乳腺動態(tài)增強MRI定量參數(shù)Ktrans、Kep、Ve與免疫組化指標MVD、VEGF的相關性

1.鄭州大學附屬鄭州中心醫(yī)院放射科 (河南 鄭州 450000)

2.鄭州大學附屬鄭州中心醫(yī)院介入科 (河南 鄭州 450000)

杜麗娟1 劉一強2 張新明1陳亞龍1 劉亞飛1

乳腺疾病是女性疾病中最常見的類型之一，在世界范圍近年來其發(fā)病率均表現(xiàn)出上升趨勢。尤其是是隨著經(jīng)濟的發(fā)展，逐漸加快生活節(jié)奏以及環(huán)境等因素的影響，乳腺癌的檢出率也逐年上升[1]。乳腺癌是最常見的女性惡性腫瘤疾病，大多數(shù)國家和地區(qū)其均居女性惡性腫瘤第一位。目前乳腺疾病的良惡性常借助乳腺動態(tài)增強MRI定量進行診斷，其以腫瘤新生血管的產(chǎn)生為基礎，通過判斷其血流動力學變化進行病變性質(zhì)的辨別[2]。惡性腫瘤具有豐富的新生血管，微血管密度較正常乳腺增大，增加了對大分子對比劑的通透性，可造成異于乳腺良性病變時間及信號強度變化，對鑒別診斷乳腺病變方面具有重要意義。生物學研究表明乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)歸過程均與腫瘤的血管生成具有緊密的聯(lián)系，其中MVD主要反映腫瘤的血管化程度，VEGF水平是新生血管的功能狀態(tài)重要指標，兩者均為陰性腫瘤血管生成的重要因素[3]。對于乳腺癌，早期診斷并采取積極治療對癌細胞的控制具有重要意義。在影像學上，現(xiàn)階段已證實乳腺動態(tài)增強MRI定量分析可用于評價腫瘤的血管生成情況，但將相關參數(shù)與MVD、VEGF進行聯(lián)合研究的報道尚不多見[4]。因此該研究探究乳腺動態(tài)增強MRI定量參數(shù)Ktrans、Kep、Ve與免疫組化指標MVD、VEGF的相關性，為乳腺癌的早期良惡性判斷提供生物學依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料該探究對象為2015年11月～2017年11月于我院診斷的40例惡性乳腺疾病患者、30例良性乳腺疾病患者以及30例非脂肪型乳腺健康門診者，設為惡性組、良性組與對照組。惡性組年齡最低27歲，最高55歲，平均(45.04±4.34)歲；疾病類型：25例浸潤性導管癌；5例粘液腺癌；5例浸潤性小葉癌；3例髓樣癌；2例導管內(nèi)癌伴間質(zhì)浸潤；良性組年齡最低24歲，最高54歲，平均(44.56±4.56)歲；疾病類型：14例乳腺纖維腺瘤；7例纖維腺??；5例小葉增生伴導管囊狀擴張；3例乳腺炎性腫塊；1例導管內(nèi)乳頭狀瘤；對照組最低25歲，最高53歲，平均(44.87±4.48)歲；納入標準：均于影象診斷后7d內(nèi)手術病理確診；無手術、化學治療、放射治療、激素治療及靶向治療史；圖像清晰，無明顯運動及呼吸偽影；對照組為年齡配對的非脂肪型乳腺健康門診者；排除標準：合并嚴重心肺等內(nèi)科疾??；哺乳期或懷孕期婦女；比較三組年齡資料差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，具有比較意義。

1.2 方法采用3.0 T磁共振掃描儀(西門子3.0skyra)以及專用八通道雙側乳房相控線圈。囑咐患者取俯臥位，自然懸垂雙側乳房使之垂于線圈內(nèi)，先進頭部，掃描范圍包含雙側腋窩、雙側乳腺組織。橫軸位T2WI：TR、TE 、TI分別為4060ms、70ms、230ms，層厚、層間距分別為3.0mm、1.5mm，矩陣：358×448，F(xiàn)OV：340 mm×340mm；橫軸位DWI：TR、TE分別為5700ms、66ms，b值取0s/mm-2與800s/mm-2。T1多翻轉(zhuǎn)角：參數(shù)：TR、TE分別為5.64ms、2.46ms，矩陣：196×320，F(xiàn)OV：333mm×380mm，層厚2.5mm，層間距0.5mm，翻轉(zhuǎn)角度5、10、12、15°。T1動態(tài)增強序列：翻轉(zhuǎn)角12°，其余參照T1的翻轉(zhuǎn)角。掃描采用時間分辨隨機軌道成像(TWIST)技術，注射磁共振釓雙胺對比劑(GE，美國)，注射劑量為0.1mmol/kg，速率2.5ml/s，完成后按相同速率注射15ml生理鹽水。均進行無間歇掃描，每位待檢者掃描時相共70次，除第1時相17.3s，其余單時相掃描時間均為4.58s，總時間5min 33s。所有圖像錄入Omni-Kinetics軟件（GE，美國)，由我科室兩名資深影像醫(yī)師閱片，記錄三組Ktrans、Kep、Ve等MRI定量參數(shù)，Ktrans：血管內(nèi)對比劑擴散到血管外的速率，單位為min；Kep：對比劑在組織間重新回到血管內(nèi)的速率，單位為min；Ve：血管外細胞外間隙除以整個體素的容積；三者關系為Ktrans=Ve·Kep。

手術病理檢查留取惡性組與良性組乳腺病灶標本，標本常規(guī)脫蠟水化，進行兩次5minPBS液浸泡，隨后進行檬酸抗原修復、滴加3% H202、BS液再浸泡等常規(guī)免疫組化染色步驟，參照Zhao L Y 等[5]操作方法。MVD計數(shù)：光鏡(100倍）下選擇3個微血管密度熱區(qū)，隨后400倍光鏡進行熱區(qū)抗CDl05染成棕黃色的血管計數(shù)，計算3個視野的平均值即為MVD；VEGF計數(shù)：光鏡(100倍)下選擇3個微血管密度熱區(qū)，隨后400倍光鏡記錄陽性、陰性數(shù)目，＜5%為“-”性，記0；6%～25%為“+”，記1；26%～50%為“2+”，記2；≥51為“3+”，記3。

1.3 統(tǒng)計學分析采用SPSS20.00統(tǒng)計軟件，計數(shù)資料采用百分率(%)的形式表示，行χ2檢驗，計量資料以(±s)表示，組間比較采用t檢驗，三組比較采用F檢驗，相關性分析采用Pearson相關分析法，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 三組乳腺動態(tài)增強MRI定量參數(shù)比較惡性組Ktrans、Kep、Ve均顯著高于良性組與對照組，且良性組顯著高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表1，圖1-6，圖7-11。

圖1 III級右乳浸潤性導管癌乳腺動態(tài)增強MRI；圖2-4 Ktrans、Kep、Ve偽彩圖，值為0.18min、1.12min、0.16；圖5-6 MVD、VEGF高表達。圖7 左乳纖維腺瘤乳腺動態(tài)增強MRI；圖8-10 Ktrans、Kep、Ve偽彩圖，值為0.05min、0.61min、0.08；圖11 MVD、VEGF低表達。

2.2 良性組與惡性組VEGF、MVD比較良性組VEGF、MVD均顯著高與對照組，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表2，圖1-6，圖7-11。

2.3 乳腺動態(tài)增強MRI定量參數(shù)與MVD、VEGF的相關性Ktrans、Kep、Ve與VEGF、MVD均呈正相關(P＜0.05)，見表3。

3 討 論

乳腺癌屬于血管依賴性腫瘤，其腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移以及預后均與腫瘤血管生長程度聯(lián)系緊密，因此腺癌微血管可作為腫瘤的生物學特性監(jiān)測評估以及癌細胞轉(zhuǎn)移及腫瘤預后的重要指標。最初發(fā)生腫瘤時無血管生成，腫瘤細胞營養(yǎng)來源于擴散的組織間隙營養(yǎng)物質(zhì)，隨著腫瘤的生長才有腫瘤血管生成[6]。腫瘤微血管可通過瘤細胞分泌的VEGF誘導腫瘤生成微血管；也可通過宿主血管的腫瘤化。在惡性腫瘤血管的生成及發(fā)展過程中受到多種細胞因子的調(diào)節(jié)與調(diào)控。腫瘤血管數(shù)目多，微循環(huán)血流速增加、容量增大[7]；新生血管具有雜亂結構、分布不均勻，多為單層內(nèi)皮且不完整，裂隙性血管網(wǎng)因缺乏無舒縮功能導致滲漏性增高[8]。以上因素導致的腫瘤微循環(huán)在時間、空間的不均衡性成為乳腺動態(tài)增強MRI能夠量化分析的生物學基礎。

表1 三組乳腺動態(tài)增強MRI定量參數(shù)比較（s）

表1 三組乳腺動態(tài)增強MRI定量參數(shù)比較（s）

注：與惡性組比較*P＜0.05，與良性組比較#P＜0.05

組別 n Ktrans（min） Kep（min） Ve惡性組 40 0.17±0.04 1.21±0.12 0.14±0.05良性組 30 0.05±0.01* 0.61±0.09* 0.08±0.02*對照組 30 0.02±0.01*# 0.45±0.05*# 0.04±0.01*#F / 320.65 640.57 76.91 P / 0.000 0.000 0.000

表2 良性組與惡性組VEGF、MVD比較（s）

表2 良性組與惡性組VEGF、MVD比較（s）

組別 n VEGF MVD（n/400HP）惡性組 40 1.56±0.23 68.23±12.12良性組 30 0.86±0.12 37.23±7.23 t / 15.174 12.363 P / 0.000 0.000

表3 乳腺動態(tài)增強MRI定量參數(shù)與MVD、VEGF的相關性

該探究結果顯示惡性組Ktrans、Kep、Ve均顯著高于良性組與對照組，且良性組顯著高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，與國外Ryu J K等[9]研究結果一致。而這與乳腺疾病的病理生理基礎聯(lián)系密切。乳腺癌患者其腫瘤細胞生長較為旺盛，產(chǎn)生大量的新生血管，動靜脈瘺、血管結構紊亂等引起血管管徑變粗，表現(xiàn)為不完整內(nèi)皮，血管壁變薄且較脆，基底膜減少等造成血管壁通透性逐漸升高[10]，對比劑交換速度變快，劑量增多因此出現(xiàn)計量血管內(nèi)對比劑擴散到血管外的速率的Ktrans明顯高于其他人群，由于Ktrans=Ve·Kep的關系表現(xiàn)出Kep、Ve相應的變化[11]。正常乳腺與良性病變?nèi)鄙偻ㄍ感暂^高的血管，血流速度相對平穩(wěn)，對比劑填充緩慢且均勻，各MRI定量參數(shù)差異具有統(tǒng)計學意義[12]。

生成腫瘤新生血管依賴于血管活性物質(zhì)的高表達，通過對血管內(nèi)皮細胞的刺激達到誘導生成新生血管的目的，其中VEGF具有最高的特異性，是調(diào)控因子最最高效的一種[13]。因此，生成新生血管病理水平不僅表現(xiàn)為VEGF蛋白的高表達也表現(xiàn)了微血管密度的上升，MVD、VEGF是反映腫瘤血管生成以及通透性的最重指標[14]。而在腫瘤學研究中，多種惡性腫瘤均表現(xiàn)為VEGF的高表達，錢建華等[15]發(fā)現(xiàn)胃癌患者病灶VEGF含量顯著高于其他胃器質(zhì)性疾病病灶以及正常胃組織。本探究良性組VEGF、MVD均顯著高與對照組，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，與等研究結果一致。相關性分析結果顯示Ktrans、Kep、Ve與VEGF、MVD均呈正相關(P＜0.05)，也與等研究結果一致。

綜上所述，Ktrans、Kep、Ve與VEGF、MVD均呈正相關,在乳腺疾病的良惡性鑒別診斷中具有重要價值。