [9] 李艷,陳駿,黎開燕,等.冷飯團的抗炎作用及其機制研究[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2014,23(25):2745-2747.

    [10] 王來友,王鳳云,王集華,等.壯藥黑老虎根提取物對大鼠非酒精性脂肪肝病的作用及機制[J].廣東藥學院學報,2015,31(6):1-4.

    [11] 方靈芝.黑老虎的化學成分及抗氧化活性研究[D].天津:南開大學,2013.

    [12] 舒永志,成亮,曺濬喆,等.黑老虎的化學成分研究[J].中草藥,2012,43(3):428-431.

    [13] 王楠,李占林,劉曉秋,等.黑老虎根化學成分的研究(Ⅱ)[J].中國藥物化學雜志,2012,22(4):305-309.

    [14] 延在昊,成亮,孔令義,等.黑老虎化學成分及其抗氧化活性研究[J].中草藥,2013,44(21):2969-2973.

    [15] 王楠,李占林,華會明.黑老虎根化學成分的研究[J].中草藥,2010,41(2):195-197.

    [16] Wang N,Li ZL,Song DD,et al. Lanostance-type triterpenoids from the roots of Kadsura coccinea [J]. Nat Prod,2008,71(6):990-994.

    [17] 陸俊,劉如如,趙雪萌,等.黑老虎活性成分及生理活性研究進展[J].食品研究與開發(fā),2018(2):219-224.

    [18] 石柳柳,李賀然.黑老虎中倍半萜類化合物的分離鑒定及抑制NO生成作用研究[J].中國醫(yī)藥導報,2016,13(10):27-29.

    [19] 宋琰,朱勇喆,趙慶杰,等.12-乙酰氧基黑老虎酸在制備防治丙型肝炎病毒藥物中的應用:中國,CN103961-357A[P].2014-08-06.

    [20] Lian-Niang L,Hong X,Da-Lun G,et al. Isolation and Structure Elucidation of Seco-neokadsuranic Acid A and 3,4-Seco-(24Z)-lanosta-4(30),8,24-triene- 3,26-dioic Acid 1 [J]. Planta medica,1989,55(3):300-302.

    猜你喜歡
    三萜氧基開環(huán)
    澤瀉原三萜、降三萜和倍半萜的分離及其抗炎活性研究
    2-(2-甲氧基苯氧基)-1-氯-乙烷的合成
    轉(zhuǎn)速開環(huán)恒壓頻比的交流調(diào)速系統(tǒng)的分析與仿真研究
    電子測試(2018年1期)2018-04-18 11:52:24
    佩氏靈芝中三個新三萜
    茯苓皮總?cè)频瓮柚苽涔に嚨膬?yōu)化
    中成藥(2016年4期)2016-05-17 06:08:05
    兩種乙氧基化技術(shù)及其對醇醚性能的影響
    一種溫和環(huán)醚開環(huán)成雙酯的新方法
    合成化學(2015年4期)2016-01-17 09:01:04
    基于開環(huán)補償?shù)娘w機偏航角控制系統(tǒng)設(shè)計及仿真
    六苯氧基環(huán)三磷腈的合成及其在丙烯酸樹脂中的阻燃應用
    中國塑料(2015年2期)2015-10-14 05:34:31
    HPLC測定5,6,7,4’-四乙酰氧基黃酮的含量
    啦啦啦观看免费观看视频高清 | 日日干狠狠操夜夜爽| 亚洲男人天堂网一区| 99国产精品一区二区三区| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 色老头精品视频在线观看| 色婷婷久久久亚洲欧美| 在线观看66精品国产| 老汉色∧v一级毛片| 美女大奶头视频| 国产主播在线观看一区二区| 黄色视频不卡| 国产成年人精品一区二区| 波多野结衣av一区二区av| 禁无遮挡网站| 满18在线观看网站| 男人的好看免费观看在线视频 | 在线观看66精品国产| 波多野结衣av一区二区av| 亚洲视频免费观看视频| 久久久国产精品麻豆| 国产精品九九99| 久久精品91无色码中文字幕| bbb黄色大片| 国内精品久久久久久久电影| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产成人av激情在线播放| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 12—13女人毛片做爰片一| 搡老岳熟女国产| 亚洲久久久国产精品| 日韩欧美免费精品| 午夜老司机福利片| 夜夜夜夜夜久久久久| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| av电影中文网址| 国语自产精品视频在线第100页| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 国产精品 欧美亚洲| 精品国内亚洲2022精品成人| 中文字幕精品免费在线观看视频| 九色亚洲精品在线播放| 亚洲全国av大片| 两个人免费观看高清视频| 99国产精品免费福利视频| 亚洲精品美女久久av网站| 久久久久久大精品| 99国产综合亚洲精品| 性色av乱码一区二区三区2| 男女下面插进去视频免费观看| 亚洲人成电影观看| 免费在线观看亚洲国产| 国产av一区在线观看免费| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 欧美国产精品va在线观看不卡| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 国产成人一区二区三区免费视频网站| 人妻久久中文字幕网| 中文字幕av电影在线播放| 亚洲电影在线观看av| 国产欧美日韩一区二区三| 一边摸一边抽搐一进一小说| 黄片播放在线免费| 国产一区二区三区视频了| 深夜精品福利| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 看片在线看免费视频| 日韩免费av在线播放| 国产午夜精品久久久久久| 午夜精品久久久久久毛片777| 欧美最黄视频在线播放免费| 村上凉子中文字幕在线| 母亲3免费完整高清在线观看| 精品久久久久久成人av| 亚洲精品国产区一区二| 久久久水蜜桃国产精品网| 麻豆国产av国片精品| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 精品久久蜜臀av无| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 长腿黑丝高跟| 国产极品粉嫩免费观看在线| 一本大道久久a久久精品| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 亚洲av熟女| 欧美中文综合在线视频| 妹子高潮喷水视频| 亚洲人成77777在线视频| 女人精品久久久久毛片| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 日韩精品免费视频一区二区三区| 久久九九热精品免费| 精品一区二区三区av网在线观看| ponron亚洲| 亚洲性夜色夜夜综合| 欧美黄色淫秽网站| 一级黄色大片毛片| 美女高潮到喷水免费观看| 国产麻豆69| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | av视频在线观看入口| 午夜成年电影在线免费观看| 国产精品亚洲一级av第二区| videosex国产| 欧美黄色淫秽网站| 亚洲av五月六月丁香网| 国产免费av片在线观看野外av| 大香蕉久久成人网| 国产亚洲精品一区二区www| 日韩成人在线观看一区二区三区| 丝袜人妻中文字幕| 中文字幕久久专区| 欧美av亚洲av综合av国产av| 日韩高清综合在线| 午夜日韩欧美国产| 丰满的人妻完整版| 人人妻人人澡人人看| 国产亚洲精品一区二区www| 精品国产一区二区三区四区第35| 久久九九热精品免费| 久久国产亚洲av麻豆专区| 亚洲精品在线观看二区| 大型av网站在线播放| 久久久久精品国产欧美久久久| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 欧美日韩福利视频一区二区| 日韩精品中文字幕看吧| 亚洲自拍偷在线| 久久亚洲真实| 久久亚洲真实| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 欧美一区二区精品小视频在线| 大陆偷拍与自拍| 欧美一级毛片孕妇| 麻豆成人av在线观看| 国产精品一区二区三区四区久久 | 精品无人区乱码1区二区| 亚洲精品av麻豆狂野| 久久婷婷成人综合色麻豆| АⅤ资源中文在线天堂| 午夜福利成人在线免费观看| 一区二区三区激情视频| 丝袜美腿诱惑在线| xxx96com| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 久久久久国内视频| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 视频在线观看一区二区三区| 亚洲午夜理论影院| 丰满的人妻完整版| 在线观看日韩欧美| 精品福利观看| 久久久久久大精品| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 窝窝影院91人妻| 99久久99久久久精品蜜桃| e午夜精品久久久久久久| 国产高清videossex| 岛国在线观看网站| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 搡老熟女国产l中国老女人| 又紧又爽又黄一区二区| 无遮挡黄片免费观看| 视频区欧美日本亚洲| 99在线视频只有这里精品首页| svipshipincom国产片| 少妇熟女aⅴ在线视频| 神马国产精品三级电影在线观看 | 啦啦啦韩国在线观看视频| 精品不卡国产一区二区三区| 婷婷六月久久综合丁香| 狠狠狠狠99中文字幕| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 动漫黄色视频在线观看| 日韩视频一区二区在线观看| 日本vs欧美在线观看视频| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 日韩视频一区二区在线观看| www.熟女人妻精品国产| 午夜福利18| av超薄肉色丝袜交足视频| 怎么达到女性高潮| 亚洲国产精品sss在线观看| 99riav亚洲国产免费| 精品高清国产在线一区| 18禁国产床啪视频网站| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 在线观看免费视频日本深夜| 制服丝袜大香蕉在线| 正在播放国产对白刺激| 国产成人系列免费观看| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 在线观看66精品国产| 久久久久久大精品| 亚洲第一电影网av| 久久久久亚洲av毛片大全| 亚洲五月天丁香| 精品高清国产在线一区| 午夜福利,免费看| 国产精品亚洲av一区麻豆| 欧美成人午夜精品| 日本a在线网址| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产在线观看jvid| 真人一进一出gif抽搐免费| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 国产精品九九99| 午夜久久久在线观看| 国产高清视频在线播放一区| 18美女黄网站色大片免费观看| 看片在线看免费视频| 精品人妻在线不人妻| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 午夜福利欧美成人| 免费看美女性在线毛片视频| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 亚洲欧美激情在线| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 日韩大尺度精品在线看网址 | 精品久久久久久久久久免费视频| 国产又色又爽无遮挡免费看| 夜夜夜夜夜久久久久| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 一夜夜www| 精品国内亚洲2022精品成人| 亚洲成人国产一区在线观看| 亚洲男人的天堂狠狠| ponron亚洲| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 婷婷丁香在线五月| 亚洲伊人色综图| 在线观看免费日韩欧美大片| 97人妻天天添夜夜摸| 国产亚洲欧美在线一区二区| 亚洲在线自拍视频| 国产精品久久久久久精品电影 | 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 日本在线视频免费播放| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 欧美日韩黄片免| av视频在线观看入口| 国产精品野战在线观看| 午夜福利,免费看| 色综合欧美亚洲国产小说| 91字幕亚洲| 丝袜人妻中文字幕| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 90打野战视频偷拍视频| 日日爽夜夜爽网站| 国产精品二区激情视频| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 久久久国产欧美日韩av| 国内精品久久久久久久电影| 欧美一区二区精品小视频在线| 18美女黄网站色大片免费观看| 国产成+人综合+亚洲专区| 老汉色av国产亚洲站长工具| 久久久久久久久免费视频了| 91麻豆精品激情在线观看国产| 成年女人毛片免费观看观看9| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 麻豆国产av国片精品| 久热爱精品视频在线9| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 一区二区三区国产精品乱码| 国产三级黄色录像| 日日夜夜操网爽| 国产免费av片在线观看野外av| 欧美午夜高清在线| 国产亚洲欧美98| 老汉色∧v一级毛片| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产亚洲精品一区二区www| 亚洲精品美女久久av网站| 伦理电影免费视频| 日本 av在线| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 老司机靠b影院| 亚洲国产精品成人综合色| 亚洲中文日韩欧美视频| 免费高清视频大片| 啦啦啦观看免费观看视频高清 | 波多野结衣巨乳人妻| 黄片小视频在线播放| 色av中文字幕| 午夜福利欧美成人| 成人亚洲精品av一区二区| 婷婷精品国产亚洲av在线| 波多野结衣一区麻豆| 少妇 在线观看| 国产高清有码在线观看视频 | 精品人妻在线不人妻| 国产xxxxx性猛交| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产精品 欧美亚洲| 不卡av一区二区三区| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 欧美乱妇无乱码| 看免费av毛片| 久久狼人影院| bbb黄色大片| 岛国在线观看网站| 在线观看一区二区三区| 在线观看免费午夜福利视频| 欧美乱色亚洲激情| 日本五十路高清| 亚洲男人天堂网一区| 精品国产一区二区久久| 色婷婷久久久亚洲欧美| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 精品无人区乱码1区二区| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 久热这里只有精品99| 搡老妇女老女人老熟妇| 制服人妻中文乱码| 午夜福利18| 90打野战视频偷拍视频| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲成人免费电影在线观看| 1024香蕉在线观看| 国产区一区二久久| 亚洲三区欧美一区| avwww免费| 成年人黄色毛片网站| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 黄色成人免费大全| 亚洲精华国产精华精| 激情在线观看视频在线高清| 色播亚洲综合网| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 欧美成人性av电影在线观看| www日本在线高清视频| 国产精品av久久久久免费| 成人精品一区二区免费| 一个人免费在线观看的高清视频| 亚洲av成人一区二区三| 免费看美女性在线毛片视频| 欧美性长视频在线观看| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 国产伦人伦偷精品视频| www日本在线高清视频| 18禁美女被吸乳视频| 搞女人的毛片| 久久久久久久精品吃奶| 久热爱精品视频在线9| av超薄肉色丝袜交足视频| 成年版毛片免费区| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲熟女毛片儿| 日本 欧美在线| 欧美精品亚洲一区二区| 高清毛片免费观看视频网站| 一区二区三区激情视频| 69精品国产乱码久久久| 91字幕亚洲| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 免费看a级黄色片| 欧美色欧美亚洲另类二区 | 国产精品永久免费网站| 91麻豆精品激情在线观看国产| 伦理电影免费视频| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 黄色a级毛片大全视频| 日韩欧美三级三区| 免费观看精品视频网站| 亚洲无线在线观看| 亚洲专区字幕在线| 制服丝袜大香蕉在线| 超碰成人久久| 欧美在线一区亚洲| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 桃红色精品国产亚洲av| 久久久久久人人人人人| 性少妇av在线| 国产xxxxx性猛交| 亚洲avbb在线观看| 国产精品,欧美在线| 亚洲国产精品久久男人天堂| 18禁国产床啪视频网站| 久久久久久久久免费视频了| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 国产激情欧美一区二区| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 久久国产亚洲av麻豆专区| 亚洲av电影在线进入| 欧美乱码精品一区二区三区| 久久中文字幕一级| 又黄又爽又免费观看的视频| www.www免费av| 国产99白浆流出| 好男人在线观看高清免费视频 | 亚洲av成人av| 91精品国产国语对白视频| 成人免费观看视频高清| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 久久久久久久精品吃奶| 中文亚洲av片在线观看爽| 国产色视频综合| 国产精品综合久久久久久久免费 | 黄色 视频免费看| 在线观看免费午夜福利视频| 久久人人精品亚洲av| 国产成人欧美在线观看| 国产高清激情床上av| 高清在线国产一区| 国产精品免费一区二区三区在线| 黄片播放在线免费| 久久久久久大精品| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 久久久久国内视频| 国产一区二区三区视频了| 黄色片一级片一级黄色片| 婷婷精品国产亚洲av在线| 成年女人毛片免费观看观看9| 男人舔女人下体高潮全视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲无线在线观看| 女性被躁到高潮视频| 亚洲精华国产精华精| 亚洲电影在线观看av| 亚洲人成电影免费在线| 久久国产乱子伦精品免费另类| 婷婷丁香在线五月| 欧美亚洲日本最大视频资源| 婷婷六月久久综合丁香| 国内精品久久久久久久电影| 在线视频色国产色| 级片在线观看| 黄色视频不卡| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 又大又爽又粗| 大型黄色视频在线免费观看| 精品欧美一区二区三区在线| 亚洲激情在线av| 我的亚洲天堂| 国产精品日韩av在线免费观看 | 成人亚洲精品一区在线观看| 色婷婷久久久亚洲欧美| 青草久久国产| 成人国产一区最新在线观看| 成年女人毛片免费观看观看9| 国产又色又爽无遮挡免费看| 大码成人一级视频| 村上凉子中文字幕在线| 国产麻豆69| 日韩精品青青久久久久久| 波多野结衣一区麻豆| 18禁观看日本| 色av中文字幕| 99国产精品免费福利视频| 怎么达到女性高潮| 亚洲九九香蕉| 国产精品一区二区精品视频观看| 久9热在线精品视频| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 人妻久久中文字幕网| 在线免费观看的www视频| 一级毛片高清免费大全| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产亚洲av高清不卡| 99精品久久久久人妻精品| 波多野结衣av一区二区av| 成人18禁在线播放| 欧美日本中文国产一区发布| 国产伦一二天堂av在线观看| 日本 欧美在线| 少妇粗大呻吟视频| 十分钟在线观看高清视频www| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 久久天堂一区二区三区四区| 久久 成人 亚洲| 日日干狠狠操夜夜爽| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 在线观看免费视频网站a站| 黄片播放在线免费| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 国产视频一区二区在线看| 黄色片一级片一级黄色片| 亚洲国产看品久久| 欧美最黄视频在线播放免费| 搡老妇女老女人老熟妇| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 99re在线观看精品视频| 看免费av毛片| 最近最新中文字幕大全免费视频| 亚洲精品中文字幕在线视频| 狂野欧美激情性xxxx| 亚洲视频免费观看视频| 9191精品国产免费久久| 亚洲国产欧美一区二区综合| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 狂野欧美激情性xxxx| 免费在线观看完整版高清| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 免费看美女性在线毛片视频| 中文亚洲av片在线观看爽| 极品人妻少妇av视频| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲精品av麻豆狂野| av视频在线观看入口| 老汉色∧v一级毛片| 少妇的丰满在线观看| 18禁国产床啪视频网站| 香蕉久久夜色| 黄片大片在线免费观看| 涩涩av久久男人的天堂| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 久久中文字幕一级| 久久精品91蜜桃| 十分钟在线观看高清视频www| 国产91精品成人一区二区三区| 热re99久久国产66热| 色播亚洲综合网| 999久久久国产精品视频| 亚洲男人的天堂狠狠| 中出人妻视频一区二区| 免费高清视频大片| 色老头精品视频在线观看| 久久香蕉激情| 在线观看免费视频网站a站| 一级毛片精品| av网站免费在线观看视频| 91字幕亚洲| 欧美国产日韩亚洲一区| 久久久久久久午夜电影| 久热爱精品视频在线9| x7x7x7水蜜桃| 午夜免费观看网址| 国产精品亚洲美女久久久| 给我免费播放毛片高清在线观看| 美女大奶头视频| 免费观看精品视频网站| 亚洲国产精品成人综合色| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 国产av一区在线观看免费| 黑丝袜美女国产一区| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 欧美中文日本在线观看视频| 一二三四社区在线视频社区8| 日韩国内少妇激情av| 国产熟女午夜一区二区三区| 无遮挡黄片免费观看| xxx96com| 最近最新中文字幕大全免费视频| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 久久伊人香网站| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 一区二区三区激情视频| 久久久久国产一级毛片高清牌| 长腿黑丝高跟| 激情在线观看视频在线高清| 美女 人体艺术 gogo| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 国产精品一区二区免费欧美| 男女之事视频高清在线观看| 一区二区三区高清视频在线| 色尼玛亚洲综合影院| 99国产综合亚洲精品| 久久精品91蜜桃| 人妻久久中文字幕网| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 在线观看免费视频日本深夜| 亚洲一区高清亚洲精品| 亚洲精品美女久久av网站| 欧美精品亚洲一区二区| 精品一区二区三区四区五区乱码| 日韩欧美三级三区| 日韩精品中文字幕看吧| 国产麻豆69| 免费av毛片视频| 真人做人爱边吃奶动态| 制服丝袜大香蕉在线| 亚洲专区国产一区二区| 99久久国产精品久久久| 欧美激情 高清一区二区三区| 丝袜美足系列| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 国产单亲对白刺激| 91精品三级在线观看| 午夜福利影视在线免费观看| 亚洲七黄色美女视频| 欧美成人午夜精品| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| e午夜精品久久久久久久| 亚洲第一av免费看| 我的亚洲天堂| 成在线人永久免费视频| 老司机深夜福利视频在线观看| 午夜福利视频1000在线观看 | 亚洲无线在线观看| 在线国产一区二区在线| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 日日夜夜操网爽| 制服丝袜大香蕉在线| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 十分钟在线观看高清视频www| 18禁国产床啪视频网站| 国产亚洲精品一区二区www|