陰道微環(huán)境改變與高危型人乳頭瘤病毒感染的相關性

鐘陽青，陳艷清，肖　翔，郭馥艷，閔琴琴

(1.廣東省東莞市塘廈醫(yī)院檢驗科　523722；2.廣東省東莞市塘廈醫(yī)院婦科　523722； 3.廣東省深圳市中醫(yī)院病理科　518033)

人乳頭瘤病毒(HPV)是一種雙鏈環(huán)狀DNA病毒，也是乳頭瘤空泡病毒，歸屬乳多空病毒科[1]。根據(jù)致癌風險的大小，HPV分為低危型和高危型兩大類，高危型HPV(HR-HPV)主要有HPV16、18、26、31、33、35、52、56、58 等亞型。研究表明HPV感染與宮頸癌密切相關[2]。宮頸癌是威脅全球女性健康的最常見的惡性腫瘤之一，有報道顯示全球每年約有宮頸癌新發(fā)病例52.8萬，與宮頸癌相關的死亡例數(shù)達26.6萬，其中 85%的病例發(fā)生在發(fā)展中國家，全球每年約有1/4左右的新發(fā)病例在我國發(fā)生[3]。研究表明HR-HPV 持續(xù)感染約 8～24個月將導致宮頸上皮內瘤變(CIN)，經過8～12年可進展為宮頸癌[4]。HR-HPV感染導致CIN，發(fā)展到癌是一個漫長的過程，在這個漫長的過程中陰道微環(huán)境可能在其中扮演著重要的角色[5]。本研究通過觀察陰道微環(huán)境的變化與HR-HPV感染的相關性，為臨床疾病的診療提供客觀依據(jù)。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇2016年1月至2017年5月來東莞市塘廈醫(yī)院婦科門診就診的宮頸細胞學檢測陰性的患者2 945例，年齡21～48歲，平均(28.32±5.17)歲。

1.2標本采集HPV標本：將標本刷在子宮頸和外口順時針旋轉 5 圈，收集子宮頸脫落細胞，置入保存液中。陰道微環(huán)境檢驗標本：用 2 根無菌棉拭子留取陰道側壁上1/3分泌物，其中一支用于陰道病五聯(lián)檢，另一支加0.9%的生理鹽水1 mL用于顯微鏡檢查。

1.3儀器及試劑HPV檢測采用Thermo基因擴增儀，試劑使用深圳亞能公司的試劑，能檢測HR-HPV17種(16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82)，低危型HPV6種(6、11、42、43、81、83)；陰道病五聯(lián)檢試劑使用北京中生金域診斷技術股份有限公司生產的愛必維試劑盒，能檢測過氧化氫(H2O2)、唾液酸苷酶(sNa)、白細胞酯酶(LE)、葡萄糖醛酸苷酶(Gus)、凝固酶(GA)。

1.4檢測方法HPV檢測、陰道病五聯(lián)檢嚴格按照廠家說明書的規(guī)定操作；外陰陰道假絲酵母菌性陰道炎(VVC)和滴蟲性陰道炎(TV)的檢測使用加了0.9%生理鹽水的棉簽，在玻璃片上涂片，使用400倍顯微鏡檢測。

1.5診斷標準HPV檢測出高危型為HR-HPV感染；H2O2、sNa陽性為需氧菌性陰道炎(AV)，H2O2、LE陽性+Gus、GA一項或兩項陽性為細菌性陰道炎(BV)，H2O2、sNa、LE陽性+Gus、GA一項或兩項陽性為AV+BV混合感染；顯微鏡檢測觀察到假絲酵母菌、滴蟲診斷為相應陰道炎；H2O2陽性其余陰性為單純H2O2缺乏，H2O2和LE陽性其余陰性為單純H2O2、LE陽性；以上任意兩項陽性為混合感染。

1.6統(tǒng)計學處理所有數(shù)據(jù)使用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計，計數(shù)資料以例數(shù)或率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結　　果

2.1陰道微環(huán)境改變與HR-HPV感染2 945例標本中有1 957例陰道微環(huán)境改變，發(fā)生率為66.45%；HR-HPV感染468例，感染率為15.89%，其中陰道微環(huán)境改變的HR-HPV感染率為384例(19.62%)，陰道微環(huán)境正常者的HR-HPV感染率為84例(8.5%)，陰道微環(huán)境改變者HR-HPV感染率與陰道微環(huán)境正常者比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表1　　各類型陰道微環(huán)境改變與HR-HPV感染的關系

注：與陰道微環(huán)境正常比較，*P<0.05

2.2各類型陰道微環(huán)境改變與HR-HPV感染的關系1 957例陰道微環(huán)境改變的患者中AV、BV、VVC、TV、單純H2O2缺乏、單純H2O2和LE陽性的分別為 302例(15.43%)、578例(29.54%)、276例(14.10%)，225例(11.50%)、246例(12.57%)、330例(16.86%)，其中存在混合感染的情況，AV通常與BV、VVC混合，VVC、TV通常與BV混合，總混合例數(shù)為439例，占22.43%；AV、BV、VVC、TV陽性者，單純H2O2缺乏者，單純H2O2和LE陽性者，混合感染者HR-HPV感染率與陰道微環(huán)境正常者比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；AV、TV陰性者HR-HPV感染率與其他各類型比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；BV、VVC陰性者HR-HPV感染率與其他類型比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；混合感染者與BV者比較HR-HPV感染率差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

3　討　　論

陰道微環(huán)境為陰道內正常的定植菌群、宿主免疫能力、體內外環(huán)境與宮頸陰道解剖結構之間構成的動態(tài)平衡的微生態(tài)系統(tǒng)。正常條件下，陰道微環(huán)境中優(yōu)勢菌如乳桿菌等占主導地位，乳桿菌分泌乳酸、H2O2及細菌素等，維持陰道的酸性環(huán)境，并殺死部分條件致病菌，維持陰道微環(huán)境平衡狀態(tài),當陰道微環(huán)境被打破時，可能造成一系列下生殖道疾病[6-8]。有研究報道陰道微環(huán)境改變如BV、滴蟲感染、假絲酵母菌、乳酸桿菌數(shù)量減少或功能降低等都會影響HPV的感染率[9-10]。

本研究共納入2 945例標本，其中陰道微環(huán)境改變的有1 957例(66.45%)，HR-HPV感染468例(15.89%)，陰道微環(huán)境改變者HR-HPV感染率與陰道微環(huán)境正常者比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，表明陰道微環(huán)境改變與HR-HPV感染有關。李東燕等[6]對3 861例標本進行分析也得出相同結果。AV、BV、VVC、TV、單純H2O2缺乏、單純H2O2和LE陽性的患者HR-HPV感染分別為78例(25.83%)、184例(31.86%)、83例(30.11%)、56例(24.92%)、62例(25.24%)、94例(28.48%)，與陰道微環(huán)境正常者比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)?；旌闲完幍牢h(huán)境改變患者HR-HPV感染率明顯升高，與陰道微環(huán)境正常者相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。夏玉潔等[11]對149例HR-HPV感染、宮頸細胞學陰性患者和165例健康者HPV陰性、細胞學陰性患者的研究表明，BV、AV、VVC、pH>4.5及乳酸桿菌減少與HR-HPV感染有關。VIEIRA-BAPTISTA等[12]的研究表明AV與宮頸癌的發(fā)生有關，是宮頸癌的獨立危險因素，但是與HPV感染率無關，目前對AV感染與HR-HPV感染的報道較少且存在差異，因此需要進一步擴大樣本研究。H2O2、LE被認為是反映陰道乳酸桿菌功能和數(shù)量的指標，本研究表明此兩項中的一項陽性或兩項均陽性與HR-HPV感染有關，與以往的研究有相同也有差異[7,11]。此外本次還發(fā)現(xiàn)VVC、TV與HR-HPV感染有關，亦與以往的研究有相符也存在差異[7,11，13]。有研究報道TV合并BV HR-HPV感染率降低，BV合并VVC感染HR-HPV感染率升高[11]。對于混合感染對HR-HPV的研究需要進一步研究。

綜上所述，陰道微環(huán)境改變與HR-HPV感染有關，尤其是BV、VVC和混合感染者的HR-HPV升高較明顯。臨床需要重視陰道微環(huán)境改變的治療，以達到預防HR-HPV感染的目的，進而降低宮頸癌的發(fā)生率。