仔豬偽狂犬病繼發(fā)大腸桿菌病的診斷

2017年11月，墊江縣某新建豬場的仔豬發(fā)生一種發(fā)病率高、死亡率高、以高熱、神經(jīng)癥狀為特征的疫病。筆者通過臨床檢查、病理剖檢、實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，確診為豬偽狂犬病繼發(fā)大腸桿菌病，現(xiàn)報(bào)告如下。

（一）疫病情況

此場原為一小學(xué)改造而成，分東西兩棟圈舍，外有圍墻相隔。于2017年11月8日從外縣引入16頭純種約克母豬，1頭純長白公豬，30頭50日齡左右榮昌仔母豬，132頭兩月齡內(nèi)育肥仔豬；13日有14頭仔豬出現(xiàn)減食、發(fā)熱、后軀不能站立，到16日，數(shù)量增至78頭，當(dāng)時(shí)診斷為飼料中毒和水腫病，更換飼料并投與抗菌素、對癥治療，疫病得到一定控制。但至20日，病豬出現(xiàn)呼吸困難、頸部水腫、后軀不能站立，神經(jīng)癥狀，部分倒地，呈劃水狀，死亡迅速。特別是原發(fā)病后看似正常者，一旦再發(fā)病，死亡很快。11月23日當(dāng)天，全場就死亡仔豬32頭，即報(bào)告至縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，后經(jīng)確切診斷，積極處理，至28日，有效地控制了病情，全場無新增病例，12月5日，停止死亡。

（二）臨床癥狀

病豬主要表現(xiàn)精神沉郁，食欲不振、甚者絕食，呼吸加快，體溫升高，一般在40℃～41℃。個(gè)別仔豬嘔吐，多數(shù)拉烏青色稀糞。耳腹出現(xiàn)紫色斑塊，眼瞼水腫，頸部腫脹。多數(shù)仔豬在出現(xiàn)臨床癥狀后不久即出現(xiàn)不同程度的神經(jīng)癥狀，一些仔豬出現(xiàn)間歇性抽搐，唾液分泌增多，出現(xiàn)間歇性轉(zhuǎn)圈運(yùn)動(dòng)，有的仔豬呆立不動(dòng)，頭觸地或抵墻，共濟(jì)失調(diào)；有的仔豬因后肢麻痹呈犬坐姿勢，進(jìn)一步發(fā)展為四肢麻痹，完全不能站立，側(cè)臥，四肢呈游泳狀劃動(dòng)。嚴(yán)重者呼吸困難，叫聲嘶啞，口吐白沫，體溫下降，持續(xù)性抽搐，很快死亡。

（三）剖檢變化

對當(dāng)天死亡的8頭死亡仔豬進(jìn)行對比剖檢：

1.頸部皮下水腫，切口浸出淡黃色液體。

2.頜下淋巴結(jié)、呼吸道淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)腫大、出血，切面呈大理石樣變化。

3.心包積液，心包炎，嚴(yán)重者心臟與心包膜粘連，剝開心包膜，心臟表面呈現(xiàn)絨毛狀，心肌出血。

4.喉頭充血，肺水腫、瘀血

5.肝、脾稍腫大，表面散在有粟粒大灰白色壞死灶。

6.腎表面、皮質(zhì)及髓質(zhì)內(nèi)可見針尖大小的出血點(diǎn)。

7.胃腸漿膜及肌層出現(xiàn)廣泛性出血，胃腸粘膜脫落、出血，腸系膜有膠凍樣纖維素性附著物。

8.腦膜及腦膜下出血，灰質(zhì)部有小點(diǎn)狀出血。

9.腸道內(nèi)寄生大量蛔蟲。

（四）實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

1.取病死豬的肝、肺、脾、腦、腎等病料進(jìn)行涂片、染色、鏡檢，可觀察到呈球狀、桿狀、革蘭氏陰性細(xì)菌。

2.無菌取病死豬心包液、肺、十二指腸粘膜、腸系膜淋巴結(jié)，接種于血瓊脂培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)，仔細(xì)觀察。24 h左右出現(xiàn)一種呈β溶血的菌落。40 h左右出現(xiàn)一種不溶血小菌落。

3.將4.2分離到的溶血性菌落，接種于普通瓊脂培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)18～24 h，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上有呈圓形、整齊、隆起、濕潤、光滑及灰白色的菌落生長，直徑約2～3 mm。取此菌劃線接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)18～24 h，發(fā)現(xiàn)有紅色菌落生長。

取此菌涂片、染色鏡檢，呈革蘭氏陰性、中等大小桿菌。

生化鑒定：對培養(yǎng)所得的細(xì)菌進(jìn)行葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇、蔗糖發(fā)酵試驗(yàn)。結(jié)果均能發(fā)酵上述糖類，并產(chǎn)酸產(chǎn)氣。

4.取病死豬心血5份及前腔靜脈采取病豬血液15份，離心制作血清，等檢。

5.用偽狂犬病膠乳凝集試驗(yàn)試劑盒進(jìn)行偽狂犬病檢測。試劑盒由武漢科前動(dòng)物生物制品有限公司生產(chǎn)，批號：170301。

（1）凝集反應(yīng)強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)：

+ + + + 全部膠乳凝集，顆粒聚于液滴邊緣，液體完全透明。

+ + + 大部膠乳凝集，顆粒明顯，液體稍渾濁。

+ + 約50%膠乳凝集，但顆粒較細(xì)，液體較渾濁。

+ 有少許凝集，液體呈渾濁。

- 液滴呈原有的均勻乳狀。

出現(xiàn)“+ +”以上凝集判為陽性。

（2）陽性對照試驗(yàn)：將陽性血清進(jìn)行2倍系列稀釋，取1滴（20μl）與等量膠乳抗原進(jìn)行膠乳凝集試驗(yàn)，結(jié)果膠乳抗原與1∶64稀釋的陽性血清出現(xiàn)“+ +”凝集反應(yīng)，與1∶32、1∶16稀釋的陽性血清出現(xiàn)“+ + +”凝集反應(yīng)，與1∶8以內(nèi)稀釋的陽性血清出現(xiàn)“+ + + +”凝集反應(yīng)。

陰性對照試驗(yàn)：陰性血清加抗原，未發(fā)生凝集反應(yīng)。

稀釋液對照試驗(yàn)：抗原加稀釋液混合后，未發(fā)生凝集反應(yīng)。

（3）被檢血清試驗(yàn)：取20份被檢血清各一滴（20μl），陽性血清、陰性血清、稀釋液各1滴（20μl），分別置于玻片上，各加等量膠乳抗原1滴，混勻，攪拌并搖動(dòng)1～2 min，在3～5 min內(nèi)觀察，判定結(jié)果。

（4）20份檢測血清試驗(yàn)結(jié)果如下：

反應(yīng)強(qiáng)度 - + + + + + + + + + +待檢血清數(shù) 2 1 10 5 2

從以上結(jié)果可以看出，呈陽性反應(yīng)的待檢血清數(shù)量為17份。占待檢血清數(shù)量的85%。

通過以上疫病調(diào)查、臨床檢查、病理剖檢、實(shí)驗(yàn)室檢測，可以確診：此批仔豬疫病是由豬偽狂犬病引起，并繼發(fā)大腸桿菌病。

（五）防治

1.首先作好隔離。對出現(xiàn)癥狀的豬，全部隔離到東邊圈舍。

2.全場使用碘伏、百毒殺、復(fù)合酚等進(jìn)行徹底消毒，對入場口、入舍口設(shè)立消毒池，每日更換新鮮消毒液。

3.對健康豬采用豬偽狂犬弱毒疫苗進(jìn)行緊急預(yù)防注射。疫苗由四川華神生物制品有限公司生產(chǎn)，批號：170808。

4.停止飼喂顆粒料。給予以玉米為主的粉料，加倍量添加多種維生素、阿莫西林粉或氟苯尼考原粉，減少料中蛋白質(zhì)及微量金屬含量，以降低應(yīng)激，控制繼發(fā)感染。避免飼喂發(fā)霉飼料、油巴、胡豆等不易消化性飼料。

5.對出現(xiàn)癥狀者，使用氨芐西林、卡那霉素、氟苯尼考、恩諾沙星等控制感染。

6.對癥治療。嚴(yán)重者，可使用5%葡萄糖生理鹽水、CoA、ATP、VitC等進(jìn)行腹腔注射，使用時(shí)注意將液體溫度調(diào)節(jié)到正常體溫。

7.加強(qiáng)護(hù)理。保持舍內(nèi)溫度，可使用紅外線燈升溫；飼料少量多次；注意保護(hù)極弱仔豬。

8.使用左旋咪唑或丙硫咪唑進(jìn)行驅(qū)蟲。

9.禁止飼養(yǎng)犬、貓，撲殺老鼠。

（六）討論

1.仔豬偽狂犬病近來病例發(fā)生較多，又極易繼發(fā)其他疾病。從本次疫情來看，盡早診斷、及時(shí)緊急防疫是控制本病最關(guān)鍵的措施。因此，一旦有疫情發(fā)生，盡早進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室鑒別診斷，以指導(dǎo)臨床，撲滅疫病。

2.大腸桿菌病是臨床上最常見的一種疾病，其本身可單獨(dú)發(fā)生，也可因其它疾病引起繼發(fā)感染。作好同型菌株的大腸桿菌防疫，是控制本病的關(guān)鍵。

3.仔豬的長途運(yùn)輸，是引起許多疫病的誘因。由于高致病性藍(lán)耳病引起許多地方的豬發(fā)病而死亡，導(dǎo)致仔豬的長途調(diào)運(yùn)，也讓現(xiàn)在的疫病更加復(fù)雜、多變。