維生素ADE注射液的研究與應(yīng)用

張玉彥，楊玉東,馮 巖，唐 姝，殷 斌，狄良嬌*

(1.寧夏智弘生物科技有限公司，寧夏銀川 750021； 2.寧夏農(nóng)墾賀蘭山奶業(yè)有限公司，寧夏銀川 750024；3.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，江蘇南京 210095)

維生素雖然不是構(gòu)成組織或器官的原料，也不是能量物質(zhì)，但是在機體內(nèi)物質(zhì)代謝、能量轉(zhuǎn)變和維持生理功能等方面都具有舉足輕重的作用[1-2]。維生素ADE注射液是由維生素ADE共同組成的脂溶性維生素制劑，可有效地預(yù)防及治療家畜因維生素ADE缺乏癥而引起的營養(yǎng)代謝性疾病，如夜盲癥、佝僂病、骨軟癥等。

1 維生素ADE生理功能

維生素A作為組成視紫紅質(zhì)素的物質(zhì)、骨骼發(fā)育所必需的營養(yǎng)物、機體皮膚和黏膜上皮細(xì)胞正常結(jié)構(gòu)與功能的維持物質(zhì)[3-5]，缺乏后會引起視覺、生長發(fā)育、呼吸、消化和繁殖力的紊亂[6-7]。維生素D3主要調(diào)節(jié)體內(nèi)鈣磷代謝，對維持鈣磷平衡、骨骼發(fā)育、肌肉神經(jīng)傳導(dǎo)效應(yīng)以及細(xì)胞活動信息傳遞等生命過程具有重要意義[8-9]，缺乏后會出現(xiàn)佝僂病、骨質(zhì)軟化等癥狀[10-12]。維生素E具有保護脂質(zhì)中的多不飽和脂肪酸免受氧化損傷、促進垂體促性腺激素分泌、穩(wěn)定細(xì)胞膜和改善脂質(zhì)代謝等作用，缺乏后會出現(xiàn)免疫力下降、代謝失常、溶血、機體衰老、流產(chǎn)、胚胎發(fā)育異常和死胎等癥狀。

2 維生素ADE的代謝情況

維生素A作為生命不可或缺的重要營養(yǎng)物質(zhì)，在畜禽養(yǎng)殖中將其作為必需品補充。維生素A只存在于動物體內(nèi)，而在植物中以維生素A原的形式存在[13]。維生素A進入體內(nèi)后，首先在小腸與膽汁酸的共同作用下被乳化，再被腸黏膜吸收，約90%儲存于肝臟中，一旦機體需要維生素A時，則水解為游離的視黃醇及其結(jié)合蛋白，并且視黃醇結(jié)合蛋白與其他的血漿蛋白質(zhì)結(jié)合后，形成三元復(fù)合物，隨著血液轉(zhuǎn)運到達(dá)靶器官，代謝產(chǎn)物經(jīng)糞便和尿排出體外。

維生素D3主要存在于動物性食物中，魚肝油中含量極為豐富。通常情況下，維生素D3的獲得除了食物，還可以通過日光的照射來合成維生素D3[14]。大劑量維生素D3經(jīng)口服或注射給藥，進入體內(nèi)后儲存在動物的肝臟和腎臟；小劑量維生素D3進入體內(nèi)后主要貯藏在脂肪。維生素D3在肝臟中被25-羥化酶氧化成25-OH-D3，通過血液進入腎臟后在1-羥化酶作用下，被再次氧化成具有生物學(xué)活性的1,25-(OH)2-D3，最后進入血液循環(huán)，并被轉(zhuǎn)運至有關(guān)組織發(fā)揮作用，代謝后主要通過糞便以原形及其代謝產(chǎn)物的形式排出體外。

維生素E是一種維持動物正常生理機能所必不可少的有機化合物，動植物體內(nèi)均存在。維生素E進入體內(nèi)后，與乳糜微粒相結(jié)合，隨著淋巴和血液轉(zhuǎn)移至機體的各個組織中，其中主要儲存在腎上腺、垂體和睪丸組織。維生素E與脂形成微膠囊粒后，通過被動擴散的方式進入腸道黏膜，在膽固醇、膽汁和磷脂等相互作用下形成乳糜微粒，并以胞吐的方式進入淋巴系統(tǒng)而被十二指腸吸收，在肝內(nèi)代謝，經(jīng)膽汁到腸道，最終通過糞便排出體外。

維生素A、維生素D、維生素E在機體內(nèi)的吸收代謝具有相互作用[15]，維生素A與維生素D在自然界中常常共存，兩者聯(lián)合具有拮抗作用，口服維生素A過量可干擾維生素D的正常吸收，使血鈣和無機磷水平呈下降趨勢，所以要控制維生素A與維生素D的用量至合適比例；維生素A與維生素E合用時，維生素E可促進機體對維生素A的吸收、利用和肝臟貯存，療效增強，具有協(xié)同作用，且可克服單用時的不足。

3 維生素ADE注射液研發(fā)概況

迄今為止，維生素ADE注射液已在加拿大、美國及澳大利亞相繼審批上市，主要用于預(yù)防及治療維生素ADE的缺乏癥，具體審批情況見表1。本公司研制的維生素ADE注射液采用乳化包被技術(shù)，提高了產(chǎn)品在體內(nèi)的分散、吸收和生物利用度；加入增溶劑、抗氧劑和防腐劑，提高了產(chǎn)品的穩(wěn)定性；采用簡單、切實可行的生產(chǎn)工藝，有助于工業(yè)化生產(chǎn)，保證產(chǎn)品質(zhì)量；采用HPLC檢測方法，有助于快速、穩(wěn)定地分析產(chǎn)品的含量。

表1 維生素ADE注射液國外審批情況

4 維生素ADE臨床應(yīng)用

4.1 補充缺乏

美國Stuart Products公司在母豬分娩前2周給予5 mL Vital E-Repro，檢測母豬在分娩前和分娩時25-OH-D3的血藥濃度，同時檢測分娩的仔豬在剛出生時和斷奶時血清中25-OH-D3的血藥濃度，發(fā)現(xiàn)分娩前2周，對照組和給藥組血清中25-OH-D3的血藥濃度基本一致；分娩時，給藥組的值比對照組高36%；新生的仔豬，給藥組的值比對照組高54%；斷奶的仔豬，給藥組的值比對照組高23%。

美國北達(dá)科他州立大學(xué)(North Dakota State University)研究Vital E-A+D臨床試驗，檢測犢牛在給藥0 h和48 h，血清中維生素E的血藥濃度；并觀察犢牛給藥后體重變化。結(jié)果為對照組與給藥組的犢牛在給藥0 h，血清中維生素E的血藥濃度一樣；給藥48 h后，與對照組相比，給藥組的犢牛血清中維生素E的血藥濃度顯著升高，增加值為202%；且給藥23 d后，與對照組相比，給藥組犢牛的平均體重增加2.27 kg，具有一定差異(P<0.10)。

4.2 提高免疫力

給斷奶前小母牛補充維生素ADE，顯著降低了腸炎、肺炎等疾病的發(fā)病率和致死率[16]。體外試驗表明，維生素A的補充不僅可以促進幼齡動物利用臍帶血合成IgM，而且可以增加成年動物通過外周血單核細(xì)胞合成IgG的量。

張樂穎等[17]研究了維生素AD3E針劑對圍產(chǎn)期奶牛乳蛋白表達(dá)的影響，發(fā)現(xiàn)維生素AD3E針劑可以增加初乳中IgG和白蛋白等表達(dá)，飼喂初乳后犢牛與產(chǎn)后奶牛免疫力的增強，促進了犢牛腸道的正常發(fā)育和母牛乳房功能的正常發(fā)揮。

4.3 提高繁殖力

應(yīng)用中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧所研制的維生素ADE注射液治療卵巢靜止的經(jīng)產(chǎn)母牛，肌內(nèi)注射維生素ADE后7 d～10 d出現(xiàn)發(fā)情癥狀，直腸檢查時卵巢變大且卵泡呈發(fā)育狀態(tài)，從而判定母牛的治療有效率為84.5%，受胎率達(dá)77.3%；同時，育成母牛注射維生素ADE后14 d～20 d表現(xiàn)發(fā)情癥狀，與對照組相比，注射維生素ADE后母牛發(fā)情提前了80 d～120 d[18]。

曾滔等[19]研究維生素ADE在肉牛超數(shù)排卵中的應(yīng)用，不同牛體在同一飼養(yǎng)環(huán)境下，進行試驗處理，試驗組牛的黃體明顯形狀好，可用胚胎中，A級胚胎明顯多于對照組；同一牛體在臨近的2次超排處理中，日糧配方不變，采取不同的方式，試驗組牛黃體形狀明顯好于對照，可用胚胎中，A級胚胎明顯多于對照組。試驗表明，維生素ADE對家畜的生殖功能起著很重要的作用，尤其是在早期胚胎的形成和發(fā)育階段。

黃占欣[20]利用激素和維生素治療奶牛不孕癥的研究，選適時輸精兩個情期以上未受胎又無明顯生殖系統(tǒng)異常，營養(yǎng)狀態(tài)良好的適齡母牛198頭，分成5組(4個試驗組，1個對照組)，試驗結(jié)果表明，采用清宮又補充維生素AD和E及孕激素的試驗1組的母牛，其受胎率最高，比對照組提高了49.5%。

李雪等[21]研究維生素ADE注射液聯(lián)合GnRH和PGF 2α誘導(dǎo)奶牛同期發(fā)情，為了取得良好的同期發(fā)情效果以提高奶牛受孕率，采用維生素ADE注射液聯(lián)合GnRH和PGF 2α對奶牛進行同期發(fā)情處理，維生素ADE注射液聯(lián)合GnRH和PGF 2α作用后奶牛的同期發(fā)情率和受胎率明顯提高(P<0.05)，且在試驗進行到第3天，維生素ADE注射液聯(lián)合GnRH和PGF 2α 試驗組就有7頭奶牛開始發(fā)情。結(jié)果提示，維生素ADE注射液對奶牛同期發(fā)情有很好的誘導(dǎo)作用。

4.4 降低胎衣不下及產(chǎn)后癱瘓

引起母牛胎衣不下的主要病因之一是缺乏維生素ADE。給奶牛注射維生素ADE后，胎衣不下的發(fā)生率明顯降低。觀察維生素ADE注射液對奶牛胎衣滯留的作用，產(chǎn)前30 d注射維生素ADE，發(fā)現(xiàn)注射維生素ADE后，胎衣不下發(fā)生率僅為7.27%，而未注射維生素ADE胎衣不下的發(fā)生率高達(dá)29.09%，說明維生素ADE明顯改善奶牛產(chǎn)后胎衣滯留的癥狀。妊娠前母牛給予維生素A、維生素D、維生素E和硒，也明顯降低胎衣不下的發(fā)生率。在奶牛產(chǎn)前1個月，每周給奶牛注射維生素ADE 1次，可顯著降低胎衣不下的發(fā)生率，而且還可縮短分娩后再次妊娠的時間。

郭全勝等[22]提出預(yù)產(chǎn)期前2周的孕牛給予維生素AD注射液和維生素E注射液各10 mL，產(chǎn)后胎衣滯留的發(fā)病率為6%，與對照組23.8%相比，有顯著的變化，建議孕牛在產(chǎn)前2周注射維生素AD和維生素E，對預(yù)防奶牛的胎衣滯留具有良好的效果。蘆鑫[23]觀察了產(chǎn)后牛肌肉注射維生素AD和維生素E的效果觀察，試驗組(產(chǎn)后1 h內(nèi)肌肉注射維生素AD和維生素E)在12 h內(nèi)胎衣不下的發(fā)病率僅為2%，而對照組的發(fā)病率為14.6%；并且試驗組比對照組的胎衣自然脫落時間提前4 h；試驗組沒有出現(xiàn)產(chǎn)后癱瘓，而對照組產(chǎn)后癱瘓率為9.0%。因此，分娩后1 h內(nèi)肌內(nèi)注射維生素AD和維生素E，不僅可以修復(fù)生殖器官在分娩時造成的損傷，恢復(fù)和維持正常的生殖機能，而且影響鈣磷的吸收代謝，維持血鈣濃度，保證了鈣內(nèi)環(huán)境的快速啟動。

5 展望

維生素ADE注射液及其相關(guān)制劑在補充缺乏癥、提高免疫力、提高繁殖力、降低胎衣不下及產(chǎn)后癱瘓方面都具有明顯的臨床效果，意味著維生素ADE注射液具有廣泛的市場需求，可以降低家畜養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟損失，為養(yǎng)殖戶帶來更大的收益。目前，臨床上治療家畜維生素ADE缺乏癥，通過調(diào)整飼料配方或注射維生素AD注射液與維生素E注射液配合使用，這兩種治療手段具有使用不便和刺激性大的特點。維生素ADE注射液屬于脂溶性維生素制劑，可一次性補充家畜3種維生素的缺乏，降低刺激性；同時，注射給藥的方式劑量可控，起效快，沒有首關(guān)效應(yīng)。維生素ADE注射液的生產(chǎn)質(zhì)量便于控制管理，經(jīng)濟有效，因此具有臨床推廣價值，應(yīng)用前景極為廣闊，值得進一步研發(fā)。

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