高效液相色譜法測定小兒瀉痢停片中醋酸潑尼松的含量

齊心 趙崇羚

摘 要：目的：探究小兒服用類型瀉痢停片當(dāng)醋酸潑尼松物物質(zhì)含量。方法：以高效液相類型色譜分析法為主要分析方式，選擇Hypersil色譜柱，在配置流動(dòng)相的階段選擇比例為58比42的甲醇和水的混合溶液，并將流動(dòng)相的實(shí)際流速控制為每分鐘一毫升，設(shè)定檢測波的長度數(shù)值為240納米，將氫化可物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物。結(jié)果：在探究實(shí)驗(yàn)中，醋酸潑尼松以及內(nèi)標(biāo)物的實(shí)際保留時(shí)間長度分別為11.7分鐘和7.8分鐘，在80毫克每毫升到240毫克每毫升的濃度區(qū)間內(nèi)，醋酸潑尼松物質(zhì)與內(nèi)標(biāo)物的具體峰面積比例和相應(yīng)的濃度比例表現(xiàn)出了線性關(guān)系，醋酸潑尼松物質(zhì)的具體平均回收率數(shù)值達(dá)到百分之99.93。結(jié)論：在對(duì)小兒服用類瀉痢停片當(dāng)中醋酸潑尼松物質(zhì)含量進(jìn)行分析的時(shí)候，采用高效液相類型色譜分析方式在分析精準(zhǔn)性、操作便捷性以及分析靈敏度方面表現(xiàn)良好，可采用這一技術(shù)對(duì)藥劑質(zhì)量進(jìn)行控制。

關(guān)鍵詞：液相色譜；瀉痢停片；含量；測定；醋酸潑尼松；醫(yī)學(xué)

小兒服用類瀉痢停片常被歸類一種抗菌類型的藥物制劑，這種藥物在應(yīng)對(duì)痢疾桿菌導(dǎo)致的急慢性類型痢疾、各種腸道病菌導(dǎo)致小兒胃腸炎癥等疾病。這種藥物當(dāng)中有效治療藥物為磺胺甲惡唑以及醋酸潑尼松等物質(zhì)。在當(dāng)前部分地區(qū)的藥品生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)當(dāng)中僅僅對(duì)小兒服用類瀉痢停片中的磺胺甲惡唑物質(zhì)的含量檢測方法進(jìn)行了記述，但是卻未對(duì)藥物當(dāng)中醋酸潑尼松物質(zhì)的含量測定方式進(jìn)行規(guī)定。但就小兒服用類瀉痢停片而言，由于其對(duì)應(yīng)的群體為小兒，所以要求藥品中醋酸潑尼松物質(zhì)的含量標(biāo)準(zhǔn)為每片1.5毫克，為了在保證小兒服用類瀉痢停片在發(fā)揮作用的同時(shí)避免藥物對(duì)小兒的身體健康造成影響，因此也就要建立藥物中醋酸潑尼松物質(zhì)含量的測定方法，使小兒服用類瀉痢停片的質(zhì)量能得到控制。

1 儀器設(shè)備以及處方

1.1 儀器設(shè)備以及試藥

液相色譜儀系統(tǒng)（日本島津）。色譜甲醇，水為重蒸水；醋酸潑尼松、磺胺甲惡唑、甲氧芐氨嘧啶、氫化可的松對(duì)照品（中國藥品生物制品檢定所）。

1.2 小兒服用類型瀉痢停片藥物處方

磺胺甲惡唑100g，甲氧芐氨嘧啶20g，醋酸潑尼松1.5g，顛茄浸膏2g，制成1000片。

2 方法以及結(jié)果

2.1 檢測中波長數(shù)值選擇

在這一環(huán)節(jié)中，以精密稱量的方式稱取適量的醋酸潑尼松物質(zhì)，用這些物質(zhì)制成含量為每毫升120微克的甲醇溶液，并將甲醇當(dāng)做空白，在波長數(shù)值為200納米到400納米區(qū)間內(nèi)進(jìn)行掃描，發(fā)現(xiàn)醋酸潑尼松物質(zhì)240納米波長數(shù)值上吸收率最大，最終決定將240納米設(shè)定為檢測階段所用的波長數(shù)值。

2.2 色譜條件以及適應(yīng)實(shí)驗(yàn)

以高效液相類型色譜分析法為主要分析方式，選擇Hypersil色譜柱，在配置流動(dòng)相的階段選擇比例為58比42的甲醇和水的混合溶液，并將流動(dòng)相的實(shí)際流速控制為每分鐘一毫升，設(shè)定檢測波的長度數(shù)值為240納米，將氫化可物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物。監(jiān)護(hù)柱體的溫度調(diào)整到25攝氏度到26攝氏度之間，以20微升為單位定量進(jìn)樣。

2.3 對(duì)照物質(zhì)溶液制備

采用精確稱量的方式稱取醋酸潑尼松對(duì)照物40毫克，將這些物質(zhì)放置到100毫升規(guī)格的量瓶當(dāng)中，在搖勻后留做后續(xù)使用。制備的內(nèi)標(biāo)物物質(zhì)的時(shí)候，精密量取氫化可的松物質(zhì)30毫克，將這些物質(zhì)放到規(guī)格為100毫升的量瓶當(dāng)中，向其中加入甲醇溶液使其溶解，并使用甲醇溶液將其稀釋到刻度線留做后續(xù)使用。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別精密量取醋酸潑尼松對(duì)照品溶液5毫升，6毫升，7.5毫升，10毫升，12.5毫升，14毫升，15毫升，放置到25毫升的容量瓶當(dāng)中。各加內(nèi)標(biāo)溶液10毫升，分別用甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別進(jìn)樣，記錄峰面積，以質(zhì)量濃度（X）為橫坐標(biāo)，醋酸潑尼松峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比（Y）為縱坐標(biāo)。

2.5 加樣回收率試驗(yàn)

精密稱取同一批號(hào)已知含量的小兒瀉痢停片粉末適量（約相當(dāng)于醋酸潑尼松，20毫克），置100毫升量瓶中，精密加入醋酸潑尼松對(duì)照品20毫克，加甲醇使溶解，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過。各加內(nèi)標(biāo)溶液10毫升，加甲醇稀釋至刻度。

2.6 樣品的測定

取小兒瀉痢停片60片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于醋酸潑尼松40毫克），置100毫升量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，過濾，取續(xù)濾液10毫升置25毫升量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液10毫升，加甲醇稀釋至刻度。

2.7 結(jié)果

在探究實(shí)驗(yàn)中，醋酸潑尼松以及內(nèi)標(biāo)物的實(shí)際保留時(shí)間長度分別為11.7分鐘和7.8分鐘，在80毫克每毫升到240毫克每毫升的濃度區(qū)間內(nèi)，醋酸潑尼松物質(zhì)與內(nèi)標(biāo)物的具體峰面積比例和相應(yīng)的濃度比例表現(xiàn)出了線性關(guān)系，醋酸潑尼松物質(zhì)的具體平均回收率數(shù)值達(dá)到百分之99.93。

3 討論

以紫外掃描光譜結(jié)果圖可以發(fā)現(xiàn)，醋酸潑尼松物質(zhì)在240納米波長數(shù)值條件下有最大吸收峰顯現(xiàn)，所以降240納米設(shè)備定為檢測中的使用波長。

但從醋酸潑尼松物質(zhì)的特點(diǎn)來看，醋酸潑尼松為白色或幾乎白色的結(jié)晶性粉末；無臭，味苦。不溶于水，微溶于乙醇、醋酸乙酯，略溶于丙酮，易溶于氯仿。主要用于各種急性嚴(yán)重細(xì)菌感染，嚴(yán)重過敏性疾病，膠原性疾病。如果藥物中某些物質(zhì)含量超標(biāo)或者服用方式不科學(xué)，則會(huì)產(chǎn)生不良副作用交叉過敏反應(yīng)。對(duì)一種磺胺藥呈現(xiàn)過敏的患者對(duì)其他磺胺藥也可能過敏。肝臟損害?？砂l(fā)生黃疸、肝功能減退，嚴(yán)重者可發(fā)生急性肝壞死，故有肝功能損害患者宜避免應(yīng)用。腎臟損害?？砂l(fā)生結(jié)晶尿、血尿和管型尿，故服用小兒瀉痢停片期間應(yīng)多飲水，保持高尿流量，如應(yīng)用小兒瀉痢停片療程長、劑量大時(shí)，除多飲水外，宜同服碳酸氫鈉，以防止此不良反應(yīng)。失水、休克和老年患者應(yīng)用小兒瀉痢停片易致腎損害，應(yīng)慎用或避免應(yīng)用小兒瀉痢停片。腎功能減退患者不宜應(yīng)用小兒瀉痢停片。對(duì)呋塞米、砜類、噻嗪類利尿藥、磺脲類、碳酸酐酶抑制藥呈現(xiàn)過敏的患者，對(duì)磺胺藥亦可過敏。胃與十二指腸潰瘍及心力衰竭患者慎用。

在文中實(shí)驗(yàn)條件下，醋酸潑尼松峰的色譜行為與其他成分的差異較大，在7分鐘前，磺胺甲口惡唑峰、甲氧芐氨嘧啶峰與溶劑峰相繼出峰完畢7分鐘后，醋酸潑尼松峰與內(nèi)標(biāo)峰才出現(xiàn)。理論板數(shù)以醋酸潑尼松峰計(jì)算為1500，醋酸與各組分峰的分離度不少于2.8。

由于該藥品主要的受眾是小兒，因此要更加重視藥品中各物質(zhì)含量的管理，讓藥物中各物質(zhì)的含量都被控制在合理的范圍內(nèi)，在保證藥物治療效果的同時(shí)避免藥物中某些物質(zhì)含量過高而造成患者身體出現(xiàn)副作用。

在對(duì)小兒服用類瀉痢停片當(dāng)中醋酸潑尼松物質(zhì)含量進(jìn)行分析的時(shí)候，采用高效液相類型色譜分析方式在分析精準(zhǔn)性、操作便捷性以及分析靈敏度方面表現(xiàn)良好，可采用這一技術(shù)對(duì)藥劑質(zhì)量進(jìn)行控制。

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