血清VCA-IgA、NA1-IgA、Zta-IgA檢測在鼻咽癌篩查中的應(yīng)用價(jià)值*

陳善昌，吳家恩，張小娟 ，陳　棟，胡靜云，彭　凌

(廣西壯族自治區(qū)賀州市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科　542800)

鼻咽癌(NPC)是源于鼻咽部上皮組織的一種頭頸部惡性腫瘤，其侵襲性以及轉(zhuǎn)移率最高，大部分患者發(fā)現(xiàn)時(shí)就已為晚期，預(yù)后較差[1-2]。早期鼻咽癌的治療預(yù)后較好，但由于其病變隱蔽，早期癥狀、體征不明顯，因此對(duì)早期鼻咽癌進(jìn)行篩查和診斷是爭取鼻咽癌治療最佳效果的關(guān)鍵[3]。近年來有研究表明，絕大多數(shù)鼻咽癌患者血清中檢測到抗EB病毒抗原的抗體，EB病毒感染與鼻咽癌密切相關(guān)，EB病毒相關(guān)抗體的血清檢測是目前診斷鼻咽癌的重要方法[4-5]。本文采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測鼻咽癌患者、非鼻咽癌患者的EB病毒殼抗原免疫球蛋白A (VCA-IgA)、EB病毒核抗原1免疫球蛋白A (NA1-IgA)、Zta蛋白抗體免疫球蛋白A (Zta-IgA)抗體,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇2010年2月至2016年4月本院耳鼻喉科收治的鼻咽癌患者100例為鼻咽癌組，其中男65例、女35例，年齡20～75歲、平均(47.6±5.7)歲，所有患者均經(jīng)組織病理學(xué)確診。并選取同期因鼻咽部癥狀就診的非鼻咽癌患者500例作為對(duì)照組，其中男312例、女188例，年齡25～76歲、平均(49.5±5.6)歲,急慢性咽炎170例、鼻炎124例、鼻出血206例。兩組患者的性別、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。向所有受檢者介紹研究目的及方法，取得其同意，并均簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集與處理收集兩組患者清晨空腹靜脈血液標(biāo)本5 mL，靜置30 min待血液凝固后以3 000 r/min速度離心10 min,獲取上層血清，放置在-20 ℃冰箱中待檢。

采用ELISA檢測3種EB病毒抗體，采用上海新波Egate 2310全自動(dòng)洗板機(jī)和美國Bio-Tek寶特ELX 808酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測，EB病毒抗體檢測試劑盒來自中山生物工程有限公司，免疫組化化學(xué)試劑盒來自上?；蚩萍加邢薰?，操作嚴(yán)格按照說明書要求。在450 nm波長下測定VCA-IgA、NA1-IgA、Zta-IgA不同抗體的吸光度值，當(dāng)VCA-IgA、NA1-IgA的吸光度/陽性判定值(S/CO)在1.1及以上時(shí)視為陽性，當(dāng)Zta-IgA的S/CO在1.0及以上時(shí)視為陽性。

1.2.2觀察指標(biāo)測定兩組患者血清VCA-IgA、NA1-IgA、Zta-IgA檢測陽性率，并計(jì)算3種EB抗體單項(xiàng)病毒及聯(lián)合檢測在篩選鼻咽癌的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度及陽性預(yù)測值。

2　結(jié)　　果

2.1兩組間檢測EB病毒抗體的陽性率比較兩組間EB病毒的血清VCA-IgA、NA1-IgA、Zta-IgA檢測鼻咽癌陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1　　兩組間檢測EB病毒抗體的陽性率比較[n(%)]

2.23種EB病毒抗體對(duì)鼻咽癌的診斷效力分析3種EB病毒抗體在篩選鼻咽癌的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值及ROC曲線下面積(AUC)見表2。3項(xiàng)聯(lián)合檢測，靈敏度、特異度、陽性預(yù)測率及AUC均明顯增高，診斷靈敏度、特異度均達(dá)90.0%以上，陽性預(yù)測值達(dá)69.6%。

表2　　3種EB病毒抗體在篩選鼻咽癌的AUC、靈敏度、特異度及陽性預(yù)測值比較

3　討　　論

大量研究證明EB病毒感染與鼻咽癌疾病的發(fā)生、發(fā)展存在密切相關(guān)性，VCA-IgA、NA1-IgA、Zta-IgA等EB病毒相關(guān)抗體可作為鼻咽癌的血清輔助診斷指標(biāo)[6-7]。研究發(fā)現(xiàn)，鼻咽癌患者血漿中檢測到高拷貝數(shù)EB病毒DNA，且其表達(dá)與腫瘤發(fā)生、治療療效、復(fù)發(fā)等多環(huán)節(jié)密切相關(guān)[8]。VCA-IgA、NA1-IgA、Zta-IgA等EB病毒相關(guān)抗體改變和EB病毒DNA水平變化與鼻咽癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，因此探討早期鼻咽癌患者EB病毒相關(guān)抗體的血清學(xué)改變，將有助于實(shí)現(xiàn)鼻咽癌的早期診斷，提高鼻咽癌治愈率。

Zta蛋白是EB病毒感染由潛伏期轉(zhuǎn)為裂解期的一項(xiàng)調(diào)控因子，它能激發(fā)裂解早期基因表達(dá)，從而導(dǎo)致EB病毒的裂解干擾。VCA是在鼻咽癌增殖后期表達(dá)的一種結(jié)構(gòu)蛋白，是EB病毒感染后最晚產(chǎn)生的抗原，可終生存于體內(nèi)，有助于鼻咽癌的早期診斷。NA1-IgA亦是鼻咽癌增殖后期產(chǎn)生的一種結(jié)構(gòu)蛋白，能夠刺激機(jī)體免疫應(yīng)答，但其個(gè)體差異較大，因此靈敏度不高，但特異度較高[9]。

本研究結(jié)果表明：鼻咽癌組患者VCA-IgA、NA1-IgA、Zta-IgA等EB病毒相關(guān)抗體陽性率明顯高于對(duì)照組，證實(shí)了EB病毒這3種相關(guān)抗體是鼻咽癌輔助診斷的重要血清學(xué)標(biāo)志物。鼻咽癌通常平均在臨床癥狀出現(xiàn)前3年可檢測到EB病毒抗體持續(xù)升高，因此，對(duì)高發(fā)區(qū)的高危人群予以VCA-IgA、NA1-IgA、Zta-IgA等EB病毒相關(guān)抗體篩查，對(duì)早期診斷和治療，爭取取得最佳治療效果具有重要意義[10]。就單一指標(biāo)而言，本研究VCA-IgA、NA1-IgA、Zta-IgA等EB病毒相關(guān)抗體在篩選鼻咽癌的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值雖然均較高，但當(dāng)3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測時(shí)，靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值及AUC均明顯增高，診斷靈敏度、特異度均達(dá)90.0%以上，陽性預(yù)測率達(dá)69.6%。提示單項(xiàng)EB病毒相關(guān)抗體應(yīng)用于鼻咽癌的篩查還存在局限性，靈敏度、特異度均不夠理想，將不同血清學(xué)抗體聯(lián)合檢測能提高鼻咽癌診斷的準(zhǔn)確率，對(duì)鼻咽癌的篩查具有顯著優(yōu)勢。

綜上所述，VCA-IgA、NA1-IgA、Zta-IgA 3種EB病毒抗體聯(lián)合檢測對(duì)早期鼻咽癌的診斷具有重要價(jià)值。