高效液相色譜法檢測注射用頭孢呋辛鈉含量

茍建亞

摘 要：本文采用高效液相色譜法測定了注射用頭孢呋辛鈉中頭孢呋辛的含量，固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動(dòng)相為醋酸鹽緩沖液-乙腈（85：15），檢測波長為273nm，頭孢呋辛在0.04～0.14mg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。頭孢呋辛的平均回收率為99.3%。本方法是一種簡便、準(zhǔn)確、安全的測定注射用頭孢呋辛鈉含量的方法。

關(guān)鍵詞：頭孢呋辛鈉；含量；測定

頭孢呋辛鈉為一種半合成第二代頭孢菌素類抗生素[1]，藥物別稱為：西力欣、頭孢羥芐四唑甲酸酯、達(dá)力新Zinacef、呋肟頭孢菌素、頭孢呋肟酯、頭孢呋肟、頭孢氨呋肟鈉等。因其對革蘭氏陰性菌的？內(nèi)酰胺酶相當(dāng)穩(wěn)定，有穿透血腦屏障等特點(diǎn)，臨床上廣泛應(yīng)用于敏感菌引起的呼吸道、泌尿系統(tǒng)、皮膚、軟組織、骨關(guān)節(jié)及女性生殖器等組織器官的感染，對敗血癥、腦膜炎也有效[2-4]。頭孢呋辛鈉的測定方法主要有微生物法、旋光法、紫外分光光度法、近紅外光譜法和高效液相色譜法等[5]。本文采用高效液相色譜法對注射用頭孢呋辛鈉進(jìn)行了含量測定。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

分析天平 METTLER TOLEDO XP205；pH計(jì) METTLER TOLEDO FE20；電熱恒溫水浴鍋 天津泰斯特 DK-98-IIA；液相色譜儀Agilent 1260；檢測器 Agilent 1260；色譜柱 依利特hypersil ODS C18 （4.6*250*5u ）。

1.2 試藥

色譜乙腈（TEDIA）、醋酸鈉AR（天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司）、冰醋酸AR（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）。

2 含量測定

2.1 色譜條件：色譜柱為依利特hypersil ODS C18色譜柱（4.6*250*5u）；流動(dòng)相為醋酸鹽緩沖液（取醋酸鈉0.68g，冰醋酸5.5ml加水稀釋成1000ml，用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至3.4）-乙腈（85：15）；檢測波長為273nm；流速0.7mL·min-1；柱溫：25℃。

2.2 對照品溶液的制備

取頭孢呋辛對照品約11mg，精密稱定，置100mL容量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液（每1mL溶液中含約0.1mg），取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

2.3 供試品溶液的制備

取注射用頭孢呋辛鈉約11mg，精密稱定，置100mL容量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液（每1mL溶液中含約0.1mg），取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

2.4 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

取頭孢呋辛對照品約27mg，置50mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度（每1mL溶液中含約0.5mg），搖勻，至60℃水浴放置30分鐘，放冷，使頭孢呋辛部分轉(zhuǎn)變?yōu)槿グ奔柞ｎ^孢呋辛，作為系統(tǒng)適用性溶液，取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，頭孢呋辛峰和去氨甲酰頭孢呋辛峰的分離度應(yīng)大于3.0，頭孢呋辛峰與相對保留時(shí)間約為1.1處雜質(zhì)峰間的分離度應(yīng)符合要求[6]，即大于1.5。取對照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄色譜圖，頭孢呋辛峰面積積分值的RSD應(yīng)不大于2.0%。

2.5 專屬性

供試品溶液出峰時(shí)間與對照品溶液出峰時(shí)間一致，專屬性強(qiáng)。

2.6 精密度試驗(yàn)

取對照品溶液20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。重復(fù)測定6次，對照品峰面積積分值的RSD為0.33%。結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)精密度良好。

2.7 重現(xiàn)性試驗(yàn)

分別稱取同批注射用頭孢呋辛鈉6份，測定含量并計(jì)算含量的RSD為0.77%。結(jié)果表明，此含量測定方法的重現(xiàn)性良好。

2.8 檢測限與定量限

將對照品溶液用水逐級稀釋，每次取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。信噪比為10：1時(shí)的進(jìn)樣量為定量限，為10ng，信噪比為3：1時(shí)的進(jìn)樣量為檢測限，為3ng。

2.9 線性與范圍

制備濃度為0.04、0.06、0.08、0.10、0.12、0.14mg·mL-1的對照品溶液，分別取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以進(jìn)樣濃度（mg）為橫坐標(biāo)，峰面積積分值A(chǔ)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程，y=164124x+33.65，r=0.9999。試驗(yàn)表明，頭孢呋辛對照品在0.04～0.14mg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.10 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品溶液，存放于4℃樣品室中，分別在0，2，4，6h取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，供試品溶液頭孢呋辛峰面積的RSD為0.57%。結(jié)果表明在4℃條件下頭孢呋辛至少在6h內(nèi)穩(wěn)定。

2.11 回收率試驗(yàn)

采用加樣回收試驗(yàn)，稱取3份供試品約22mg，精密稱定，按照供試品溶液制備方法制備，分別準(zhǔn)確移取3份3ml供試品溶液至9個(gè)10ml容量瓶中，再稱取對照品約22mg，精密稱定，按照對照品溶液制備方法制備，分別移取1ml、2ml、3ml對照品溶液至已加入供試品溶液的容量瓶中，制備成3個(gè)供試品高、中、低濃度共9份樣品，測定含量，計(jì)算回收率。9次測定的平均回收率為99.3%，RSD為0.59%，回收率良好。

2.12 樣品含量測定

依照外標(biāo)法測定三批注射用頭孢呋辛鈉的含量，以頭孢呋辛計(jì)分別為標(biāo)示量的100.1%、100.2%、99.9%。

3 討論

本方法采用高效液相色譜法測定注射用頭孢呋辛鈉的含量，操作簡便、準(zhǔn)確度高，能夠很好的控制藥品質(zhì)量，保證了臨床用藥的安全。

參考文獻(xiàn)

[1]高碩，楊錯(cuò)，王紅.頭孢呋辛鈉藥動(dòng)學(xué)的研究進(jìn)展[J].中國藥房，2012（1）.

[2]鄧寶軍，林詩貴，李蜀巍，等.頭孢呋辛的臨床抗感染研究進(jìn)展[J].中國臨床藥理學(xué)雜志，2000（5）.

[3]白林，王曉蕾，王璐，等.頭孢呋辛鈉與5種常用輸液的配伍穩(wěn)定性研究[J].中國藥師，2008（3）.

[4]注射用頭孢呋辛鈉說明書.

[5]謝守霞，董淳.旋光法測定注射用頭孢呋辛鈉的含量[J].華西藥學(xué)雜志，2003（3）.

[6]袁琦，郭新社，楊浩.HPLC法測定注射用頭孢呋辛鈉的含量[J].河南大學(xué)學(xué)報(bào)，2012（4）.

[7]中國藥典：二部[S].國家藥典委員會(huì).中國醫(yī)藥科技出版社，2015.