補(bǔ)腎強(qiáng)脊顆粒聯(lián)合塞來昔布對強(qiáng)直性脊柱炎成纖維細(xì)胞抗骨化作用及BMP/Smad信號通路的影響*

勾志靜，耿 良

1.河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院(洛陽 471000)，2.鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院(鄭州 450008)

主題詞 脊柱炎，強(qiáng)直性/中西醫(yī)結(jié)合療法 @補(bǔ)腎強(qiáng)脊顆粒 成纖維細(xì)胞

強(qiáng)直性脊柱炎(AS)是以中軸關(guān)節(jié)炎癥為主，與感染、免疫障礙、遺傳相關(guān)的慢性疾病，發(fā)病機(jī)制不明[1]。本病起病較為隱匿，病史纏綿難愈，致殘率較高，臨床表現(xiàn)為腰背疼痛，活動不利，脊柱變形、僵硬，畸形，基至出現(xiàn)竹節(jié)樣變，骶髂關(guān)節(jié)及外周關(guān)節(jié)面融合，對患者生活質(zhì)量產(chǎn)生嚴(yán)重影響。在我國，該病發(fā)病率高達(dá)0.3%，青年人為高發(fā)人群[2]。有學(xué)者活檢AS患者骨組織，結(jié)果發(fā)現(xiàn)AS患者成骨細(xì)胞的成骨能力普遍下降，由此推測骨形成減少是AS的主要原因[3]。骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)是骨生長啟動因子，促進(jìn)成骨細(xì)胞分化，參與成骨，有研究顯示BMP能誘導(dǎo)血管、肌肉、間充質(zhì)及纖維細(xì)胞，轉(zhuǎn)化骨系細(xì)胞[3]。Smad是細(xì)胞內(nèi)信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白,把TGF-與其受體結(jié)合，產(chǎn)生信號傳導(dǎo)，細(xì)胞外因子進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子，促進(jìn)細(xì)胞的定向分化[4]。有研究認(rèn)為BMP/Smad信號通路是骨形成的重要信號傳導(dǎo)通路[5]。這就為探索抗骨化方法提供重要線索。AS是難治醫(yī)學(xué)問題，目前仍缺乏有效理想的方式，尋求安全有效的治療是AS醫(yī)生研究的重點。西醫(yī)治療主要有患者教育、功能鍛煉、藥物及關(guān)節(jié)置換術(shù)等，但療效欠佳。中醫(yī)治療該病有一定優(yōu)勢，本研究主要探討補(bǔ)腎強(qiáng)脊顆粒聯(lián)合塞來昔布對強(qiáng)直性脊柱炎(AS)成纖維細(xì)胞的抗骨化作用，并探討兩藥聯(lián)用對BMP/Smad信號通路的影響，以期為相關(guān)患者提供參考。

資料與方法

1 一般資料 選取我院疼痛科2015年5月至2017年5月收治AS患者100例，均處于疾病的活動期。采用隨機(jī)數(shù)字表法分為兩組，每組50例。對照組：男性27例，女性23例；年齡20～60歲，平均年齡(32.64±3.81)歲；病程1.5～12年，平均(6.52±2.43)年；大學(xué)及以上學(xué)歷15例，高中20例，初中10例，小學(xué)5例，文盲0例。觀察組：男性28例，女性22例；年齡21～60歲，平均年齡(31.92±4.63)歲；病程2～13年，平均(6.85±2.61)年；大學(xué)及以上學(xué)歷16例，高中17例，初中13例，小學(xué)3例，文盲1例。兩組一般資料無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。本試驗已獲本院倫理委員會批準(zhǔn)，并且患者及家屬了解方案，并簽署知情同意書。

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合紐約標(biāo)準(zhǔn)(1984年)[6]，病程至少3個月，活動時疼痛緩解；腰活動受限；胸廊的擴(kuò)展范圍縮小；雙側(cè)的骶髖關(guān)節(jié)炎在II-IV級間，單側(cè)骶髖關(guān)節(jié)炎在III-IV級間。0級，表現(xiàn)正常；I級,懷疑有變化；II級，存在輕度的異常；III級，存在明顯異常；IV級，存在嚴(yán)重異常，表現(xiàn)為完全性關(guān)節(jié)強(qiáng)直；年齡18歲以上；資料完整；臨床依從性好。排除標(biāo)準(zhǔn):不符合上述臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)者；合并嚴(yán)重心、腦、肝腎等臟器功能不全及造血系統(tǒng)障礙者；做過相關(guān)治療或參加其他藥物臨床試驗而影響觀測結(jié)果者；有智力、認(rèn)知、精神障礙患者；資料不全、不按規(guī)定用藥者；有胃腸道病史者；妊娠或哺乳期者；合并腎上腺皮質(zhì)激素用藥者；皮膚過敏者均以排除。

2 治療方法 對照組：口服塞來昔布膠囊(批號：20141206)100 mg/次，2次/d。觀察組：在對照組基礎(chǔ)上聯(lián)用補(bǔ)腎強(qiáng)脊顆粒：雷公藤、淫羊藿、巴戟天20 g，熟地、當(dāng)歸、杜仲、赤芍、川斷、懷牛膝、細(xì)辛各10 g，甘草6 g，(批號： 20141121)，10 g/次，2 次/d。若患者煩躁易怒，舌紅，脈弦，為肝陽上亢型；可加菊花、枸杞子、山藥等，若患者腰膝酸軟、舌質(zhì)淡、脈沉細(xì)，為腎精虧虛型，可加生地、麥冬、龜板等；若形體肥胖、舌質(zhì)淡滑、脈濡細(xì)，為痰濕蒙閉型，可加半夏、膽南星、陳皮、枳實；若腰部僵硬、不能活動，關(guān)節(jié)腫痛、身重發(fā)熱，口干口苦，小便黃赤，舌紅苔黃膩，脈弦數(shù)，為濕熱內(nèi)郁，可加淡豆豉、梔子、茵陳蒿、龍膽草；若腰骶部冷痛，骨節(jié)酸痛，得溫則舒，身重，陰雨天加劇，口淡，不渴，舌淡紅，苔白，脈弦緊；為風(fēng)寒侵襲，可加桂枝、麻黃、附子、肉桂；兩組均連續(xù)用藥6個月。

3 療效評價標(biāo)準(zhǔn) 抗骨化療效指標(biāo)：Bath強(qiáng)直性脊柱炎病情活動指數(shù)(BASDAI)[7]量表、強(qiáng)直性脊柱炎功能指數(shù)(BASFI)[7]量表、疼痛采用10cm的視覺模擬評分(VAS)、晨僵時間、病人及研究者4級總體評價。脊柱活動度檢測：Schober試驗、踝間距、擴(kuò)胸度、指地距、枕墻距。SPARCC評分評估：行骶髂關(guān)節(jié)MRI評分。蛋白印跡法檢測，嚴(yán)格按試劑盒說明書操作進(jìn)行。

4 統(tǒng)計學(xué)方法 本研究應(yīng)用SPSS22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行處理，計量資料采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間采用t檢驗，計數(shù)資料采用χ2檢驗，等級資料采用F檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

1 兩組臨床療效比較 治療前兩組臨床療效各指標(biāo)均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，治療后兩組臨床療效各指標(biāo)均較前顯著改善(P<0.05)，且觀察組在BASDAI積分(13.29±5.13)分、BADFI積分(21.48±6.47)分、疼痛積分(1.56±0.54)、晨僵時間(18.57±7.93)均較對照組顯著改善(P<0.05)，見表1。

2 兩組抗骨化療效 兩組治療前后各積分項、觀察項均有降低。觀察組治療后1個月、3個月、6個月的各項積分改善情況均優(yōu)于對照組(均P<0.05)，見表1。

表1 兩組抗骨化療效指標(biāo)比較(分)

續(xù)表

組 別時間晨僵時間病人4級總體評價研究者4級總體評價觀察組治療前48.97±11.282.79±0.042.77±0.05 治療1個月31.34±8.73△2.21±0.03△2.35±0.04△ 治療3個月22.86±9.36△1.68±0.04△1.71±0.05△ 治療6個月18.57±7.93▲1.27±0.06△1.31±0.04▲對照組治療前49.13±12.092.91±0.062.82±0.04 治療1個月42.39±9.61△2.34±0.05△2.43±0.03△ 治療3個月28.45±8.49△1.85±0.03△1.92±0.03△ 治療6個月22.67±8.74△▲1.53±0.02△1.46±0.03▲

注：與本組治療前比較，△P<0.05；與觀察組比較，▲P<0.05

3 兩組脊柱活動度比較 治療前，兩組脊柱活動度各指標(biāo)均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，治療后，兩組Schober試驗、擴(kuò)胸度、指地距均較前顯著改善(P<0.05)，且觀察組在Schober試驗(4.42±1.14)較對照組(3.84±1.21)顯著改善(P<0.05)，見表2。

表2 兩組脊柱活動度比較

注：與本組治療前比較，△P<0.05；與觀察組比較，▲P<0.05

4 兩組SPARCC評分比較 治療前兩組SPARCC評分無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。治療后觀察組SPARCC評分(6.27±3.26)分，對照組(7.35±2.45)分均較前顯著改善(P<0.05),見表3。

表3 兩組SPARCC評分比較(分)

注：與本組治療前比較，△P<0.05；與對照組比較，▲P<0.05

5 兩組BMP受體水平比較 治療前兩組BMP受體水平無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，治療后兩組BMP受體水平均較前顯著改善(P<0.05),且觀察組BMP-II受體水平顯著降低于對照組(P<0.05)，見表4。

6 兩組Smad水平比較 治療前，兩組Smad水平無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。治療后兩組Smad水平均較前顯著改善(P<0.05),且觀察組Smad1水平(0.806±0.048)、Smad5水平(0.413±0.078)顯著降低于對照組(P<0.05)，見表5。

表4 兩組BMP受體水平比較

注：與本組治療前比較，△P<0.05；與觀察組比較，▲P<0.05

表5 兩組Smad水平比較

注：與本組治療前比較，△P<0.05；與觀察組比較，▲P<0.05

討 論

AS是一種原因尚未明確，侵犯以骶髂、脊柱為主的中軸關(guān)節(jié)，慢性、炎性、全身性病[8]。表現(xiàn)為腰背僵硬、疼痛、活動受限、關(guān)節(jié)炎等，還可累及肺、腎、心等器官。歸屬于祖國醫(yī)學(xué)“骨痹”、“竹節(jié)風(fēng)”、“大僂”、“痹癥”、“龜背風(fēng)”等[9]。《素問·痹論》云：“腎痹者，善脹，尻以代踵，脊以代頭”?！秲?nèi)經(jīng)》曰：“大僂，身體俯曲，不能直立，背脊彎曲”。《素問》曰：“風(fēng)寒濕三氣雜至，合而為痹也”。古醫(yī)學(xué)者常認(rèn)為AS為本虛標(biāo)實之癥，腎氣不足乃本，風(fēng)寒濕等外邪乃標(biāo)[10]。王莉[11]發(fā)現(xiàn)AS患者以腎陽虛為主，寒邪入侵為輔，影響筋骨滋養(yǎng)而發(fā)病。宋俊垚[12]認(rèn)為腎精虧虛貫穿AS始終。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)表明AS骨化主要累及脊柱及關(guān)節(jié)附近的結(jié)締組織，其主要成分是成纖維細(xì)胞[13]。有研究顯示AS患者棘上韌帶及髖關(guān)節(jié)成纖維細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，具備成骨性[14]，因此,可認(rèn)為骨化的靶細(xì)胞是成纖維細(xì)胞。

本次研究中加上補(bǔ)腎強(qiáng)脊方藥，方中雷公藤,歸肝腎經(jīng)，祛風(fēng)除濕，活血通絡(luò)，現(xiàn)代藥理學(xué)具有抗炎、提高免疫力的作用；熟地,歸肝腎經(jīng)；淫羊藿、巴戟天,補(bǔ)命門、補(bǔ)腎壯陽、強(qiáng)筋骨,杜仲、川斷,補(bǔ)益肝腎、強(qiáng)筋壯骨；懷牛膝,氣味苦酸平，主治寒濕痿痹、膝痛，具有提高抵抗力的作用，諸藥合用，相得益彰，可見補(bǔ)腎強(qiáng)脊之功效。本次研究結(jié)果顯示,觀察組在BASDAI積分、BADFI積分、疼痛積分、晨僵時間均較對照組顯著改善；表明補(bǔ)腎強(qiáng)脊顆粒聯(lián)合塞來昔布具有抗骨化作用。并且，補(bǔ)腎強(qiáng)脊顆粒聯(lián)合塞來昔布發(fā)揮抗骨化作用，可能通過抑制BMP/Smad信號通路的活化。