補(bǔ)充低聚糖對(duì)運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)的動(dòng)情周期抑制大鼠HPO軸激素的影響

李 合, 王人衛(wèi), 趙 璨, 劉曉麗, 洪潤(rùn)肖

(1. 上海師范大學(xué) 體育學(xué)院，上海 200234；2. 上海體育學(xué)院 運(yùn)動(dòng)科學(xué)學(xué)院，上海 200438；3. 湖北民族學(xué)院 體育學(xué)院，湖北 恩施 445300)

由于長(zhǎng)期處于高強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練應(yīng)激，女性運(yùn)動(dòng)員發(fā)生月經(jīng)周期紊亂的比例要遠(yuǎn)高于普通人[1]。長(zhǎng)期月經(jīng)周期紊亂可影響骨代謝，不利于骨骼健康[2-4]，并且會(huì)對(duì)運(yùn)動(dòng)員以后的生育健康埋下隱患[5]。研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練狀態(tài)下，機(jī)體攝入的能量遠(yuǎn)不能滿足運(yùn)動(dòng)所需要的能量，造成機(jī)體可利用能量的負(fù)平衡是引起月經(jīng)周期紊亂的起始因素[6-7]。因此，增加可利用能量的攝入和降低運(yùn)動(dòng)量及強(qiáng)度是緩解月經(jīng)周期紊亂的方法[8]。在實(shí)際訓(xùn)練中，為了提高或維持運(yùn)動(dòng)能力，采用降低運(yùn)動(dòng)量及強(qiáng)度對(duì)于運(yùn)動(dòng)員而言不現(xiàn)實(shí)，而通過(guò)增加可利用能量攝入的方法具有實(shí)用意義[9]。本文通過(guò)補(bǔ)充低聚糖的方法，探討在外源性能量補(bǔ)充的情況下，是否可以緩解動(dòng)情周期抑制大鼠的HPO軸(hypothalamus-pituitary-ovarian axis)激素釋放紊亂，為運(yùn)動(dòng)員月經(jīng)周期紊亂的防治提供理論基礎(chǔ)。

1 研究對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取由上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源中心西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供的健康成熟2月齡雌性SD大鼠36只，平均體質(zhì)量為(200.0±5.9) g。將符合國(guó)家飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的嚙齒類動(dòng)物飼料(由上海仕林生物科技有限公司提供，產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)為Q/TJCX 1-2007)作為基礎(chǔ)標(biāo)準(zhǔn)飼料(1 337 kJ/100 g，每100 g飼料中含有脂肪4 g、蛋白質(zhì)19 g、糖類52 g)。低聚糖干預(yù)組所用的低聚糖由河北華辰淀粉糖有限公司提供，生產(chǎn)許可證號(hào)為QS130123010057，質(zhì)量管理體系認(rèn)證證書編號(hào)為00109Q23299R0M/1300。本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)通過(guò)上海市營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的鑒定，并接受其監(jiān)督([倫審]2013-002)。

1.2 研究方法

1.2.1 分組及干預(yù)方法 選取2月齡SD雌性大鼠36只，在適應(yīng)運(yùn)動(dòng)2周后，隨機(jī)分為4組，每組9只。為了全面觀察實(shí)驗(yàn)組的干預(yù)效果，對(duì)照組設(shè)計(jì)為2組，分別為陰性對(duì)照組(negative control group，Nco組)，該組為常規(guī)對(duì)照組，不進(jìn)行運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練，以維持正常的動(dòng)情周期；陽(yáng)性對(duì)照組(postive control group，Pco組)，該組為動(dòng)情周期抑制模型組，進(jìn)行9周運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練，前6周為遞增負(fù)荷訓(xùn)練，后3周為恒定負(fù)荷訓(xùn)練，以維持動(dòng)情周期抑制狀態(tài)。

實(shí)驗(yàn)組設(shè)計(jì)為2組，前6周均采用遞增負(fù)荷訓(xùn)練，后3周采取不同的干預(yù)方式，其中后3周不再進(jìn)行運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練，只進(jìn)行安靜休息的為安靜休息組(rest intervention group，Res組)，用于觀察安靜休息的干預(yù)方法對(duì)動(dòng)情周期抑制的緩解作用，并與補(bǔ)充低聚糖的干預(yù)方法進(jìn)行效果比較；繼續(xù)進(jìn)行3周恒定負(fù)荷訓(xùn)練，采用低聚糖進(jìn)行補(bǔ)充的為低聚糖補(bǔ)充組(oligosaccharide intervention group，Oli組)。實(shí)驗(yàn)組的運(yùn)動(dòng)負(fù)荷方案同Pco組一致，后3周采用的恒定訓(xùn)練負(fù)荷是第6周的訓(xùn)練負(fù)荷(圖1)。

圖1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)Figure 1 Experimental design

本實(shí)驗(yàn)?zāi)M運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練中周期性耐力跑的方式，參照Bedford大鼠運(yùn)動(dòng)負(fù)荷標(biāo)準(zhǔn)[10]和王人衛(wèi)教授建立的大鼠動(dòng)情周期抑制模型時(shí)的運(yùn)動(dòng)方案[11]，采用段氏PT98型鼠類跑臺(tái)進(jìn)行訓(xùn)練。每籠3只，每周連續(xù)訓(xùn)練6 d，然后休息1 d，每天上、下午各訓(xùn)練1次(訓(xùn)練負(fù)荷見(jiàn)表1)，第9周最后一天下午訓(xùn)練結(jié)束后，晚上再加訓(xùn)1次。對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組前6周均采用普食喂養(yǎng)，每天固定為每籠投喂相同量的飼料(每天早上稱量對(duì)照組一天消耗的飼料量，然后以此為參考，給實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行喂食)和200 mL飲用純凈水；后3周，Oli組在普食喂養(yǎng)的基礎(chǔ)上，每天下午飲用含有24 g低聚糖(17.2 kJ/g)的100 mL溫水(第二天早上補(bǔ)充100 mL飲用純凈水，以保障每組每天飲水總量相同)其余組仍200 mL飲用純凈水?？傮w上，Oli組平均每天增加能量攝入17.2 kJ/g×24 g/3只=137.6 kJ/只。

表1 大鼠運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)

1.2.2 大鼠陰道脫落細(xì)胞學(xué)檢查 參考Marcondes的方法[12]，為避免造成待檢查大鼠應(yīng)激反應(yīng)，檢查的大鼠和待檢查的大鼠分置于不同的實(shí)驗(yàn)室。待檢查大鼠放置動(dòng)物手術(shù)臺(tái)后，安撫并清理大鼠毛上的墊料，用拇指和食指捏住大鼠尾巴，其余三指輕壓其后腰背部，翻起尾巴露出陰道口，清理糞便后，用醫(yī)用棉簽蘸少許生理鹽水，在大鼠陰道按照順時(shí)針?lè)较蜉p轉(zhuǎn)一周。將采集物涂于玻璃載玻片后，在無(wú)水乙醇中浸泡10 min，采用常規(guī)HE染色，通過(guò)普通光學(xué)顯微鏡觀察陰道脫落細(xì)胞的狀況。

1.2.3 激素指標(biāo)檢測(cè) 為了消除運(yùn)動(dòng)應(yīng)急對(duì)內(nèi)分泌系統(tǒng)產(chǎn)生的不必要影響，大鼠處死前安靜休息36 h，并禁食12 h。大鼠稱重后，采用體積分?jǐn)?shù)為10%的水合氯醛作為麻醉劑，按照每千克大鼠注射40 mg麻醉劑的量進(jìn)行麻醉。待大鼠完全麻醉后，將大鼠四肢固定在手術(shù)臺(tái)，迅速打開(kāi)腹腔，剝離下腔靜脈，用一次性負(fù)壓真空管采血5～8 mL，低溫離心(3 000 r/min)15 min，取上清液置于-80 ℃的冰箱中，待測(cè)GnRH、FSH、LH、E2、P及PRL。GnRH采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定，試劑盒由美國(guó)R & D公司提供。

E2的測(cè)定采用免疫化學(xué)發(fā)光法，試劑盒由 Beckman Coulter 公司提供，采用Beckman Coulter 公司生產(chǎn)的 Access 2 immunoassay system(全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定系統(tǒng))進(jìn)行測(cè)試。采用雙抗體放射免疫分析法測(cè)定FSH、LH、P、PRL，放射免疫分析試劑盒由第二軍醫(yī)大學(xué)神經(jīng)生物學(xué)教研室提供。

1.3 數(shù)據(jù)處理 采用SPSS 20.0數(shù)據(jù)軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，所有結(jié)果均以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(M±SD)表示。采用單因素方差分析進(jìn)行組間比較，采用LSD法進(jìn)行兩兩比較。P<0.05表示具有顯著性差異。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 大鼠體質(zhì)量的變化情況 由圖2可見(jiàn)，在前6周建立動(dòng)情周期抑制狀態(tài)，未進(jìn)行任何干預(yù)措施前，各組大鼠的體質(zhì)量的自然生長(zhǎng)發(fā)育變化基本一致；動(dòng)情周期抑制建立后，自第7周開(kāi)始，體質(zhì)量的不同變化趨勢(shì)開(kāi)始顯現(xiàn)，Res組體質(zhì)量開(kāi)始迅速增加；而Oli組也呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，但無(wú)Res組明顯；Nco組體質(zhì)量基本不再變化；Pco組體質(zhì)量下降明顯。

圖2 大鼠體質(zhì)量的變化Figure 2 Changes of body weight of rats

2.2 大鼠內(nèi)臟脂肪情況 禁食12 h后對(duì)大鼠進(jìn)行處死，處死前測(cè)量大鼠的體長(zhǎng)、體質(zhì)量；處死后取大鼠內(nèi)臟周圍的脂肪進(jìn)行稱量。由表2可見(jiàn)，各組大鼠的體長(zhǎng)無(wú)組間統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但體質(zhì)量、內(nèi)臟脂肪含量均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。為了避免體質(zhì)量對(duì)內(nèi)臟脂肪質(zhì)量的影響，將內(nèi)臟脂肪質(zhì)量/體質(zhì)量×100作為衡量大鼠體脂率的指標(biāo)。經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)：Pco組大鼠體脂率顯著低于Nco組，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；Oli組大鼠體脂率顯著低于Nco組；Res組合Oli組大鼠體脂率顯著高于Pco組；Oli組大鼠體脂率低于Res組，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2 大鼠形態(tài)指標(biāo)比較(M±SD)

注：*表示與Nco組比較，P<0.05；#表示與Pco組比較，P<0.05

2.3 大鼠陰道脫落細(xì)胞情況 大鼠的動(dòng)情周期一般為4～5 d，圖3(a)～(d)為Nco組大鼠一個(gè)動(dòng)情周期的陰道脫落細(xì)胞HE染色結(jié)果，該組為動(dòng)情周期正常組。由圖3可見(jiàn)，不同動(dòng)情周期階段表現(xiàn)出不同的陰道脫落細(xì)胞特征：圖3(a)為動(dòng)情前期，該階段以大量有核表層細(xì)胞為特征；圖3(b)為動(dòng)情期，該階段以大量無(wú)核表層細(xì)胞為特征；圖3(c)為動(dòng)情后期，該階段以大量有核表層細(xì)胞和白細(xì)胞為特征；圖3(d)為動(dòng)情間期，該階段以出現(xiàn)大量白細(xì)胞為特征。

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始2周后，每2天進(jìn)行陰道脫落細(xì)胞學(xué)檢查，結(jié)果顯示：運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練第3周后，實(shí)驗(yàn)干預(yù)組各組陰道涂片出現(xiàn)中層細(xì)胞和少量底層細(xì)胞；第4～5周時(shí)，出現(xiàn)大量的中層細(xì)胞和相對(duì)少量的底層細(xì)胞；第6周時(shí)，出現(xiàn)大量底層細(xì)胞和相對(duì)少量的中層細(xì)胞，并且陰道脫落細(xì)胞數(shù)量明顯較前幾周減少(圖3(e)、(f))。這表明，經(jīng)過(guò)6周的遞增負(fù)荷訓(xùn)練，動(dòng)情周期開(kāi)始出現(xiàn)抑制，這與王人衛(wèi)等[11]觀察到的一致。

在第7周開(kāi)始進(jìn)行干預(yù)，陰道脫落細(xì)胞學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)：Res、Oli組陰道脫落細(xì)胞數(shù)量開(kāi)始增加(圖3(g))；至第9周后，以上2組大鼠陰道脫落細(xì)胞數(shù)量同Nco組無(wú)顯著性差異(圖3(h))；隨著運(yùn)動(dòng)的繼續(xù)，Pco組陰道脫落細(xì)胞顯著減少。

圖3 大鼠陰道脫落細(xì)胞HE染色結(jié)果Figure 3 Results of HE staining of vaginal exfoliated cells in rats

2.4 HPO軸激素濃度情況 通過(guò)陰道脫落細(xì)胞學(xué)檢查確認(rèn)大鼠的動(dòng)情周期抑制狀態(tài)建立后，再進(jìn)行3周恒定負(fù)荷訓(xùn)練，并采取不同的干預(yù)措施。結(jié)果顯示，HPO軸釋放的各激素濃度均有組間統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(表3)。兩兩比較的結(jié)果顯示，Pco組的GnRH、FSH、LH、E2及P濃度均顯著低于Nco組，而Pco組的PRL濃度則顯著高于Nco組。Res組和Oli組的GnRH、FSH、LH、E2及P濃度均低于Nco組，而Nco組的PRL濃度高于Res組和Oli組，但均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Res組和Oli組的GnRH、FSH、LH、E2及P濃度均顯著高于Pco組，而Res組和Oli組的PRL濃度則顯著低于Pco組。Oli組同Res組比較發(fā)現(xiàn)，除釋放的GnRH濃度顯著高于Res組外，其余激素濃度，Res組和Nco組均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(表4～表9)。

表3 HPO軸激素濃度情況比較(M±SD)

表4 GnRH組間比較結(jié)果

注：*表示P<0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；表5～表9同此

表5 FSH組間比較結(jié)果

表6 LH組間比較結(jié)果

表7 E2組間比較結(jié)果

表8 P組間比較結(jié)果

表9 PRL組間比較結(jié)果

3 分析與討論

動(dòng)情周期是有胎盤類哺乳動(dòng)物擁有的一種經(jīng)常性的生理變化，與人類的月經(jīng)周期相似，是受身體性腺軸釋放的性激素影響而產(chǎn)生的周期性變化。動(dòng)情周期抑制類似于女性的閉經(jīng)，是一種病理狀態(tài)，長(zhǎng)期處于這種狀態(tài)，不僅會(huì)影響身體健康，還會(huì)抑制生殖功能。本文以大鼠動(dòng)情周期抑制模型模擬女性閉經(jīng)，通過(guò)補(bǔ)充低聚糖，增加外源性能量攝入，觀察是否可以促進(jìn)HPO軸激素釋放恢復(fù)正常，以逆轉(zhuǎn)動(dòng)情周期抑制狀態(tài)。

3.1 對(duì)內(nèi)臟脂肪含量的影響 體質(zhì)量是早期衡量月經(jīng)周期是否規(guī)律的直觀指標(biāo)。早期學(xué)者發(fā)現(xiàn)從事形體類運(yùn)動(dòng)項(xiàng)目的運(yùn)動(dòng)員，如體操運(yùn)動(dòng)員[13]，普遍存在體質(zhì)量過(guò)輕，月經(jīng)周期不規(guī)律的問(wèn)題，體質(zhì)量與月經(jīng)周期存在密切的相關(guān)性。本文各組雌性大鼠體質(zhì)量在前6周未采取干預(yù)措施前，隨著自然生長(zhǎng)發(fā)育體質(zhì)量變化基本一致，但當(dāng)動(dòng)情周期抑制形成后，隨著不同干預(yù)措施的施行，大鼠的體質(zhì)量呈現(xiàn)不同的變化。主要原因是由于運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練負(fù)荷的降低和外源性可利用能量的補(bǔ)充，使得安靜休息組和補(bǔ)充低聚糖組大鼠的體質(zhì)量得以繼續(xù)維持生長(zhǎng)，而運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度和飲食保持不變的陽(yáng)性對(duì)照組(即動(dòng)情周期抑制模型組)則由于缺乏足夠的外源性能量補(bǔ)充，體質(zhì)量呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。

體質(zhì)量的變化只是直觀現(xiàn)象，內(nèi)臟脂肪含量的變化才是客觀原因。研究表明，內(nèi)臟脂肪對(duì)維持正常的動(dòng)情周期具有重要作用。總結(jié)已有的研究[14-16]，學(xué)者認(rèn)為：①內(nèi)臟脂肪是能量存儲(chǔ)器，可以為動(dòng)情周期的維持提供必需的可利用能量；②內(nèi)臟脂肪也具有分泌瘦素(leptin)的作用，能直接作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的leptin受體，對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)釋放進(jìn)行機(jī)體能量?jī)?chǔ)存的信號(hào)，并且與下丘腦GnRH脈沖性釋放密切相關(guān)，從而直接影響HPO軸。本文發(fā)現(xiàn)，雖然補(bǔ)充低聚糖組的內(nèi)臟脂肪含量低于安靜休息組和陰性對(duì)照組(均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異)，卻顯著高于陽(yáng)性對(duì)照組，表明通過(guò)補(bǔ)充低聚糖可以有效阻止內(nèi)臟脂肪的消耗，并達(dá)到與安靜休息近似的效果。3.2 對(duì)陰道脫落細(xì)胞學(xué)的影響 研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期力竭運(yùn)動(dòng)致動(dòng)情周期紊亂大鼠的卵巢顆粒細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著高于正常對(duì)照組[17]。對(duì)動(dòng)情周期正常的大鼠進(jìn)行遞增負(fù)荷訓(xùn)練時(shí)發(fā)現(xiàn)：當(dāng)訓(xùn)練進(jìn)行到第3周時(shí)，陰道涂片出現(xiàn)中層細(xì)胞和少量底層細(xì)胞，卵巢功能開(kāi)始表現(xiàn)出輕度低落；當(dāng)訓(xùn)練至第7周時(shí)，則出現(xiàn)大量底層細(xì)胞和相對(duì)少量的中層細(xì)胞，表現(xiàn)為卵巢功能大幅下降[11]。經(jīng)過(guò)6周遞增負(fù)荷訓(xùn)練后發(fā)現(xiàn)，陰道脫落細(xì)胞的數(shù)量急劇減少，與已有研究結(jié)果[11]基本一致，表明第6周后，動(dòng)情周期抑制模型已成功建立。隨后進(jìn)行為期3周的不同手段的干預(yù)，根據(jù)陰道脫落細(xì)胞學(xué)可知：陽(yáng)性對(duì)照組的底層細(xì)胞數(shù)量顯著增加，表明動(dòng)情周期抑制狀態(tài)加深；而安靜休息組和補(bǔ)充低聚糖組陰道脫落細(xì)胞數(shù)量逐漸增加，開(kāi)始出現(xiàn)無(wú)核表層細(xì)胞，表明動(dòng)情周期抑制狀態(tài)逐步解除。

3.3 對(duì)HPO軸合成分泌激素的影響 HPO軸是由下丘腦-垂體-性腺軸組成的神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)，控制女性發(fā)育、正常月經(jīng)和性功能，因此又稱性腺軸。HPO軸的每個(gè)環(huán)節(jié)均有其獨(dú)特的神經(jīng)內(nèi)分泌功能，并且彼此調(diào)節(jié)和影響。下丘腦分泌的GnRH作用于腦垂體，促使其分泌FSH、LH和PRL；卵巢在FSH和LH的作用下分泌E2、P；子宮內(nèi)膜的周期性變化又受卵巢分泌的E2、P的控制；卵巢分泌的E2、P又可通過(guò)負(fù)反饋抑制下丘腦GnRH的釋放，從而使HPO軸重新調(diào)整相應(yīng)激素的釋放[18]。

通過(guò)比較血清激素檢查結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，陽(yáng)性對(duì)照組的GnRH、FSH、LH、E2及P濃度均顯著低于其余各組，而PRL則顯著高于其余各組。研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)分泌系統(tǒng)由多條內(nèi)分泌軸組成，每條內(nèi)分泌軸對(duì)運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的反應(yīng)不一致，從而引起內(nèi)分泌穩(wěn)態(tài)失衡，導(dǎo)致HPO軸分泌出現(xiàn)紊亂[19]。有研究報(bào)道，長(zhǎng)期高強(qiáng)度的劇烈運(yùn)動(dòng)可導(dǎo)致多巴胺神經(jīng)元活性降低[19]。多巴胺神經(jīng)元是下丘腦和腦垂體間重要的神經(jīng)遞質(zhì)，可以通過(guò)Kp(神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生的一類多肽類激素)保持GnRH的脈沖頻率。過(guò)高的PRL通過(guò)短路反饋影響下丘腦多巴胺神經(jīng)元活性，由于機(jī)體長(zhǎng)期處于負(fù)能量平衡狀態(tài)，易導(dǎo)致下丘腦弓狀核神經(jīng)元的老化、凋亡及神經(jīng)遞質(zhì)的傳遞出現(xiàn)障礙，從而抑制GnRH的合成與釋放，破壞其正常的脈沖分泌[20]。當(dāng)PRL分泌升高時(shí)，其通過(guò)破壞GnRH的正常脈沖式分泌導(dǎo)致FSH和LH分泌的減少，使卵巢合成的E2及P分泌也減少，從而造成月經(jīng)周期紊亂和閉經(jīng)等問(wèn)題。

本文通過(guò)補(bǔ)充低聚糖或采取安靜休息的方法發(fā)現(xiàn)：補(bǔ)充低聚糖組或安靜休息組分泌的PRL水平顯著低于陽(yáng)性對(duì)照組，而與陰性對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；且GnRH、FSH、LH、E2及P濃度均顯著高于陽(yáng)性對(duì)照組，并與陰性對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。表明補(bǔ)充低聚糖或安靜休息后，多巴胺神經(jīng)元活性升高，且神經(jīng)遞質(zhì)傳遞增多，從而緩解了因PRL分泌增加而引起的GnRH脈沖式分泌的抑制，使性腺軸各環(huán)節(jié)激素的合成與釋放恢復(fù)正常，陰道脫落細(xì)胞數(shù)量逐漸增加，無(wú)核表層細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)，動(dòng)情周期的抑制狀態(tài)得到緩解。

4 結(jié)論

通過(guò)補(bǔ)充低聚糖，增加大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練狀態(tài)下雌性大鼠的外源性能量攝入，使HPO軸合成分泌激素恢復(fù)正常。由此推斷大鼠能量負(fù)平衡狀態(tài)得到改善，使可利用能量增加，緩解了動(dòng)情周期抑制狀態(tài)。