維吾爾藥地錦草藥材水分、灰分、浸出物、重金屬和砷鹽含量測定△

阿提坎木·瓦合甫 吐提姑·艾力 其曼姑麗·阿布都熱合曼 古力巴爾·卡生木 米仁沙·牙庫甫

(1.喀什地區(qū)維吾爾醫(yī)醫(yī)院，新疆 喀什 844000； 2. 新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830011)

地錦草為大戟科植物地錦Euphorbia humifusa Willd．或斑地錦Euphorbiamaculata L．的干燥全草[1]，我國大戟科大戟屬Euphorbia地錦類植物尚有6個種和1個變種在民間作地錦草藥用，除東南沿海省份之外，遍及全國各地[2]，主要分布在原野荒地、路旁、田間，資源十分豐富。夏、秋季節(jié)采全草，除去雜質(zhì)、清水洗凈，切段，曬干。地錦草用藥歷史悠久，為中醫(yī)、維醫(yī)、蒙醫(yī)常用藥材。 《中國藥典》2015版收載品種，其名最早出自《嘉祜本草》，之后的歷代醫(yī)書中均有記載，按醫(yī)書記載描述的形態(tài)、習(xí)性及產(chǎn)地記述，與如今市售地錦草藥材相比，其特征基本相符。地錦草味辛、性平，歸肝、大腸經(jīng)，入藥部分為地錦草全草，具有止血涼血、解毒清熱之功效。主要用于治療各種皮膚病(皮膚瘙癢)、各種炎癥疾病(腸炎、陰道炎等)、痢疾、咳血、便血、外傷出血、崩漏、乳汁不通、濕熱黃疸、跌打損傷等疾病[3-5]。

鑒于地錦草較好的藥用價值及良好的應(yīng)用前景，近年來國內(nèi)外學(xué)者對地錦草的關(guān)注度日漸提高，并在化學(xué)成分方面做了大量工作。早在1937年日本學(xué)者藤井勝也等，報道了地錦草的部分化學(xué)成分，發(fā)現(xiàn)地錦中含有槲皮素、沒食子酸、沒食子酸甲酯和肌醇[6]，之后國內(nèi)外醫(yī)藥學(xué)者又不斷地對地錦植物進行了深入分析研究，證實此類中草藥中化學(xué)成分主要有黃酮及其苷類[7-8]。

地錦草豐富多樣的化學(xué)成分決定了其廣泛的藥理活性，現(xiàn)代藥理研究表明，地錦草具有抗菌、抗炎[9-11]、抗氧化[12]、抗過敏、免疫調(diào)節(jié)、護肝、止血[13,14]等多種藥理效應(yīng)?；谏疃任墨I分析，我們發(fā)現(xiàn)目前國內(nèi)學(xué)者大部分都集中在地錦草水煎液及總黃酮提取物部位的研究，并發(fā)現(xiàn)有效活性成分主要為黃酮類成分。本研究旨在建立對維藥地錦草藥材定性的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，擬對地錦草藥材水灰分、浸出物含量等質(zhì)量評價參數(shù)進行測定，為全面控制與評價地錦草藥材的質(zhì)量提供實驗依據(jù)同時為后續(xù)我院院內(nèi)制劑吾西巴抗婦炎糖漿質(zhì)量控制提供一個科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與藥材

1.1 儀器與試藥 電子天平(JJ224BC，江蘇常熟濱鎮(zhèn)馀市有限公司)，數(shù)顯恒溫水浴鍋(HH—202，金壇市醫(yī)療儀器廠)，馬沸爐(黃岡永安醫(yī)療器械有限公司)，脈動真空干燥滅菌機(XGl—山東新華醫(yī)療器械股份有限公司)，電熱恒溫干燥箱(202型—北京市永光明醫(yī)療器械有限公司)，扁形稱量瓶，坩堝，氯化鈉，硝酸，鹽酸，硫酸，硝酸銀，硝酸鉛，硫代乙酰胺，醋酸鉛，溴化汞，無水乙醇，等均為分析純。

1.2 藥材 地錦草樣品來源見表1。供試10批地錦草藥材由新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院帕麗達·阿不力孜教授鑒定為地錦草為大戟科植物地錦Euphoria humidify Wield。

表1 地錦草藥材來源

2 方法與結(jié)果

2.1 水分測定 按照2015年版《中國藥典》一部附錄ⅨH水分測定法第一法，取10批地錦草藥材粉末(過2號篩)約2 g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過10 mm，精密稱定，打開瓶蓋在105℃干燥5 h，將瓶蓋蓋好，移至干燥器中，冷卻30min，精密稱定，再在上述溫度干燥1 h，冷卻，稱重，至連續(xù)再次稱重的差異不超過5 mg，根據(jù)減失的重量計算含水量(%)。實驗結(jié)果表明，地錦草水分含量在3.14%～4.72%之間，平均值為3.93%，結(jié)果見表2。

表2 地錦草藥材中水分的含量

2.2 灰分的測定

2.2.1 總灰分的測定 照灰分測定法(《中國藥典》2015版一部附錄ⅨK)測定。取地錦草藥材粉末，通過2號篩，混合均勻后，取供試品3.5g，置熾灼至恒重的坩堝中，緩緩升溫?zé)霟?，注意避免燃燒，至完全炭化時，逐漸升溫至560℃，使完全炭化至恒重。根據(jù)殘渣重量，計算出供試品中總灰分含量(%)。結(jié)果見表3。

2.2.2 酸不溶性灰分的測定 照灰分測定法(《中國藥典》2015版一部附錄ⅨK)測定，取“2.2.1”項下所得灰分，在坩堝中加入稀鹽酸10mL，用表面皿覆蓋坩堝，置水浴上加熱10min，表面皿用熱水5 mL沖洗，洗液并坩堝中，用無灰濾紙濾過，坩堝中的殘渣用水洗于濾紙上，并洗滌至洗液不顯氯化物反應(yīng)為止。濾渣連同濾紙移至同一坩堝中干燥，560℃熾灼至恒重。計算地錦草酸不溶性灰分的含量(%)。地錦草總灰分含量為8.81%～13.068%，平均值為10.89%；酸不溶性灰分含量為1.56%～2.34%，結(jié)果見表3。

表3 地錦草藥材總灰分和酸不溶性灰分的含量

2.3 浸出物的測定

2.3.1 浸出物測定方法的比較 照浸出物測定法(《中國藥典》2015版一部附錄ⅨA)測定。

冷浸法：取批號為20160725供試品約2 g，稱定重量，置250mL的錐形瓶中，精密加人溶劑50 mL，塞緊，冷浸，前6 h內(nèi)時振搖，再靜置18 h，用干燥濾器迅速濾過，精密量取濾液20m1，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，移置干燥器中，冷卻30 min，迅速精密稱定重量，除另有規(guī)定外，以干燥品計算供試品中水溶性浸出物的含量(%)。

熱浸法：取批號為20160725供試品約2 g，稱定重量，置250mL的錐形瓶中，精密加入溶劑50 mL，塞緊，稱定重量，靜置1h后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1h。放冷后，取下錐形瓶，密塞，稱定重量，用溶劑補足減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過。精密量取濾液25 mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，移置干燥器中，冷卻30 min，迅速精密稱定重量，除另有規(guī)定外，以干燥品計算供試品中水溶性浸出物的含量(%)。

實驗結(jié)果表明，冷浸法和熱浸法對同一樣品分別用2種不同溶劑來進行浸出物的測定，熱浸法的測定結(jié)果高于冷浸法，故選擇水為溶劑熱浸法測定浸出物的含量，結(jié)果見表4。

表4 地錦草浸出物冷浸法和熱浸法測定結(jié)果(%)

2.3.2 水溶性浸出物的測定 照浸出物測定法(《中國藥典》2015版一部附錄ⅨA)項下的水溶性浸出物的測定法熱浸法測定，結(jié)果見表5。

表5 水溶性浸出物測定結(jié)果(n=3)

2.3.3 醇溶性浸出物的測定 乙醇濃度的選擇取批號為20160725地錦草藥材2 g，對不同濃度的乙醇進行了比較。

實驗結(jié)果表明用75%乙醇測定的浸出物結(jié)果高于其它濃度乙醇，故選擇55%乙醇測定浸出物，結(jié)果見表6。

表6 乙醇濃度的比較測定

照浸出物測定法(《中國藥典》2015版一部附錄ⅨA)項下的醇溶性浸出物的測定法熱浸法測定。實驗結(jié)果表明，地錦草水溶性浸出物測定結(jié)果在26.83%～40.25%之間，平均值為33.54%；55%乙醇浸出物測定結(jié)果在22.61%～33.91%之間，平均值為28.26%，結(jié)果見表7。

表7 醇溶性浸出物測定結(jié)果(n=3)

2.4 重金屬(Pb2+) 測定照重金屬測定法(《中國藥典》2015版一部附錄ⅨE)測定；取地錦草藥材粉末過2號篩49，緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸1 mL，使恰濕潤，用低溫?zé)嶂亮蛩岢霰M后，加硝酸0.5 mL蒸干，放冷，在560℃熾灼使至完全灰化，放冷加鹽酸2 mL，至水浴上蒸干后加水15mL，滴加氨試液至酚酞指示液顯粉紅色，再加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2 mL，微熱溶解后，移至納氏比色管中，加水稀釋成25mL，作為甲管；另取配制供試品溶液的試劑，置瓷皿中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2mL與水15mL，微熱溶解后，移至納氏比色管中加不同量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液，再用水稀釋成25 mL，作為乙管；再在甲，乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液個2mL，搖勻，放置2 min，同置白紙上，自上向下透視，甲管中出現(xiàn)的顏色不得乙管深，結(jié)果見表8。

2.5 砷鹽測定 砷鹽測定按照《中國藥典》2015版一部附錄ⅧJ砷鹽檢查法項下第l法(古蔡氏法)進行測定，稱取三氧化二砷0.132 g，置1000mL容量瓶中，加20%氫氧化鈉溶液5 mL溶解后，用適量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10mL，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10mL，置1000m1容量瓶中，加稀硫酸10 mL，用水稀釋至刻度，搖勻，即得標(biāo)準(zhǔn)砷溶液(每毫升相當(dāng)1μg的As)。精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2 mL，置標(biāo)準(zhǔn)磨口錐形瓶中，加鹽酸5 mL與水21mL，再加碘化鉀試液5 mL與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10 min后，加鋅粒2 g，立即將裝有醋酸鉛棉花和溴化汞試紙的導(dǎo)氣管密塞于標(biāo)準(zhǔn)磨口錐形瓶上，并將瓶置于25～40℃水浴中，反應(yīng)45 min，取出溴化汞試紙，取出溴化汞試紙，即得，結(jié)果見表8。

實驗結(jié)果表明，地錦草重金屬與砷鹽檢查結(jié)果均符合《中國藥典》(2015年版)規(guī)定重金屬與砷鹽雜質(zhì)限量檢查的要求。

表8 重金屬與有害物質(zhì)測定結(jié)果

3 討論

地錦草作為維吾爾醫(yī)的常用藥材收載于《中華人民共和國藥品標(biāo)準(zhǔn)維吾爾藥分冊》)(1993年版)。本文首次采用《中國藥典》[15]法對地錦草藥材水分、灰分、酸不溶性灰分、浸出物含量、重金屬與砷鹽指標(biāo)進行測定，為地錦草藥材的質(zhì)量評價提供了實驗依據(jù)，可填補原地方標(biāo)準(zhǔn)的空白。根據(jù)測定結(jié)果并參照《中國藥典》的相關(guān)規(guī)定，建議地錦草藥材提升標(biāo)準(zhǔn)中，地錦草藥材水分暫定不超過5.0%為宜，總灰分暫定不超過14.0%為宜，酸不溶性灰分暫定不超過3.0%為宜，熱浸法水溶性浸出物暫定不超過41.0%為宜，熱浸法55%乙醇浸出物暫定不低于34.0%為宜，重金屬(Pb)暫定不超過0．001%為宜，砷鹽暫定不超過0．000l%為宜。

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