2011—2017年安徽省市縣級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果分析

周迎春，何長(zhǎng)生，王 軍，王 倩，劉 華，沈 艷，王 維，占松鶴

（安徽省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，安徽合肥 230091）

實(shí)驗(yàn)室間能力比對(duì)作為一項(xiàng)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室工作能力的方法，一直在全球范圍內(nèi)被廣泛應(yīng)用，我國(guó)衛(wèi)生系統(tǒng)、質(zhì)檢系統(tǒng)也將此方法作為評(píng)價(jià)、管理、提高實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)水平的重要手段[1-2]。實(shí)驗(yàn)室間的比對(duì)可以確定檢測(cè)能力，識(shí)別實(shí)驗(yàn)室間差異和實(shí)驗(yàn)室存在的問題，有益于提高技術(shù)人員的專業(yè)水平，進(jìn)而提高實(shí)驗(yàn)室的綜合檢測(cè)能力[3-4]。開展獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)，是評(píng)價(jià)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)水平的重要手段，也是加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的有效方法[4-5]。

按照農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求，安徽省自2011—2017年連續(xù)組織開展了市、縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作，通過試驗(yàn)比對(duì)分析和查找不足，進(jìn)一步完善實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系，提升安徽省市縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力和技術(shù)水平。現(xiàn)將安徽省主要做法和存在問題總結(jié)如下，以便交流提高。

1 比對(duì)范圍

安徽省2011—2017年連續(xù)組織市、縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室（省級(jí)考核合格）開展檢測(cè)能力比對(duì)工作。

2 比對(duì)方法

2.1 比對(duì)項(xiàng)目設(shè)置

每年設(shè)置3～5個(gè)比對(duì)項(xiàng)目，根據(jù)市、縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力不同，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室參加3個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)能力比對(duì)（表1）。

表1 2011—2017年檢測(cè)能力比對(duì)總體結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

2.2 比對(duì)試劑、樣品的準(zhǔn)備與發(fā)放

比對(duì)試劑和樣品均由安徽省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心按照“四個(gè)統(tǒng)一”原則準(zhǔn)備和發(fā)放，即統(tǒng)一制備發(fā)放比對(duì)樣品，統(tǒng)一訂購(gòu)檢測(cè)試劑，統(tǒng)一檢測(cè)方法，統(tǒng)一時(shí)間領(lǐng)取樣品和試劑。每個(gè)比對(duì)項(xiàng)目設(shè)置5～6個(gè)樣品。定量或半定量樣品設(shè)置了不同的滴度，定性樣品設(shè)置了陰性、陽(yáng)性和弱陽(yáng)性樣品，其中的1～2個(gè)樣品還設(shè)置了重復(fù)樣品。

2.3 比對(duì)檢測(cè)方法

所有比對(duì)項(xiàng)目的檢測(cè)方法均采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或參考實(shí)驗(yàn)室推薦方法（表2）。

表2 檢測(cè)能力比對(duì)項(xiàng)目采用的標(biāo)準(zhǔn)（方法）

2.4 評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)

2.4.1 禽流感病毒抗體檢測(cè)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn) 檢測(cè)值與參考值的偏差不超過1個(gè)滴度，判為結(jié)果準(zhǔn)確。

2.4.2 豬瘟病毒抗體檢測(cè)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn) 檢測(cè)值與參考值的偏差不超過1個(gè)滴度，判為結(jié)果準(zhǔn)確。

2.4.3 口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白抗體檢測(cè) 強(qiáng)陽(yáng)性和弱陽(yáng)性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陽(yáng)性”，陰性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

2.4.4 布魯氏菌抗體檢測(cè)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn) 強(qiáng)陽(yáng)性和弱陽(yáng)性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陽(yáng)性”，陰性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

2.4.5 豬繁殖與呼吸綜合征病毒核酸檢測(cè)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn) 強(qiáng)陽(yáng)性和弱陽(yáng)性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陽(yáng)性”，陰性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

2.4.6 A/O型口蹄疫病毒抗體檢測(cè)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn) 檢測(cè)值與參考值的偏差不超過一個(gè)滴度，判為準(zhǔn)確。

2.4.7 H7亞型禽流感病毒核酸檢測(cè)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn) 強(qiáng)陽(yáng)性和弱陽(yáng)性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陽(yáng)性”，陰性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

2.5 比對(duì)結(jié)果的報(bào)送

參加比對(duì)的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室在收到樣品之日起4日內(nèi)完成檢測(cè)，并將檢測(cè)結(jié)果傳真或掃描件發(fā)至安徽省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心檢測(cè)科。出具正式的檢測(cè)報(bào)告，送至安徽省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心檢測(cè)科。

3 結(jié)果分析

3.1 2011—2017年總體比對(duì)情況

2011—2017年安徽省共開展了30個(gè)項(xiàng)目的比對(duì)，樣品檢測(cè)結(jié)果總體正確率為92.32%，每年的樣品檢測(cè)結(jié)果正確率從87.46%到97.22%不等；實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)總體準(zhǔn)確率為81.12%，每年實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)準(zhǔn)確率從65.81%到91.67%不等；參加比對(duì)的實(shí)驗(yàn)室數(shù)量逐年增加，2017年達(dá)到74個(gè)，占全省獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的79.57%（表1、圖1）。

圖1 2011—2017年全省獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室比對(duì)情況

3.2 不同檢測(cè)方法的比對(duì)結(jié)果

比對(duì)項(xiàng)目分為血清學(xué)檢測(cè)和病原學(xué)檢測(cè)。其中血清學(xué)檢測(cè)比對(duì)了4種檢測(cè)方法，分別是HI、IHA、ELISA、試管凝集。病原學(xué)檢測(cè)比對(duì)了RTPCR方法或熒光RT-PCR方法。這5種檢測(cè)方法是檢測(cè)常見動(dòng)物疫病常用的檢測(cè)方法，也是國(guó)家動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)計(jì)劃里要求使用的檢測(cè)方法。從表3可知，ELISA方法檢測(cè)準(zhǔn)確率最高，試管凝集次之，IHA最低。

表3 2011—2017年不同檢測(cè)方法的檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

4 討論

4.1 比對(duì)工作總體呈上升趨勢(shì)

由圖1可知，2011—2017年比對(duì)結(jié)果準(zhǔn)確率總體趨勢(shì)穩(wěn)步上升，樣品檢測(cè)準(zhǔn)確率從87.46%提高到93.92%，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)準(zhǔn)確率從65.81%提高到82.43%。2011—2017年參加檢測(cè)比對(duì)的實(shí)驗(yàn)室數(shù)量從39個(gè)增至74個(gè)，占全省獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的79.57%。由此可看出，獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的重要性日益引起各級(jí)獸醫(yī)主管部門的重視，實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力和水平逐年上升。

4.2 HI檢測(cè)準(zhǔn)確率年度不均衡

HI是常規(guī)試驗(yàn)項(xiàng)目，雖然準(zhǔn)確率總體呈上升趨勢(shì)，但2015—2017年實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)準(zhǔn)確率分別為95.31%、 72.46%、78.38%，比對(duì)結(jié)果變幅較大。究其原因，比對(duì)試劑、樣品、方法沒有改變，唯有參與比對(duì)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)人員發(fā)生了變化。部分實(shí)驗(yàn)室為充實(shí)技術(shù)力量而招聘了新人，因這些人員未經(jīng)過系統(tǒng)培訓(xùn)，檢測(cè)能力和水平較差，導(dǎo)致2016年的HI項(xiàng)目的比對(duì)結(jié)果準(zhǔn)確率有較大下降；經(jīng)培訓(xùn)之后，新進(jìn)人員的檢測(cè)能力和水平得以提升，因此2017的準(zhǔn)確率有所提高。

4.3 病原學(xué)和血清學(xué)檢測(cè)能力不均衡

RT-PCR的靈敏性、準(zhǔn)確性、特異性較高，能在較短時(shí)間內(nèi)檢出病原體，目前安徽省主要是省級(jí)、市級(jí)以及國(guó)家級(jí)疫情測(cè)報(bào)站具備這種檢測(cè)能力。從比對(duì)結(jié)果看，安徽省市級(jí)和國(guó)家級(jí)疫情測(cè)報(bào)站的病原學(xué)檢測(cè)能力仍是薄弱環(huán)節(jié)，平均檢測(cè)準(zhǔn)確率僅為60.61%，2017年的準(zhǔn)確率僅為31.82%。分析其原因，主要是受基層編制待遇等的影響，專職、固定的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)人員較少，技術(shù)培訓(xùn)不能及時(shí)開展，常規(guī)HI、ELISA試驗(yàn)開展較多，病原學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目幾乎不開展，因此此項(xiàng)檢測(cè)能力和水平較弱。目前主要依靠省級(jí)實(shí)驗(yàn)室承擔(dān)此項(xiàng)檢測(cè)任務(wù)。

5 建議

安徽省獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作已連續(xù)開展7年。從比對(duì)結(jié)果看，市縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的總體檢測(cè)能力和技術(shù)水平在逐年提高，這不僅反映出比對(duì)工作所取得的成效，也說明安徽省農(nóng)委在加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系建設(shè)方面的措施是有效的。但部分實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力和水平還有待提高，尤其市級(jí)實(shí)驗(yàn)室的病原學(xué)檢測(cè)能力。為進(jìn)一步發(fā)揮獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室在動(dòng)物疫病防控方面的重要作用，建議做好以下工作。

一是加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室人員培訓(xùn)工作，特別是新進(jìn)人員培訓(xùn)，培訓(xùn)應(yīng)包括檢測(cè)技術(shù)、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定與分析、生物安全和實(shí)驗(yàn)室管理等，嚴(yán)格持證上崗，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性[6]。檢測(cè)技術(shù)方面尤其要加強(qiáng)比對(duì)薄弱項(xiàng)目的培訓(xùn)，如RT-PCR。

二是加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和硬件投入。檢測(cè)結(jié)果與人員、設(shè)備、環(huán)境、樣品、方法、試劑等密切相關(guān)，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)是在相同方法、相同試劑、相同樣品的前提下進(jìn)行比對(duì)，比對(duì)的是不同環(huán)境和設(shè)備條件下檢測(cè)人員的操作能力。只有把實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和設(shè)備控制在滿足試驗(yàn)的條件下，人員經(jīng)過培訓(xùn)，才能達(dá)到滿意的效果[6]。

三是加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室人員管理?；鶎荧F醫(yī)主管部門要充分認(rèn)識(shí)到獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室在動(dòng)物疫病防控中的重要技術(shù)支撐作用，要通過政策傾斜、職稱評(píng)定等鼓勵(lì)措施，培養(yǎng)一批穩(wěn)定、專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)人員，充分發(fā)揮獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)職能。

[1] 劉來福，張鶴曉，張利峰，等. 家禽禽流感病毒AGID抗體定性檢測(cè)及H5、H9亞型HI抗體定量檢測(cè)你呢里驗(yàn)證結(jié)果分析[J].現(xiàn)代測(cè)量與實(shí)驗(yàn)室管理，2004（2）：29-32.

[2] 董昕欣，劉偉，邴國(guó)霞，等. 2015年全國(guó)省級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果分析[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，2015，51（11）：103-105.

[3] 陳昕，黃振華，朱瑩.微生物實(shí)驗(yàn)室室間比對(duì)的結(jié)果分析[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2008，18（3）：554-555.

[4] 吳赟竑，孫冰冰，吳雪軍，等. 2016年浙江省獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果分析[J].浙江畜牧獸醫(yī)，2017（1）：1-4.

[5] 王文，張繼紅，蘭玲，等. 2010年新疆獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)試驗(yàn)的探討與建議[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫，2011，28（9）：19-21.

[6] 孫圣福，陳偉，陳靜，等. 2011—2014年山東省獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果分析[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫，2016，33（3）：52-54.