利洋1號和利洋2號南美白對蝦仔蝦耐低氧能力研究

■ 單保黨、胡壯濤、蔡娟、丁玉龍、黎秋云

(廣州金水動物保健品有限公司，廣州 510510 )

南美白對蝦（Penaenus vannamei）屬于節(jié)肢動物門（Arthropoda）、甲殼綱（crustacean）、十足目（decapod）、對蝦屬（shrimp genus）白對蝦（White shrimp），也有人叫做凡納濱對蝦（Litopenaeus）、白肢蝦（White-lag shrimp）。它與斑節(jié)對蝦、中國對蝦并列稱為世界產(chǎn)量最高的三大對蝦。南美白對蝦因其肉質(zhì)鮮嫩、生長迅速、產(chǎn)量高、抗病力強而逐漸成為我國沿海主要養(yǎng)殖品種之一，且深受廣大人們?nèi)罕姷南矏?。目前國?nèi)對蝦養(yǎng)殖現(xiàn)狀是種蝦差、種苗差、養(yǎng)殖過程病害多、輪作障礙等。種苗的重要性不言而喻。如何培養(yǎng)出培養(yǎng)出一批抗病性強，耐低氧能力強，生長速度快的蝦苗？嚴格的親蝦選育技術(shù)及優(yōu)良的育苗技術(shù)是培育優(yōu)良蝦苗的關鍵。耐低氧能力是評價蝦苗好壞的指標之一，而蝦苗耗氧率、窒息點的高低均能反映耐低氧能力強弱。目前國內(nèi)外耗氧率、窒息點等相關研究主要集中在溫度、鹽度、pH、規(guī)格、晝夜變化等，研究對象主要集中在貝類、魚類有斑點叉尾鮰魚苗、鯔幼魚、刀鱭幼魚、長鰭籃子魚幼魚、布氏鯛幼魚、羅非魚等；蝦類主要有日本對蝦、羅氏沼蝦、中國明對蝦、南美白對蝦等。而不同品系間的南美白對蝦仔蝦耗氧率、窒息點的相關研究較少。本試驗以利洋1號和利洋2號南美白對蝦仔蝦為研究對象，研究其瞬時耗氧速率、瞬時耗氧量、窒息點、窒息臨界點以及昏迷臨界點等耐低氧指標，以期為選育耐低氧品系南美白對蝦種苗及育苗工作提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗對象與條件

試驗用南美白對蝦來自于利洋1號和利洋2號兩個品系p7-p8與p12-p13階段的仔蝦，試驗用水經(jīng)過化學試劑消毒、曝氣、沙濾、沉淀、陶氏過濾器設備處理，二次消毒后使用。選取正常發(fā)育的仔蝦暫養(yǎng)幾小時后開始試驗。試驗中定期使用Hach溶氧儀監(jiān)測溶解氧，試驗3次重復，結(jié)果取平均值。試驗水溫27.0±0.5℃，水體20L。

1.2 試驗方法

試驗過程中仔細觀察蝦苗的活動狀況，按時抽取水樣進行測定，定時記錄水體的溶解氧，當?shù)谝恢晃r昏迷作為昏迷臨界值（Coma Threshold-CT），當?shù)谝恢晃r死亡時作為窒息臨界值（Suffocating Threshold-ST），50%蝦死亡時水體的含氧量作為窒息點（Suffocating point-Sp,mg/L）。當蝦苗靜臥瓶底，僅附肢和尾部間歇運動即視為處于昏迷狀態(tài)，當觸碰無反應時,則視為窒息死亡。定期測觀察仔蝦并且判斷仔蝦存活狀況，并定時記錄水體溶解氧以及時間。記錄對應的昏迷臨界值，窒息臨界點和窒息點。按照以上公式換算出瞬時耗氧量，以及瞬時耗氧率。最后擬合瞬時耗氧率和時間的曲線，瞬時耗氧量和瞬時耗氧率的關系曲線，以及瞬時耗氧率和溶解氧的關系曲線。

1.3 試驗公式

試驗結(jié)束后用濾紙吸干仔蝦體表水分，進行稱重以及量體長，耗氧量H按下面公式計算：

H=（C1-C0）/（t*n）★1000★V, 單位（mg/h·尾）

式中C1是結(jié)束時溶解氧（mg/L），C0是初始溶解氧（mg/L），t為期間溶解氧變化所需時間（h），n為一個玻璃瓶中蝦的數(shù)量（尾），V為玻璃瓶容量單位L。

耗氧率v=H / w, 單位（mg/h·g），式中w為每尾蝦平均重量（g）。

2 結(jié)果與討論

2.1 利洋仔蝦瞬時耗氧速率與時間（t）的關系

利洋1號瞬時耗氧率與時間的關系結(jié)果見圖1圖2，由圖1-圖2可知，利洋1號和利洋2號仔蝦瞬時耗氧率隨著時間的增加呈指數(shù)下降。擬合方程分別是：v1= 0.27524exp（-0.1761t）+0.03862, R2=0.9834和v2=0.031+0.277exp（-0.151t）, R2=0.98017。

2.2 利洋仔蝦瞬時耗氧率與瞬時耗氧量的關系

利洋1號瞬時耗氧量與瞬時耗氧率的關系結(jié)果見圖3圖4，由圖3～圖4可知，利洋1號和利洋2號仔蝦瞬時耗氧量和瞬時耗氧率呈顯著正比關系（p＜0.001）。利洋1號和利洋2號仔蝦平均耗氧率分別為0.169mg/h·g和0.163mg/h·g。以及平均耗氧量為 0.00520mg /h·尾和0.00280mg/h·尾。

2.3 利洋仔蝦瞬時耗氧率與溶解氧（DO）的關系

利洋1號p12-p13階段仔蝦的耗氧率和溶氧的關系結(jié)果見圖5圖6。由圖5～圖6可知，仔蝦耗氧率和溶氧的方程分別為v1= 0.0415x+0.0603, R2=0.9024和v2=0.0379x+0.0807, R2=0.8296。p12-p13階段利洋仔蝦的耗氧率隨溶解氧含量降低而降低，屬于順應型呼吸類型。Fry等人認為順應型呼吸型是溶氧越低瞬時耗氧率越低。張磊磊發(fā)現(xiàn)太湖一號和日本對蝦雜交仔蝦屬于順應型呼吸。崔瑩等測定的南美白對蝦（3.14～3.27cm）瞬時耗氧率與溶解氧成反比，不屬于順應型呼吸型。以上研究說明，同一物種的不同試驗階段，瞬時耗氧率與溶氧的變化情況不同。順應型呼吸可能是仔蝦對低氧的一種適應，即通過減少瞬時的耗氧率來阻止進一步的氧氣的減少的一種環(huán)境突變的適應策略。

圖1 利洋1號瞬時耗氧率與時間的關系

圖2 利洋2號瞬時耗氧率與時間的關系

圖3 利洋1號瞬時耗氧量與瞬時耗氧率的關系

圖4 利洋2號瞬時耗氧量和瞬時耗氧率的關系

圖5 利洋1號p12-p13階段仔蝦的耗氧率和溶氧的關系

圖6 利洋2號p12-p13階段仔蝦的耗氧率和溶氧的關系

2.4 仔蝦的昏迷臨界點、窒息臨界點與窒息點的差異

利洋1號與利洋2號p7-p8階段仔蝦的昏迷臨界點（CT）、窒息臨界點（SP）以及窒息點（SP）結(jié)果見表1。由表1可知在p7-p8階段，大約經(jīng)過6h左右，利洋1號和利洋2號仔蝦第一尾仔蝦昏迷時靜伏水底。昏迷點分別是1.43mg/L和1.40mg/L。接著過了大概0.5h至2h第一尾蝦開始死亡，此時窒息臨界點分別為1.28mg/L和1.03mg/L。在7～8h后，水體溶氧分別達到0.58mg/L和0.48mg/L時半數(shù)蝦死亡達到窒息點。利洋1號比利洋2號窒息點高，利洋2號更耐低氧。

利洋1號與利洋2號p12-p13階段仔蝦的昏迷臨界點（CT）、窒息臨界點（SP）以及窒息點（SP）結(jié)果見表2。由表2可知在p12-p13階段，利洋1號和利洋2號仔蝦經(jīng)過6時30分左右仔蝦開始靜伏水底開始昏迷，昏迷點分別是1.5mg/L和1.65 mg/L。約7h后，兩品系仔蝦窒息點分別為0.795mg/L和0.695mg/L。利洋1號窒息點比利洋2號窒息點高，表明利洋2號更耐低氧。

3 討論與分析

3.1 利洋1號和利洋2號仔蝦耗氧量、耗氧率、昏迷點及窒息點差異分析

本試驗發(fā)現(xiàn)，利洋1號和利洋2號仔蝦瞬時耗氧量和瞬時耗氧率呈顯著正比關系（p＜0.001）。窒息點的高低與耗氧率（耗氧量）有正相關性，即高耗氧率（高耗氧量）導致仔蝦窒息點高，低耗氧率（低耗氧量）導致仔蝦窒息點低。利洋1號和利洋2號仔蝦由昏迷點達到窒息點的時間約7～8h。

研究還發(fā)現(xiàn)利洋2號仔蝦（p12-p13階段）平均耗氧率、平均耗氧量均低于利洋1號平均耗氧率、平均耗氧量。利洋1號和利洋2號仔蝦（p12-p13階段）平均耗氧率分別為0.169 mg/h·g和0.163mg/h·g；平均耗氧量分別為0.00520 mg/h·尾和0.00285 mg/h·尾。表明了利洋2號仔蝦耐低氧能力強于1號仔蝦耐低氧能力。

較高的平均耗氧率意味著會加速消耗水體溶氧，耗氧量增大，導致達到窒息點的時間相對于低的耗氧率要更快，即不耐低氧。為何不良水體環(huán)境如溫度不適、鹽度不適、pH不當、水體有機質(zhì)濃度過高等，均能加速到達窒息點而死亡？因為不良環(huán)境導致高的耗氧率，而高的耗氧率導致蝦苗應激增大，其活動增加，有更多的能量消耗，其新陳代謝加快，水體溶解氧量快速變少，若氧氣不足容易蝦缺氧死亡。同時新陳代謝加快還會使得排泄物增多，水質(zhì)變差會更快，產(chǎn)生惡性循環(huán)。反之，低的耗氧率意味著更耐低氧。

表1 利洋1號與利洋2號p7-p8階段仔蝦的昏迷臨界點(CT)、窒息臨界點(ST)以及窒息點(SP)

3.2 利洋仔蝦在不同發(fā)育階段昏迷點、窒息點及安全溶氧濃度差異分析

研究發(fā)現(xiàn)不同發(fā)育階段其窒息點存在差異，p7-p8階段利洋1號和利洋2號仔蝦，昏迷點分別是1.43mg/L和1.40mg/L。而在p12-p13階段，利洋1號和利洋2號仔蝦昏迷點分別為1.50 mg/L和1.65mg/L。較早發(fā)育階段的仔蝦（p7-p8階段）耐低氧能力高于較晚發(fā)育階段的仔蝦（p12-p13階段）耐低氧能力，其規(guī)格越大耐低氧能力越低，這與陳琴研究南美白對蝦研究結(jié)果一致。利洋1號在p7-p8階段仔蝦的安全溶氧濃度大于1.43 mg/L，利洋2號p7-p8階段仔蝦的安全溶氧濃度大于1.40 mg/L。在p12-p13階段仔蝦，利洋1號的安全濃度大于1.5mg/L，利洋2號大于1.65mg/L。顯然只要溶氧不低于1.65mg/L利洋兩種品系仔蝦均處于安全狀態(tài)。

表2 利洋1號與利洋2號p12-p13階段仔蝦的昏迷臨界點（CT）、窒息臨界點(ST)以及窒息點(SP)

3.3 利洋仔蝦和已報道南美白對蝦仔蝦耗氧率、窒息點的差異分析

本試驗發(fā)現(xiàn)利洋1號和利洋2號仔蝦都屬于順應型呼吸類型，即溶氧量越低耗氧率越低。利洋仔蝦具有耐低氧能力強，可能是它對某種不良環(huán)境變化的一種適應，即減少自身耗氧量以及耗氧率來應對水體缺氧環(huán)境。利洋1號p12-p13階段仔蝦的窒息點為0.795mg/L，利洋2號在該階段仔蝦的窒息點為0.695mg/L，均低于陳琴已報道值（南美白對蝦p12-p13階段仔蝦的窒息點為0.947mg/L）。對比發(fā)現(xiàn)利洋1號和利洋2號苗屬于低耗氧品系，具有較強耐低氧能力。

3.4 利洋蝦苗特色

首先，利洋種蝦是一代種蝦。在此基礎上經(jīng)過長期的人工育種及基因選育技術(shù)的篩選，蝦苗的生長速度快、抗病能力強、耐低氧能力強。其次管理體系嚴格，如，利洋的親蝦幼體均經(jīng)過PCR技術(shù)進行包括WSSV、BPV、IHHNV、TSV、HPV、YHV的病毒檢測。及對蝦苗的全程質(zhì)量監(jiān)督，每一批蝦苗經(jīng)過層層檢測合格后方可出苗。最后利洋育苗技術(shù)的成熟，全程使用天然餌料，合理飼喂營養(yǎng)全面的多種植物性活餌以及動物活餌，蝦苗胃腸飽滿，富含脂肪滴，身體健壯，抗應激能力強。尤其是利洋在國內(nèi)首創(chuàng)的生態(tài)育苗體系，整個育苗過程不使用抗生素，確保優(yōu)質(zhì)蝦苗?？傊?，利洋以正確的養(yǎng)殖理念為前提，始終堅持以優(yōu)秀的種蝦為戰(zhàn)略制高點、加之以嚴格的管理體系、以及先進的育苗技術(shù)為支撐。才得以保證每一批的蝦苗質(zhì)量優(yōu)秀，最終幫助養(yǎng)殖戶養(yǎng)成高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、養(yǎng)殖周期短的大規(guī)格蝦，實現(xiàn)雙贏的局面。（參考文獻略）