秀珍菇哈茨木霉菌高效低毒防治藥劑的篩選

盧政輝

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秀珍菇哈茨木霉菌高效低毒防治藥劑的篩選

盧政輝

（福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所特色食用菌繁育與栽培國家地方聯(lián)合工程研究中心，福建 福州 350014）

采用生長速率法，測定20種殺菌劑在1 mg/kg濃度下對哈茨木霉生長和10種殺菌劑對秀珍菇菌絲生長的抑制作用。結(jié)果表明，灰霉克星和咪鮮胺對哈茨木霉的抑制率分別達92.14%和82.93%，抑制作用強而對秀珍菇菌絲生長的抑制作用弱。

殺菌劑；秀珍菇；哈茨木霉；抑制作用

秀珍菇（）隸屬于擔子菌綱側(cè)耳科側(cè)耳屬，子實體質(zhì)地脆嫩細膩、口感爽滑、鮮美可口、風(fēng)味獨特，富含優(yōu)質(zhì)蛋白、多糖及人體需要的17種氨基酸和多種微量元素，有“菇中極品”之稱，深受消費者喜愛。

我國1998年自臺灣引種試栽培，已初步建立了一套栽培生產(chǎn)工藝，并迅速得以推廣，栽培面積迅速擴大[1]。但由于栽培技術(shù)還不夠完善，缺乏嚴格標準，又難以借鑒其他菌類的種植方法，因此在出菇過程中常因管理失當而感染綠霉，引起爛筒[2]；另一方面，我國普遍使用的秀珍菇菌株均屬中高溫型菌株，適宜出菇溫度為20～28 ℃，超過30 ℃或低于20 ℃菌包不出菇或小菇蕾易發(fā)黃、萎蔫，出菇一二潮后料面迅速染雜變綠，導(dǎo)致后期基本絕收，損失慘重[3, 4]。

綠霉菌是木霉屬（spp.）真菌的俗稱，屬半知菌門絲孢目木霉屬，廣泛分布于土壤中。它在生物防治中扮演著重要角色。目前已發(fā)現(xiàn)木霉至少對18個屬的29種植物的病源真菌具有生防作用，其中某些木霉菌株已用于商業(yè)開發(fā)[5]。

但綠霉菌卻是食用菌栽培及菌種生產(chǎn)中一個為害嚴重的主要競爭性雜菌和致病菌，在菌絲體生長階段和子實體期普遍存在。由于綠色木霉通常能夠產(chǎn)生高活性的纖維素酶，對纖維素的分解能力很強，在木質(zhì)素、纖維素豐富的基質(zhì)上生長快，傳播蔓延迅速。棉籽殼、木屑、段木都是其良好的營養(yǎng)物。主要癥狀為產(chǎn)生綠色、青綠色或黃綠色霉層。菌包或培養(yǎng)料被污染后，出菇率下降；子實體受污染后，會萎縮和腐爛[6]。

2010年，本所從閩清縣東橋鎮(zhèn)采集秀珍菇綠霉樣品，經(jīng)分離純化培養(yǎng)并鑒定，得到哈茨木霉菌株。哈茨木霉是木霉屬中常見的一個種，廣泛分布于土壤中。于浩龍等對廣西林區(qū)木霉菌經(jīng)多樣性調(diào)查發(fā)現(xiàn)，從6種林區(qū)中共分離鑒定出木霉菌11個種，其中哈茨木霉發(fā)現(xiàn)率高達100%[7]。

食用菌上防治木霉的常用藥劑有甲基托布津、退菌特、百菌清、福美雙、防霉劑、抗霉劑、霉菌靈、多菌靈、疫霉靈、撲霉靈等[8, 9]。劉欣等報道，木霉對菌核凈最為敏感[10]，但該藥劑對食用菌菌絲的影響有待進一步研究。有學(xué)者認為，多菌靈對綠霉抑制作用較強，對平菇菌絲生長有一定影響，使用濃度為500～1 000倍[11]。王宗善試驗發(fā)現(xiàn)多菌靈稀釋1 000倍使用，能抑制綠霉菌絲生長，而對金針菇菌絲生長的影響較弱[12]。但韓慶國選擇多菌靈、雙效靈、克霉靈、克霉先鋒、甲醛等5種殺菌劑對木霉進行抑菌實驗，卻發(fā)現(xiàn)克霉先鋒的防治效果更好，而0.2%的多菌靈對木霉幾乎沒有抑制作用，推測是抗藥性綠霉菌株導(dǎo)致[13]。

綠霉菌與食用菌均屬于真菌類，如何在保證秀珍菇正常生產(chǎn)，為人類餐桌提供美味食用菌食品的同時，又保證食用菌子實體的健康安全。在生產(chǎn)過程中有效安全地進行秀珍菇綠霉病的防控成為科研工作的重點。篩選高效低毒低殘留秀珍菇綠霉病抑制藥劑用于防治食用菌木霉病害，意義重大。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

秀珍菇57-2為福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所栽培室保藏種。哈茨木霉菌分離自閩清縣東橋鎮(zhèn)秀珍菇菌料。

1.2 供試藥劑

共20種：28%灰霉克星WP（綠波生化有限公司），咪鮮胺25%EW（山東省聯(lián)合農(nóng)業(yè)工業(yè)有限公司），25%丙環(huán)唑EC（山東濱農(nóng)科技有限公司），50%抑霉唑SC（以色列馬克西姆化學(xué)有限公司），50%多菌靈WP（江蘇鎮(zhèn)江建蘇農(nóng)藥化工有限公司），70%甲基托布津WP（江蘇龍燈化學(xué)有限公司），兩性霉B50 ppm（華北制藥股份有限公司），30%苯甲丙環(huán)唑EC（青島奧迪斯生物科技有限公司），23.5%異菌脲SC（美邦農(nóng)藥有限公司），30%醚菌酯WP（山東京博農(nóng)化有限公司），50%福美雙WP（青島海利爾藥業(yè)有限公司），75%百菌清WP（陜西上格之路生物科技有限公司），70%嘧霉胺WDG（山東京博農(nóng)化有限公司），12.5%粉唑醇SC（江蘇豐登農(nóng)藥有限公司），77.2%霜霉威鹽酸鹽AS（山東億嘉農(nóng)化有限公司），30%氟菌唑WP（浙江禾本農(nóng)藥化學(xué)有限公司），50%抑霉唑SC（以色列馬克西姆化學(xué)公司），10%戊菌唑SC（浙江禾本農(nóng)藥化學(xué)有限公司），25%嘧菌酯SC（瑞士先正達作物保護有限公司）。

1.3 實驗方法

采用生長速率法，測定各殺菌劑在濃度為1 mg/kg條件下對木霉菌和秀珍菇菌絲生長的抑制率。在無菌條件下，將5 mL濃度為1 mg/kg的藥劑用移液管加入培養(yǎng)皿后，迅速倒入經(jīng)滅菌后冷卻至50 ℃左右的PDA培養(yǎng)基，混勻，制成處理液稀釋濃度的平板，對照組加入等量滅菌水，3次重復(fù)。待平板凝固后接入生長一致的菌餅（Ф=7.0 mm），置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7天，用十字交叉法測量菌落直徑，取平均值，計算菌絲生長抑制率。

用下列公式計算菌絲生長抑制率：

菌落直徑（mm）=測量菌落直徑平均值－7.0；

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

用Excel 2007和SPSS21.0進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計和差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 20種殺菌劑對秀珍菇哈茨木霉菌抑制作用

不同藥劑對哈茨木霉抑制強度不同（表1）?；颐箍诵菍哪久咕z生長抑制效果最好，在濃度為1 mg/kg時，抑制率達90%以上；其次為咪鮮胺，抑制率達80%以上；抑霉唑抑制率高于30%；丙環(huán)唑、多菌靈和甲基托布津抑制率處于20%～30%；百菌清、異菌脲、苯甲丙環(huán)唑、兩性霉素B、氟菌唑的抑制率介于10%～20%；嘧菌酯、戊菌唑、粉唑醇、醚菌酯對哈茨木霉菌絲生長抑制率在5%～10%；氟硅唑、嘧霉胺、福美雙、霜霉威鹽酸鹽、溶壁霉5種藥劑對哈茨木霉的抑制作用很弱，抑制率低于3%。20種藥劑中，霜霉威鹽酸鹽的抑制率最低，僅0.83%。

表1 20種藥劑對哈茨木霉菌絲的抑制率

注：同列不同小寫字母表示差異顯著（＜0.05）。表2同。

2.2 10種殺菌劑對秀珍菇菌絲的抑制作用

從20種藥劑中選取10種對哈茨木霉抑制效果相對較好的殺菌劑，測定其對秀珍菇菌絲的抑制作用。結(jié)果表明，不同藥劑對秀珍菇菌絲生長的抑制強度（表2）依次為：苯甲丙環(huán)唑，抑制率高達62%；丙環(huán)唑，約為47%；百菌清，高于20%；兩性霉素B，約為13%；甲基托布津、咪鮮胺、抑霉唑，介于4%～8%之間；灰霉克星、多菌靈、異菌脲，小于2%。

表2 10種藥劑對秀珍菇菌絲的抑制率

3 結(jié)論與討論

20種殺菌劑對秀珍菇哈茨木霉菌絲的抑制實驗結(jié)果表明，灰霉克星效果良好，在濃度為1 mg/kg時，抑制效果約為92%；其次為咪鮮胺，抑制率約82%；再次為抑霉唑，抑制率約32%。秀珍菇對藥劑的敏感性實驗表明，秀珍菇菌絲對灰霉克星和咪鮮胺不敏感，可推薦用于秀珍菇栽培中防治哈茨木霉菌。丙環(huán)唑?qū)哪久咕囊种瞥潭炔桓撸覍π阏涔骄z抑制率強，不適用于秀珍菇栽培過程中哈茨木霉菌的防治。其他藥劑雖對秀珍菇菌絲抑制作用不大，但對木霉菌抑制作用也低，不提倡在食用菌栽培過程中用于防治木霉菌。

本研究用室內(nèi)培養(yǎng)皿法測定20種藥劑對哈茨木霉病菌和10種藥劑對秀珍菇菌絲生長的影響，但該實驗結(jié)果在生產(chǎn)上是否適用，對食用菌的產(chǎn)量、品質(zhì)是否有影響及其殘留情況，有待于進一步探究。

致謝 感謝團隊的蘭清秀、柯斌榕、廖劍華的理解，給予我獨著發(fā)表的機會。

[1] 盧政輝. 秀珍菇安全高效生產(chǎn)技術(shù)[J]. 浙江食用菌, 2009, 17(14): 46-49.

[2] 郁正中, 李振國. 秀珍菇菌包的防霉措施[J]. 食用菌, 2003(5): 40.

[3] 王增術(shù). 秀珍菇爛袋原因及其預(yù)防措施[J]. 食用菌, 2004(5): 43-44.

[4] 盧政輝. 秀珍菇及其近緣22株菌株的SRAP分析[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報, 2008, 20(11): 8-10.

[5] 段銀芝, 郎劍鋒, 孔凡彬, 等. 4種農(nóng)藥對哈茨木霉生長的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué), 2013, 41(3): 101-102.

[6] 張紹升, 羅佳, 林時遲, 等. 食用菌病蟲害防治圖譜[M]. 福州: 福建科學(xué)技術(shù)出版社, 2004.

[7] 于浩龍, 趙樟, 劉云, 等. 廣西林區(qū)木霉菌多樣性調(diào)查[J]. 西北林學(xué)院學(xué)報, 2012, 27(2): 109-113.

[8] 宋敏, 李增國, 彭向永. 6種殺菌劑對綠色木霉的抑制作用[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué), 2008(8): 90-91.

[9] 張水旺, 康源春, 蔣寶貴. 幾種殺菌劑對霉菌及香菇菌絲生長影響試驗初報[J]. 中國食用菌, 1997, 16(5): 24-25.

[10] 劉欣, 臺蓮梅. 幾種常用殺菌劑對6個木霉菌株的室內(nèi)毒力測定[J]. 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報, 2006, 18(6): 8-11.

[11] 李志欣, 李仲秀, 王方. 幾種殺菌劑防治平菇綠霉菌試驗初報 [J]. 中國農(nóng)學(xué)通報, 1999, 15(1): 57-58.

[12] 王宗善, 武模戈. 四種殺菌劑對綠霉及金針菇菌絲生長的影響[J]. 中國食用菌, 2009, 28(3): 58-60.

[13] 韓慶國. 幾種藥劑對木霉、根霉的抑菌試驗[J]. 食用菌, 2007(1): 55.

福建省屬公益科研院所基本科研專項“秀珍菇綠霉病綜合防治技術(shù)”（2009R10038-5）；福建省重大農(nóng)技推廣服務(wù)項目“食用菌產(chǎn)業(yè)農(nóng)技推廣服務(wù)體系建設(shè)——秀珍菇崗位”（合同編號：KNJ-153048）

盧政輝（1973—），男，高級工程師，主要從事食用菌栽培和病蟲害防治研究。E-mail：513948288@qq.com。

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2095-0934（2018）03-178-04