八角茴香干燥前后揮發(fā)油成分G C-M S分析*

★ 熊耀坤 曾文雪 王雅琪 慕澤涇 王學(xué)成 伍振峰 朱根華*（.江西中醫(yī)藥大學(xué) 南昌 33 00 04；.創(chuàng)新藥物與高效節(jié)能降耗制藥設(shè)備國家重點實驗室 南昌 33 00 04）

八角茴香Illiciumverum Hook. f.為木蘭科植物八角茴香的干燥成熟果實，別名大茴香、茴香八角珠、大八角，為藥材和香料兼用的植物，主產(chǎn)于廣西、廣東、云南等地［1］。八角茴香味辛、性溫，有溫陽散寒、理氣止痛功效［2］。用于寒疝腹痛、腎虛腰痛、胃寒嘔吐、脘腹冷痛等癥?，F(xiàn)代藥理研究表明八角茴香有抗菌、鎮(zhèn)痛、抗病毒等作用［3］。其中，揮發(fā)油部位是其主要藥效部位［4-7］。目前，八角茴香在產(chǎn)地加工仍采用太陽曬干、殺青曬干、簡易土炕干燥、硫熏干燥等干燥方法，采收期遇陰雨、多雨天不能及時干燥八角果而引起的變質(zhì)腐爛的問題，普遍未進行藥材的質(zhì)量控制，在干燥過程中過度干燥，過高的溫度和過長的低效干燥，致使藥材色澤劣變、芳香物質(zhì)損失以及藥用有效成分分解，甚至促使性味改變，藥效喪失［8-9］。本文模擬八角茴香產(chǎn)地加工干燥的方式對鮮八角茴香進行干燥，采用水蒸氣蒸餾法提取干燥前后八角茴香揮發(fā)油，應(yīng)用GC-MS方法進行分離和分析鑒定，探究在干燥前后八角茴香揮發(fā)油含量及化學(xué)差異，為八角茴香產(chǎn)地加工干燥過程質(zhì)量控制提供參考依據(jù)。

1 儀器與試藥

Agilent7890A/5975C型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）（美國安捷倫公司）；色譜柱為DB-5石英毛細(xì)管柱（0.25μm×250μm×30.0m）；KDM型調(diào)溫電熱套（山東鄄城華魯電熱儀器有限公司）；YHC-11002B電子天平（瑞安市英衡電器有限公司）；TG328A型萬分之一電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；SZ-93自動雙重純水蒸餾器（上海亞榮生化儀器廠）無水硫酸鈉（西隴科學(xué)股份有限公司），乙酸乙酯（上海安譜實驗科技股份有限公司）均為市售分析純；蒸餾水（自制）。八角茴香，2017年10月采購于廣西玉林市容縣石頭鎮(zhèn)，經(jīng)江西中醫(yī)藥大學(xué)張壽文教授鑒定為Illiciumverum Hook. f.的新鮮果實，批次為20171009，購買后，貯存于陰涼處備用。

2 方法與結(jié)果

2.1 鮮藥材的干燥 按2015版《中國藥典》對鮮藥材進行晾干［10］，取500g新鮮藥材揀凈，置于太陽底下進行晾曬，得到干燥藥材138g。

2.2 揮發(fā)油提取 按2015版《中國藥典》提取揮發(fā)油的方法［11］，稱取八角茴香200g（鮮藥材按干燥前重量計算），加水600mL于1000mL電熱套中，于揮發(fā)油提取器中提取5h，取0.1mL精油用少量乙醚將析出的揮發(fā)油反復(fù)溶出，并用無水硫酸鈉脫水過夜，并經(jīng)0.45μm的微孔濾膜濾過，裝入樣品瓶中，密封保存。

對干燥前后八角茴香揮發(fā)油的色澤、相對密度、pH值、藥材中含量等進行測定和表征，結(jié)果見表1。可見在干燥前后八角茴香揮發(fā)油的理化性質(zhì)無明顯變化，干品中含油量比鮮品的含油量低0.34%。

表1 八角茴香藥材干燥前后理化性質(zhì)的變化

2.3 氣相色譜條件 氣相色譜條件：DB-5MS毛細(xì)石英管柱（30m×250μm×0.25μm）；載氣He為恒流模式，柱流器為1.0mL/min，平均線速為37cm/s，進樣量為1.0μl，進樣口為分流模式，分流比為50∶1，進樣口溫度為250℃；升溫程序為初始溫度60℃，以5℃/min升至150℃，再以10℃/min升至250℃，保持5min，共計33min。

2.4 質(zhì)譜條件 電子轟擊源分析（EI），電離能量為70ev，電子倍增管為1905V，離子源溫度為230℃，四極桿溫度為150℃，接口溫度為250℃，掃描范圍m/z 40～550amu，全掃描方式，NIST11質(zhì)譜庫。

2.5 氣質(zhì)結(jié)果分析 實驗中通過對升溫程序進行系統(tǒng)優(yōu)化，得到了2.3項下的色譜分離條件。如圖1所示，化合物各成分得到了較好的分離，峰形分布較好，各化合物的鑒定過程如下：總離子流色譜圖中的各峰經(jīng)質(zhì)譜掃描后得到相應(yīng)的質(zhì)譜圖，經(jīng)過計算機質(zhì)譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索（質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫：NIST11庫），再結(jié)合保留時間及查閱的相關(guān)文獻資料，確定其成分歸屬。在默認(rèn)的積分設(shè)置下，鮮品八角茴香揮發(fā)油中檢測到19個化學(xué)成分，干品八角茴香揮發(fā)油中檢測到20個化學(xué)成分，推測在干燥的過程中有新的揮發(fā)油生成。結(jié)果見表2，表2中所給出的各種化合物的鑒定結(jié)果，其所對應(yīng)的匹配度均大于85%，相對含量為默認(rèn)積分設(shè)置下的歸一化所得的相應(yīng)的計算結(jié)果。

表2 八角茴香藥材干燥前后化學(xué)成分和相對含量的變化

從實驗的數(shù)據(jù)可以看出，八角茴香干燥前后揮發(fā)油成分以及相對含量都無較明顯的變化，再根據(jù)相似度評價軟件進行分析，發(fā)現(xiàn)鮮品八角茴香和干品八角茴香峰值相差也不大，從物質(zhì)含量數(shù)據(jù)結(jié)果顯示，干品中含有1個獨有成分，經(jīng)鑒定為2-甲氧基苯甲酸甲酯，含量為0.07%。鮮品中雙戊烯含量為5.69%，干品含量為2.71%；5，6，7，8-四氫喹喔啉鮮品含量為0.68%，干品含量為0.45%；茴香腦鮮品含量為87.77%，干品含量為92.37%；3-蒈烯鮮品含量為0.86%，干品含量為0.48%；四者占揮發(fā)油總量的95.00%和96.01%。干品中雙戊烯要比鮮品中含量低2.98%，干品中茴香腦要比鮮品中高4.60%，可能在干燥的過程中發(fā)生了某些化學(xué)或物理變化，使得雙戊烯含量減少，同時茴香腦的含量有所增加。推測在酶促反應(yīng)下，鮮品中部分雙戊烯轉(zhuǎn)化為干品中的茴香腦，綜合整體測量數(shù)據(jù)來看八角茴香中其他組分在測定前后的含量無明顯差異。

圖1 八角茴香藥材干燥前后揮發(fā)油成分G C-M S總離子流圖

3 討論

通過對干燥前后八角茴香揮發(fā)油氣質(zhì)譜的特有屬性進行分析處理，八角茴香干燥前后其揮發(fā)油化學(xué)成分及含量均發(fā)生顯著變由。試驗結(jié)果對比表明鮮品中揮發(fā)油的含量要高于干品含量。在本實驗中，由于八角茴香揮發(fā)油的主要成分茴香腦，雙戊烯等具有易揮發(fā)性，且對溫度比較敏感，屬于熱敏性物質(zhì)，考慮到加熱干燥過程可能會導(dǎo)致易揮發(fā)的成分大量揮發(fā)，最終造成揮發(fā)油總含量的降低，因此在實驗過程中選用陰干、涼干等干燥方法。此外，本實驗還模擬產(chǎn)地加工的初步處理方法，保證新鮮藥材在不發(fā)生霉變的狀態(tài)下，使得干燥前后八角茴香中揮發(fā)油中有一些成分在含量上存在差異。以便進行干燥前后該所得實驗數(shù)據(jù)的對比處理。

通過GS-MS分析結(jié)果，結(jié)合文獻參考［12］，揮發(fā)油鑒定的成份為19個，而干品中成分為20個，干品中有1個獨有成分為2-甲氧基苯甲酸甲酯，2-甲氧基苯甲酸甲酯的含量為0.07%。此外，干品中主要藥效成分茴香腦要比鮮品中高4.60%，干品中雙戊烯要比鮮品中低2.98%，推測在酶促反應(yīng)下，鮮品中部分雙戊烯轉(zhuǎn)化為干品中的茴香腦，從而使得兩者成分發(fā)生較大變化。關(guān)于該轉(zhuǎn)變過程的發(fā)生是否和干燥時的溫度成正相關(guān)或成其他相關(guān)關(guān)系，有待進一步的研究進行證明。另外，本文所涉及的樣品數(shù)量雖然較少，但仍然具有一定的代表性和參考價值，對八角茴香中揮發(fā)油的合理開發(fā)利用具有一定的指導(dǎo)作用。

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