COX-2與VEGF在皮膚鱗狀細(xì)胞癌（SCC）及基底細(xì)胞癌（BCC）中的表達(dá)分析

王霞

（井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)部病理教研室，江西 吉安 343000）

皮膚鱗狀細(xì)胞癌（squamous cell carcinoma of the skin，SCC）及基底細(xì)胞癌（basal cell carcinoma，BCC）為臨床最常見的皮膚腫瘤疾病，分別發(fā)生于表皮或者附屬角質(zhì)細(xì)胞以及基底細(xì)胞或者皮膚附件，其發(fā)病早期無(wú)特異性癥狀表現(xiàn)，易被醫(yī)師或患者忽視，導(dǎo)致其失去最佳治療時(shí)機(jī)[1]。探尋疾病早期診斷的有效方法對(duì)提升治療效果、改善患者預(yù)后具有重要意義。有關(guān)研究指出，與其他類型腫瘤相似，皮膚腫瘤亦涉及血管生成、腫瘤細(xì)胞惡性增殖、細(xì)胞黏附與侵襲、轉(zhuǎn)移等一系列復(fù)雜過(guò)程[2]。而VEGF為重要的血管生成促進(jìn)因子之一，可加速血管生成，提高血管通透性，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞惡性增殖與轉(zhuǎn)移；COX-2為環(huán)氧化酶（COX）主要亞型之一，其不僅可經(jīng)由各種信號(hào)途徑對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖及凋亡產(chǎn)生影響，且可加速腫瘤血管生成，促進(jìn)腫瘤發(fā)生、發(fā)展[3]。本研究選取因其他疾病手術(shù)切除附帶正常皮膚切除者36例及SCC、BCC患者各48例為研究對(duì)象，旨在進(jìn)一步分析COX-2、VEGF在SCC、BCC中的表達(dá)及其臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2013年8月～2017年9月本院SCC與BCC患者分為SCC與BCC組，各48例。另選擇36例同期因其他疾病手術(shù)切除附帶正常皮膚切除者為對(duì)照組。SCC組男29例，女19例，年齡27～82歲，平均（63.80±7.25）歲；Broders病理分級(jí)：Ⅲ級(jí)7例，Ⅱ級(jí)9例，Ⅰ級(jí)32例。BCC組男27例，女21例，年齡29～81歲，平均（63.21±7.96）歲。對(duì)照組男20例，女16例，年齡26～79歲，平均（62.74±8.02）歲。3組性別、年齡等臨床資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性，且本研究經(jīng)醫(yī)院倫理協(xié)會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn) ①納入標(biāo)準(zhǔn)：SCC與BCC患者均經(jīng)手術(shù)病理檢查證實(shí)，入組前未進(jìn)行光動(dòng)力治療、放療及其他特殊治療；對(duì)照組均為因其他疾病手術(shù)切除附帶正常皮膚切除者，無(wú)惡性腫瘤疾??；3組均知曉本研究并簽訂知情同意書。②排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重感染、心腦血管疾病以及肝腎功能嚴(yán)重障礙者；依從性差，無(wú)法配合研究者。

1.3 方法 以免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)皮膚組織內(nèi)COX-2、VEGF表達(dá)，具體操作為：取皮膚組織以甲醛溶液（濃度：10%）固定，石蠟包埋，切片，進(jìn)行抗原修復(fù)，而后于室溫下冷卻，以磷酸鹽緩沖液進(jìn)行沖洗，一抗于室溫下孵育，以磷酸鹽緩沖液洗滌，二抗于37℃環(huán)境下孵育，再以磷酸鹽緩沖液洗滌，采用二氨基聯(lián)苯胺溶液顯色后進(jìn)行沖洗、復(fù)染、分化、脫水、透明、封片；應(yīng)用磷酸鹽緩沖液替代一抗為陰性對(duì)照。

1.4 結(jié)果判定 當(dāng)COX-2、VEGF的染色結(jié)果顯示細(xì)胞質(zhì)（漿）中出現(xiàn)棕黃色或者棕褐色顆粒則判定為陽(yáng)性，以半定量計(jì)分法進(jìn)行判定，于高倍鏡下選取10個(gè)左右視野，分別觀察500個(gè)細(xì)胞，若切片內(nèi)陽(yáng)性細(xì)胞≥61%為3分，處于31%～60%為2分，處于5%～30%為1分，不足5%為0分；染色強(qiáng)度：棕黃色或者棕褐色為3分，棕色為2分，淡黃色為1分，幾乎無(wú)染色為0分，免疫反應(yīng)總得分是陽(yáng)性細(xì)胞百分比和免疫染色強(qiáng)度得分的乘積[4]。

1.5 觀察指標(biāo) ①3組皮膚組織標(biāo)本內(nèi)COX-2、VEGF陽(yáng)性表達(dá)率；②SCC組與BCC組皮膚組織中COX-2、VEGF表達(dá)的相關(guān)性。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 通過(guò)SPSS 19.0分析，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示、卡方檢驗(yàn)，應(yīng)用Spearman相關(guān)分析探究SCC組與BCC組皮膚組織中COX-2、VEGF的表達(dá)的相關(guān)性，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組皮膚組織標(biāo)本內(nèi)COX-2、VEGF陽(yáng)性表達(dá)率 SCC與BCC組皮膚組織中COX-2、VEGF陽(yáng)性表達(dá)率均高于對(duì)照組，且SCC組皮膚組織中上述指標(biāo)陽(yáng)性表達(dá)率高于BCC組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 3組皮膚組織標(biāo)本內(nèi)COX-2、VEGF陽(yáng)性表達(dá)率比較[n（%）]

2.2 SCC組與BCC組皮膚組織中COX-2、VEGF表達(dá)的相關(guān)性SCC組與BCC組皮膚組織中COX-2、VEGF的表達(dá)呈明顯正相關(guān)（r=0.442，P=0.021），見表2。

表2 SCC組與BCC組皮膚組織中COX-2、VEGF表達(dá)的相關(guān)性

3 討論

SCC與BCC均為皮膚科常見疾病，其中SCC常由黏膜白斑、角化病與其他癌前病變轉(zhuǎn)化形成，生長(zhǎng)較為迅速，BCC病因與多個(gè)基因突變損傷密切相關(guān)，病程較緩慢，由于兩者發(fā)病早期癥狀不典型，待疾病確診時(shí)患者病情已產(chǎn)生惡化，治療難度增加，預(yù)后差[5]。故探究SCC與BCC有效的早期診斷方法成為臨床研究熱點(diǎn)。

有關(guān)研究指出，腫瘤新生血管生成為腫瘤生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)，而VEGF為一種血管生成促進(jìn)因子，具有加速血管生成及提高血管通透性的作用，在判定腫瘤新生血管生成狀況中具有較高特異性[6-7]。賈志凌等[8]研究指出，VEGF于食管癌、胃癌、肺癌、乳腺癌等多種腫瘤疾病中均呈高表達(dá)狀態(tài)，且表達(dá)水平和腫瘤生物學(xué)行為具有密切關(guān)系。本研究結(jié)果顯示，SCC與BCC組皮膚組織中VEGF陽(yáng)性表達(dá)率高于對(duì)照組。亦說(shuō)明VEGF表達(dá)水平與SCC、BCC發(fā)生進(jìn)展密切相關(guān)。且本研究結(jié)果中，SCC組皮膚組織中VEGF陽(yáng)性表達(dá)率高于BCC組。分析其原因與SCC、BCC的生物學(xué)行為及產(chǎn)生新生血管的能力存在差異，BCC中形成新生血管數(shù)量低于SCC，致使其腫瘤細(xì)胞所獲營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足，惡性增殖少等有關(guān)。

環(huán)氧化酶（COX）為誘導(dǎo)型前列腺素內(nèi)源性過(guò)氧化物酶之一，主要存在于哺乳動(dòng)物的細(xì)胞微粒體內(nèi)，包括COX-2、COX-1兩種亞型，其中COX-1屬結(jié)構(gòu)性酶，多存在于正常組織中，病理狀態(tài)下水平幾乎不變；COX-2屬誘導(dǎo)型酶，正常生理狀態(tài)下表達(dá)極低，而當(dāng)受到癌基因產(chǎn)物、炎性因子等刺激后，其可于細(xì)胞中被快速誘導(dǎo)產(chǎn)生[9]。有關(guān)研究指出，COX-2不僅為炎癥反應(yīng)啟動(dòng)的關(guān)鍵酶，且在多種腫瘤中均有不同程度表達(dá)，同時(shí)可經(jīng)由加速腫瘤新生血管生成、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖并阻止其凋亡等機(jī)制參與腫瘤發(fā)生、進(jìn)展中[10]。本研究結(jié)果顯示，SCC與BCC組皮膚組織中COX-2陽(yáng)性表達(dá)率均高于對(duì)照組，且SCC組皮膚組織中COX-2陽(yáng)性表達(dá)率高于BCC組。說(shuō)明COX-2表達(dá)水平與SCC、BCC發(fā)生進(jìn)展具有密切關(guān)系，且其表達(dá)水平可用于鑒別SCC、BCC。另由本研究結(jié)果可知，SCC組與BCC組皮膚組織中COX-2、VEGF的表達(dá)呈明顯正相關(guān)。提示在SCC與BCC中COX-2、VEGF的表達(dá)可相互促進(jìn)，一同加速腫瘤發(fā)生及進(jìn)展。

綜上所述，SCC與BCC患者中COX-2、VEGF均呈異常表達(dá)狀態(tài)，且兩者有相互促進(jìn)作用，對(duì)其表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)有助于為疾病早期診斷提供可靠依據(jù)。

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