• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    低溫等離子體輔助聚乳酸表面接枝乳酸鏈球菌素及抗菌性

    2018-07-25 06:27:10戶帥鋒王潔卿李鵬輝韋宗偉王懷雨
    集成技術(shù) 2018年4期
    關(guān)鍵詞:抗菌劑接枝等離子體

    戶帥鋒 王潔卿 李鵬輝 高 明 韋宗偉 王懷雨 王 喆

    1(深圳市中科摩方科技有限公司 深圳 518114)2(中國科學(xué)院深圳先進技術(shù)研究院 深圳 518055)

    1 引 言

    抗菌活性包裝是目前食品及材料領(lǐng)域研究開發(fā)的一個前沿和熱點,是將抗菌劑混入高聚物包裝材料中,使其具有抗菌活性的包裝方法??咕钚园b可以緩慢地釋放出抗菌劑,在包裝內(nèi)部維持長期穩(wěn)定的抗菌劑濃度,達(dá)到抗菌防腐的目的,以逐漸減少或代替向食品中加入的防腐劑[1]。其替代了傳統(tǒng)的向食品中添加抗菌劑的食品保藏方法,能長時間保持食品的營養(yǎng)和風(fēng)味,延長貨架期,提高安全性,能夠有效解決高水分活度食品的抗菌防腐難題。

    目前應(yīng)用的抗菌活性包裝分為兩類:(1)將抗菌劑包埋在基材內(nèi)部或直接涂抹在表面,通過向食品表面釋放抗菌劑實現(xiàn)抗菌活性,同時又通過控制抗菌劑的遷移溶出速率,實現(xiàn)持續(xù)性抗菌;(2)將抗菌劑分子與基材通過化學(xué)鍵等方式結(jié)合,固定在基材表面,使其不溶出,通過材料與食品的緊密接觸來實現(xiàn)抗菌活性,并阻止環(huán)境中微生物對食品的侵蝕,能夠長期保持抗菌活性[2]。

    抗菌包裝體系主要包括包裝基材、抗菌劑和食品三個部分。食品的貨架期除受自身因素影響外,還取決于包裝材料的特性。但現(xiàn)在常用的塑料包裝不易降解,容易造成白色污染,所以對可降解包裝材料的研究,一直是包裝領(lǐng)域的研究熱點。聚乳酸(Polylactic Acid,PLA)是一種原材料來源廣泛,廢棄后不會造成污染,且很有發(fā)展前途的高分子材料[3],非常適合做食品活性包裝基材。但 PLA 也存在一些缺點,如無抗菌性等。這些缺點限制了其在活性抗菌食品包裝領(lǐng)域的進一步應(yīng)用。

    乳酸鏈球菌素(Nisin)是一種天然多肽抗菌素類物質(zhì),在食品工業(yè)中應(yīng)用廣泛[4,5]。Nisin 作為一種安全高效新型天然防腐劑,在國內(nèi)外均得到認(rèn)可,并且已經(jīng)應(yīng)用到食品行業(yè)的各個領(lǐng)域。將Nisin、殼聚糖和茶多酪復(fù)合配比對新鮮冷卻羊肉進行冷卻保鮮證明,Nisin 具有很好的抑菌效果,并發(fā)現(xiàn)殼聚糖和 Nisin 之間具有很好的交互反應(yīng)[6]。采用不同濃度的葡聚糖和海藻糖對 Nisin進行熱處理后穩(wěn)定性的影響研究。實驗結(jié)果表明,添加葡聚糖和海藻糖均能提高 Nisin 熱處理后的效價[7]。用葡萄提取物、Nisin 和乙二胺四乙酸與大豆分離蛋白復(fù)合的可食性薄膜不僅具有較好的物理性質(zhì),而且還有較高的抗菌活性[8]。

    等離子體改性技術(shù)能快速、高效地引發(fā)常規(guī)反應(yīng)中不能或很難實現(xiàn)的物理或化學(xué)變化,賦予膜材料表面各種優(yōu)異性能,而不改變基體材料本身的性質(zhì),是拓展高分子膜材料應(yīng)用范圍的一種重要方法[9]。將高分子材料進行表面改性,達(dá)到高性能或高功能,是經(jīng)濟有序地開發(fā)新材料的重要功能。近年來,利用低溫等離子體技術(shù)對高分子材料表面改性的研究十分活躍,其改性優(yōu)點具體體現(xiàn)在[10]:(1)賦予改性表面各種優(yōu)異的性能;(2)表面改性層,厚度極薄(從幾納米到幾百納米),整體性質(zhì)基本不變;(3)可以賦予一些材料本身不具有的性能,如抗菌特性等。

    本文將利用低溫等離子體技術(shù),在低真空的條件下對 PLA 膜進行表面改性,并對其表面性能進行表征。通過用 Nisin 溶液浸泡,從而使Nisin 接枝在改性的 PLA 薄膜表面,賦予 PLA 薄膜抗菌活性,促進其在食品包裝領(lǐng)域的應(yīng)用。

    2 材料與方法

    2.1 材料

    PLA 薄膜(4032D,厚度:40 μm)購自深圳光華偉業(yè)有限公司;Nisin(900 UI/mg)購自上海源葉生物科技有限公司;L.monocytogenes菌株(ATCC19115)購自廣東微生物菌種保藏中心。

    2.2 低溫等離子體處理

    低溫等離子體處理(Cold Plasma Treatment,CPT)采用自制的等離子體設(shè)備(400 kHz,200~500 W)。其中,等離子體設(shè)備的反應(yīng)室直徑為 100 nm,兩個電極板之間的距離為 25 mm。在(20±5)℃ 的環(huán)境下,PLA 薄膜樣品尺寸為50 mm×50 mm。實驗中,首先將反應(yīng)室抽真空至 100 Pa(無氣體通入),樣品在功率為 300 W 的條件下分別處理 0、15 s、30 s、45 s 和 60 s,并依次命名為 PLA0、PLA15、PLA30、PLA45 和PLA60;然后,將處理后的樣品放置于溫度為(20±5)℃、相對濕度為 50% 的條件下保存待用。

    2.3 Nisin 涂膜處理

    首先,將 Nisin 溶于蒸餾水,在室溫下以100 rpm 的速率攪拌 1 h 后,獲得 10 mg/mL 的Nisin 溶液。然后,Nisin 溶液經(jīng)過 5 300 rpm 冷凍離心 20 min,取上清液置于-20℃ 冷藏待用。最后,在(20±5)℃ 環(huán)境下,將 PLA0、PLA15、PLA30、PLA45 和 PLA60 分別置于解凍后的 Nisin 溶液中 2 min,再置于 40℃ 條件下烘干 6 h。將獲得的薄膜分別命名為 PN0、PN15、PN30、PN45 和 PN60,以上 5 組樣品合稱為PLA Nisin 薄膜,即 PN 薄膜。

    2.4 薄膜的性能表征

    2.4.1 原子力顯微鏡

    將膜樣品取一小片后,置于原子力顯微鏡(Bruker MultiMode 8,Bruker,德國)中,采用非接觸方式工作,諧振頻率約為 267 kHz,操作在手套箱(氧氣含量<0.1 ppm,水蒸氣含量<0.1 ppm)中完成。利用該手段,主要對 PLA 薄膜的粗糙度進行表征。

    2.4.2 水接觸角

    選用固體石蠟和玻璃作為基板材料。實驗前,對固體基板表面進行拋光和清洗處理。人工拋光后,首先分別用清潔劑、自來水、蒸餾水超聲清洗 15 min;然后,將基板取出在無水酒精中清洗 10 min,室溫下置于濾紙上吹干;最后,用微量注射器垂直緩慢地將 5 μL 膜液滴到水平放置的固體基板上,使用接觸角測定儀(OCA20,Dataphysics Co. Ltd.,德國)測定膜液接觸角。相同試驗重復(fù) 3 次,結(jié)果取平均值。

    2.4.3 抗菌性能測試

    將L.monocytogenes菌株(ATCC19115)接種于腦心津液瓊脂培養(yǎng)基表面,在 37℃ 恒溫培養(yǎng)箱中活化培養(yǎng) 24 h,然后在胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯(TSB-YE)中進行兩次傳代培養(yǎng)恢復(fù)菌株活性。用生理鹽水進行梯度稀釋,得到 105CFU/mL的L.monocytogenes菌液待用。其中,CFU 為菌落形成單位(Colony-Forming Units)。

    取 2.5 mL 105CFU/mL 的L.monocytogenes菌液接種于 22.5 mL TSB-YE 中。將 PLA、PN0、PN15、PN30、PN45 和 PN60 分別加入上述溶液中作為 6 個實驗組,領(lǐng)取一組不加任何薄膜作為空白對照。每組均做 3 個平行,置于搖床中以 250 rpm 的速率震蕩培養(yǎng) 1 h。經(jīng)過梯度稀釋后,進行平板計數(shù)。

    3 結(jié)果與討論

    3.1 粗糙度

    圖1 低溫等離子體處理對 PLA 薄膜表面性能的影響Fig. 1 The effect of cold plasma treatment on the properties of PLA film surface

    由圖1可知,隨著處理時間的延長,薄膜表面平均粗糙度(Ra)先增大后減小。這是由于低溫等離子體放電過程中產(chǎn)生的高能活性粒子、離子、自由基等,在處理中不斷轟擊 PLA 膜表面,碰撞傳導(dǎo)的能量遠(yuǎn)超過材料表面原子的結(jié)合能,引發(fā)化學(xué)鍵斷裂,產(chǎn)生表面刻蝕現(xiàn)象。但是,我們也可以看到,當(dāng)處理時間超過 30 s 后,PLA 薄膜的粗糙度呈下降趨勢,這與常規(guī)看起來并不相符。

    研究顯示,等離子體能量的增加導(dǎo)致分子單體斷裂成更多片段,因此薄膜的粗糙度隨著等離子體射頻的增加而減小[11]。另有研究表明,經(jīng)過氦氣和氬氣等離子體處理后,薄膜表面的凸起被刻蝕,薄膜粗糙度更加均勻,更加平滑[12]。而大氣等離子體處理的薄膜,由于空氣中氧氣的刻蝕作用更強,導(dǎo)致薄膜表面粗糙度增大。處理方式是影響薄膜表面粗糙度的一個因素,另一個因素則是薄膜的內(nèi)在結(jié)構(gòu)[13]。PLA 在擠出成型過程中,由于退火溫度的不同,導(dǎo)致薄膜表層和內(nèi)部的結(jié)晶度、均勻性不同。薄膜表面的分子結(jié)構(gòu)大多都是無定型態(tài),結(jié)構(gòu)更加松散,相對于內(nèi)層更容易被刻蝕。在 100 Pa、無處理氣體的條件下,高能量的離子和 PLA 易刻蝕的表層導(dǎo)致處理時間超過 30 s 后薄膜逐漸變得光滑。

    3.2 接觸角

    接觸角測量是一種快速、簡單的研究材料表面性能變化的方法。圖1 為水滴在膜表面 3 s 內(nèi)接觸角的變化趨勢。未經(jīng)等離子體處理改性的PLA 膜的接觸角為 82.5°,屬于疏水性膜。隨著等離子體處理時間的增加,PLA 薄膜的接觸角先下降后上升,在 15 s 降至最低 51.06°(P<0.05);在 45 s 和 60 s 時分別上升至 77.8°、75°,與未處理薄膜間無顯著差異(P>0.05)??梢?,薄膜的接觸角變化與粗糙度變化呈負(fù)相關(guān)。有研究表明,粗糙度和化學(xué)性質(zhì)的變化使材料表面的接觸角與楊氏方程產(chǎn)生差異[14,15]。根據(jù)經(jīng)典的潤濕理論[16],薄膜表面粗糙度的增加可以提高其在大氣中的親水性。上述兩種理論證實,等離子體處理對 PLA 薄膜表面粗糙度的影響導(dǎo)致了其接觸角的變化。

    3.3 菌落總數(shù)分析

    抗菌材料的抗菌活性取決于兩個方面:一是抗菌劑自身的抗菌活性及經(jīng)過擠出加工后的抗菌活性,這是材料具有抗菌活性的前提;二是抗菌劑從基材中的遷移溶出速率,這是材料具有抗菌活性的關(guān)鍵。對抗菌材料的制備和研究需要從這兩個方面入手。Nisin 是由 34 個氨基酸組成的短肽,氨基酸殘基賦予其親水性和親脂性。由于 Nisin 使L.monocytogenes菌體細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)溶出,破壞菌體細(xì)胞膜的完整性進而導(dǎo)致菌體裂解死亡[17,18]。因此,Nisin 對L.monocytogenes具有良好的抗菌效果。Shiroodi等[19]通過共混包埋的方式制備出含 Nisin 的大豆分離蛋白(PPI)、乳清分離蛋白(WPI)和 PLA薄膜,將上述薄膜置于L.monocytogenes菌液中經(jīng)過 48 h 培養(yǎng)后,結(jié)果顯示含有 Nisin 的PPI、WPI 和 PLA 薄膜中菌液的濃度分別上升至 6.0 log10(CFU/mL)、8.47 log10(CFU/mL)和9.0 log10(CFU/mL)。這表明包埋后的 Nisin 不能充分與菌接觸,進而發(fā)揮其抑菌作用。本文選用L.monocytogenes作為抗菌對象,將 Nisin 接枝在PLA 薄膜表面,考察 PN 膜的抗菌活性。

    等離子體處理對 PLA 表面 Nisin 接枝效果的影響如圖2所示。經(jīng)過 1 h 震蕩培養(yǎng)后,空白對照組和 PLA 組的L.monocytogenes的菌落總數(shù)由初始的 4.0 log10(CFU/mL)分別增加至 5.61 log10(CFU/mL)、5.48 log10(CFU/mL),但兩者間無顯著差異(P>0.05)。而 PN0、PN15、PN30、PN45 和 PN60組的L.monocytogenes的菌落總數(shù)分別下降至3.01 log10(CFU/mL)、3.50 log10(CFU/mL)、3.47 log10(CFU/mL)、3.01 log10(CFU/mL)和2.25 log10(CFU/mL),顯示 Nisin 接枝后的 PN 薄膜具備不同的抑菌效果,且均好于 PLA 薄膜。抗菌效果不同表明接枝在薄膜表面的 Nisin 含量不同。經(jīng)過等離子體處理的 PLA 膜表面粗糙度的變化導(dǎo)致接觸面積增加,刻蝕作用導(dǎo)致表面自由基增多,可有效與 Nisin 進行接枝反應(yīng),從而具備一定的抗菌性能。在 Nisin 溶液浸泡后,等離子體處理前 45 s 和未經(jīng)等離子體處理的 PLA 薄膜間的抗菌效果差異不顯著(P>0.05),說明 Nisin 的接枝量差異不明顯。隨著低溫等離子體處理時間延長至 60 s,PN60 的抑菌效果達(dá)到最佳。

    圖2 低溫等離子體處理對 PN 薄膜抗菌性能的影響Fig. 2 The effect of cold plasma treatment on the antimicrobial properties of PN film surface

    4 與國內(nèi)外相似研究的對比分析

    Xu 等[20]通過化學(xué)偶聯(lián)的方法將 Nisin 接枝固定在聚醚酰亞胺薄膜表面,將其置于 10 mL 105CFU/mLS.aureus溶液中,經(jīng)過 24 h 培養(yǎng)后,95.2% 的S.aureus被殺死。Aveyard 等[21]通過化學(xué)偶聯(lián)的方法將 Nisin 接枝固定在經(jīng)過氦氣等離子體處理后的聚苯乙烯薄膜表面,以薄膜對L.monocytogenes和S.aureus的抑菌效果證明,不同條件下 Nisin 的接枝效果不同。因此,本文主要是通過 PN 膜的抑菌性能強弱來判斷經(jīng)等離子體處理的 PLA 薄膜與 Nisin 接枝的程度。其中,PN60 組的菌落總數(shù)最低(P<0.05),證明其具有最優(yōu)的抑菌效果。

    5 結(jié) 論

    低溫等離子體處理可明顯改善 PLA 薄膜表面的物理性質(zhì)。表征結(jié)果表明,平均粗糙度隨著處理時間的增加先增大后減小,表面親水性與粗糙度呈正相關(guān)。通過對抑菌性能的表征發(fā)現(xiàn),PN60具有最好的抑菌效果,這說明低溫等離子體處理60 s 后的 PLA 薄膜與 Nisin 的接枝效果最好。

    猜你喜歡
    抗菌劑接枝等離子體
    氨基糖苷類抗生素與抗菌劑不同毒性比混合對大腸桿菌的聯(lián)合效應(yīng)研究
    連續(xù)磁活動對等離子體層演化的影響
    基于低溫等離子體修飾的PET/PVC浮選分離
    丙烯酸丁酯和聚丙二醇二甲基丙烯酸酯水相懸浮接枝PP的制備
    SBS接枝MAH方法及其改性瀝青研究
    石油瀝青(2019年4期)2019-09-02 01:41:54
    等離子體種子處理技術(shù)介紹
    高接枝率PP—g—MAH的制備及其在PP/GF中的應(yīng)用
    中國塑料(2016年3期)2016-06-15 20:30:03
    EPDM接枝共聚物對MXD6/PA6/EPDM共混物性能的影響
    中國塑料(2015年1期)2015-10-14 00:58:41
    織物抗菌劑有機硅季銨鹽POASC和PFASC的制備及應(yīng)用
    絲綢(2015年11期)2015-02-28 14:56:49
    自制抗菌劑 GD-1在棉織物上的抗菌性能
    亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 精品乱码久久久久久99久播| 国产日韩欧美亚洲二区| 一级毛片女人18水好多| 中文字幕人妻熟女乱码| 国产一区二区在线观看av| 成人国语在线视频| 日韩制服骚丝袜av| 黄片大片在线免费观看| 欧美黑人欧美精品刺激| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 自线自在国产av| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 黑丝袜美女国产一区| 大香蕉久久成人网| 久久久久精品国产欧美久久久 | 亚洲第一青青草原| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产精品一区二区在线不卡| 曰老女人黄片| 少妇被粗大的猛进出69影院| 亚洲国产欧美一区二区综合| 久久ye,这里只有精品| 精品福利观看| 亚洲视频免费观看视频| 两性夫妻黄色片| 久久ye,这里只有精品| 97精品久久久久久久久久精品| 亚洲国产看品久久| av网站免费在线观看视频| 两人在一起打扑克的视频| 精品高清国产在线一区| av在线app专区| 久久久国产精品麻豆| 69精品国产乱码久久久| 色综合欧美亚洲国产小说| 男人操女人黄网站| 色精品久久人妻99蜜桃| 久久久久久久久久久久大奶| 嫁个100分男人电影在线观看| 欧美日韩福利视频一区二区| 视频区图区小说| 女性生殖器流出的白浆| 久久久久久久国产电影| 国产精品久久久人人做人人爽| 国产免费福利视频在线观看| 午夜激情久久久久久久| av免费在线观看网站| 国产亚洲精品第一综合不卡| 国产免费av片在线观看野外av| 一边摸一边做爽爽视频免费| netflix在线观看网站| 麻豆乱淫一区二区| 在线精品无人区一区二区三| 视频区图区小说| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 国产精品一区二区免费欧美 | 中国国产av一级| 在线av久久热| 亚洲人成电影免费在线| 黄色怎么调成土黄色| 超碰97精品在线观看| 亚洲av美国av| 日本av免费视频播放| 久久久久久久久免费视频了| 乱人伦中国视频| 国产成人精品在线电影| 99久久精品国产亚洲精品| 99久久99久久久精品蜜桃| 精品人妻一区二区三区麻豆| cao死你这个sao货| 亚洲国产精品一区三区| 午夜精品国产一区二区电影| 久久久国产精品麻豆| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 美女福利国产在线| 成人国产一区最新在线观看| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 2018国产大陆天天弄谢| 亚洲精品中文字幕在线视频| 在线天堂中文资源库| 这个男人来自地球电影免费观看| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产精品久久久久成人av| 久久久久精品国产欧美久久久 | 久久这里只有精品19| 亚洲人成电影免费在线| 午夜老司机福利片| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久 | 婷婷丁香在线五月| 色老头精品视频在线观看| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 视频在线观看一区二区三区| 亚洲色图综合在线观看| 日本91视频免费播放| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 久久久久视频综合| 777久久人妻少妇嫩草av网站| h视频一区二区三区| 日韩大码丰满熟妇| 在线观看免费高清a一片| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 国产伦人伦偷精品视频| 正在播放国产对白刺激| 韩国精品一区二区三区| 男女下面插进去视频免费观看| 午夜久久久在线观看| 久久国产精品影院| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 色婷婷av一区二区三区视频| 成年人午夜在线观看视频| 日韩欧美一区视频在线观看| 欧美日韩视频精品一区| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 99国产极品粉嫩在线观看| 五月开心婷婷网| 91麻豆精品激情在线观看国产 | a级片在线免费高清观看视频| 国产在线观看jvid| a级片在线免费高清观看视频| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 欧美日本中文国产一区发布| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 色婷婷久久久亚洲欧美| www.999成人在线观看| 国产麻豆69| 不卡av一区二区三区| 国产免费av片在线观看野外av| 成人手机av| 久久影院123| 美女视频免费永久观看网站| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 国产日韩欧美亚洲二区| 久久久久国内视频| 9191精品国产免费久久| 另类亚洲欧美激情| 中文欧美无线码| 正在播放国产对白刺激| 亚洲人成77777在线视频| 一本久久精品| 99九九在线精品视频| 国产成+人综合+亚洲专区| 99国产精品一区二区三区| 日韩一区二区三区影片| 99国产极品粉嫩在线观看| 日本精品一区二区三区蜜桃| 首页视频小说图片口味搜索| 午夜激情av网站| 高清视频免费观看一区二区| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 搡老熟女国产l中国老女人| 搡老岳熟女国产| 丝袜人妻中文字幕| 亚洲av成人一区二区三| 国产免费av片在线观看野外av| 午夜精品久久久久久毛片777| 丝袜美足系列| 国产又色又爽无遮挡免| e午夜精品久久久久久久| 精品福利观看| 亚洲性夜色夜夜综合| 久久久国产一区二区| 一边摸一边做爽爽视频免费| 国产精品av久久久久免费| 欧美另类一区| 99国产极品粉嫩在线观看| 伊人亚洲综合成人网| 亚洲情色 制服丝袜| 亚洲中文字幕日韩| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 视频区图区小说| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 看免费av毛片| 男人舔女人的私密视频| 视频区欧美日本亚洲| 久久久国产成人免费| 精品第一国产精品| 日日夜夜操网爽| 亚洲国产成人一精品久久久| 日本黄色日本黄色录像| 日本一区二区免费在线视频| 精品一区二区三区av网在线观看 | 久久青草综合色| 婷婷成人精品国产| 90打野战视频偷拍视频| 各种免费的搞黄视频| 又黄又粗又硬又大视频| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 久久久水蜜桃国产精品网| 91国产中文字幕| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 香蕉丝袜av| 亚洲国产欧美一区二区综合| 国产成人免费无遮挡视频| 国产成人系列免费观看| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 最新的欧美精品一区二区| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 亚洲av国产av综合av卡| 99九九在线精品视频| 亚洲视频免费观看视频| 性少妇av在线| 亚洲精品在线美女| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 久久久国产一区二区| 飞空精品影院首页| 1024视频免费在线观看| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 日本精品一区二区三区蜜桃| 高清av免费在线| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 中亚洲国语对白在线视频| 91精品国产国语对白视频| 男女无遮挡免费网站观看| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 老司机在亚洲福利影院| 国产亚洲精品久久久久5区| 天堂8中文在线网| 一个人免费看片子| 亚洲人成电影免费在线| 欧美性长视频在线观看| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 久久久久国产一级毛片高清牌| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 男女免费视频国产| 大片免费播放器 马上看| 国产不卡av网站在线观看| 日本wwww免费看| 秋霞在线观看毛片| 国产亚洲精品久久久久5区| 精品少妇久久久久久888优播| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 亚洲国产av影院在线观看| 国产精品国产三级国产专区5o| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 亚洲国产精品一区三区| 国产av一区二区精品久久| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 国产精品成人在线| 咕卡用的链子| 欧美激情极品国产一区二区三区| 91老司机精品| 人妻 亚洲 视频| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 超碰97精品在线观看| 亚洲一码二码三码区别大吗| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲av电影在线进入| 制服人妻中文乱码| 国产免费av片在线观看野外av| 桃花免费在线播放| 国产高清视频在线播放一区 | 欧美日韩亚洲高清精品| cao死你这个sao货| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 性高湖久久久久久久久免费观看| 午夜成年电影在线免费观看| 欧美在线黄色| 狂野欧美激情性xxxx| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 黄片大片在线免费观看| 秋霞在线观看毛片| 一级,二级,三级黄色视频| 日韩免费高清中文字幕av| 国产欧美日韩精品亚洲av| 亚洲欧洲日产国产| 美女午夜性视频免费| 午夜福利在线观看吧| 欧美大码av| a级毛片黄视频| videos熟女内射| 香蕉丝袜av| 亚洲免费av在线视频| 咕卡用的链子| 啦啦啦免费观看视频1| 国产亚洲欧美在线一区二区| 视频区图区小说| 狂野欧美激情性bbbbbb| av网站免费在线观看视频| 人妻人人澡人人爽人人| videosex国产| 黄色毛片三级朝国网站| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 91字幕亚洲| 一区二区三区精品91| 欧美激情久久久久久爽电影 | 久久这里只有精品19| 亚洲精品国产区一区二| 中国美女看黄片| 岛国在线观看网站| 久久中文字幕一级| 美国免费a级毛片| 日韩三级视频一区二区三区| 高清在线国产一区| 久久毛片免费看一区二区三区| 91麻豆av在线| 欧美97在线视频| 十分钟在线观看高清视频www| 男人舔女人的私密视频| 国产欧美日韩一区二区精品| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 中亚洲国语对白在线视频| www日本在线高清视频| 一个人免费在线观看的高清视频 | 亚洲成人国产一区在线观看| 欧美少妇被猛烈插入视频| 日韩视频在线欧美| 中文字幕色久视频| 少妇精品久久久久久久| 成年女人毛片免费观看观看9 | 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲中文av在线| xxxhd国产人妻xxx| 十八禁网站免费在线| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 精品人妻在线不人妻| 国产精品亚洲av一区麻豆| 好男人电影高清在线观看| 免费观看a级毛片全部| 欧美成人午夜精品| 18在线观看网站| av免费在线观看网站| 大型av网站在线播放| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久 | 咕卡用的链子| 91av网站免费观看| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 精品高清国产在线一区| 视频区欧美日本亚洲| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 久久国产精品人妻蜜桃| 亚洲,欧美精品.| 欧美大码av| 人妻 亚洲 视频| 午夜久久久在线观看| 久久狼人影院| 夫妻午夜视频| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 91麻豆av在线| 欧美黑人精品巨大| 欧美少妇被猛烈插入视频| 午夜免费观看性视频| 国产男人的电影天堂91| 久久亚洲精品不卡| 欧美国产精品一级二级三级| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 免费不卡黄色视频| 日本91视频免费播放| 国产区一区二久久| 午夜影院在线不卡| www.精华液| h视频一区二区三区| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 男女高潮啪啪啪动态图| 热99久久久久精品小说推荐| 正在播放国产对白刺激| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 91大片在线观看| 少妇被粗大的猛进出69影院| 久久热在线av| 久久久久精品人妻al黑| 窝窝影院91人妻| 国产在线视频一区二区| 亚洲中文日韩欧美视频| 久久国产精品大桥未久av| 9191精品国产免费久久| 国产有黄有色有爽视频| 国产成+人综合+亚洲专区| 俄罗斯特黄特色一大片| 免费日韩欧美在线观看| 欧美在线一区亚洲| 99热全是精品| 成年人黄色毛片网站| 黄色 视频免费看| 中文字幕人妻熟女乱码| 午夜视频精品福利| 99久久国产精品久久久| 精品人妻一区二区三区麻豆| 精品欧美一区二区三区在线| 国产高清视频在线播放一区 | 国产成人a∨麻豆精品| 99久久人妻综合| 国产黄色免费在线视频| xxxhd国产人妻xxx| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 亚洲精品久久午夜乱码| 黄色 视频免费看| 免费观看人在逋| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| a 毛片基地| 老鸭窝网址在线观看| 水蜜桃什么品种好| 免费高清在线观看视频在线观看| 悠悠久久av| 欧美日韩福利视频一区二区| 极品少妇高潮喷水抽搐| 大片电影免费在线观看免费| 国产av一区二区精品久久| 制服人妻中文乱码| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 热re99久久国产66热| 最近中文字幕2019免费版| 又黄又粗又硬又大视频| 国产精品 国内视频| 97精品久久久久久久久久精品| 9色porny在线观看| 久久久水蜜桃国产精品网| 久久久久久久精品精品| 成年人免费黄色播放视频| 精品高清国产在线一区| 精品免费久久久久久久清纯 | 国产成人a∨麻豆精品| 国产av精品麻豆| 老司机深夜福利视频在线观看 | 999久久久精品免费观看国产| 国产熟女午夜一区二区三区| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲国产欧美在线一区| 国产一卡二卡三卡精品| 国产99久久九九免费精品| 久久女婷五月综合色啪小说| 色婷婷久久久亚洲欧美| 十八禁人妻一区二区| 久热爱精品视频在线9| 嫁个100分男人电影在线观看| 飞空精品影院首页| 国产区一区二久久| 欧美变态另类bdsm刘玥| av在线播放精品| 亚洲性夜色夜夜综合| 在线 av 中文字幕| 最新的欧美精品一区二区| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 欧美黄色淫秽网站| h视频一区二区三区| 欧美久久黑人一区二区| 国产精品一区二区在线观看99| 一本久久精品| 亚洲一区二区三区欧美精品| 老熟妇仑乱视频hdxx| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 欧美97在线视频| 91大片在线观看| 大香蕉久久网| 欧美国产精品va在线观看不卡| 久久久久久久久久久久大奶| 免费在线观看影片大全网站| 成人av一区二区三区在线看 | 国产真人三级小视频在线观看| 伦理电影免费视频| 免费在线观看完整版高清| 脱女人内裤的视频| 精品国产乱码久久久久久男人| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 免费人妻精品一区二区三区视频| 老司机靠b影院| 国产麻豆69| 男人添女人高潮全过程视频| 国产精品一区二区免费欧美 | av免费在线观看网站| tocl精华| 丝袜喷水一区| 久久影院123| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 老司机靠b影院| 亚洲免费av在线视频| 国产av一区二区精品久久| 一级毛片女人18水好多| 免费观看人在逋| 又紧又爽又黄一区二区| 女警被强在线播放| 欧美97在线视频| 黄片播放在线免费| 丝袜美腿诱惑在线| 97人妻天天添夜夜摸| 麻豆国产av国片精品| 日本91视频免费播放| 久久久久精品国产欧美久久久 | 精品第一国产精品| 免费高清在线观看日韩| 九色亚洲精品在线播放| 操出白浆在线播放| 美女中出高潮动态图| 中国国产av一级| 国产精品一区二区在线观看99| 丝袜脚勾引网站| 久久香蕉激情| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产成人av激情在线播放| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 欧美日韩av久久| tocl精华| 啦啦啦免费观看视频1| 人人澡人人妻人| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 在线十欧美十亚洲十日本专区| 久久精品亚洲av国产电影网| videos熟女内射| 成人影院久久| 国产av精品麻豆| 国产亚洲av高清不卡| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 精品一区二区三区av网在线观看 | 十八禁人妻一区二区| 日韩欧美国产一区二区入口| 亚洲avbb在线观看| 老汉色av国产亚洲站长工具| 女性被躁到高潮视频| 两性夫妻黄色片| 波多野结衣av一区二区av| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 国产精品一区二区在线观看99| 国产精品一区二区精品视频观看| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 久久亚洲精品不卡| 美女福利国产在线| 男女边摸边吃奶| 亚洲全国av大片| 2018国产大陆天天弄谢| 美女高潮到喷水免费观看| 亚洲 欧美一区二区三区| 国产福利在线免费观看视频| 丝袜在线中文字幕| 欧美另类亚洲清纯唯美| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 国产老妇伦熟女老妇高清| 久9热在线精品视频| 精品一区二区三卡| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲黑人精品在线| 自线自在国产av| av一本久久久久| 亚洲性夜色夜夜综合| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产97色在线日韩免费| 一区二区日韩欧美中文字幕| 久久 成人 亚洲| 最近最新免费中文字幕在线| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 黑人猛操日本美女一级片| 亚洲人成77777在线视频| 国产视频一区二区在线看| 十分钟在线观看高清视频www| 精品乱码久久久久久99久播| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 成人黄色视频免费在线看| 亚洲国产看品久久| 精品高清国产在线一区| a在线观看视频网站| 波多野结衣av一区二区av| 高潮久久久久久久久久久不卡| 满18在线观看网站| 好男人电影高清在线观看| 国产高清videossex| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 婷婷色av中文字幕| 国产精品免费大片| 五月开心婷婷网| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 日韩大片免费观看网站| av天堂在线播放| 老司机午夜福利在线观看视频 | 日本a在线网址| 午夜精品国产一区二区电影| 伦理电影免费视频| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 飞空精品影院首页| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 大陆偷拍与自拍| 亚洲精品国产区一区二| 午夜久久久在线观看| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 亚洲精品国产色婷婷电影| 欧美黄色片欧美黄色片| 精品高清国产在线一区| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 一级片'在线观看视频| 欧美国产精品va在线观看不卡| 人成视频在线观看免费观看| 国产视频一区二区在线看| 国产色视频综合| 日本91视频免费播放| 中文字幕最新亚洲高清| 久久女婷五月综合色啪小说| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 一级片免费观看大全| 中文字幕制服av| 国产成人欧美在线观看 | 亚洲综合色网址| av视频免费观看在线观看| 免费在线观看日本一区| 老司机影院毛片| 下体分泌物呈黄色| 欧美日韩成人在线一区二区| 午夜精品国产一区二区电影| 91麻豆av在线| 99re6热这里在线精品视频| 99九九在线精品视频| 1024视频免费在线观看| 三上悠亚av全集在线观看| 欧美一级毛片孕妇| 亚洲av美国av| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频|