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    實時熒光定量PCR在HPV檢測中的應(yīng)用研究

    2018-09-14 07:05:04王景芬
    關(guān)鍵詞:敏感度雜交定量

    王景芬

    (赤峰市松山區(qū)婦幼保健所檢驗科,內(nèi)蒙古 赤峰 024005)

    人乳頭瘤病毒(HPV)是與女性患者宮頸病變甚至癌變直接相關(guān)的一類病毒,持續(xù)感染會增加宮頸癌發(fā)生率[1],HPV感染患者早期多無特異性表現(xiàn),因而實時早期篩查的價值較高。目前臨床常用的篩查手段有實時熒光定量PCR、第二代雜交捕獲法、酶切信號放大法等,其中實時熒光定量PCR在HPV檢測中的應(yīng)用愈發(fā)廣泛,本次研究就其在HPV檢測中的應(yīng)用進行研究分析,為臨床檢驗工作提供部分參考。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    選取2016年6月~2018年2月我院接診的宮頸病變患者180例作為研究對象,年齡25~50歲,平均(38.59±4.32)歲,均未合并其他生殖系統(tǒng)疾病者,且就本次研究簽署知情同意書。按照患者的就診編號將其隨機分為觀察組與對照組,各90例,兩組患者一般資料對比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

    1.2 方法

    對所有患者均實施陰道鏡病理學(xué)活檢后實施HPV DNA檢測。

    1.2.1 對照組

    給予雜交捕獲Ⅱ代法檢測,采用試劑盒對待檢標(biāo)本進行解鏈、雜交,獲取的雜交鏈與特異性抗體結(jié)合后進行信號放大與發(fā)光處理,對獲取的光強度對DNA-RNA雜交鏈含量進行定量檢測。

    1.2.2 觀察組

    給予熒光定量PCR檢測,采用HPV核酸分型檢測試劑盒,對宮頸細(xì)胞進行HPV DAN檢測,將特異性引物與探針與靶序列結(jié)合,同時在Taq酶引導(dǎo)下復(fù)制,水解探針后形成FAM熒光基團,其與DNA復(fù)制合成情況相關(guān),一條DNA鏈的合成與一次熒光相對應(yīng),一次進行DNA復(fù)制的定量檢測。

    1.3 觀察指標(biāo)

    對兩組患者的HPV陽性檢出率、特異度及敏感度進行比較分析,其中特異度=真陰性/(真陰性+假陽性)×100%;敏感度=真陽性/(真陽性+假陰性)×100%[2]。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

    采用SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行處理,計數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)(%)表示,采用x2檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié) 果

    2.1 兩組患者HPV,DNA陽性檢出率比較

    兩組患者HPV,DNA陽性檢出率分別為觀察組93.98%,對照組81.93%,組間比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),實時熒光定量PCR的陽性檢出率顯著高于雜交捕獲Ⅱ代法,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表1。

    表1 兩組患者HPV,DNA陽性檢出率比較 [n(%)]

    2.2 兩組患者檢測結(jié)果的特異度及敏感度比較

    觀察組患者檢測的特異度及敏感度分別為83.21%,92.35%,對照組分別為76.69%,81.93%,組間比較觀察組均顯著高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表2。

    表2 兩組患者檢測的特異度及敏感度比較(%)

    3 討 論

    HPV病毒根據(jù)其DNA排序有多種分型,目前有超40中HPV,DNA分型與女性生殖系統(tǒng)感染相關(guān),嚴(yán)重時易引發(fā)宮頸癌變,直接威脅患者生命安全。臨床診斷多有賴于病理學(xué)活檢,HPV的早期篩查多采用第二代雜交捕獲法、酶切信號放大法等方法。本次研究就實施熒光定量PCR檢測與以往常用的第二代雜交捕獲法的應(yīng)用效果進行比較,結(jié)果顯示實時熒光定量PCR檢測在PCR DNA檢測方面,從陽性檢出率、敏感度及特異度等方面比較,均顯著優(yōu)于第二代雜交捕獲法,由此可見與過去常用的檢驗方法比較,實時熒光定量PCR檢測在早期診斷方面的優(yōu)勢較高,臨床推廣及普及的價值較大。

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