豬瘟、圓環(huán)病毒病和霉菌毒素性腸炎混合感染的診斷

王麗萍 李克鑫 李克欽 牛緒東 張?jiān)?劉建柱

1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院

2.山東德信生物科技集團(tuán)

3.濟(jì)南鑫寶星動(dòng)物藥業(yè)有限公司

豬瘟（CSF）是由黃病毒科豬瘟病毒屬豬瘟病毒（CSFV）感染引起的一種急性、熱性、接觸性傳染病，具有高傳染性和致死性，是威脅養(yǎng)豬業(yè)的主要傳染病之一。豬圓環(huán)病毒病（PCVD）是由圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬的豬圓環(huán)病毒2 型（PCV2）感染引起的多個(gè)與之相關(guān)疾病的統(tǒng)稱(chēng)。2018年4月23日，臨沂市某養(yǎng)豬戶(hù)帶一頭病死豬來(lái)本院就診，經(jīng)診斷確診為豬瘟、圓環(huán)病毒和霉菌性腸炎混合感染，現(xiàn)報(bào)告如下。

（一）發(fā)病情況及癥狀

4月8日，畜主購(gòu)買(mǎi)一批豬苗，30 kg左右豬苗20頭，10 kg左右豬苗40頭，并注射了豬瘟疫苗，自購(gòu)買(mǎi)之日起2～3 d后仔豬開(kāi)始發(fā)病，輕度咳嗽，重度氣喘，個(gè)別伴有嘔吐現(xiàn)象；體溫40.5℃～41.0℃；病豬皮膚發(fā)白，貧血；耳朵，腹部，頸部皮膚發(fā)紫；食欲減退或廢絕。病程12 d中所用藥物有頭孢、替米考星、氟苯尼考、板藍(lán)根、電解多維、雙黃連注射液、金岑芍注射液、茵陳等。所用藥物均無(wú)效。直至4月23日來(lái)本院就診時(shí)，60頭豬幾乎全部發(fā)病，其中60斤左右豬苗已經(jīng)死亡6頭，死亡率30%(6/20)，10 kg左右豬苗死亡3頭，死亡率7.5%(3/40)，總死亡率為15%(9/60)。

（二）剖檢變化

膝上淋巴結(jié)腫大；腹股溝淋巴結(jié)水腫并伴有輕度出血，胸前淋巴結(jié)壞死，胸上淋巴結(jié)腫大，肝門(mén)淋巴結(jié)水樣腫，胃門(mén)淋巴結(jié)水樣腫肺門(mén)淋巴結(jié)腫大。可見(jiàn)大量心包積液，為渾濁液體，心臟表面有纖維素性滲出物，心內(nèi)膜出血；肝臟局部出血，脾臟未見(jiàn)明顯變化。胸腔有纖維素性滲出物，肺嚴(yán)重出血壞死，肉樣變、胰樣變，增生，有纖維蛋白滲出物，氣管內(nèi)有少量淡黃色黏液，支氣管內(nèi)可見(jiàn)多量泡沫狀液體。胰有出血點(diǎn)小腸內(nèi)容物血腥味，腸道纖維蛋白滲出，賁門(mén)腺區(qū)出血并伴有輕度水腫，胃底腺區(qū)潮紅，盲腸粘膜出血，回腸、結(jié)腸出血，膀胱未見(jiàn)明顯變化，腎貧血，積尿，表面有肉眼可見(jiàn)白斑。

膝上淋巴結(jié)腫大

腹股溝淋巴結(jié)腫大

心包積液與滲出物

心內(nèi)膜出血

（三）實(shí)驗(yàn)室診斷

對(duì)剖檢病豬的扁桃體、淋巴結(jié)、脾臟、肺部組織等進(jìn)行無(wú)菌采樣，剪取適量的病料組織加入適量滅菌的PBS溶液并使用組織勻漿機(jī)研磨成勻漿，然后將研磨好的病料組織勻漿通過(guò)離心機(jī)9 000 r/ min 離心4 min后，取上清液備用。使用北京全式金生物科技有限公司Easy Pure Viral DNA/RNA Kit試劑盒提取病毒DNA/RNA，進(jìn)行豬瘟病毒、

圖2-1 （RT）PCR檢測(cè)結(jié)果

（四）結(jié)論

根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀和病理變化，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，最終確診該養(yǎng)豬場(chǎng)發(fā)生圓環(huán)病毒病和豬瘟混合感染，并伴隨霉菌毒素性腸炎。

（五）討論

通過(guò)診斷結(jié)果可以看出，該疫情是因?yàn)樨i圓環(huán)病毒并發(fā)豬瘟造成的。由于注射豬瘟細(xì)胞苗4 d后就能起到保護(hù)作用，畜主來(lái)診時(shí)已注射疫苗接近兩周，但豬群仍發(fā)病，可能與PCV參與有關(guān)。因PCV能破壞機(jī)體的免疫系統(tǒng)，進(jìn)而影響豬瘟疫苗的免疫效果。豬患圓環(huán)病毒病時(shí)，淋巴結(jié)可腫大至十幾倍，巨嗜細(xì)胞的數(shù)量顯著增加，侵占了原來(lái)的淋巴細(xì)胞的位置，導(dǎo)致淋巴細(xì)胞在淋巴組織當(dāng)中的含量有很明顯的減少。由于淋巴細(xì)胞的位置被大量占用，缺少淋巴細(xì)胞的豬便產(chǎn)生了豬藍(lán)耳病毒、偽狂犬病病毒、豬圓環(huán)病毒2型（RT）PCR檢測(cè)。飼料交由百奧明飼料添加劑（中國(guó)）有限公司進(jìn)行霉菌毒素檢測(cè)。

經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，豬瘟病毒和圓環(huán)病毒2型的檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性（圖2-1），飼料中含有多種霉菌毒素，包括嘔吐毒素371μg/kg，15～乙酰基嘔吐毒素100μg/kg，伏馬毒素 B1/B2/B3分別 為 855μg/kg，242μg/kg，121μg/kg.玉米赤霉烯酮74μg/kg。嚴(yán)重的免疫抑制。抑制豬免疫應(yīng)答產(chǎn)生，導(dǎo)致在進(jìn)行豬瘟疫苗免疫時(shí)，無(wú)CSFV抗體產(chǎn)生或只產(chǎn)生低水平抗體，增加臨床上發(fā)生非典型豬瘟及豬瘟免疫失敗的風(fēng)險(xiǎn)。

霉菌毒素達(dá)到豬體受損害的閾值很低，很少的量即可引發(fā)多種嚴(yán)重疾病。此病例中，飼料含多種霉菌毒素，共同作用下產(chǎn)生的毒害作用遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于單一霉菌毒素所造成的機(jī)體損傷。世界各地的養(yǎng)豬場(chǎng)中，幾乎所有的豬傳染病的發(fā)生都是由霉菌毒素間接造成的。動(dòng)物飼料中僅存在少量霉菌毒素時(shí)，會(huì)降低疫苗對(duì)使用的免疫效果。因?yàn)槎舅氐牟煌麄儠?huì)影響免疫反應(yīng)以及抑制其細(xì)胞因子的合成行動(dòng)。霉菌毒素的特異性免疫反應(yīng)影響了動(dòng)物，使疫苗免疫破裂導(dǎo)致疾病的發(fā)生。霉菌毒素不僅會(huì)使飼料中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)流失，飼料發(fā)熱、變質(zhì)，還會(huì)面干擾豬的胃腸道的正常生理機(jī)能，通常會(huì)表現(xiàn)為豬的生殖周期紊亂，采食量下降，生長(zhǎng)緩慢，破壞動(dòng)物的免疫系統(tǒng)，為各種病原菌的侵入提供機(jī)會(huì)。

針對(duì)該病例的處理，首先建議讓畜主隔離病豬并且盡快淘汰嚴(yán)重者，再使用三氯異氰尿酸鈉消毒劑進(jìn)行全面帶豬消毒。全豬群立刻緊急倍量注射疫苗，舍棄含霉菌毒素飼料，選用安全營(yíng)養(yǎng)的飼料，可以在飼料中加入25%的VC，可以達(dá)到抗病毒和提高免疫力的作用。

由于這兩種疾病都屬于病毒性疾病，所以臨床上并沒(méi)有針對(duì)此兩種疾病的特效藥，目前針對(duì)這兩種疾病還是以預(yù)防為基礎(chǔ)手段，注射相關(guān)類(lèi)疫苗，保持養(yǎng)殖場(chǎng)環(huán)境的衛(wèi)生，病死豬在指定地點(diǎn)深埋，凡是病豬污染過(guò)的圈舍、用具、地面、車(chē)船以及糞水吃剩的飼料都要充分消毒。豬瘟病毒可與多種病原微生物混合感染。一旦感染，將無(wú)法醫(yī)治，所以預(yù)防才是這治療兩種病的最佳途徑。為防止蟲(chóng)鼠等動(dòng)物機(jī)械性帶毒并對(duì)病毒進(jìn)行傳播，養(yǎng)殖戶(hù)應(yīng)當(dāng)堅(jiān)持做好防暑和驅(qū)蟲(chóng)滅鼠工作，盡可能減少傳染源，如果飼養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有可疑豬只需要及時(shí)隔離，切斷傳播途徑，防止疫情發(fā)展擴(kuò)大到不可控制的地步，造成無(wú)法挽回的嚴(yán)重后果。

豬瘟，圓環(huán)病毒病，霉菌毒素三種因素都造成了不同程度的免疫抑制，所以病程中所用藥物及疫苗均無(wú)明顯效用。在預(yù)防傳染病的同時(shí)還要預(yù)先提防霉菌毒素的侵害，多給豬飼喂青料，注重維生素的補(bǔ)充，做到營(yíng)養(yǎng)均衡，使豬的體格增強(qiáng)，變得健壯，如此免疫力也會(huì)得到提高，增強(qiáng)抗病能力，從各個(gè)方面保證豬群的健康生長(zhǎng)及繁育。