溫通針法聯(lián)合丹紅注射液對血管性癡呆患者血清白細胞介素18、干擾素撥玫撓跋

孫赫楠 朱曼迪 張威

摘要目的：探討溫通針法聯(lián)合丹紅注射液對血管性癡呆（VD）患者血清白細胞介素18、干擾素γ的影響。方法：選取2015年4月至2016年10月遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院收治VD患者132例，按照隨機數(shù)表法分為對照組、溫通組、丹紅組及聯(lián)合組，每組33例。對照組給予安慰劑，溫通組給予溫通針法治療，丹紅組給予丹紅注射液治療，聯(lián)合組給予溫通針法聯(lián)合丹紅注射液治療。觀察4組治療前及治療后（治療6周）改良長谷川癡呆量表（HDS）評分變化，治療前后血清白細胞介素18、干擾素γ水平變化，并進行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果：治療后，對照組HDS評分及血清白細胞介素18、干擾素γ水平與治療前差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>005）；溫通組、丹紅組及聯(lián)合組HDS評分與治療前比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<005），且以聯(lián)合組為最高，溫通組、丹紅組為其次，溫通組、丹紅組及聯(lián)合組血清白細胞介素18、干擾素γ水平與治療前比較顯著降低（P<005），且均以丹紅組為最高，丹紅組次之，溫通組為最低。相關(guān)性分析顯示，溫通組HDS評分與血清白細胞介素18、干擾素γ水平無明顯相關(guān)性（P>005），丹紅組HDS評分與血清白細胞介素18、干擾素γ水平呈負相關(guān)（P<005），丹紅組HDS評分與血清白細胞介素18、干擾素γ水平呈負相關(guān)（P<005）。結(jié)論：溫通針法聯(lián)合丹紅注射液治療VD具有較好的效果，降低血清白細胞介素18、干擾素γ水平可能是其分子生物學(xué)機制之一。

關(guān)鍵詞白細胞介素18；干擾素γ；溫通針法；丹紅注射液；血管性癡呆

Effects of WenTong Needling Combined with Danhong Injection on Serum

of IL18 and IFNγ of Patients with Vascular Dementia

Sun Henan1， Zhu Mandi2， Zhang Wei1

（1 Affiliated Hospital of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine， Shengyang 110032， China；

2 Liaoning Vocational College of Medicine， Shenyang 110101， China）

AbstractObjective：To discuss the effects of WenTong needling combined with Danhong injection on serum of IL18 and IFNγ of patients with vascular dementia. Methods：A total of 132 patients with vascular dementia （VD） were selected from April 2015 to October 2016 in our hospitals， and randomly divided into control group， Wentong group， Danhong group， combination group according to the random number table method， with 33 cases in each group. The control group received placebo， and Wentong group received Wentong needling treatment. Danhong group received Danhong injection treatment， and combination group received Wentong needling combined with Danhong injection treatment. Changes in scores of revised Hasegawa dementia scale （HDSR）， serum levels of IL18 and IFNγ of all groups were observed before and after treatment， and statistical analysis was performed. Results：Afte treatment， score of HDS and serum of IL18 and IFNγin in control group was basically the same as compared with the conditions before treatment （P>005）； Scores of HDS in Wentong group， Danhong group， combination group were significantly increased as compared with the conditions before treatment （P<005）， and the highest was combination group， followed by the Wentong group and Danhong group； Serum of IL18 and IFNγin of Wentong group， Danhong group， combination group were significantly reduced as compared with the conditions before treatment （P<005）， and the highest was Wentong group， followed by the Danhong group， and the lowest was combination group； Correlation analysis showed that score of HDS in the Wentong group was not correlated with serum of IL18 and IFNγ （P>005）； Score of HDS in the Danhong group was negatively correlated with serum of IL18 and IFNγ （P>005）； Score of HDS in the combination group was significantly negatively correlated with serum of IL18 and IFNγ （P>005）. Conclusions： Wentong needling combined with Danhong injection treatment of VD has good effect， and lower levels of serum IL18. IFNγ is probably one of the molecular biology mechanism.

Key WordsIL18； IFNγ； Wentong needling； Danhong injection； Vascular dementia

中圖分類號：R245；R242文獻標識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2018.05.025

血管性癡呆（Vascular Dementia，VD）是指因腦血管疾病所致的智能及認知功能障礙的臨床綜合征。目前，臨床治療VD尚無特效藥物，而建基于藏象學(xué)說的中醫(yī)學(xué)，已取得豐碩成果，充分發(fā)揮了中醫(yī)學(xué)多靶點的優(yōu)勢[12]?？墒瞧渲械姆肿由餀C制尚未明確，有關(guān)這一方面的研究鮮有報道。為此，我院開展本研究，試圖從分子生物學(xué)角度探討溫通針法聯(lián)合丹紅注射液治療VD的作用機制，為溫通針法聯(lián)合丹紅注射液治療VD的應(yīng)用提供基礎(chǔ)支持，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

11一般資料本研究已經(jīng)倫理學(xué)委員會批準，選取2016年4月至2016年10月我院收治VD患者132例，按照隨機數(shù)表法分為對照組、溫通組、丹紅組及聯(lián)合組，每組33例。對照組中男20例，女13例；年齡（56～67）歲，平均年齡（6219±731）歲；病程（1～7）個月，平均病程（426±126）個月。溫通組男19例，女14例；年齡（56～67）歲，平均年齡（6221±735）歲；病程（1～7）個月，平均病程（422±118）個月。丹紅組男20例，女13例；年齡（55～66）歲，平均年齡（6220±741）歲；病程（1～6）個月，平均病程（411±131）個月。聯(lián)合組男21例，女12例；年齡（57～67）歲，平均年齡（6250±732）歲；病程（1～7）個月，平均病程（420±126）個月。4組患者一般資料分布均衡（P>005），具有可比性。

12診斷標準根據(jù)中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)病學(xué)分會VD的相關(guān)診斷標準[3]。

13納入標準VD患者；知情并簽署知情同意書。

14排除標準心、肝、腎等重要器官功能不全者；抑郁癥、腦卒中、健忘癥、失語癥及老年性癡呆病患者；顱腦創(chuàng)傷、氰化物中毒、一氧化碳中毒史者。

15脫落與剔除標準違反方案操作等的任何情況；沒有完成臨床試驗全程訪視等的任何情況；死亡、對研究藥物過敏或中途失訪等符合脫落標準者。

16治療方法對照組給予5%葡萄糖注射液（浙江濟民制藥有限公司，國藥準字H20023048）50 mL，靜脈滴注，1次/d。溫通組給予溫通針法治療，取患者正坐位，使用75%乙醇對百會、水溝、風(fēng)池的主穴及內(nèi)關(guān)、懸鐘的配穴行常規(guī)消毒，取2寸毫針，參照鄭魁山教授[4]的溫通針法施展操作，風(fēng)池穴守氣1 min，不留針，余穴均留針30 min，1次/d，每治療5 d間隔2 d。丹紅組給予丹紅注射液（菏澤步長制藥有限公司，國藥準字Z20026866）30 mL，配制5%葡萄糖注射液稀釋液，靜脈滴注，1次/d。聯(lián)合組給予溫通針法聯(lián)合丹紅注射液治療，治療方法同溫通組及丹紅組。

17觀察指標治療前后使用HDS評價工具對4組患者進行智力評分[5]。觀察4組治療前后血清白細胞介素18、干擾素γ水平變化。治療前后昨晚所有病例禁食12 h，并于隔日8：00～9：00在空腹?fàn)顟B(tài)下抽取肘前靜脈血5 mL，離心后取血清凍存，待同一批次采用酶聯(lián)免疫吸附試驗雙抗夾心法檢測白細胞介素18、干擾素γ的表達水平，試劑盒由深圳子科生物科技有限公司提供，嚴格按照說明書由專人操作。

18療效判定標準HDS，總分≥30分納入智能正常，總分<30分納入認知功能障礙，總分<15分納入癡呆，得分越高表示智能水平越高。

19統(tǒng)計學(xué)方法所有數(shù)據(jù)均經(jīng)SPSS 2000軟件包進行統(tǒng)計學(xué)處理。計量資料若呈正態(tài)分布組間比較采用配對資料t檢驗，以均數(shù)±標準差（±s）的形式表示；計數(shù)資料采用配對資料卡方檢驗；檢驗水準α=005。采用Pearson相關(guān)分析方法分析HDS評分與血清白細胞介素18、干擾素γ水平的相關(guān)性，以P<005為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

214組HDS評分變化比較治療后，對照組HDS評分與治療前比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>005），溫通組、丹紅組及聯(lián)合組HDS評分與治療前比較顯著增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<005），且以聯(lián)合組為最高，溫通組、丹紅組為其次。見表1。

224組血清白細胞介素18、干擾素γ水平比較治療后，對照組血清白細胞介素18、干擾素γ水平與治療前比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>005），溫通組、丹紅組及聯(lián)合組血清白細胞介素18、干擾素γ水平與治療前比較顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<005），且均以丹紅組為最高，丹紅組次之，溫通組為最低。見表1。

23HDS評分與血清白細胞介素18、干擾素γ水平的相關(guān)性分析溫通組HDS評分與血清白細胞介素18、干擾素γ水平無相關(guān)（P>005），丹紅組HDS評分與血清白細胞介素18、干擾素γ水平負相關(guān)（P<005），聯(lián)合組HDS評分與血清白細胞介素18、干擾素γ水平負相關(guān)（P<005）。見表2。

3討論

血管性癡呆（VD）是指因一系列腦血管因素（缺血或出血及急慢性缺氧性腦血管病）所致的智能損害綜合征，其臨床癥狀或特征與阿爾茨海默病尤為相似，主要表現(xiàn)為記憶力、認知能力減退，抽象、具象思維缺損及人格障礙等[67]。中醫(yī)學(xué)并無VD的病名或是相關(guān)記載，但根據(jù)其病因、證候及病機，史料及文獻記載[89]。諸如：《景岳全書》曰：“或以郁結(jié)，或以不遂，或以思慮，或以驚恐而漸至癡呆”?！夺t(yī)林改錯》曰：“瘀血也令人善忘”。故VD范屬“中風(fēng)”“文呆”“武呆”“健忘”“郁證”為其病證，“口眼歪斜、情志失調(diào)、半身不遂”為其病征?！堆C論》曰：“血在上，則濁蔽而不明矣”。認為瘀血阻絡(luò)與VD的發(fā)病密切相關(guān)。王四平等[10]研究者同樣發(fā)表過類似觀點，其指VD者中醫(yī)辨證多見痰瘀互結(jié)，瘀血與痰濁阻滯腦絡(luò)為該病的病機。本研究亦持有相同觀點，認為VD為年老體衰而腎虛髓空，加之痰、瘀上蒙清竅故瘀血阻絡(luò)，最終靈機失用，故補腎益髓、活血化痰為該病的治療思路。

本研究采用隨機對照試驗，探討了溫通針法與丹紅注射液單一用藥及聯(lián)合用藥的療效。由本研究結(jié)果可見，溫通針法及丹紅注射液均有效改善VD患者的智能水平，且兩者聯(lián)合效果更佳。1）丹紅注射液是丹參、紅花的中藥注射劑，其主要成分有丹參酚、丹參酮和紅花黃色素，具有活血化瘀，通脈舒絡(luò)的功[11]。2）溫通針法為鄭魁山教授所創(chuàng)的針刺手法，該針法以“溫”“通”為特點?！皽亍奔凑駣^陽氣，“通”即疏通經(jīng)絡(luò)，溫通結(jié)合即振奮陽氣、疏通經(jīng)絡(luò)、消散壅滯。本研究參照鄭魁山教授的溫通針法施展操作，選取百會、大椎、水溝、風(fēng)池為主穴，選取內(nèi)關(guān)、懸鐘為配穴。百會穴為“三陽五會”，大椎穴為“總督諸陽”，針刺之?dāng)M振奮周身之陽氣；水溝穴為“手足陽明之會”，針刺之?dāng)M醒腦開竅；風(fēng)池穴為“陽維之會”，內(nèi)關(guān)為八脈交會穴之一，通于陰維脈，針刺之?dāng)M疏通經(jīng)絡(luò)；懸鐘為髓海，針刺之?dāng)M補腎益髓；溫通針法與諸穴共奏，培補正氣、益髓醒腦、活血通絡(luò)。但兩者聯(lián)合可增進療效的機制尚未明確，本研究嘗試從分子生物學(xué)的角度探討其作用機制。

IL18是一種主要由單核巨噬細胞產(chǎn)生的促炎性細胞因子，其在體內(nèi)與IL18R結(jié)合可增強CD8+T細胞和NK細胞的細胞毒性作用，其與IL12的協(xié)同作用可上調(diào)IFNγ基因表達，活化NK細胞[1213]。IFNγ是一種主要由NK細胞、T輔助淋巴細胞產(chǎn)生的小分子多肽，其具有調(diào)節(jié)細胞作用，可介導(dǎo)T細胞對巨噬細胞的激活，促進T細胞分化，進而促進細胞毒性T細胞分化，續(xù)而抑制Th2細胞的增殖[1415]。既往研究表明，白細胞介素18、干擾素γ共同參與到了VD的發(fā)生發(fā)展，兩者的關(guān)系可能是IFNγ促進炎性反應(yīng)，上調(diào)IL18、IL12、IL6等促炎性細胞因子表達，促炎性細胞因子繼續(xù)上調(diào)IFNγ基因表達，如此循環(huán)，而始動因素為VD后的應(yīng)激反應(yīng)[16]。本研究結(jié)果顯示，溫通組、丹紅組及聯(lián)合組血清白細胞介素18、干擾素γ水平與治療前比較顯著降低（P<005），且均以丹紅組為最高，丹紅組次之，溫通組為最低。為此，本研究選擇血清白細胞介素18、干擾素γ水平來探討溫通針法聯(lián)合丹紅注射液治療VD的分子生物學(xué)機制。本研究相關(guān)性分析顯示，溫通組HDS評分與血清白細胞介素18、干擾素γ水平無明顯相關(guān)性（P>005），但溫通組血清白細胞介素18、干擾素γ水平與治療前比較顯著降低（P<005），本研究認為，溫通針法可治療VD可改善VD后應(yīng)激反應(yīng)，引起良性循環(huán)，進而血清白細胞介素18、干擾素γ表達有所下降[17]，而溫通針法的靶點可能并不直接作用于白細胞介素18、干擾素γ。與此同時，丹紅組HDS評分與血清白細胞介素18、干擾素γ水平呈負相關(guān)（P<005），丹紅組HDS評分與血清白細胞介素18、干擾素γ水平呈顯著負相關(guān)（P<005），故本研究認為溫通針法聯(lián)合丹紅注射液治療VD存在相輔相成在關(guān)系，可顯著降低血清白細胞介素18、干擾素γ水平。

綜上所述，溫通針法聯(lián)合丹紅注射液能夠降低血清白細胞介素18、干擾素γ水平，可能是其治療VD的分子生物學(xué)機制之一。

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（2017-06-12收稿責(zé)任編輯：楊覺雄）