龍灣區(qū)部分市售食品中黃曲霉毒素污染狀況的調(diào)查

□ 王曉紅 金慧慧 姜 嫻 溫州市龍灣區(qū)疾病預(yù)防控制中心

黃曲霉毒素（AF）是黃曲霉和寄生曲霉的代謝產(chǎn)物[1]，有強(qiáng)烈的毒性和致癌性，是重要的食品污染物之一，其中以花生、玉米和大米污染最為嚴(yán)重[2]，對(duì)人和動(dòng)物均具有極強(qiáng)的毒性和致癌性，是誘發(fā)肝癌的重要物質(zhì)之一。為了解龍灣區(qū)市售大米、玉米、花生及其制品中黃曲霉毒素污染狀況，探討其對(duì)人和動(dòng)物存在的潛在危害，2014—2016年對(duì)本轄區(qū)市售大米、玉米、花生及其制品中常見的4種黃曲霉毒素污染狀況進(jìn)行監(jiān)測調(diào)查。

1 材料和方法

1.1 樣品來源

2014—2016年在龍灣區(qū)內(nèi)各農(nóng)貿(mào)市場或超市等采集谷物及其制品（大米、玉米粉、面粉）、豆類及其制品（黃豆、黑豆、紅豆）、堅(jiān)果及其籽類（花生、芝麻、瓜子）、油脂及其制品（玉米油、大豆油、花生油）、調(diào)味醬（花生醬、豆瓣醬、辣椒醬）等448份樣品。

1.2 試劑

1.2.1 試劑

免疫親和柱（Afla StarTMR，Romer Labs公司）；甲醇為色譜純（莫克公司）；水為超純水；碘為分析純。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)品

黃 曲 霉 毒 素 B1、B2、G1、G2混標(biāo)（46300-U SUPELCO，含量為98%～99%，黃曲霉毒素B1和G1分別為 0.932 μg/mL 和 0.876 μg/mL，黃曲霉毒素B2和G2分別為0.309 mg/L和0.265 mg/L，規(guī)格為每支1 mL）。

1.2.3 儀器

Waters I Class型高效液相色譜儀（熒光檢測器2475）；AL204電子天平（d=0.1 mg）；德國IKA公司的T25型均質(zhì)器。

1.3 方法

1.3.1 樣品的處理和測定

采取免疫親和層析法，該方法特異性強(qiáng)、凈化效果出色、操作簡單[3]。稱取5 g左右研磨均勻大米樣品于50mL離心管中，加入10 mL（甲醇+水）（60+40）均質(zhì)提取3 min。另取一干凈50mL離心管，里面加入10 mL（甲醇+水）（60+40）沖洗刀頭，均質(zhì)3 min，將此均質(zhì)液倒入初次均質(zhì)的離心管內(nèi)，合并均質(zhì)液，玻璃纖維濾紙過濾。取10 mL濾液與20 mL純水混合，備用。將50 mL注射器筒與免疫親和柱頂部相連，將親和柱放置于固相萃取裝置上，移取15 mL上述濾液稀釋液到注射器筒內(nèi)，放空親和柱柱內(nèi)液體，調(diào)節(jié)下滴速度，使液體以1～2滴/秒速度過柱，待樣液流完后，加入20 mL純水，以穩(wěn)定流速洗滌免疫親和柱，待柱內(nèi)液體被抽干后，在親和柱下面放置10 mL刻度試管，然后用1.5 mL甲醇分三次洗脫黃曲霉毒素，將洗脫液全部收集于10 mL刻度試管中，整個(gè)洗脫時(shí)間不小于60 s。在50 ℃下氮吹吹至0.5 mL以下，用甲醇定容至0.5 mL，再用純水定容至1 mL，漩渦30 s溶解殘留物，0.22濾膜過濾后放高效液相色譜上待測。高效液相色譜法結(jié)合熒光檢測器檢測黃曲霉毒素是國際上比較流行的方法[4]。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線配制

以樣品黃曲霉毒素含量為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，標(biāo)準(zhǔn)曲線配制見表1。標(biāo)準(zhǔn)曲線std1點(diǎn)色譜圖見圖1。

表1 黃曲霉毒素標(biāo)準(zhǔn)曲線配制表（單位：ng/mL）

1.4 判斷標(biāo)準(zhǔn)

食品中4種黃曲霉毒素的檢出與判斷標(biāo)準(zhǔn)按照GB 2761-2017《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中真菌毒素限量》執(zhí)行。本方法的方法檢出限為：B1為0.4 ng/mL，B2為 0.2 ng/mL，G1為0.4 ng/mL，G2為0.2 ng/mL。

2 結(jié)果

2.1 黃曲霉毒素污染情況

圖1 標(biāo)準(zhǔn)曲線std1點(diǎn)色譜圖

在采集的488份樣品中，調(diào)味醬這一大類污染最嚴(yán)重，調(diào)味醬中黃曲霉毒素總陽性率達(dá)54.5%，B1、B2、G1、G2陽性率分別為52.3%、17.0%、23.9%、14.8%。堅(jiān)果及其籽類80份，總陽性率達(dá)46.2%，B1、B2、G1、G2陽性率分別為46.2%、16.2%、18.8%、16.2%。谷物及其制品80份，黃曲霉毒素總陽性率達(dá)10.8%，B1、B2、G1、G2陽性率分別為10.0%、5.8%、2.5%、2.5%。豆類及其制品、油脂及其制品這兩大類樣品均未檢出黃曲霉毒素。四種黃曲霉毒素污染最嚴(yán)重的是AFB1，總陽性率高達(dá)21.2%，污染情況為B1＞G1＞B2＞G2。

2.2 黃曲霉毒素聯(lián)合污染情況

監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，在花生醬、玉米粉、花生中存在黃曲霉毒素聯(lián)合污染情況，所有樣品黃曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2中有2種及以上聯(lián)合污染率為65.8%，其中花生醬聯(lián)合污染率為71.4%，玉米粉聯(lián)合污染率為42.8%，花生聯(lián)合污染率為63.0%。

3 討論

黃曲霉毒素常由黃曲霉等霉菌在霉變的食品中產(chǎn)生，如糧食、豆類、堅(jiān)果等，其中又以花生和玉米較易感染[5]。通過監(jiān)測調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在采集的448份樣品中，調(diào)味醬這一大類黃曲霉毒素污染率最高，總陽性率達(dá)54.5%，有較大的潛在危害。通過查看采樣記錄發(fā)現(xiàn)，這主要是由調(diào)味醬中的花生醬污染率極高引起的。堅(jiān)果及其籽類80份樣品，總陽性率達(dá)46.2%，主要污染物為花生。谷物及其制品80份黃曲霉毒素總陽性率達(dá)10.8%，代表污染物為玉米粉?；ㄉu、花生、玉米粉又存在四種黃曲霉毒素的聯(lián)合污染，四種黃曲霉毒素中污染最嚴(yán)重的是AFB1，AFB1是4種黃曲霉毒素中毒性和致癌性最強(qiáng)的一種，眾多檢測報(bào)告中均顯示AFB1存在檢出率高、含量超標(biāo)現(xiàn)象[6-7]。因此，本次調(diào)查分析結(jié)果表明，龍灣區(qū)市售食品存在黃曲霉毒素污染隱患，相關(guān)部門要加強(qiáng)監(jiān)控，以保證消費(fèi)者的身體健康。黃曲霉毒素監(jiān)測范圍可以進(jìn)一步縮小，可以把食品種類具體縮小到花生、花生醬、玉米粉等陽性率比較高的食品上，從而實(shí)現(xiàn)更有效、更有針對(duì)性監(jiān)測及防控。

[1]黃湘東,龍朝陽,梁春穗,等.廣東省市售大米、花生及其制品中黃曲霉毒素污染水平調(diào)查[J].華南預(yù)防醫(yī)學(xué),2007,33(3):62.

[2]王丹,馬淑清.濰坊市售部分食品中黃曲霉毒素污染情況分析[J].中國城鄉(xiāng)企業(yè)衛(wèi)生,2015(2):71.

[3]李少暉,任丹丹,謝云峰,等.食品中黃曲霉毒素檢測方法研究進(jìn)展食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào)[J].2015,6(4):1108-1109.

[4]胡一晨,萬麗,范成杰,等.免疫親和柱凈化HPLC柱后光化學(xué)衍生化法檢測中藥及染菌中藥制劑中間體的黃曲霉毒素[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2012,18(10):117.

[5]王雯,李崗,魏云瀟,等.我國食品中黃曲霉毒素污染現(xiàn)狀的研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2015,43(18):308.

[6]林曉華,叢黎達(dá).廣州市超級(jí)市場散裝直接入口食品衛(wèi)生狀況調(diào)查分析[J].中國公共衛(wèi)生管理,2003,19(2):163-165.

[7]呂 金 標(biāo),林 平.黃 巖 區(qū)1998～2005年食飲具監(jiān)測結(jié)果分析[J].中國衛(wèi)生監(jiān)督,2006,13(3):201-204.