陳皮復(fù)方止咳含片制備工藝優(yōu)化及質(zhì)量控制

譚娥玉 唐興榮 葉國強 王賢兒 關(guān)琴笑

摘 要 目的： 優(yōu)化陳皮復(fù)方止咳含片的制備工藝，并建立測定其中橙皮苷含量的方法。方法：以含片口感、外觀、崩解時限和硬度評分為指標(biāo)，采用正交試驗篩選生姜用量、乳糖-甘露醇質(zhì)量比、薄荷油用量、甜菊糖用量及硬脂酸鎂用量，以優(yōu)化陳皮復(fù)方止咳含片的制備工藝。采用高效液相色譜法測定橙皮苷的含量，色譜柱為InfinityLab Poroshell 120 EC-C18，流動相為甲醇-醋酸-水（35 ∶ 4 ∶ 61，V/V/V），流速為1.0 mL/min，檢測波長為283 nm，柱溫為25 ℃，進樣量為5 μL。結(jié)果：最佳制備工藝1倍量處方中生姜用量為7 g，乳糖-甘露醇質(zhì)量比為2 ∶ 1，薄荷油用量為1 mL，甜菊糖用量為0.15%（以藥材粉末和填充劑總質(zhì)量計），硬脂酸鎂用量為0.5%（以制得干顆粒質(zhì)量計）。橙皮苷檢測質(zhì)量濃度線性范圍為0.045 0～0.450 0 mg/mL（r=0.999 9）；定量限為3.50 ng，檢測限為1.05 ng；精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性試驗的RSD均小于1%；加樣回收率為97.99%～101.65%（RSD=1.53%，n=6）。結(jié)論：該工藝制備的陳皮復(fù)方止咳含片口感好，外觀完整光潔、色澤均勻，崩解時限適宜，硬度較高，制備工藝穩(wěn)定、可行。

關(guān)鍵詞 陳皮復(fù)方止咳含片；制備工藝；優(yōu)化；正交試驗設(shè)計；橙皮苷；含量測定；質(zhì)量控制

中圖分類號 R283；R284 文獻標(biāo)志碼 A 文章編號 1001-0408（2018）14-1935-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.14.15

ABSTRACT OBJECTIVE： To optimize the preparation technology of Compound Citrus reticulata buccal tablets， and to establish a method for content determination of hesperidin. METHODS： Using the taste， appearance， disintegrating time and hardness score as evaluation indexes， L9（34）orthogonal test was used to screen the amount of Zingiber officinale， ratio of lactose-mannitol. The preparation technology of Compound C. reticulata buccal tablets was optimized. The content of hesperidin was determined by HPLC. The determination was performed on InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 column with mobile phase consisted of methanol-acetic acid-water （35 ∶ 4 ∶ 61，V/V/V） at the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 283 nm， and column temperature was 25 ℃. The sample size was 5 μL. RESULTS： The optimal preparation technology included Z. officinale 7 g， lactose-mannitol ratio of 2 ∶ 1， peppermint oil 1 mL， stevioside 0.15% （by total amount of medicinal powder and filler）， magnesium stearate 0.5% （by the weight of dry granule）. The linear range of hesperidin was 0.045 0-0.450 0 mg/mL （r=0.999 9）. The quantitation limit was 3.50 ng， and detection limit was 1.05 ng. RSDs of precision， stability and repeatability tests were all lower than 1%； the recoveries was 7.99%-101.65%（RSD=1.53%， n=6）. CONCLUSIONS： Compound C. reticulata buccal tablets prepared by this technology are good in taste， complete and smooth in appearance， uniform in color， suitable in disintegration time and high hardness. The preparation technology is stable and feasible.

KEYWORDS Compound Citrus reticulata buccal tablets； Preparation technology； Optimization； Orthogonal test； Hesperidin； Content determination； Quality control

陳皮復(fù)方止咳含片處方由《御纂醫(yī)宗金鑒》中的加味二陳湯加減而成[1]，該方由陳皮、生姜、桔梗、蘇子、甘草等5味藥材組成，具有理氣化痰、清利咽喉的功效，主要用于治療風(fēng)痰引起的初期咳嗽。本課題組考慮將該方研制為含片，以方便攜帶，且含片可使藥物直達患處而迅速起效，進而能快速緩解初期咳嗽的癥狀。本研究以口感、外觀、崩解時限、硬度為考察指標(biāo)，采用正交試驗設(shè)計方法對陳皮復(fù)方止咳含片的配比及輔料進行篩選，以優(yōu)化其制備工藝，并參考相關(guān)文獻[2-3]以高效液相色譜法（HPLC）測定方中君藥陳皮的主要有效成分橙皮苷的含量，以完善其質(zhì)量控制。

1 材料

1.1 儀器

1260 InfinityⅡ型HPLC儀，包括四元泵、自動進樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測器、色譜工作站 （美國Agilent公司）；ME104型電子分析天平[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]；WH-800型超聲波清洗機（濟寧萬和超聲電子設(shè)備有限公司）；DHG-9070型電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；TDP-5T型單沖壓片機（興化市祥和制藥機械有限公司）；ZP210型全封閉式旋轉(zhuǎn)壓片機（上海天凡藥機制造廠）；XL-08B型400克密封型搖擺式粉碎機（廣州市旭朗機械設(shè)備有限公司）；YD-1型片劑硬度測試儀（天津市精拓儀器科技有限公司）；BJ-2A型智能崩解儀（天津創(chuàng)興電子設(shè)備制造有限公司）。

1.2 藥品、藥材與試劑

橙皮苷對照品（成都曼思特生物科技有限公司，批號：MUST-17032502，純度：98.76%）；陳皮復(fù)方止咳含片（江門市五邑中醫(yī)院自制，批號：20171026、20171210、20171227，規(guī)格：0.8 g/片）；陳皮藥材（批號：A1600601）、生姜藥材（批號：A1601414）、桔梗藥材（批號：A1600807）、蘇子藥材（批號：A1601104）、甘草藥材（批號：A1601080）均購于培力（南寧）藥業(yè)有限公司；甲醇（色譜純，瑞典Oceanpak公司）；其余試劑均為分析純，水為雙蒸水。

2 方法與結(jié)果

2.1 制備工藝

原料藥材按處方比例混合，并經(jīng)粉碎機粉碎，過40目篩得藥材粉末；將藥材粉末與輔料混勻后，以85%乙醇制軟材，過10目篩制粒；干燥，過10目篩整粒，均勻噴灑薄荷油，低溫干燥，加入處方量的硬脂酸鎂，混勻，壓片。

2.2 輔料篩選

2.2.1 填充劑的選擇 根據(jù)本方日服用劑量及片質(zhì)量，確定藥材粉末與填充劑的用量比為1 ∶ 1。參考相關(guān)文獻[4-15]，以口感、外觀、崩解時限、硬度為考察指標(biāo)篩選填充劑，同時參考2015年版《中國藥典》（四部）片劑的溶化性中崩解時限檢查法[15]，并參考相關(guān)文獻[8-10]制定含片的評分標(biāo)準(zhǔn)，計算公式：總評分=口感評分×0.3+外觀評分×0.2+崩解時限評分×0.3+硬度評分×0.2。評分標(biāo)準(zhǔn)見表1，不同填充劑種類及比例對含片評分的影響見表2。結(jié)果顯示，當(dāng)填充劑為乳糖-甘露醇（1.5 ∶ 1，m/m）時，含片的口感、外觀、崩解時限、硬度均較好，易于制粒。

2.2.2 矯味劑及潤滑劑的選擇 選用甜菊糖及薄荷油為矯味劑，經(jīng)預(yù)試驗，以1倍處方量計算，甜菊糖用量為藥材粉末和填充劑總量的0.15%～0.25%時，甜度適宜；噴灑薄荷油1～1.5 mL時，清涼感較適宜。于制得的干顆粒中加入約為顆粒質(zhì)量0.5%的硬脂酸鎂，混勻，采用固定圓錐法測定顆粒休止角。結(jié)果顯示，制得的顆粒具有良好的流動性，休止角均小于40°，可滿足生產(chǎn)過程中對顆粒流動性的要求。

2.3 處方中生姜用量的考察

含片的辛辣感主要來源于生姜，在處方中生姜的用量范圍內(nèi)，以1倍處方量計算，選擇3個生姜用量水平（6、7、8 g）進行單因素考察，以乳糖-甘露醇（1.5 ∶ 1，m/m）（藥材粉末與填充劑的用量比為1 ∶ 1）、0.15%甜菊糖（以藥材粉末和填充劑總量計）、薄荷油1 mL、0.5%硬脂酸鎂（以制得干顆粒質(zhì)量計），按“2.1”項下方法制備含片。結(jié)果表明，生姜用量為6～7 g時，含片辛辣感合適。

2.4 顆粒干燥條件的優(yōu)選

在含片制備過程中，顆粒干燥條件可直接影響含片的成型、外觀、口感等。取適量濕顆粒進行干燥試驗，以含水量3%～5%為標(biāo)準(zhǔn)，考察不同干燥溫度（55、65、75 ℃）和干燥時間（30、60、90 min）對顆粒質(zhì)量的影響。結(jié)果表明，干燥溫度在55 ℃時，顆粒質(zhì)量好，但需干燥90 min，效率較低；干燥溫度為65 ℃、干燥時間為60 min時，顆粒質(zhì)量好，且顏色未明顯加深；干燥溫度為75 ℃時，顆粒顏色明顯加深，且此時部分顆粒易粘結(jié)成團。因此，選擇65 ℃干燥60 min為顆粒的干燥條件。

2.5 工藝優(yōu)化

由于生姜用量、乳糖-甘露醇質(zhì)量比、薄荷油用量及甜菊糖用量均對陳皮復(fù)方止咳含片的質(zhì)量有顯著影響，為優(yōu)化含片的制備工藝，采用L9（34）正交試驗設(shè)計，考察生姜用量（A）、乳糖-甘露醇質(zhì)量比（B）、薄荷油用量（C）、甜菊糖用量（D）4個因素，每個因素設(shè)3個水平，以口感、外觀、崩解時限、硬度評分為指標(biāo)進行綜合評價。因素與水平見表3，正交試驗設(shè)計與結(jié)果見表4，方差分析結(jié)果見表5。

由表4、表5可知，4個因素對含片質(zhì)量的影響程度排序為A>B>C>D，即生姜用量>乳糖-甘露醇質(zhì)量比>薄荷油用量>甜菊糖用量，其中生姜用量與乳糖-甘露醇質(zhì)量比對含片質(zhì)量有顯著影響（P<0.05）。最優(yōu)工藝條件為A3B3C1D1，即1倍量處方中生姜用量為7 g，乳糖-甘露醇質(zhì)量比為2 ∶ 1，薄荷油用量為1 mL，甜菊糖用量為0.15%（以藥材粉末和填充劑總質(zhì)量計）。

2.6 工藝驗證

按“2.5”項下最優(yōu)工藝條件A3B3C1D1，將藥材粉末與輔料混勻后，以85%乙醇制軟材（緊握成團，觸之即散），過10目篩制粒；于65 ℃干燥60 min后，過10目篩整粒，均勻噴灑薄荷油，低溫干燥，加入0.5%硬脂酸鎂（以制得干顆粒質(zhì)量計），混勻，壓片。結(jié)果，所得含片外觀光滑完整，色澤光潔、均勻，口感適宜，崩解時限控制在18 min左右，硬度較高，提示該工藝可行、穩(wěn)定，符合實際生產(chǎn)要求。

2.7 含量測定

2.7.1 色譜條件 色譜柱：InfinityLab Poroshell 120 EC-C18（150 mm ×4.6 mm，5 μm）；流動相：甲醇-醋酸-水（35 ∶ 4 ∶ 61，V/V/V）；流速：1.0 mL/min；檢測波長：283 nm；柱溫：25 ℃；進樣量：5 μL。

2.7.2 溶液的制備 精密稱取橙皮苷對照品適量，加甲醇制成每1 mL含0.45 mg的對照品溶液。 另取含片樣品8片，研細，取約3 g，精密稱定，加甲醇25 mL，超聲（功率：800 W，頻率：40 kHz）提取30 min，冷卻，經(jīng) 0.45 μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。制備缺少陳皮的陰性樣品，按上述供試品溶液制備方法進行制備，即得陰性對照溶液。

2.7.3 系統(tǒng)適用性試驗 取“2.7.2”項下對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液各適量，按“2.7.1”項下色譜條件進樣測定，記錄色譜，詳見圖1。由圖1可知，供試品色譜中在與對照品色譜相應(yīng)位置上有相同的色譜峰，且陰性對照溶液對測定無干擾，理論板數(shù)按橙皮苷峰計應(yīng)不低于2 000。

2.7.4 線性關(guān)系考察 精密吸取“2.7.2”項下對照品溶液適量，倍比稀釋，得橙皮苷系列對照品溶液（0.045 0、0.056 3、0.112 5、0.225 0、0.450 0 mg/mL），按“2.7.1”項下色譜條件進樣測定，以橙皮苷檢測質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（x，mg/mL）、峰面積（y）為縱坐標(biāo)進行線性回歸，得回歸方程為y=6 495.431 9x+8.989 0（r=0.999 9）。結(jié)果表明，橙皮苷檢測質(zhì)量濃度線性范圍為0.045 0～0.450 0 mg/mL。

2.7.5 定量限與檢測限考察 精密吸取“2.7.2”項下對照品溶液適量，倍比稀釋，按“2.7.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積。按信噪比為10 ∶ 1、3 ∶ 1分別計算定量限、檢測限。結(jié)果，橙皮苷的定量限為3.50 ng，檢測限為1.05 ng。

2.7.6 精密度試驗 精密吸取“2.7.2”項下對照品溶液適量，按“2.7.1”項下色譜條件連續(xù)進樣測定6次，記錄峰面積。結(jié)果，橙皮苷峰面積的RSD為0.33%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.7.7 穩(wěn)定性試驗 取供試品溶液（批號：20171026）適量，于室溫下放置0、4、8、16、24 h時按“2.7.1”項下色譜條件分別進樣測定，記錄峰面積。結(jié)果，橙皮苷峰面積的RSD為0.67%（n=5），表明供試品溶液在室溫下放置24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.7.8 重復(fù)性試驗 精密稱取樣品（批號：20171026）適量，共6份，按“2.7.2”項下方法制備供試品溶液，再按“2.7.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積并計算樣品含量。結(jié)果，橙皮苷平均含量為1.029 2 mg/g，RSD為0.54%（n=6），表明本方法重復(fù)性良好。

2.7.9 加樣回收率試驗 取已知含量樣品（批號：20171026）約1.5 g，共6份，精密稱定，加入一定量的對照品溶液，按“2.7.2”項下方法制備供試品溶液，再按“2.7.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積并計算加樣回收率，結(jié)果見表6。

2.7.10 樣品含量測定 分別取3批樣品各適量，按“2.7.2”項下方法制備供試品溶液，再按“2.7.1”項下色譜條件進樣測定，平行測定3次，記錄峰面積并計算樣品含量，結(jié)果見表7。

3 討論

含片應(yīng)選擇口感較好的輔料為填充劑，以提高患者的用藥依從性。常用的填充劑有甘露醇、乳糖、糊精、淀粉、糖粉等。其中，甘露醇易溶于水，無引濕性，且在口腔含化過程中有負熱效應(yīng)，故在口腔中溶解后可出現(xiàn)清涼爽口感，是咀嚼片、含片的主要填充劑之一[16]；乳糖易溶于水，無引濕性，具有良好的流動性和可壓性，性質(zhì)穩(wěn)定，可與大多數(shù)藥物配伍，制成的片劑光潔、美觀，硬度適宜，釋放藥物較快[16]；糊精較少單獨、大量用作填充劑，而常與糖粉、淀粉配合使用，淀粉-糊精-糖粉（7 ∶ 1 ∶ 1，m/m/m）為片劑常用的填充劑[16-17]。在預(yù)試驗中，單純以乳糖或甘露醇為填充劑，口感、外觀、崩解時限、硬度方面均可達到較好效果，但在制粒過程中損耗較大，僅能制成少量顆粒，因此單一輔料不適合作為本含片的填充劑。以淀粉-糊精-糖粉（7 ∶ 1 ∶ 1，m/m/m）為填充劑時，含片表面出現(xiàn)麻點，光潔度較差，口感欠佳，易裂片。糊精分別與乳糖、甘露醇混合或三者混合的效果亦欠佳。但以乳糖-甘露醇（2 ∶ 1，m/m）為填充劑時，含片口感、外觀、崩解時限、硬度則更佳，且易于制粒。

甜菊糖是一種天然的非營養(yǎng)型高倍甜味劑，也是一種低熱值的糖苷，其甜度是蔗糖的200～300倍，而熱量僅為蔗糖的0.4%左右；而且其用量較少，對顆粒制備和壓片影響較小[18]。噴灑適量薄荷油可提高含片口感，使含片具清涼感，可更好地緩解咽喉的不適。因此，選擇甜菊糖和薄荷油作為矯味劑。

顆粒為含片制備的中間體，其流動性是片劑制備的一項重要物理性質(zhì)，若顆粒的流動性差，會導(dǎo)致填入?？椎念w粒不均勻，從而引起松片與片重差異超限的情況發(fā)生。加入潤滑劑可增加壓片時顆粒的流動性，以保證壓制的含片具有良好的均一性，減少黏沖現(xiàn)象及減小顆粒與沖模之間的摩擦力，使片劑表面光滑[4，19]。硬脂酸鎂為常用的潤滑劑，具有質(zhì)地輕、比表面積大、易與顆粒混勻、用量較少（其常規(guī)用量為0.3%～1.0%）等優(yōu)點[19]。因此，選擇0.5%硬脂酸鎂為潤滑劑。

本研究建立了采用HPLC法測定陳皮復(fù)方止咳含片中橙皮苷含量的方法，經(jīng)考察，本方法操作簡便、分離度好，且具有良好的穩(wěn)定性、重復(fù)性，可用于本含片的質(zhì)量控制。本研究共測定了3批樣品，結(jié)果顯示，3批樣品中的橙皮苷含量差異不大，提示陳皮復(fù)方止咳含片的制備工藝穩(wěn)定、可靠，可保證成品的質(zhì)量。

綜上所述，此工藝制備的陳皮復(fù)方止咳含片口感好，外觀完整光潔、色澤均勻，崩解時限適宜，硬度較高，制備工藝穩(wěn)定、可行。

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（收稿日期：2018-01-23 修回日期：2018-05-21）

（編輯：陳 宏）