• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    喹啉-2-甲醛類(lèi)希夫堿銅配合物的合成及其生物活性

    2018-09-07 09:43:52胡茜顏軍方紫薇張壽春
    關(guān)鍵詞:希夫細(xì)胞毒鍵角

    胡茜,顏軍,方紫薇,張壽春

    ?

    喹啉-2-甲醛類(lèi)希夫堿銅配合物的合成及其生物活性

    胡茜,顏軍,方紫薇,張壽春

    (中南大學(xué) 化學(xué)與化工學(xué)院,湖南 長(zhǎng)沙,410083)

    合成一種新的喹啉-2-甲醛縮組胺希夫堿銅(II)配合物[Cu(Quin-Hist)Cl2],利用元素分析和紅外光譜對(duì)其進(jìn)行表征,通過(guò)X線單晶衍射確定其晶體結(jié)構(gòu)。研究結(jié)果表明:該晶體屬于單斜晶體,P21/n空間群,晶胞參數(shù)為= 0.858 90(7) nm,=1.282 38(10) nm,=1.459 76(12) nm,=99.346 0(10)°;配合物為畸變的三角雙錐空間構(gòu)型;該銅(II)配合物能與小牛胸腺DNA(CT-DNA)之間通過(guò)溝槽結(jié)合的方式相互作用;此外,銅(II)配合物對(duì)MCF-7人乳腺癌細(xì)胞系、A-549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系和SKOV-3人卵巢癌細(xì)胞系均有較強(qiáng)的體外細(xì)胞毒活性,且與順鉑相比,銅(II)配合物對(duì)MCF-7細(xì)胞系具有更強(qiáng)的體外細(xì)胞毒活性。

    銅配合物;希夫堿;晶體結(jié)構(gòu);DNA結(jié)合;細(xì)胞毒活性

    癌癥是導(dǎo)致當(dāng)今社會(huì)死亡率最高的疾病之一,它嚴(yán)重威脅了人們的身體健康。順鉑是目前臨床上常用的一種抗癌藥物,但其嚴(yán)重的毒副作用、耐藥性及難代謝的缺陷限制了它的臨床使用,因此,研發(fā)出高效、低毒、水溶性好、抗癌范圍廣的新型小分子金屬配合物受到了人們?cè)絹?lái)越多的關(guān)注[1?4]。銅是人體必需的微量元素之一,是人體內(nèi)蛋白質(zhì)和酶的重要組成部分,在生物體系中具有重要作用。與鉑相比,銅具有更高的生物兼容性和更低的毒性,因此,銅配合物被認(rèn)為是繼鉑類(lèi)配合物后最有應(yīng)用前景的抗癌藥物之一[5]。近年來(lái),人們合成了大量銅配合物并發(fā)現(xiàn)這些配合物具有較強(qiáng)的抗癌活性[6]。在這些配合物中,希夫堿類(lèi)銅配合物的研究尤為引人注目。許多希夫堿化合物本身具有一定的生物活性,希夫堿配合物也被證明具有較強(qiáng)的抗菌、抗炎與抗癌活性[7?8]。ZHANG等[9?10]已報(bào)道多個(gè)喹啉-2-甲醛縮氨基硫脲希夫堿配合物,這些配合物可與DNA結(jié)合,能氧化切割DNA,且對(duì)腫瘤細(xì)胞有較強(qiáng)的生長(zhǎng)抑制作用。為了進(jìn)一步研究喹啉-2-甲醛類(lèi)希夫堿金屬配合物的生物活性,本文作者選擇以具有生物活性的組胺與喹啉-2-甲醛作為原料合成希夫堿配體,進(jìn)而合成銅(II)配合物,以期增強(qiáng)銅配合物的生物兼容性,從而加強(qiáng)配合物的生物活性。

    1 實(shí)驗(yàn)

    1.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器

    主要試劑為:喹啉-2-甲醛,二鹽酸組,三羥甲基氨基甲烷(Tris),溴化乙錠(EB),均購(gòu)自Sigma公司;小牛胸腺DNA(CT-DNA),購(gòu)自MBI Fermentas公司;水,為二次蒸餾水;其他試劑,均為分析純。

    主要儀器:Bruker VEC-TOR22 紅外光譜儀(KBr壓片);Perkin-Elmer元素分析儀;Shimadzu UV-2450 紫外?可見(jiàn)分光光度計(jì);Hitachi F4600熒光光譜儀;Jasco J-815圓二色譜光譜儀;Bruker CCD X線衍射儀。

    1.2 配合物[Cu(Quin-Hist)Cl2]的合成

    將0.157 g(1.0 mmol)喹啉-2-甲醛和0.184 g (1.0 mmol)二鹽酸組胺溶于15 mL乙醇中,滴加幾滴NaOH溶液,攪拌回流2 h。然后滴加含0.085 g (0.5 mmol) CuCl2·2H2O的乙醇溶液5 mL,回流攪拌 4 h。冷卻至室溫后過(guò)濾,將綠色沉淀用乙醇和乙醚洗滌數(shù)次。置于空氣中干燥,然后將少量綠色沉淀溶于無(wú)水乙醇中,靜置揮發(fā)后有亮綠色塊狀晶體析出,質(zhì)量為0.137 g(產(chǎn)率為71.4%)。對(duì)C15H14N4CuCl2元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)進(jìn)行分析,計(jì)算值如下:C質(zhì)量分?jǐn)?shù)為46.91%,H為3.73%;N為14.45%。實(shí)際值(質(zhì)量分?jǐn)?shù))如下:C為46.84%,H為3.70%,N為14.51%。紅外圖譜分析(KBr壓片,cm?1)結(jié)果如下:3 111 cm?1處的峰為咪唑環(huán)上的N—H伸縮振動(dòng)吸收峰;1 654 cm?1處的峰為喹啉環(huán)上的C=N伸縮振動(dòng)吸收峰;1 592 cm?1處的峰為C=N伸縮振動(dòng)吸收峰。

    1.3 配合物[Cu(Quin-Hist)Cl2]晶體結(jié)構(gòu)測(cè)定

    采用Bruker CCD衍射儀收集銅配合物晶體的X線衍射數(shù)據(jù)。在溫度293 K下,衍射光源為石墨單色器單色化的MoKα射線,以5.0~50.0 min?1的速度運(yùn)用?2掃描方式收集衍射結(jié)果,衍射結(jié)果均經(jīng)過(guò)洛倫茲?極化因子和半經(jīng)驗(yàn)吸收校正。所有氫原子坐標(biāo)由理論計(jì)算確定,對(duì)全部非氫原子坐標(biāo)及其各向異性熱參數(shù)進(jìn)行全矩陣最小二乘法修正。所有計(jì)算用SHELXTL程序完成。配合物的晶體學(xué)參數(shù)見(jiàn)表1。

    1.4 配合物[Cu(Quin-Hist)Cl2]與DNA的相互作用

    用Tris-HCl緩沖溶液(5 mmol/LTris,5 mmol/L HCl,50 mmol/LNaCl,pH=7.4)溶解一定量的CT-DNA,測(cè)定該DNA溶液在260 nm和280 nm處的吸光度,這2處吸光度比值約為1.9,表明該DNA溶液中不含有蛋白質(zhì)[11]。DNA溶液的濃度可通過(guò)260 nm處吸光度260確定(260=6 600 L·mol?1·cm?1)[12]。

    取一定量[Cu(Quin-Hist)Cl2]溶于少量DMSO中,然后加入適量Tris-HCl緩沖溶液稀釋至濃度為5.0×10?5mol/L。取配合物溶液與DNA溶液按不同物質(zhì)的量之比([n(Cu)/n(DNA)]為 0,0.2,0.4和 0.6)混合,利用紫外?可見(jiàn)分光光度計(jì)分別測(cè)定上述各混合溶液的紫外?可見(jiàn)光譜。銅配合物與DNA的結(jié)合常數(shù)b可由下式計(jì)算得出[13]:

    表1 配合物[Cu(Quin-Hist)Cl2]的晶體學(xué)參數(shù)及其值

    注:,和為單胞軸長(zhǎng)間的夾角;,和為單胞的軸長(zhǎng);1為偏差因子;w為加權(quán)因子。

    [DNA]/(a–f)=[DNA]/(b–f)+1/[b(b–f)] (1)

    式中:[DNA]為純DNA的濃度;a為配合物的表觀摩爾吸光系數(shù);f為純配合物的摩爾吸光系數(shù);b為配合物與DNA充分結(jié)合后的摩爾吸光系數(shù);b為結(jié)合常數(shù),即以[DNA]/(b?f)對(duì)[DNA]作圖得到的直線斜率與截距的比值。

    在CT-DNA(1.0×10?4mol/L)和EB(1.0×10?5mol/L)混合溶液中緩慢滴加[Cu(Quin-Hist)Cl2]溶液(5.0×10?5mol/L),在室溫下測(cè)定每次加樣后熒光光譜的變化(激發(fā)波長(zhǎng)為530 nm,發(fā)射波長(zhǎng)為600 nm)。猝滅常數(shù)可由Stern-Volmer式計(jì)算得出[14]:

    0/=1+·[(Cu)/(DNA)](2)

    式中:0和分別為有無(wú)金屬配合物時(shí)熒光光譜的發(fā)射強(qiáng)度;[(Cu)/(DNA)]為銅配合物與DNA的物質(zhì)的量之比。以0/對(duì)[(Cu)/(DNA)]作圖,猝滅常數(shù)為該直線的斜率。

    在25 ℃測(cè)定[Cu(Quin-Hist)Cl2]與DNA(1.0×10?4mol/L)以不同物質(zhì)的量之比混合所得溶液的圓二色光譜。掃描波長(zhǎng)為220~320 nm,掃描速度為10 nm/min。

    1.5 體外細(xì)胞毒活性測(cè)試

    配合物[Cu(Quin-Hist)Cl2]的體外細(xì)胞毒活性選用人乳腺癌細(xì)胞系(MCF-7)、人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系(A-549)和人卵巢癌細(xì)胞系(SKOV-3)并用MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide)法進(jìn)行測(cè)試,并以順鉑為陽(yáng)性對(duì)照。腫瘤細(xì)胞于96孔板中在體積分?jǐn)?shù)為5%的CO2和37 ℃培養(yǎng)20 h,細(xì)胞貼壁后,加入含有不同濃度梯度的銅配合物的培養(yǎng)液100 μL培養(yǎng)48 h。然后在每孔中加入含MTT的PBS緩沖溶液(20 μL,5 g/L),孵育4 h。最后在每孔中加入200 μL DMSO振蕩搖勻10 min,采用酶標(biāo)儀檢測(cè)。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 晶體結(jié)構(gòu)

    喹啉-2-甲醛與二鹽酸組胺以物質(zhì)的量比為1:1的比例混合反應(yīng)生成希夫堿化合物,然后加入CuCl2·2H2O,通過(guò)原位反應(yīng)得到配合物產(chǎn)物[Cu(Quin-Hist)Cl2]。[Cu(Quin-Hist)Cl2]的分子結(jié)構(gòu)如圖1所示,主要鍵長(zhǎng)和鍵角如表2所示。配合物中氫鍵的鍵長(zhǎng)和鍵角如表3所示。該配合物中心金屬Cu(II)離子處于變形三角雙錐配位環(huán)境中,其為0.65(=(?)/60,其中,為Cl(2)-Cu(1)-Cl(1)的鍵角,為N(1)-Cu(1)-N(3)的鍵角,和分別為130.8°和169.8°)。當(dāng)為0或1時(shí),配合物分別為規(guī)則的四方錐或三角雙錐構(gòu)型;當(dāng)為0~1時(shí),配合物為變形三角雙錐構(gòu)型)[15]。喹啉環(huán)上N(1)原子和咪唑環(huán)上N(3)原子位于三角雙錐的2個(gè)極軸頂點(diǎn),亞胺基N(2)原子和2個(gè)氯原子組成三角平面。三角平面上N(2)-Cu(1)-Cl(1),N(2)-Cu(1)-Cl(2)和Cl(2)-Cu(1)-Cl(1)的鍵角均不相等,其值分別為106.2(6)°,122.5(6)°和130.8(3)°。Cu(1)-Cl(1)和Cu(1)-Cl(2)的鍵長(zhǎng)也不相等,其值分別為0.241 0(6) nm和0.229 4(7) nm。極軸上N(1)-Cu(1)-N(3)的鍵角為169.8(7)°,比規(guī)則的三角雙錐中的該鍵角180°更小。鍵軸上Cu(1)-N(1)和Cu(1)-N(3)的鍵長(zhǎng)分別為0.203 9(17) nm和0.196 5(17) nm,比三角平面上Cu(1)-N(2)鍵長(zhǎng)(0.207 4(18) nm)更短。該配合物與一些含咪唑環(huán)Cu(II)配合物中的 Cu-N咪唑環(huán)鍵長(zhǎng)基本相等[16],但比另一些希夫堿銅(II)配合物中Cu-N亞胺基鍵長(zhǎng)略長(zhǎng)[17?18]。[Cu(Quin-Hist)Cl2]的晶體結(jié)構(gòu)堆積圖如圖2所示,分子間存在氫鍵,N(4)···Cl(1)的D···A距離為0.315 0 nm。除此之外,配合物中的喹啉環(huán)與相鄰的配體之間存在π?π 堆積作用,相鄰平面的間距為0.331 5(3) nm。配合物通過(guò)氫鍵和π?π堆積作用形成具有鏈狀結(jié)構(gòu)的超分子體系。

    圖1 配合物[Cu(Quin-Hist)Cl2]的分子結(jié)構(gòu)

    表2 配合物的主要鍵長(zhǎng)和主要鍵角

    注:元素后面的括號(hào)內(nèi)數(shù)字表示該原子的編號(hào),數(shù)值后面的括號(hào)內(nèi)數(shù)字表示最后1位數(shù)的誤差。

    表3 配合物中的氫鍵的鍵長(zhǎng)和鍵角

    圖2 配合物分子通過(guò)氫鍵和π?π堆積形成的一維超分子鏈狀結(jié)構(gòu)

    2.2 配合物與DNA相互作用方式的研究

    2.2.1 紫外吸收光譜

    DNA被普遍認(rèn)為是許多抗癌藥物的主要作用靶點(diǎn),研究金屬配合物與DNA之間的相互作用對(duì)于開(kāi)發(fā)新型高效的抗癌試劑具有重要意義。本文利用紫外?可見(jiàn)吸收光譜、熒光光譜與圓二色光譜等方法對(duì)配合物[Cu(Quin-Hist)Cl2]與DNA之間相互作用進(jìn)行研究。當(dāng)小分子金屬配合物以嵌入方式與DNA堿基對(duì)結(jié)合時(shí),其紫外吸收光譜會(huì)出現(xiàn)峰位紅移和減色效應(yīng)。紫外吸收光譜變化程度與其結(jié)合能力有關(guān)。減色效應(yīng)越大,說(shuō)明金屬配合物與DNA作用越強(qiáng),以嵌入方式結(jié)合的可能性越高。吸收峰紅移越大,則說(shuō)明配合物與DNA嵌入程度越大[19]。配合物與DNA作用的紫外吸收光譜如圖3所示。從圖3可見(jiàn):隨著DNA濃度增加,配合物的紫外吸收光譜在251 nm處發(fā)生了減色效應(yīng),減色率約為8.42%,但沒(méi)有出現(xiàn)紅移現(xiàn)象。為了定量比較銅配合物與DNA結(jié)合能力,利用式(1)求得配合物與DNA的結(jié)合常數(shù)b為6.70×104mol/L。該常數(shù)遠(yuǎn)小于經(jīng)典的嵌入試劑EB的結(jié)合常數(shù)(EB-DNA結(jié)合常數(shù)為1.00×106mol/L)[20],說(shuō)明該銅配合物與DNA的結(jié)合能力比EB與DNA的結(jié)合能力低,且該配合物可能是通過(guò)非經(jīng)典的作用方式如溝槽方式與DNA結(jié)合[21]。

    r[n(Cu)/n(DNA)] :a—0;b—0.2;c—0.4;d—0.6。

    2.2.2 熒光光譜

    DNA和EB本身的熒光性都很弱,但當(dāng)EB插入到DNA小溝處的堿基對(duì)后,其熒光強(qiáng)度就會(huì)大大增強(qiáng)。當(dāng)EB從DNA堿基對(duì)中游離出來(lái)時(shí),熒光強(qiáng)度又會(huì)大大減弱。因此,可以根據(jù)配合物對(duì)EB-DNA復(fù)合物熒光強(qiáng)度的影響來(lái)研究該配合物與DNA間的相互作用。配合物[Cu(Quin-Hist)Cl2]與DNA相互作用的熒光光譜如圖4所示(每次向EB-DNA體系中增加20 μL配合物溶液)。從圖4可見(jiàn):隨著配合物濃度增加,EB-DNA復(fù)合物在600 nm處的熒光強(qiáng)度逐漸減弱,減弱率為49%。這表明銅配合物可以取代EB-DNA復(fù)合物中的EB,與DNA進(jìn)行有效結(jié)合。銅配合物可能是以溝槽方式與DNA結(jié)合[22],這與紫外吸收光譜測(cè)定結(jié)果一致。

    V配合物/μL:a—0;b—20;c—40;d—60;e—80。

    2.2.3 圓二色譜

    DNA是具有雙螺旋結(jié)構(gòu)的手性分子,在圓二色譜上會(huì)出現(xiàn)2個(gè)峰:275 nm處的正峰和245 nm處的負(fù)峰。正峰是由DNA堿基對(duì)π?π堆積形成的,正峰上升意味著堿基堆積緊實(shí);負(fù)峰是由DNA的右旋性產(chǎn)生的,負(fù)峰上升意味著配合物對(duì)DNA有解旋能力[23]。配合物[Cu(Quin-Hist)Cl2]與DNA相互作用的圓二色譜如圖5所示。從圖5可見(jiàn):隨著[n(Cu)/n(DNA)]增大,圓二色譜中275 nm處的正峰強(qiáng)度稍增大,而245 nm處的負(fù)峰強(qiáng)度顯著減小,但并沒(méi)有發(fā)生譜帶紅移或藍(lán)移。這表明銅配合物與DNA發(fā)生相互作用,導(dǎo)致DNA構(gòu)象發(fā)生了明顯變化。在247 nm處負(fù)峰下降,可能是由于配合物對(duì)DNA產(chǎn)生解旋作用,使DNA轉(zhuǎn)化為A型構(gòu)型[24]。

    r[n(Cu)/n(DNA)] :a—0;b—0.2;c—0.4。

    2.3 體外細(xì)胞毒性研究

    C50為殺死半數(shù)腫瘤細(xì)胞所需的藥物濃度,其值越低,則藥物的細(xì)胞毒性越高。本文以順鉑作為陽(yáng)性對(duì)照,通過(guò)MTT法測(cè)試配合物[Cu(Quin-Hist)Cl2]對(duì)3種不同腫瘤細(xì)胞系(MCF-7,A-549和SKOV-3)的細(xì)胞毒活性,結(jié)果如圖6所示。從圖6可見(jiàn):該銅配合物對(duì)MCF-7,A-549和SKOV-3這3種細(xì)胞系的C50分別為15.2,27.2和25.8 μmol/L,由此說(shuō)明該配合物對(duì)MCF-7細(xì)胞系具有最強(qiáng)的體外細(xì)胞毒活性,對(duì)其他2種細(xì)胞系也有不同程度的生長(zhǎng)抑制作用。此外,該銅配合物對(duì)MCF-7細(xì)胞系的C50比順鉑的低(C50=20.4 μmol/L),即表現(xiàn)出強(qiáng)于順鉑的體外細(xì)胞毒活性,這表明配合物[Cu(Quin-Hist)Cl2]有望發(fā)展成為一種潛在的抗癌試劑。

    圖6 配合物對(duì)3種癌細(xì)胞株的細(xì)胞毒活性圖(以順鉑為對(duì)照)

    3 結(jié)論

    1) 以喹啉-2-甲醛、二鹽酸組胺、CuCl2·2H2O為原料,通過(guò)原位反應(yīng)合成了一個(gè)新的希夫堿類(lèi)銅配合物[Cu(Quin-Hist)Cl2]。

    2) 該希夫堿類(lèi)銅配合物結(jié)構(gòu)為畸變的三角雙錐構(gòu)型,且配合物分子通過(guò)氫鍵和π?π堆積作用形成具有鏈狀結(jié)構(gòu)的超分子體系。

    3) 配合物[Cu(Quin-Hist)Cl2]以溝槽結(jié)合的方式和CT-DNA結(jié)合,并且對(duì)MCF-7細(xì)胞系具有比順鉑更高體外細(xì)胞毒活性,表明該配合物可作為一種潛在的抗癌試劑。

    [1] GARBUTCHEONSINGH K B, GRANT M P, HARPER B W, et al. Transition metal based anticancer drugs[J]. Current Topics in Medicinal Chemistry, 2011, 11(5): 521?542.

    [2] OLIVERI V, VECCHIO G. 8-Hydroxyquinolines in medicinal chemistry: a structural perspective[J]. European Journal of Medicinal Chemistry, 2016, 120(14): 252?274.

    [3] 覃姣蘭, 曹倩倩, 覃其品, 等. 8-羥基喹啉及其衍生物金屬配合物抗腫瘤和抗菌活性研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)科學(xué): 化學(xué), 2017, 47(2): 172?182. QIN Jiaolan, CAO Qianqian, QIN Qipin, et al. Progress on antitumor and antibacterial activity of 8-hydroxyquinoline and its derivatives metal complexes[J]. Scientia Sinica Chimica, 2017, 47(2): 172?182.

    [4] QIN Qipin, CHEN Zhenfeng, QIN Jiadan, et al. Studies on antitumor mechanism of two planar platinum(II) complexes with 8-hydroxyquinoline: synthesis, characterization, cytotoxicity, cell cycle and apoptosis[J]. European Journal of Medicinal Chemistry, 2015, 92(6): 302?313.

    [5] MARZANO C, PELLEI M, TISATO F, et al. Copper complexes as anticancer agents[J]. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry, 2009, 9(2): 185?211.

    [6] ZHANG Zhen, WANG Huiyun, YAN Maocai, et al. Novel copper complexes as potential proteasome inhibitors for cancer treatment (Review)[J]. Molecular Medicine Reports, 2017, 15(1): 3?11.

    [7] LIAN Wenjing, WANG Xintian, XIE Chengzhi, et al. Mixed-ligand copper(ii) Schiff base complexes: the role of the co-ligand in DNA binding, DNA cleavage, protein binding and cytotoxicity[J]. Dalton Transactions, 2016, 45(22): 9073?9087.

    [8] SHEBLL M. Synthesis,spectroscopic characterization and antimicrobial activity of binuclear metal complexes of a new asymmetrical Schiff base ligand: DNA binding affinity of copper(II) complexes[J]. Spectrochimica Acta Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy, 2014, 117(1): 127?137.

    [9] ZHANG Shouchun, DONG Juanjuan, FAN Xiaorui, et al. Cobalt(II) complexes with thiosemicarbazone as potential antitumor agents:synthesis,crystal structures, DNA interactions, and cytotoxicity[J]. Spectrochimica Acta: Part A (Molecular and Biomolecular Spectroscopy), 2013, 66(24): 4268?4279.

    [10] ZHANG S C, DONG J J, FAN X R, et al. A new nickel(II) complex with the thiosemicarbazone of quinoline-2- carboxaldehyde: structure, DNA-binding, cleavage, and cytotoxic activities[J]. Journal of Coordination Chemistry, 2012, 65(17): 3098?3110.

    [11] MARMUR J. A procedure for the isolation of deoxyribonucleic acid from micro-organisms[J]. Journal of Molecular Biology, 1961, 3(1): 208?218.

    [12] REICHMANN M E, RICE S A, THOMAS C A, et al. A further examination of the molecular weight and size of desoxypentose nucleic acid[J]. Journal of American Chemical Society, 1954, 76(11): 3047?3053.

    [13] WOLFE A, JR SHIMER G H, MEEHAN T. Polycyclic aromatic hydrocarbons physically intercalate into duplex regions of denatured DNA[J]. Biochemistry, 1987, 26(20): 6392?6396.

    [14] EFTINK M R, GHIRON C A. Fluorescence quenching studies with proteins[J]. Anal Biochem, 1981, 114(2): 199?227.

    [15] ADDISON A W, RAO T N, DEEDIJK J, et al. Synthesis, structure, and spectroscopic properties of copper(II) compounds containing nitrogen-sulphur donor ligands; the crystal and molecular structure of aqua[1,7-bis(N-methylbenzimidazol- 2'-yl)-2,6-dithiaheptane]copper(II) perchlorate[J]. J Chem Soc Dalton Trans, 1984(7): 1349?1356.

    [16] SADHUKHAN D, RAY A, DAS S, et al. Effect of ligand substitution on DNA binding ability of two new square planar copper(II)-Schiff base complexes[J]. J Mol Struc, 2010, 975(1): 265?273.

    [17] DONG Jianfang, LI Lianzhi, LIU Guihua, et al. Synthesis, crystal structure and DNA-binding properties of a new copper(II) complex with l-valine Schiff base and 1,10-phenanthroline[J]. J Mol Struc, 2011, 986(1/2/3): 57?63.

    [18] QIAO Xin, MA Zhongying, XIE Chengzhi, et al. Study on potential antitumor mechanism of a novel Schiff Base copper(II) complex: synthesis, crystal structure, DNA binding, cytotoxicity and apoptosis induction activity[J]. J Inorg Biochem, 2011, 105(5): 728?737.

    [19] NAIR R B, TENG E S, KIRKLAND S L, et al. Synthesis and DNA-binding properties of [Ru(NH3)4dppz]2+[J]. Inorganic Chemistry, 1998, 37(1): 139?141.

    [20] WARING M J. Complex formation between ethidium bromide and nucleic acids[J]. Journal of Molecular Biology, 1965, 13(1): 269?282.

    [21] XU Zhihong, CHEN Fengjuan, XI Pinxian, et al. Synthesis, characterization, and DNA-binding properties of the cobalt(II) and nickel(II) complexes with salicylaldehyde 2-phenylquinoline-4-carboylhydrazone[J]. J Photochem Photobiol A, 2008, 196(2): 77?83.

    [22] KRISHNA A G, KUMAR D V, KHAN B, et al. Taxol-DNA interactions:fluorescence and CD studies of DNA groove binding properties of taxol[J]. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-General Subjects, 1998, 1381(1): 104?112.

    [23] COLLINS J G, SHIELDS T P, BARTON J K. 1H-NMR of Rh(NH3)4phi3+Bound to d(TGGCCA)2:classical intercalation by a nonclassical octahedral metallointercalator[J]. Journal of the American Chemical Society, 1994, 116(22): 9840?9846.

    [24] CHAUHAN M, BANERJEE K, ARJMAND F. DNA binding studies of novel copper(ii) complexes containing L-tryptophan as chiral auxiliary: in vitro antitumor activity of Cu-Sn2complex in Human neuroblastoma cells[J]. Inorg Chem, 2007, 46(8): 3072?3082.

    (編輯 陳燦華)

    Synthesis and bio-activity of copper(ii) complex of schiff-base derived from quinoline-2-carboxaldehyde

    HU Xi, YAN Jun, FANG Ziwei, ZHANG Shouchun

    (School of Chemistry and Chemical Engineering, Central South University, Changsha 410083, China)

    A novel copper(II) complex, i.e. [Cu(Quin-Hist)Cl2] (Quin-Hist=2-(4-imidazolyl) ethylimino-quinoline), was prepared and structurally characterized by elemental analysis and IR spectra. The results show that the complex crystallized belongs to monoclinic space group P21/n with=0. 858 90(7) nm,=1.282 38(10) nm,=1.459 76(12) nm,=99.346 00(10)°. The copper(II) ion is situated in a trigonal bipyramid geometry. There is apparent interaction between the copper(II) complex and calf thymus DNA(CT-DNA) via a groove binding mode. Moreover, the copper(II) complex exhibits in vitro cytotoxicity against MCF-7,A549 and SKOV-3 cell lines. Especially, the copper(II) complex shows higher growth inhibitory rates than cisplatin against MCF-7 cell line.

    copper complex; schiff-base; crystal structure; DNA binding; cytotoxicity

    O614.121

    A

    1672?7207(2018)08?1878?06

    10.11817/j.issn.1672?7207.2018.08.006

    2017?10?23;

    2017?12?20

    國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(21301194)(Project(21301194) supported by the National Natural Science Foundation of China)

    張壽春,博士,副教授,從事金屬配合物的生物活性研究;E-mail:zhang_shch@sina.cn

    猜你喜歡
    希夫細(xì)胞毒鍵角
    淺議鍵角大小比較
    分子中鍵角大小的比較
    崗松中二氫黃酮的分離、絕對(duì)構(gòu)型的確定及細(xì)胞毒活性
    高溫下季戊四醇結(jié)構(gòu)和導(dǎo)熱率的分子動(dòng)力學(xué)研究
    分子中鍵角的大小比較
    2種新型3,5-二溴水楊醛希夫堿的微波合成及表征
    廣藿香內(nèi)生真菌Daldinia eschscholzii A630次級(jí)代謝產(chǎn)物及其細(xì)胞毒活性研究
    水楊醛縮乙二胺希夫堿與牛血清白蛋白的相互作用及抑菌活性研究①
    微紫青霉菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的化學(xué)成分和細(xì)胞毒活性
    中成藥(2016年4期)2016-05-17 06:07:47
    希夫堿金屬配合物催化劑的研究進(jìn)展
    山東化工(2016年24期)2016-04-11 00:45:24
    久久精品国产99精品国产亚洲性色| 观看美女的网站| 日韩成人av中文字幕在线观看| 99久久精品国产国产毛片| 韩国av在线不卡| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 亚洲成av人片在线播放无| 精品熟女少妇av免费看| 久久久久久久久久黄片| 春色校园在线视频观看| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 久久久a久久爽久久v久久| 国产毛片a区久久久久| 久久久午夜欧美精品| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲国产最新在线播放| 午夜精品国产一区二区电影 | 精品人妻熟女av久视频| 99热精品在线国产| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 伊人久久精品亚洲午夜| av在线观看视频网站免费| 亚洲av福利一区| 亚洲五月天丁香| a级毛色黄片| 99久久精品一区二区三区| 亚洲中文字幕日韩| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 国产免费视频播放在线视频 | 啦啦啦韩国在线观看视频| 小说图片视频综合网站| 国产成人免费观看mmmm| 毛片女人毛片| 精品久久久噜噜| 小说图片视频综合网站| 久久久久久伊人网av| 日韩av在线大香蕉| 99久久人妻综合| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 亚洲自拍偷在线| 九九热线精品视视频播放| 欧美色视频一区免费| 最近最新中文字幕大全电影3| 看十八女毛片水多多多| www.色视频.com| 99国产精品一区二区蜜桃av| 精品久久久久久成人av| av福利片在线观看| 七月丁香在线播放| 日本欧美国产在线视频| 可以在线观看毛片的网站| 日日撸夜夜添| 综合色av麻豆| 久久精品久久久久久久性| 18+在线观看网站| ponron亚洲| 亚洲av成人av| 国产成人aa在线观看| 青春草视频在线免费观看| 亚洲av二区三区四区| 婷婷色综合大香蕉| 91精品伊人久久大香线蕉| 极品教师在线视频| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 婷婷色综合大香蕉| 精品久久久久久久末码| 国产精品久久电影中文字幕| 国产精品1区2区在线观看.| 亚洲精品成人久久久久久| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 国产麻豆成人av免费视频| 成人综合一区亚洲| 亚洲精品自拍成人| 激情 狠狠 欧美| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 久久久亚洲精品成人影院| АⅤ资源中文在线天堂| 中文字幕精品亚洲无线码一区| av专区在线播放| 1000部很黄的大片| or卡值多少钱| 桃色一区二区三区在线观看| 在线播放无遮挡| 久久99精品国语久久久| 日日干狠狠操夜夜爽| 女的被弄到高潮叫床怎么办| av福利片在线观看| 亚洲综合色惰| 99在线视频只有这里精品首页| 国产免费又黄又爽又色| 波多野结衣高清无吗| 久久久久久大精品| 女人被狂操c到高潮| 欧美激情国产日韩精品一区| 成人国产麻豆网| 91久久精品国产一区二区成人| 婷婷色av中文字幕| 黄色配什么色好看| 日韩大片免费观看网站 | 日本熟妇午夜| 日本wwww免费看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 青春草视频在线免费观看| ponron亚洲| 国产精品日韩av在线免费观看| 午夜爱爱视频在线播放| 久久久久久久久久成人| 午夜日本视频在线| 国产私拍福利视频在线观看| 国产黄片视频在线免费观看| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲天堂国产精品一区在线| 欧美激情国产日韩精品一区| ponron亚洲| 精品久久久久久久久亚洲| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 男女边吃奶边做爰视频| 日韩高清综合在线| 麻豆av噜噜一区二区三区| 别揉我奶头 嗯啊视频| 精品国内亚洲2022精品成人| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 边亲边吃奶的免费视频| 精品久久久久久电影网 | 联通29元200g的流量卡| 波野结衣二区三区在线| 精华霜和精华液先用哪个| 亚洲av福利一区| av在线播放精品| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产午夜精品论理片| 国产一区二区在线观看日韩| 好男人在线观看高清免费视频| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 亚洲成人中文字幕在线播放| 99久国产av精品国产电影| av专区在线播放| 2022亚洲国产成人精品| 日韩av在线大香蕉| 国产一区有黄有色的免费视频 | 蜜臀久久99精品久久宅男| 日本免费a在线| 内地一区二区视频在线| 久久热精品热| 99久久无色码亚洲精品果冻| 国产精品野战在线观看| 3wmmmm亚洲av在线观看| 乱系列少妇在线播放| 亚洲性久久影院| 日韩精品有码人妻一区| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 中文字幕久久专区| 黄片wwwwww| 亚洲综合精品二区| av在线亚洲专区| 草草在线视频免费看| 国产精华一区二区三区| 国产伦精品一区二区三区四那| 人人妻人人澡欧美一区二区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 十八禁国产超污无遮挡网站| 91aial.com中文字幕在线观看| 精品久久久久久久末码| 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产精品一及| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 身体一侧抽搐| 91久久精品国产一区二区成人| 久久人妻av系列| 日韩av不卡免费在线播放| 两个人视频免费观看高清| 亚洲美女搞黄在线观看| 日本免费一区二区三区高清不卡| 国产成人a∨麻豆精品| 天堂网av新在线| 国产精品福利在线免费观看| 亚洲最大成人手机在线| 欧美人与善性xxx| 草草在线视频免费看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 免费av不卡在线播放| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 一夜夜www| 久久人人爽人人片av| 欧美高清成人免费视频www| 亚洲欧美精品自产自拍| 久久久久久久久久黄片| 男人的好看免费观看在线视频| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 亚洲电影在线观看av| 久久这里有精品视频免费| eeuss影院久久| 婷婷色综合大香蕉| 国产精品久久久久久精品电影| 久久久午夜欧美精品| 亚洲精品亚洲一区二区| 亚洲av中文av极速乱| www日本黄色视频网| 欧美区成人在线视频| 全区人妻精品视频| 日本免费一区二区三区高清不卡| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 欧美变态另类bdsm刘玥| 97超碰精品成人国产| 91狼人影院| 少妇熟女aⅴ在线视频| 人妻夜夜爽99麻豆av| av免费在线看不卡| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 国产精品久久电影中文字幕| 国内精品一区二区在线观看| 精品人妻视频免费看| 嫩草影院精品99| 熟女人妻精品中文字幕| 国产色婷婷99| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 日日撸夜夜添| 精品久久久久久久末码| 色尼玛亚洲综合影院| 夫妻性生交免费视频一级片| 日韩制服骚丝袜av| 午夜福利在线观看吧| 国产大屁股一区二区在线视频| 一级黄色大片毛片| 色综合亚洲欧美另类图片| 欧美成人a在线观看| 亚洲不卡免费看| 亚洲成人av在线免费| 国产精品,欧美在线| 日本一二三区视频观看| 最近最新中文字幕大全电影3| 全区人妻精品视频| 亚洲18禁久久av| 日韩亚洲欧美综合| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 我的老师免费观看完整版| 国产亚洲91精品色在线| 国产片特级美女逼逼视频| 欧美潮喷喷水| 久久久亚洲精品成人影院| 91久久精品国产一区二区三区| 99热6这里只有精品| 欧美高清成人免费视频www| 亚洲精品,欧美精品| 亚洲av一区综合| 美女高潮的动态| 亚洲精品456在线播放app| 国产精品人妻久久久久久| 国产精品国产三级专区第一集| 免费av毛片视频| 午夜福利视频1000在线观看| 麻豆一二三区av精品| 中文天堂在线官网| 成年女人永久免费观看视频| 亚洲欧美清纯卡通| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 国产 一区精品| 日日干狠狠操夜夜爽| 日韩成人av中文字幕在线观看| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲色图av天堂| 色综合亚洲欧美另类图片| 久久久久九九精品影院| 99热这里只有是精品50| 日本免费在线观看一区| 精品久久国产蜜桃| 国产视频内射| 少妇高潮的动态图| 免费av毛片视频| 狠狠狠狠99中文字幕| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 国产极品天堂在线| 美女内射精品一级片tv| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| av国产久精品久网站免费入址| 美女被艹到高潮喷水动态| 波多野结衣高清无吗| 一区二区三区四区激情视频| 超碰97精品在线观看| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| av福利片在线观看| 国产精品av视频在线免费观看| 成人漫画全彩无遮挡| 在线免费十八禁| 99久久人妻综合| a级一级毛片免费在线观看| 精品国产露脸久久av麻豆 | 国产亚洲一区二区精品| 国产淫语在线视频| 亚洲成人av在线免费| 日本午夜av视频| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲高清免费不卡视频| 色视频www国产| 91精品一卡2卡3卡4卡| 1000部很黄的大片| 国产探花极品一区二区| 亚洲av二区三区四区| 国产精品一区www在线观看| 久久这里有精品视频免费| 亚洲欧美精品专区久久| 久久韩国三级中文字幕| 亚洲三级黄色毛片| 男人舔奶头视频| 超碰av人人做人人爽久久| 99国产精品一区二区蜜桃av| 禁无遮挡网站| 免费人成在线观看视频色| 中文字幕av成人在线电影| 一个人免费在线观看电影| 亚洲精品一区蜜桃| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| av在线播放精品| 国产精品永久免费网站| 欧美精品一区二区大全| 九九热线精品视视频播放| 一级av片app| 国产高清不卡午夜福利| 麻豆国产97在线/欧美| 国产单亲对白刺激| 人体艺术视频欧美日本| 欧美性猛交黑人性爽| 国产淫片久久久久久久久| 日韩国内少妇激情av| 亚州av有码| av国产久精品久网站免费入址| 久久午夜福利片| 精品久久久噜噜| 中文字幕av在线有码专区| 村上凉子中文字幕在线| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 国产一区有黄有色的免费视频 | 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 黄色日韩在线| 长腿黑丝高跟| 亚洲一区高清亚洲精品| 亚洲欧美精品自产自拍| 偷拍熟女少妇极品色| 国产91av在线免费观看| 午夜福利网站1000一区二区三区| 国产黄色小视频在线观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 国产极品天堂在线| 欧美成人一区二区免费高清观看| 午夜免费男女啪啪视频观看| 日韩制服骚丝袜av| 国产视频内射| 在线天堂最新版资源| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 午夜久久久久精精品| 久久久午夜欧美精品| 亚洲欧美清纯卡通| 国产伦在线观看视频一区| 在线免费观看的www视频| 久久精品夜色国产| 熟女电影av网| 最近手机中文字幕大全| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 最近中文字幕2019免费版| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 搞女人的毛片| 一夜夜www| 伊人久久精品亚洲午夜| 久久6这里有精品| 九草在线视频观看| 天天躁日日操中文字幕| 人体艺术视频欧美日本| 亚洲四区av| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 亚洲精品国产av成人精品| 成人亚洲欧美一区二区av| 亚洲精品影视一区二区三区av| 亚洲经典国产精华液单| 最近手机中文字幕大全| 两个人的视频大全免费| 简卡轻食公司| 婷婷色麻豆天堂久久 | 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 日本熟妇午夜| 美女内射精品一级片tv| 欧美三级亚洲精品| 人妻少妇偷人精品九色| 2022亚洲国产成人精品| 久热久热在线精品观看| 久久99热这里只有精品18| 又爽又黄a免费视频| 国产成人91sexporn| 国产大屁股一区二区在线视频| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 午夜老司机福利剧场| 九九在线视频观看精品| 一本一本综合久久| 国产爱豆传媒在线观看| 三级国产精品片| 亚洲欧美精品专区久久| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 草草在线视频免费看| 精品久久久久久久久久久久久| 亚洲av.av天堂| 亚洲久久久久久中文字幕| 久久久亚洲精品成人影院| 国产黄片视频在线免费观看| 丰满乱子伦码专区| 欧美高清性xxxxhd video| 永久免费av网站大全| 欧美一区二区亚洲| 亚洲三级黄色毛片| 草草在线视频免费看| 久久草成人影院| 欧美三级亚洲精品| 六月丁香七月| 看黄色毛片网站| 欧美精品一区二区大全| 亚洲综合精品二区| 色网站视频免费| 免费看美女性在线毛片视频| 日韩视频在线欧美| 亚洲欧洲国产日韩| 麻豆乱淫一区二区| 国产爱豆传媒在线观看| 国产真实乱freesex| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 噜噜噜噜噜久久久久久91| 免费观看精品视频网站| 亚洲自偷自拍三级| 国产高清三级在线| 热99在线观看视频| 欧美成人免费av一区二区三区| av天堂中文字幕网| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产成人午夜福利电影在线观看| 亚洲内射少妇av| 十八禁国产超污无遮挡网站| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 日本与韩国留学比较| 乱系列少妇在线播放| 天堂中文最新版在线下载 | 亚洲国产精品合色在线| 淫秽高清视频在线观看| 日韩一区二区视频免费看| av免费在线看不卡| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 哪个播放器可以免费观看大片| 欧美一区二区精品小视频在线| 国产精品.久久久| 少妇被粗大猛烈的视频| 老司机影院成人| 国产高清不卡午夜福利| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲成av人片在线播放无| a级毛片免费高清观看在线播放| 青春草视频在线免费观看| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 午夜精品国产一区二区电影 | 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 欧美bdsm另类| 成人二区视频| 中文欧美无线码| 国产视频内射| 中文字幕av成人在线电影| 免费av不卡在线播放| 久久久久久久久久黄片| 亚洲精品一区蜜桃| 五月伊人婷婷丁香| 超碰97精品在线观看| 人人妻人人澡欧美一区二区| 国产老妇伦熟女老妇高清| 全区人妻精品视频| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 亚洲在久久综合| av在线天堂中文字幕| 精品久久久噜噜| 国产成年人精品一区二区| 午夜精品国产一区二区电影 | 最近手机中文字幕大全| 国产精品1区2区在线观看.| 亚洲精品影视一区二区三区av| 亚洲成人av在线免费| 国产精品久久视频播放| 亚洲色图av天堂| 亚洲国产精品成人综合色| 国产黄片美女视频| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 九草在线视频观看| 日本爱情动作片www.在线观看| 久久久久久久久久成人| 久久久精品欧美日韩精品| 可以在线观看毛片的网站| 亚洲av福利一区| 天堂网av新在线| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 久久久a久久爽久久v久久| 免费av毛片视频| 特大巨黑吊av在线直播| 久久热精品热| 日韩亚洲欧美综合| 最近中文字幕2019免费版| 深爱激情五月婷婷| 丝袜喷水一区| av国产免费在线观看| 国产麻豆成人av免费视频| 日韩欧美 国产精品| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 欧美成人精品欧美一级黄| 午夜福利在线在线| 1024手机看黄色片| 寂寞人妻少妇视频99o| 99久国产av精品国产电影| 三级经典国产精品| 岛国在线免费视频观看| 看免费成人av毛片| 欧美激情在线99| 精品不卡国产一区二区三区| 丝袜美腿在线中文| 黄色配什么色好看| 一二三四中文在线观看免费高清| 黄色一级大片看看| 99久久无色码亚洲精品果冻| 国产老妇女一区| 精品一区二区三区视频在线| 日韩欧美 国产精品| 国产美女午夜福利| 神马国产精品三级电影在线观看| 国产真实乱freesex| 日本免费一区二区三区高清不卡| 91精品伊人久久大香线蕉| 人体艺术视频欧美日本| 99在线视频只有这里精品首页| av在线蜜桃| 久久精品夜色国产| 美女大奶头视频| 亚洲不卡免费看| 国产成人免费观看mmmm| av在线老鸭窝| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 成人欧美大片| 亚洲最大成人av| 久久精品国产亚洲av涩爱| 性插视频无遮挡在线免费观看| 国产毛片a区久久久久| 国产高清有码在线观看视频| 看十八女毛片水多多多| 日日摸夜夜添夜夜爱| 成人亚洲欧美一区二区av| 免费观看的影片在线观看| 国产乱人视频| 国产69精品久久久久777片| 国产真实伦视频高清在线观看| 如何舔出高潮| 黄片wwwwww| 中文字幕免费在线视频6| 日本wwww免费看| 国产色婷婷99| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 一个人看的www免费观看视频| 免费搜索国产男女视频| 国产午夜福利久久久久久| 水蜜桃什么品种好| 欧美日韩在线观看h| 精品久久久久久成人av| 最新中文字幕久久久久| 国产久久久一区二区三区| av免费在线看不卡| 欧美97在线视频| 中国国产av一级| 亚洲经典国产精华液单| 久久久久九九精品影院| 1000部很黄的大片| 免费在线观看成人毛片| 亚洲自拍偷在线| 欧美另类亚洲清纯唯美| 免费av毛片视频| 99热精品在线国产| 久久精品综合一区二区三区| 欧美激情国产日韩精品一区| 国模一区二区三区四区视频| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 夫妻性生交免费视频一级片| 国产在视频线精品| 国产三级中文精品| 国产片特级美女逼逼视频| 欧美又色又爽又黄视频| 国产v大片淫在线免费观看| 久久久成人免费电影| 亚洲久久久久久中文字幕| 免费电影在线观看免费观看| 欧美97在线视频| 国产亚洲最大av| 黄色配什么色好看| 美女cb高潮喷水在线观看| 男人舔奶头视频| 欧美成人精品欧美一级黄| 我的女老师完整版在线观看| 日韩视频在线欧美| 一级二级三级毛片免费看| 看免费成人av毛片| 亚洲高清免费不卡视频| 精品熟女少妇av免费看| 国产成人aa在线观看| 亚洲欧美清纯卡通| 久久热精品热| 久久草成人影院| 国产精品,欧美在线| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 午夜亚洲福利在线播放| 欧美日韩综合久久久久久| 乱系列少妇在线播放| av免费观看日本| 国产高清三级在线| 激情 狠狠 欧美| 岛国毛片在线播放|