血脂康與阿托伐他汀對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用

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急性心肌梗死(AMI)是心肌供血中斷引起的心肌缺血性壞死，后果嚴(yán)重，盡快恢復(fù)血供是搶救瀕臨死亡心肌的唯一有效方法，目前常采用溶栓治療或冠狀動脈介入治療實(shí)現(xiàn)再通，但不容忽視的是，再灌注本身往往會造成心肌更為持久和嚴(yán)重的損害，缺血心肌得到再灌注，縮小梗死面積，改善預(yù)后。然而，心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion，I/R)后常常出現(xiàn)缺血再灌注損傷影響了再灌注的療效。研究表明其與自由基生成增多、鈣超載、心肌纖維能量代謝障礙、血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)功能紊亂、一氧化氮(NO)、中性粒細(xì)胞及細(xì)胞凋亡等過程密切相關(guān)。眾多研究表明，他汀類藥物具有多種調(diào)脂以外的作用，包括改善內(nèi)皮功能、穩(wěn)定動脈粥樣硬化斑塊、抑制炎癥反應(yīng)等[1-2]。國內(nèi)外研究提示他汀類藥物可以改善心肌I/R損傷[3-5]。血脂康是從特制的中藥紅曲中提煉而成，是我國自主開發(fā)研制的具有他汀類降脂作用的中藥，富含羥甲基戊二酰輔酶A(HMG-Co)還原酶抑制劑(洛伐他汀)、多種不飽和脂肪酸、人體必需氨基酸、甾醇和少量黃酮等多種有效成分，除具有降低血脂、防治動脈硬化功能外，還具有抑制巨噬細(xì)胞分泌、抗炎等作用[6]。本研究旨在比較阿托伐他汀與血脂康應(yīng)用于急性心肌缺血再灌注大鼠對減少心肌損傷及改善心室重構(gòu)的作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物與分組 20周齡的Wistar大鼠115只(體重190 g～230 g)，隨機(jī)分為4組，假手術(shù)組25只、缺血再灌注組30只、阿托伐他汀組30只、血脂康組30只。

1.2 方法

1.2.1 給藥方法 缺血再灌注組及假手術(shù)組給予1 mL/d生理鹽水；阿托伐他汀組：取阿托代他汀2 mg/kg，配成濃度0.02%的藥液(阿托伐他汀由大連輝瑞公司提供)，1 mL/l00 g；血脂康組：以血脂康0.09 g/kg溶于生理鹽水中灌胃(血脂康由北京大學(xué)維信生物科技有限公司生產(chǎn))；每天空腹灌胃1次，灌胃7 d后，制作大鼠在體心肌I/R模型，模型建立后再連續(xù)灌胃4周。

1.2.2 大鼠在體心肌I/R模型的建立[7]連接心電監(jiān)護(hù)儀監(jiān)測心電變化，并做Ⅱ?qū)?lián)心電圖記錄。將大鼠麻醉后，仰臥固定于手術(shù)臺上，先用縫線在開胸部位做一荷包，自左側(cè)3～4肋間開胸，暴露心臟，于冠狀動脈左前降支起始0.2 cm處穿線，待呼吸、血壓平穩(wěn)15 min后，用一細(xì)小帶凹槽乳膠管墊于血管和結(jié)扎線之間，結(jié)扎。30 min后剪開結(jié)扎線，再灌注180 min(假手術(shù)組僅穿線不結(jié)扎)。結(jié)扎成功標(biāo)志：結(jié)扎線遠(yuǎn)端心肌顏色發(fā)紺，心電圖表現(xiàn)為R波高聳或ST段抬高[8]。模型制備成功標(biāo)志：松開結(jié)扎線以恢復(fù)冠狀動脈血量，缺血部位心肌顏色恢復(fù)，抬高的ST段下降。

1.2.3 血清乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超敏C反應(yīng)蛋白(hsCRP)水平的測定 大鼠再灌注180 min后采血3 mL，加入預(yù)先準(zhǔn)備的無菌肝素抗凝管內(nèi)，3 000 r/min離心5 min，分離血清，采用全自動生化儀檢測血清LDH、CK；酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定hsCRP水平。

1.2.4 心室重構(gòu)指標(biāo)的測定 各組動物于術(shù)后第28天稱取體重后打開胸腔，分離心臟，分別稱取左右心室重量，與體重相除，得左右心室相對重量，用千分尺量取室間隔厚度。

2 結(jié) 果

2.1 各組大鼠血清LDH、CK、hsCRP水平比較 缺血再灌注組、阿托伐他汀組及血脂康組血清LDH、CK、hsCRP水平均明顯高于假手術(shù)組(P<0.01)，但阿托伐他汀組及血脂康組血清LDH、CK、hsCRP水平明顯低于缺血再灌注組(P<0.01)，而阿托伐他汀組與血脂康組各指標(biāo)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。詳見表1。

表1 各組大鼠血清LDH、CK、hsCRP水平比較(±s)

2.2 各組大鼠心室重構(gòu)指標(biāo)比較 與假手術(shù)組比較，缺血再灌注組左室相對重量、右室相對重量及室間隔厚度明顯增加(P<0.01)；與缺血再灌注組比較，阿托伐他汀組和血脂康組左室重量指數(shù)、右室重量指數(shù)、室間隔厚度均明顯降低(P<0.01)；阿托伐他汀組和血脂康組心室重構(gòu)各指標(biāo)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。詳見表2。

表2 各組大鼠心室重構(gòu)指標(biāo)比較(±s)

3 討 論

目前已知心肌缺血再灌注損傷的發(fā)生機(jī)制包括氧自由基生成增加、鈣超載、能量代謝障礙、心肌細(xì)胞凋亡、血管內(nèi)皮細(xì)胞功能受損以及炎性細(xì)胞浸潤等。氧自由基生成增加和心肌細(xì)胞凋亡在心肌缺血再灌注損傷的早期進(jìn)程中占有重要地位。眾多研究結(jié)果表明，缺血組織再灌注時(shí)會產(chǎn)生急性炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致缺血組織、細(xì)胞損傷，炎癥細(xì)胞釋放細(xì)胞因子通過不同的致炎和抗炎途徑參與缺血再灌注損傷的病理過程[9]。Uehara等[10]通過研究認(rèn)為hsCRP是對AMI后心肌灌注評價(jià)的重要指標(biāo)之一，尤其是在AMI后心肌的重構(gòu)中。在急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)病人中hsCRP水平隨著梗死面積的不斷擴(kuò)大逐漸開始增加，說明hsCRP在AMI病人的心肌灌注中扮演著一個(gè)活躍的角色，并且已經(jīng)作為一個(gè)STEMI病人預(yù)后和心肌灌注狀態(tài)的預(yù)測標(biāo)志[11]。

近年來，有研究發(fā)現(xiàn)采用藥物預(yù)處理能夠有效抑制心肌缺血再灌注的心肌細(xì)胞凋亡，減少心肌梗死面積[12]。眾多的研究證實(shí)他汀類藥物有心肌保護(hù)作用。有研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)皮冠狀動脈介入術(shù)(PCI)術(shù)前給予他汀類藥物短期治療可顯著降低術(shù)后E選擇素和黏附分子-1的水平，對內(nèi)皮功能有防護(hù)作用[13]。血脂康是我國開發(fā)研制的具有他汀類降脂作用的中藥，作為一種天然他汀可有效地抑制體內(nèi)3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶[14]，減少膽固醇的合成，并通過反饋調(diào)節(jié)，增加肝細(xì)胞表面低密度脂蛋白(LDL)受體的活性而加速LDL的清除，從而達(dá)到以降低血清膽固醇為主的血脂調(diào)節(jié)作用。血脂康降脂作用不低于其他他汀類藥物[15]。血脂康還具有其他他汀類所擁有的抑制動脈粥樣硬化斑塊形成、抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖遷移、抑制肝臟沉積、保護(hù)血管內(nèi)皮功能、抑制炎癥反應(yīng)、抗心肌缺血等作用，且其療效不比他汀類藥物差[16-18]。

本研究中，阿托伐他汀組和血脂康組大鼠血清中的心肌酶標(biāo)志物CK和LDH水平及炎性標(biāo)志物hsCRP水平明顯低于缺血再灌注組，表明預(yù)先應(yīng)用血脂康和阿托伐他汀可以對心肌缺血再灌注損傷產(chǎn)生保護(hù)作用，抑制炎癥因子的釋放，從而改善急性心肌梗死后心肌灌注的狀態(tài)，并且這種保護(hù)作用與其降脂效應(yīng)無關(guān)，這與國內(nèi)外研究結(jié)果一致。與假手術(shù)組對比，缺血再灌注組左室相對重量、右室相對重量明顯增高，室間隔厚度明顯增加(P<0.01)；與缺血再灌注組比較，阿托伐他汀組及血脂康組均能使上述指標(biāo)降低(P<0.01)。證明應(yīng)用阿托伐他汀和血脂康均可以抑制大鼠心肌缺血再灌注后的左室擴(kuò)張。

綜上所述，血脂康作為一種調(diào)脂藥物，除調(diào)脂外，還可減少心肌缺血，減輕炎癥反應(yīng)，改善內(nèi)皮功能，保護(hù)缺血再灌注損傷，且療效與他汀類藥物無明顯差異，其保護(hù)作用除部分與其中的他汀類成分有關(guān)，還可能與其他成分有關(guān)，因此對其深入的研究很可能擴(kuò)大該藥的臨床應(yīng)用范圍。