不同炮制方法對(duì)白術(shù)藥材指標(biāo)成分含量及浸出物影響研究*

★ 徐春良 林苗苗 魏惠珍** 何浪 費(fèi)俗青 柴艷承

(1.江西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院 南昌 330006；2.江西江中中藥飲片有限公司 江西 九江 332300；3. 江西中醫(yī)藥大學(xué)中藥固體制劑制造技術(shù)國(guó)家工程研究中心 南昌 330006)

白術(shù)是菊科Compositae植物白術(shù)AtractylodesmacrocephalaKoidz.干燥根莖。具有健脾益氣，燥濕利水，止汗，安胎等功效[1]。白術(shù)主要有效成分為揮發(fā)性成分和白術(shù)多糖[2-3]。揮發(fā)性成分中的白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ不但具有消炎、抗癌作用，還可以調(diào)節(jié)胃腸運(yùn)動(dòng)，達(dá)到健脾運(yùn)脾的功效[4-6]，而白術(shù)的主要燥性成分是蒼術(shù)酮，具有一定的刺激性，故選擇白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、蒼術(shù)酮為白術(shù)指標(biāo)性成分。

白術(shù)的炮制方法有清炒白術(shù)、米泔水漂白術(shù)、麩炒白術(shù)、焦白術(shù)、土炒白術(shù)等[7-9]。傳統(tǒng)認(rèn)為白術(shù)藥材炮制后可使藥性緩和，療效增強(qiáng)[10-12]。清炒白術(shù)具有緩和燥性，健脾益氣的功能[13-14]。麩炒白術(shù)有和中益脾之功效，主要用于運(yùn)化失常，食少脹滿等病癥[15-16]。米泔水漂白術(shù)可借助米泔水去燥性和中，增加補(bǔ)脾和胃的功效[17]。焦白術(shù)有溫化燥濕，增強(qiáng)醒脾的功效，主要用于慢性寒性腹瀉。土炒白術(shù)以補(bǔ)脾止瀉為優(yōu)，主要用于脾虛與泄瀉。不同炮制方法影響白術(shù)藥材指標(biāo)成分含量，關(guān)于這方面研究多數(shù)集中于麩炒白術(shù)和土炒白術(shù)[18]。本文研究白術(shù)藥材、米泔水漂白術(shù)、麩炒白術(shù)、焦白術(shù)、土炒白術(shù)指標(biāo)成分含量及浸出物含量的變化，為指導(dǎo)炮制工藝改進(jìn)及不同炮制品在臨床的應(yīng)用提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

Waters 2695-2996 高效液相色譜儀及工作站，美國(guó)Waters公司；依利特ODS(5μm,4.6mm×250mm)色譜柱，大連依利特分析儀器有限公司。AB104N型萬(wàn)分級(jí)電子精密天平，梅特勒-托利多儀器；KQ-250DB型數(shù)控超聲波清洗器，昆山市超聲儀有限公司。

白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對(duì)照品均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)分別為111975-201501、111976-201501、111978-201501，蒼術(shù)酮購(gòu)自成都瑞芬思生物科技有限公司，批號(hào)為c-084-170306。

白術(shù)藥材分別購(gòu)自各個(gè)產(chǎn)地，經(jīng)江西江中中藥飲片有限公司諶瑞林副主任中藥師鑒定為菊科植物白術(shù)AtractylodesmacrocephalaKoidz.的干燥根莖；白術(shù)炮制品為自制，均由對(duì)應(yīng)產(chǎn)地同一批白術(shù)藥材按法定標(biāo)準(zhǔn)方法炮制而來(lái)。

溶液制備用甲醇為分析純；流動(dòng)相用乙腈為色譜純；所用水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 對(duì)照品溶液制備 精密稱取白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、蒼術(shù)酮對(duì)照品適量，分別加甲醇制成0.0104，0.0106，0.0107，0.5050 mg/mL的溶液，即得。

2.2 供試品溶液的制備 精密稱取供試品粉末(過(guò)3號(hào)篩)1.0 g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20 mL，稱定重量，超聲處理(功率250 W，頻率50 KHz)30 min ，取出，稱重，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，即得。

2.3 色譜條件 色譜柱：依利特ODS色譜柱(4.6mm × 250mm,5μm)；流動(dòng)相為乙腈(A)-水(B)，梯度洗脫0～10min，A 40%→48%；10～15min，A 48%→48%；15～28min，A 48%→55%；28～38min，A 55%→55%；38～45min，A 55%→70%；45～50min，A 70%→75%；50～70min，A 75%→85%；流速為1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、蒼術(shù)酮：220nm，白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ：276nm；柱溫：30℃，進(jìn)樣量：10 μL，經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證，該方法適合于白術(shù)四種成分含量測(cè)定。對(duì)照品及供試品色譜圖見(jiàn)圖1。

A，B對(duì)照品；C，D白術(shù)藥材(批號(hào)：20151226)；1：白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ；

2.4 樣品指標(biāo)成分測(cè)定結(jié)果 分別取10 批白術(shù)藥材、10批麩炒白術(shù)、10批米泔水漂白術(shù)、10批焦炒白術(shù)和10批土炒白術(shù)每個(gè)樣品取2份，按“2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，精密吸取10μL 進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算樣品中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ和蒼術(shù)酮含量，結(jié)果見(jiàn)表1-2。

由表1、表2可知，不同白術(shù)炮制品中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量變化明顯。白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ含量變化趨勢(shì)：米泔水漂白術(shù)>土炒>焦炒>白術(shù)藥材=麩炒；白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ含量變化趨勢(shì)：米泔水漂白術(shù)>焦炒=麩炒>土炒=白術(shù)藥材；白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量變化趨勢(shì): 焦炒>米泔水漂白術(shù)>麩炒>土炒>白術(shù)藥材；蒼術(shù)酮含量變化趨勢(shì)：焦炒=米泔水漂白術(shù)=麩炒=白術(shù)藥材>土炒。

表1 不同白術(shù)炮制品四種成分含量測(cè)定結(jié)果 %

2.5 樣品浸出物測(cè)定結(jié)果 參照《中國(guó)藥典》2015版醇溶性浸出物測(cè)定法(熱浸法)測(cè)定白術(shù)不同炮制品浸出物含量，結(jié)果見(jiàn)表3。

表2 不同白術(shù)炮制品四成分平均含量 %

表3 浸出物含量測(cè)定結(jié)果 %

由表3可知，浸出物含量：焦白術(shù)>白術(shù)藥材>麩炒白術(shù)>土炒白術(shù)>米泔水漂白術(shù)。

3 討論

試驗(yàn)過(guò)程中考察了超聲提取、回流提取2種方法，指標(biāo)成分含量基本無(wú)差異，綜合考慮選取超聲提取法。同時(shí)比較了提取時(shí)間、提取溶液體積，最終確定為1 g白術(shù)藥材加20 mL 甲醇，超聲提取30 min。

白術(shù)內(nèi)酯類成分有抗癌、抗炎，促進(jìn)胃腸運(yùn)動(dòng)等作用，浸出物是白術(shù)藥材主要的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，在一定程度上反映了白術(shù)臨床療效。不同炮制方法使白術(shù)藥材中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量較白術(shù)藥材都有上升趨勢(shì)，蒼術(shù)酮含量基本沒(méi)有發(fā)生變化。米泔水漂白術(shù)中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ和白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量增加明顯，蒼術(shù)酮含量基本沒(méi)有發(fā)生變化，但其浸出物含量明顯降低，可能與白術(shù)多糖及其他易溶于水的成分在炮制過(guò)程中溶解有關(guān)。麩炒白術(shù)和焦炒白術(shù)中白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量明顯增加，且焦炒白術(shù)中浸出物含量明顯升高，這可能是焦炒白術(shù)健脾止瀉功效顯著增強(qiáng)的原因。該研究為白術(shù)不同炮制品在臨床的應(yīng)用提供了有利依據(jù)，但臨床作用機(jī)理還需進(jìn)一步研究。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典·一部[S].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2015:103.

[2]吳慧,趙文龍,單國(guó)順,等.HPLC波長(zhǎng)切換法同時(shí)測(cè)定白術(shù)及其不同麩制品中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ[J].中成藥,2013,35(11):2484-2487.

[3]閻克里,朱秀卿,趙麗.HPLC法同時(shí)測(cè)定白術(shù)揮發(fā)油中5種抗腫瘤成分含量[J].藥物分析雜志,2011,31(6):1 106-1 110.

[4]向小慶,葉紅.白術(shù)抗腫瘤作用的研究及應(yīng)用進(jìn)展[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2013,19(8):367-370.

[5]李雯,尹華. 白術(shù)化學(xué)成分的藥理作用研究進(jìn)展[J].海峽藥學(xué),2012,24(3):9-11.

[6]彭騰,李鴻翔,鄧赟,等.白術(shù)內(nèi)酯類成分及其藥理作用研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥房,2012,23(39):3 732-3 734.

[7]段啟,許冬謹(jǐn),謝晨. HPLC法測(cè)定白術(shù)不同炮制品中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ[J].中草藥,2008,39(9):2 482-2 487.

[8]沈建濤,張振凌.白術(shù)炮制品中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅲ含量隨放置時(shí)間變化的研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2014,25(8):1 873-1 875.

[9]張金蓮,謝日健,劉明貴,等.不同炮制方法對(duì)白術(shù)中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ含量的影響[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2016,22(21):15-18.

[10]朱國(guó)瓊,高嵐.白術(shù)古今炮制述要[J].基層中藥雜志,1998,12(3):17.

[11]李釗,李維聰.淺析白術(shù)不同炮制的臨床應(yīng)用[J].四川中醫(yī),2015,33(2):189-191.

[12]費(fèi)瑩,王娜妮,李洪玉,等.炮制工藝對(duì)白術(shù)揮發(fā)油組成及3種白術(shù)內(nèi)酯含量的影響研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2016,34(2):418-421.

[13]王文明,夏黎,段啟,等. 清炒白術(shù)高效液相色譜指紋圖譜研究[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2013,29(17):2 582-2 583.

[14]段啟,許冬謹(jǐn),劉傳祥,等. 白術(shù)的研究進(jìn)展[J].中草藥,2008,39(5):附4-附6.

[15]伏新順. 白術(shù)炮制不同功有別[N].中國(guó)中醫(yī)藥報(bào),2009-09-17(5).

[16]李慶.白術(shù)的不同炮制法對(duì)臨床作用影響[J].中國(guó)醫(yī)藥指南,2013,11(19):302-303.

[17]張鈺祺,龔千鋒. 米泔水在中藥炮制中的古今應(yīng)用研究[J].江西中醫(yī)藥,2011,42(4):64-66.

[18]諶瑞林,何浪,費(fèi)俗青,等. 白術(shù)不同炮制品白術(shù)內(nèi)酯含量的比較研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2016,27(12):2 911-2 914.