信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子信號(hào)通路在自然殺傷細(xì)胞研究中的進(jìn)展

于淮海，孫雨飛，金昌洙，付 強(qiáng)

自然殺傷(natural killer, NK)細(xì)胞是固有免疫系統(tǒng)的重要組成部分，是機(jī)體抗感染和防止細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的重要免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞。NK細(xì)胞不表達(dá)特異性的抗原識(shí)別受體，不需預(yù)先活化就能夠識(shí)別并殺傷異常細(xì)胞，在機(jī)體抗感染、抗腫瘤、正常妊娠和免疫調(diào)節(jié)等方面發(fā)揮重要作用。因其毒副作用小，近年來(lái)已初步應(yīng)用于臨床的相關(guān)治療。但目前對(duì)NK細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育和功能調(diào)控還有許多機(jī)制尚未闡明，限制了其進(jìn)一步的應(yīng)用。

信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子(signal transducers and activators of transcription，STAT)信號(hào)通路廣泛參與NK細(xì)胞的各項(xiàng)生理功能并發(fā)揮著重要的調(diào)控作用，因此對(duì)這條通路的研究具有重要的意義。STAT信號(hào)通路的上游有酪氨酸激酶相關(guān)受體、酪氨酸激酶。細(xì)胞因子與相應(yīng)受體結(jié)合引起受體分子的二聚化，然后與受體偶聯(lián)的酪氨酸激酶相互接近并通過(guò)交互的酪氨酸磷酸化作用而活化。活化的STAT蛋白以二聚體的形式進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)與靶基因結(jié)合，調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄[1]。STAT作為最終的轉(zhuǎn)錄激活子，負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄相應(yīng)的基因或影響其他因子的活性，進(jìn)而影響NK細(xì)胞相應(yīng)的功能活性?，F(xiàn)就以不同的STAT為序，探討STAT信號(hào)通路對(duì)NK細(xì)胞功能的影響。

1 STAT1：NK細(xì)胞的激活因子

STAT1可以促進(jìn)NK細(xì)胞的發(fā)育，增強(qiáng)NK細(xì)胞的抗感染和抗腫瘤能力。STAT1促進(jìn)NK細(xì)胞的發(fā)育，Cardif是一種胞內(nèi)受體蛋白，介導(dǎo)Ⅰ型干擾素和其他炎癥因子的產(chǎn)生，Ⅰ型干擾素對(duì)維持細(xì)胞內(nèi)STAT1的水平至關(guān)重要，敲除Cardif的NK細(xì)胞表達(dá)STAT1水平低，其增殖能力和細(xì)胞毒性均降低[2]。STAT1增強(qiáng)NK細(xì)胞的抗感染作用，其對(duì)NK細(xì)胞介導(dǎo)的抗病毒作用至關(guān)重要，尤其在干擾素介導(dǎo)的一系列抗病毒反應(yīng)中發(fā)揮著重要作用。STAT1基因敲除鼠發(fā)育正常，對(duì)其他細(xì)胞因子反應(yīng)正常，但對(duì)干擾素?zé)o應(yīng)答，極易受病毒感染死亡[3]。STAT1增強(qiáng)NK細(xì)胞的抗腫瘤作用，轉(zhuǎn)移性黑色素瘤患者與正常人相比較，其體內(nèi)NK細(xì)胞的STAT1表達(dá)水平下降[4]。姜黃素類(lèi)化合物不僅可以通過(guò)抑制核因子-κB起到抑制腫瘤增殖的作用，同時(shí)也抑制了STAT1在腫瘤細(xì)胞中的抗腫瘤增殖作用和NK細(xì)胞干擾素(interferon，IFN)-γ的分泌，但姜黃素類(lèi)化合物與Ω-3脂肪酸聯(lián)合使用，可以減少STAT1磷酸化水平降低而致的NK細(xì)胞的失活，增強(qiáng)對(duì)腫瘤的殺傷作用[5]。另有研究發(fā)現(xiàn)STAT1蛋白一個(gè)磷酸化位置S727的點(diǎn)突變可顯著增加NK細(xì)胞穿孔素和顆粒酶B的釋放，從而大大提高了NK細(xì)胞的抗腫瘤活性[6]。以上研究表明STAT1促進(jìn)NK細(xì)胞的細(xì)胞活性，因而增加STAT1在NK細(xì)胞的表達(dá)有利于發(fā)揮NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。但關(guān)于STAT1通路的詳細(xì)機(jī)制還未研究透徹，值得進(jìn)一步研究探討。

2 STAT2：Ⅰ型干擾素的信號(hào)因子

Ⅰ型干擾素和白細(xì)胞介素(interleukin，IL)可以通過(guò)STAT2對(duì)NK細(xì)胞進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)。Ⅰ型干擾素通過(guò)激活蛋白酪氨酸激酶(Janus kinase，JAK)1和酪氨酸激酶2(tyrosine kinase 2，TYK2)從而激活STAT1和STAT2，形成相應(yīng)的二聚體調(diào)節(jié)NK細(xì)胞的一系列生物效應(yīng)，其中包括對(duì)STAT4的調(diào)節(jié)，影響NK細(xì)胞釋放IFN-γ。TYK2基因敲除小鼠的NK細(xì)胞細(xì)胞毒性降低，對(duì)腫瘤的抵抗力下降[7]。IFN-α可以減少NK細(xì)胞IL-21受體mRNA表達(dá)，調(diào)節(jié)NK細(xì)胞IL-21受體的表達(dá)，這一過(guò)程需要STAT2的參與[8]。另外IL-15受體信號(hào)通路也可以激活下游的STAT2從而影響NK細(xì)胞的生物活性[9]。Ⅰ型干擾素在抗病毒中發(fā)揮著重要的作用，并已應(yīng)用于臨床治療某些病毒感染疾病和惡性腫瘤。而Ⅰ型干擾素作用于細(xì)胞受體所介導(dǎo)的一系列信號(hào)通路離不開(kāi)STAT2的參與[10]。Clr-b是NK細(xì)胞抑制性受體NKR-P1B的配體，在巨細(xì)胞病毒感染模型鼠中，旁鄰細(xì)胞在Ⅰ型干擾素的刺激下高表達(dá)Clr-b，保護(hù)其免受NK細(xì)胞的殺傷。在這一過(guò)程中，STAT2對(duì)于Clr-b的誘導(dǎo)是必不可少的[11]。值得注意的是，Ⅰ型干擾素介導(dǎo)的經(jīng)典的信號(hào)通路是通過(guò)STAT1/STAT2/IRF9三聚體作用的，但有研究發(fā)現(xiàn)STAT2可以不依賴(lài)STAT1與干擾素調(diào)節(jié)因子9(inter feron regulatory factors 9，IRF9)形成STAT2/IRF9二聚體就可以對(duì)病毒感染做出反應(yīng)[12]。目前對(duì)STAT2與NK細(xì)胞之間聯(lián)系的研究較少，除與STAT1共同介導(dǎo)Ⅰ型干擾素對(duì)NK細(xì)胞調(diào)節(jié)之外的其他功能有待進(jìn)一步闡明。

3 STAT3：NK細(xì)胞毒性的抑制因子

STAT3抑制NK細(xì)胞的活性，抑制NK細(xì)胞對(duì)腫瘤的殺傷，但有時(shí)會(huì)起到相反的作用。實(shí)驗(yàn)表明敲除STAT3基因的NK細(xì)胞表達(dá)更高的顆粒酶B、穿孔素和DNAM-1，提高對(duì)腫瘤的免疫監(jiān)視殺傷作用[13]。Schnurri-2是細(xì)胞內(nèi)一類(lèi)含鋅指樣結(jié)構(gòu)調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的蛋白，參與細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的信號(hào)傳導(dǎo)，Schnurri-2敲除小鼠NK細(xì)胞的STAT3表達(dá)上升，其顆粒酶B、穿孔素釋放減少，表明Schnurri-2對(duì)NK細(xì)胞的發(fā)育功能有重要影響，并通過(guò)STAT3信號(hào)通路發(fā)揮作用，STAT3的激活抑制NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性[14]。在腫瘤微環(huán)境中，腫瘤細(xì)胞可以分泌多種細(xì)胞因子激活腫瘤微環(huán)境內(nèi)的STAT3信號(hào)通路，STAT3在NK細(xì)胞的激活可以抑制NK細(xì)胞的活性，表現(xiàn)在NK細(xì)胞激活性受體DNAM-1、NKp30、NKp44和NKG2D的表達(dá)下調(diào)，以及穿孔素A和顆粒酶B的表達(dá)下降，從而降低了NK細(xì)胞對(duì)腫瘤的殺傷作用。STAT3在腫瘤細(xì)胞的激活既可以抑制NK細(xì)胞釋放趨化因子，減少招募到腫瘤微環(huán)境中免疫細(xì)胞的數(shù)量，又可以減少NKG2D配體MICA和ULBP的表達(dá)，從而抑制NK細(xì)胞的活性，并且還發(fā)現(xiàn)STAT3的激活可以導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞程序性死亡受體配體-1(Programmed cell death-ligand 1，PD-L1)表達(dá)增高，PD-L1與NK細(xì)胞表達(dá)的程序性細(xì)胞死亡蛋白-1結(jié)合降低NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性。腫瘤細(xì)胞和骨髓來(lái)源的抑制性細(xì)胞共同釋放吲哚胺2，3-雙加氧酶和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β抑制NK細(xì)胞的發(fā)育、增殖、活性。NK細(xì)胞可以與體內(nèi)的各種免疫細(xì)胞相互作用，促進(jìn)其對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用，但是STAT3的激活會(huì)抑制這一活性[15]。

但也有實(shí)驗(yàn)表明，STAT3會(huì)起到完全相反的作用，會(huì)促進(jìn)NK細(xì)胞的活性，促進(jìn)NK細(xì)胞對(duì)腫瘤的殺傷。用表達(dá)CD137L和mbIL21的K562細(xì)胞從外周血擴(kuò)增NK細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)可以明顯促進(jìn)NK細(xì)胞的增殖和細(xì)胞毒性，但STAT3抑制劑JSI-124可以抑制這一過(guò)程，使K562細(xì)胞的作用失效，表明STAT3的激活有利于NK細(xì)胞的發(fā)育和細(xì)胞毒性[16]。IL-10和IL-21通過(guò)激活STAT3使NK細(xì)胞激活性受體NKG2D、DAP10、DAP12表達(dá)上升，STAT3抑制劑會(huì)抑制NKG2D的表達(dá)，STAT3基因敲除的NK細(xì)胞表達(dá)低水平的NKG2D，這使得NK細(xì)胞的殺傷活性降低[17]。IL-21作用于NK細(xì)胞會(huì)增強(qiáng)NK細(xì)胞對(duì)腫瘤的殺傷從而延長(zhǎng)腫瘤小鼠模型的生存期，這一作用是NKG2D依賴(lài)的。使用NKG2D抗體或抑制小鼠模型內(nèi)NK細(xì)胞的活性后，IL-21對(duì)小鼠的保護(hù)作用消失，小鼠生存期減少[18]。這些實(shí)驗(yàn)表明，IL-21可以通過(guò)激活STAT3，增加NK細(xì)胞表面NKG2D的表達(dá)，從而增加NK細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。研究發(fā)現(xiàn)，慢性NK細(xì)胞增殖性疾病與STAT3基因的突變有關(guān)，突變位于二聚化界面上的SH2區(qū)域，介導(dǎo)STAT3的激活。STAT3通路不僅可以調(diào)節(jié)NK細(xì)胞的細(xì)胞活性，突變還可造成NK細(xì)胞的癌變[19]。STAT3既可抑制又可促進(jìn)NK細(xì)胞的細(xì)胞活性，但以抑制為主，因此減少STAT3在NK細(xì)胞中的表達(dá)有利于NK細(xì)胞發(fā)揮其細(xì)胞毒性作用，但需根據(jù)不同的微環(huán)境而定。對(duì)于某些腫瘤，STAT3抑制劑不僅起不到治療的作用還會(huì)促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)，抑制NK細(xì)胞的活性，其具體機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。

4 STAT4：NK細(xì)胞毒性的促進(jìn)因子

STAT4的激活可以促進(jìn)NK細(xì)胞釋放IFN-γ和穿孔素從而增強(qiáng)NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性，并在移植免疫和抗感染中發(fā)揮著重要的作用。STAT4在NK細(xì)胞可經(jīng)IL-12信號(hào)通路活化，IL-12通過(guò)激活JAK2和TYK2從而激活STAT4，活化的STAT4促進(jìn)NK細(xì)胞的增殖，增強(qiáng)NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性，增加IFN-γ的釋放[20]。IL-12還可以通過(guò)激活STAT4促進(jìn)NK細(xì)胞穿孔素的釋放，這與STAT4促進(jìn)穿孔素相關(guān)蛋白的轉(zhuǎn)錄有關(guān)[21]。在移植免疫中，使用地塞米松可有效抑制NK細(xì)胞STAT4的表達(dá)，從而抑制NK細(xì)胞的免疫活性，這有利于抑制器官移植的排斥反應(yīng)[22]。接受肝移植的非丙型肝炎患者體內(nèi)NK細(xì)胞的活性降低，表達(dá)低水平的NKp46和NKp30，IFN-γ釋放減少，細(xì)胞毒性降低。與健康人和丙型肝炎肝移植患者對(duì)比，接受肝移植的非丙型肝炎患者體內(nèi)NK細(xì)胞的STAT4的水平明顯降低，這表明STAT4和NK細(xì)胞介導(dǎo)的免疫耐受有關(guān)[23]。研究發(fā)現(xiàn)，STAT4還可通過(guò)誘導(dǎo)T-bet和IL-10產(chǎn)生記憶性NK細(xì)胞，進(jìn)一步增強(qiáng)NK細(xì)胞的抗感染能力[24]。分泌IFN-γ和穿孔素是NK細(xì)胞行使免疫功能的重要體現(xiàn)，因而增加STAT4在NK細(xì)胞中的表達(dá)有利于NK細(xì)胞發(fā)揮其細(xì)胞毒性作用，抑制STAT4信號(hào)通路則有利于減少來(lái)自NK細(xì)胞的免疫排斥反應(yīng)。

5 STAT5：NK細(xì)胞發(fā)育的必須因子

STAT5促進(jìn)NK細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育并增強(qiáng)NK細(xì)胞毒性和抗腫瘤能力。STAT5對(duì)NK細(xì)胞的發(fā)育起重要的作用，STAT5的缺失可導(dǎo)致NK細(xì)胞數(shù)量的減少，STAT5對(duì)小鼠的生存是必不可少的，失去STAT5的NK細(xì)胞不能存活[25]。Schnurri-2基因敲除小鼠NK細(xì)胞的STAT5表達(dá)下調(diào)，其顆粒酶、穿孔素釋放減少[15]。IL-15可以增強(qiáng)NK細(xì)胞的抗腫瘤作用，由Cish編碼的CIS蛋白是IL-15信號(hào)通路的抑制調(diào)節(jié)因子，敲除Cish基因，NK細(xì)胞對(duì)IL-15的敏感性增高，促進(jìn)NK細(xì)胞的增殖和IFN-γ的分泌，增強(qiáng)其對(duì)腫瘤的殺傷作用，而這一過(guò)程離不開(kāi)STAT5的參與[26]。V2O5可以通過(guò)抑制STAT5的磷酸化，致使NK細(xì)胞的增殖能力和IFN-γ釋放水平下降，促使腫瘤在機(jī)體內(nèi)的發(fā)生[27]。STAT5被抑制了的NK細(xì)胞可被Bcl-2過(guò)表達(dá)所營(yíng)救，并且通過(guò)增加血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-A的水平促進(jìn)腫瘤的形成，抑制NK細(xì)胞的STAT5水平可以增加腫瘤的血管生成，促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)[28]。STAT5增強(qiáng)NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性，是NK細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育所必需的，抑制NK細(xì)胞內(nèi)STAT5的表達(dá)會(huì)促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)，因而增加NK細(xì)胞內(nèi)STAT5的水平有利于NK細(xì)胞行使其正常的免疫功能。

6 STAT6:NK細(xì)胞活性的調(diào)節(jié)因子

STAT6既可增強(qiáng)NK細(xì)胞的細(xì)胞活性又可抑制NK細(xì)胞的細(xì)胞活性。STAT6促進(jìn)NK細(xì)胞釋放IFN-γ，增強(qiáng)NK細(xì)胞的細(xì)胞活性。IL-4和IL-13通過(guò)調(diào)節(jié)JAK3和STAT6的磷酸化水平來(lái)調(diào)節(jié)NK細(xì)胞的生物活性，IL-4促進(jìn)NK細(xì)胞釋放IFN-γ，這一過(guò)程是STAT6依賴(lài)的，IL-4不能刺激STAT6敲除小鼠NK細(xì)胞釋放IFN-γ。IL-4可以協(xié)同IL-2和IL-12共同刺激NK細(xì)胞釋放IFN-γ，不同的是IL-4協(xié)同IL-2刺激NK細(xì)胞釋放IFN-γ是STAT6依賴(lài)的，協(xié)同IL-12是非STAT6依賴(lài)的[29]。STAT6亦可抑制NK細(xì)胞的細(xì)胞活性，降低其對(duì)病毒的殺傷作用。在STAT6基因敲除小鼠體內(nèi)，NK細(xì)胞細(xì)胞毒性增強(qiáng)，增強(qiáng)其對(duì)病毒感染細(xì)胞的殺傷作用[30]。此外，STAT6對(duì)維持母胎界面免疫平衡有一定的積極作用，研究發(fā)現(xiàn)IL-4在固有免疫細(xì)胞(包含NK細(xì)胞)中通過(guò)STAT6信號(hào)通路可誘導(dǎo)Tim-3表達(dá)，在妊娠期間，Tim-3作為一個(gè)調(diào)節(jié)分子，調(diào)控固有免疫和適應(yīng)性免疫，從而調(diào)控Th1和Th2之間的平衡，影響母胎界面的免疫平衡[31]。CKJOT是韓國(guó)傳統(tǒng)方法治療女性不孕不育中使用的一種中草藥，研究發(fā)現(xiàn)CKJOT可以讓Th1相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子T-bet明顯下調(diào)，而Th2相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子GATA3及STAT6明顯上調(diào)，這表明韓國(guó)傳統(tǒng)中藥CKJOT對(duì)維持母胎界面免疫平衡有一定的作用，STAT6參與母胎界面免疫平衡的調(diào)節(jié)[32]。對(duì)于STAT6在NK細(xì)胞中的作用研究較少，STAT6在NK細(xì)胞中的調(diào)控以及對(duì)蛻膜NK細(xì)胞的影響有待于進(jìn)一步研究。

7 結(jié)論

近年研究發(fā)現(xiàn)激活NK細(xì)胞內(nèi)的STAT1、STAT4、STAT5可以促進(jìn)NK細(xì)胞的細(xì)胞活性，增強(qiáng)NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性，有利于NK細(xì)胞行使其抗感染、抗腫瘤的作用。抑制NK細(xì)胞內(nèi)的STAT3、STAT6亦可增強(qiáng)NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性，但有些情況下會(huì)起到相反的作用，提示STAT3、STAT6可能在自身免疫耐受有重要的作用。因而在利用STAT通路調(diào)節(jié)NK細(xì)胞的生物學(xué)功能時(shí)，要根據(jù)實(shí)際情況，兼顧STAT1/STAT4、STAT1/STAT3及STAT4/STAT6等信號(hào)通路的平衡來(lái)增強(qiáng)或抑制某一類(lèi)STAT蛋白以發(fā)揮出NK細(xì)胞的最佳功能狀態(tài)。另外，細(xì)胞因子作用于NK細(xì)胞不僅僅激活STAT信號(hào)通路，往往可能與多條其他信號(hào)通路共同作用，信號(hào)通路之間的相互作用值得進(jìn)一步探討。鑒于STAT信號(hào)通路在NK細(xì)胞生物活性中的重要性，在進(jìn)一步闡明相關(guān)機(jī)制的基礎(chǔ)上，精確抑制或促進(jìn)這條通路的某些靶點(diǎn)，亦或是將來(lái)在轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)實(shí)踐中治療某些腫瘤、感染以及生殖相關(guān)疾病的有效手段。

【參考文獻(xiàn)】

[1]Aaronson DS,Horvath CM.A road map for those who don’t know JAK-STAT[J].Science,2002,296(5573):1653-1655.

[2]Haynes LD,Verma S,McDonald B,et al.Cardif (MAVS) regulates the maturation of NK cells[J].J Immunol,2015,195(5):2157-2167.

[3]Durbin JE,Hackenmiller R,Simon MC,et al.Targeted disruption of the mouse Stat1 gene results in compromised innate immunity to viral disease[J].Cell,1996,84(3):443-450.

[5]Fiala M.Curcumin and omega-3 fatty acids enhance NK cell-induced apoptosis of pancreatic cancer cells but curcumin inhibits interferon-γ production: benefits of omega-3 with curcumin againstcancer[J].Molecules,2015,20(2):3020-3026.

[6]Putz EM,Gotthardt D,Hoermann G,et al.CDK8-mediated STAT1-S727 phosphorylation restrains NK cell cytotoxicity and tumor surveillance[J].Cell Rep,2013,4(3):437-444.

[7]Zhang Q,Sturgill JL,Kmieciak M,et al.The role of Tyk2 in regulation of breast cancer growth[J].J Interferon Cytokine Res,2011,31(9):671-677.

[8]Strengell M,Julkunen I,Matikainen S.IFN-alpha regulates IL-21 and IL-21R expression in human NK and T cells[J].J Leukoc Biol,2004,76(2):416-422.

[9]Marra P,Mathew S,Grigoriadis A,et al.IL15RA drives antagonistic mechanisms of cancer development and immune control in lymphocyte-enriched triple-negative breast cancers[J].Cancer Res,2014,74(17):4908-4921.

[10]Huang M,Jiang JD,Peng Z.Recent advances in the anti-HCV mechanisms of interferon[J].Acta Pharm Sin B,2014,4(4):241-247.

[11]Kirkham CL,Aguilar OA,Yu T,et al.Interferon-dependent induction of Clr-b during mouse cytomegalovirus infection protects bystander cells from natural killer cells via NKR-P1B-mediated inhibition[J].J Innate Immun,2017,9(4):343-358.

[12]Blaszczyk K,Nowicka H,Kostyrko K,et al.The unique role of STAT2 in constitutive and IFN-induced transcription and antiviral responses[J].Cytokine Growth Factor Rev,2016,29:71-81.

[13]Gotthardt D,Putz EM,Straka E,et al.Loss of STAT3 in murine NK cells enhances NK cell-dependent tumor surveillance[J].Blood,2014,124(15):2370-2379.

[14]Yamashita J,Iwamura C,Mitsumori K,et al.Murine Schnurri-2 controls natural killer cell function and lymphoma development[J].Leuk Lymphoma,2012,53(3):479-486.

[15]Cacalano NA.Regulation of natural killer cell function by STAT3[J].Front Immunol,2016,7:128.

[16]Wang X,Lee DA,Wang Y,et al.Membrane-bound interleukin-21 and CD137 ligand induce functional human natural killer cells from peripheral blood mononuclear cells through STAT-3 activation[J].Clin Exp Immunol,2013,172(1):104-112.

[17]Zhu S,Phatarpekar PV,Denman CJ,et al.Transcription of the activating receptor NKG2D in natural killer cells is regulated by STAT3 tyrosine phosphorylation[J].Blood,2014,124(3):403-411.

[18]Takaki R,Hayakawa Y,Nelson A,et al.IL-21 enhances tumor rejection through a NKG2D-dependent mechanism[J].Immunol,2005,175(4):2167-2173.

[19]Karube K,Tsuzuki S,Yoshida N,et al.Comprehensive gene expression profiles of NK cell neoplasms identify vorino statas an effective drug candidate[J].Cancer Lett,2013,333(1):47-55.

[20]Bacon CM,Petricoin EF 3rd,Ortaldo JR,et al.Interleukin 12 induces tyrosine phosphorylation and activation of STAT4 in human lymphocytes[J].Proc Natl Acad Sci USA,1995,92(16):7307-7311.

[21]Yamamoto K,Shibata F,Miyasaka N,et al.The human perforin gene is a direct target of STAT4 activated by IL-12 in NK cells[J].Biochem Biophys Res Commun,2002,297(5):1245-1252.

[22]Michelo CM,Fasse E,van Cranenbroek B,et al.Added effects of dexamethasone and mesenchymal stem cells on early natural killer cell activation[J].Transpl Immunol,2016,37:1-9.

[23]Jamil KM,Hydes TJ,Cheent KS,et al.STAT4-associated natural killer cell tolerance following liver transplantation[J].Gut,2017,66(2):352-361.

[24]Sun JC,Madera S,Bezman NA,et al.Proinflammatory cytokine signaling required for the generation of natural killer cell memory[J].J Exp Med,2012,209(5):947-954.

[25]Lin JX,Li P,Liu D,et al.Critical Role of STAT5 transcription factor tetramerization for cytokine responses and normal immune function[J].Immunity,2012,36(4):586-599.

[26]Delconte RB,Kolesnik TB,Dagley LF,et al.CIS is a potent checkpoint in NK cell-mediated tumor immunity[J].Nat Immunol,2016,17(7):816-824.

[27]Gallardo-Vera F,Diaz D,Tapia-Rodriguez M,et al.Vanadium pentoxide prevents NK-92MI cell proliferation and IFNγ secretion through sustained JAK3 phosphorylation[J].J Immunotoxicol,2016,13(1):27-37.

[28]Gotthardt D,Putz EM,Grundschober E,et al.STAT5 is a key regulator in NK cells and acts as a molecular switch from tumor surveillance to tumor promotion[J].Cancer Discov,2016,6(4):414-429.

[29]Bream JH,Curiel RE,Yu CR,et al.IL-4 synergistically enhances both IL-2 and IL-12 induced IFN-gamma expression in murine NK cells[J].Blood,2003,102(1):207-214.

[30]Mahalingam S,Karupiah G,Takeda K,et al.Enhanced resistance in STAT6-deficient mice to infection with ectromelia virus[J].Proc Natl Acad Sci USA,2001,98(12):6812-6817.

[31]Zhao J,Lei Z,Liu Y,et al.Human pregnancy up-regulates Tim-3 in innate immune cells for systemic immunity[J].J Immunol,2009,182(10):6618-6624.

[32]Lee HS,Cho KH,Kim TK,et al.Cho-kyung-jong-ok-tang,a traditional Korean herbal formula induces type 2 shift in murine natural killer cell cytokine production[J].J Ethnopharmacol,2011,134(2):281-287.