GPC-GC-MS對(duì)食用植物油中多種農(nóng)藥殘留的同步測(cè)定分析

□ 陳國(guó)泉 戴學(xué)明 浙江鼎龍科技有限公司檢測(cè)中心

我國(guó)制定的《食品中農(nóng)藥殘留最大限量》明確規(guī)定了菜籽油、花生油、棉籽油、食用植物油等多種農(nóng)藥的殘留限量。當(dāng)前市場(chǎng)上銷售的農(nóng)藥種類繁多，逐漸從單一型發(fā)展為復(fù)合型、混合型，因此，實(shí)施不同類型農(nóng)藥殘留的同步檢測(cè)方法至關(guān)重要。GC-MS（氣相色譜-質(zhì)譜）具有準(zhǔn)確的定性和較高的分離性能，被廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥殘留分析中。由于農(nóng)藥殘留對(duì)植物油質(zhì)量安全有著直接影響，所以要認(rèn)真檢測(cè)食用植物油中的農(nóng)藥殘留，去除其中高含量的油脂，以免污染檢測(cè)儀器或干擾基體。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑與儀器

二氯甲烷、正己烷（農(nóng)殘級(jí)，美國(guó)Fisher公司）。本次實(shí)驗(yàn)中采用的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液都是由農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所研制，用量為100 mg/L，包括氰戊菊酯、氟氰戊菊酯、異狄氏劑、毒死蜱、氟樂(lè)靈、甲氰菊酯、丁草胺、艾氏劑、五氯硝基苯、伏殺磷、異丙威、氟胺氰菊酯、速克靈、抗蚜威、克螨特、六氯苯、氯菊酯、七氯、倍硫磷、三氟氯氰菊酯、甲基對(duì)硫磷、聯(lián)苯菊酯、對(duì)硫磷、狄氏劑、仲丁威、環(huán)氯七氯、殺螟松、α硫丹、β硫丹。利用可調(diào)式的微量移液器，分別提取上述29種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液；提取到10 mL的容量瓶后，利用正己烷進(jìn)行稀釋，在此基礎(chǔ)上定容至刻度，配置成混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。值得注意的是，該儲(chǔ)備液中的各種農(nóng)藥質(zhì)量濃度都是1.0 mg/L，臨時(shí)采用混合標(biāo)準(zhǔn)工作液時(shí)要用正己烷進(jìn)行逐級(jí)稀釋。

本次實(shí)驗(yàn)中采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，并配置有NIST02質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)、Agilent氣相色譜/質(zhì)譜工作站（D.01.02），同時(shí)，采用美國(guó)安捷倫公司研制的HP-5MS毛細(xì)管柱（30.0 m×250 μm×0.25 μm） 以 及 DB-35MS毛細(xì)管柱（30.0 m×250 μm×0.25 μm）。實(shí)驗(yàn)中使用凝膠滲透色譜儀，并配備有示差檢測(cè)器、5 mL定量環(huán)、內(nèi)填S-X3凝膠填料、700 mm×25 mm玻璃柱，還有MS2迷你振蕩器、DSY-Ⅱ型自動(dòng)快速濃縮儀。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣品處理

樣品的分離凈化可選用凝膠滲透色譜，約稱取2 g的樣品，可精確至0.01 g，并利用正己烷進(jìn)行稀釋，在此基礎(chǔ)上定容至10 mL。同時(shí)，利用MS2迷你振蕩器混勻，用自動(dòng)進(jìn)樣器提取5 mL的樣品溶液進(jìn)行稀釋，并將其注入GPC中。洗脫溶劑可選擇體積為1:1的二氯甲烷、正己烷，通過(guò)5 mL/min的流速進(jìn)行洗脫，利用自動(dòng)快速濃縮儀吹干所收集的120～210 mL流出液，然后利用1.0 mL正己烷溶解殘?jiān)?.0 μL以供GC-MS測(cè)定。

1.2.2 質(zhì)譜與色譜條件

DB-35MS熔融石英毛細(xì)管柱的膜厚為 30 m×250 μm×0.25 μm；進(jìn)樣量為1.0 μL，不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣口溫度為250 ℃；載氣為高純He：1 mL/min（恒流）；程序升溫過(guò)程中的初始溫度為60 ℃，保持2 min，以10 ℃/min上升至180 ℃，保持5 min，以20 ℃/min上升至200 ℃，保持5 min，以5 ℃/min上升至280 ℃，保持10 min。另外，四級(jí)桿、GC-MS接口、離子源的溫度分別為150 ℃、280 ℃、230 ℃；質(zhì)量掃描范圍為50～550 u；電子倍增器電壓為1 765 V；電離方式：EI電子能量70 eV；采集方式：采用離子監(jiān)測(cè)（SM）的方式，每種化合物的SM離子可選擇大豐度的碎片離子，其中定量離子為豐度最大的子離子。峰面積通過(guò)外標(biāo)法定量，其中氟胺氰菊酯、氯菊酯、氰戊菊酯、氟氰戊菊酯、克螨特的峰面積以各異構(gòu)體的峰面積之和為依據(jù)進(jìn)行計(jì)算。

2 結(jié)果與討論

第一，選擇毛細(xì)管柱和溫度。本次實(shí)驗(yàn)中分別采用HP-5MS毛細(xì)管 柱（30.0 m×250 μm×0.25μm） 和DB-35MS毛細(xì)管柱（30.0 m×250 μm×0.25 μm），根據(jù)要求用色譜分離29種農(nóng)藥。相關(guān)結(jié)果表明，29種農(nóng)藥基本能在DB-35MS毛細(xì)管柱上進(jìn)行有效分離；在HP-5MS毛細(xì)管柱上，甲氰菊酯和聯(lián)苯菊酯存在部分重疊，艾氏劑和殺螟松存在部分重疊，甲基對(duì)硫磷、倍硫磷、毒死蜱和對(duì)硫磷重疊，因此，該實(shí)驗(yàn)宜選用DB-35MS毛細(xì)管柱實(shí)施色譜分離。此外，由于氨基甲酸酯類和有機(jī)磷農(nóng)藥存在較低的汽化溫度，加上氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)熱不夠穩(wěn)定，所以汽化室的溫度可選定為250 ℃。色譜柱離子流圖見(jiàn)圖1。

第二，確定GPC凈化條件。按照要求來(lái)處理食用植物油，收集300 mL的餾出液，每份為10 mL，在此基礎(chǔ)上利用氮?dú)獯蹈桑^察可發(fā)現(xiàn)洗脫的油脂處于60～120 mL；同樣處理29種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí)，利用氮?dú)獯蹈桑缓笥? mL的正己烷進(jìn)行定容，并用GC-MS予以測(cè)定，其中29種農(nóng)藥的洗脫體積保持在110～200 mL。在分離樣品的脂質(zhì)機(jī)體中采用GPC時(shí)，選擇的切割時(shí)間點(diǎn)要綜合考慮待測(cè)組分的分離情況、被滲透排除的基體部分，因此，應(yīng)該綜合分析待測(cè)農(nóng)藥和油脂的洗脫情況，然后選擇收集的120～210 mL餾出液，為GC-MS的測(cè)定提供依據(jù)。

圖1 色譜柱離子流圖

第三，方法的檢出限、精密度、回收率、校準(zhǔn)曲線。農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度分別為 0.01、0.04、0.08、0.2、0.5、1.0 mg/L，結(jié)合吸收峰面積與質(zhì)量濃度的曲線來(lái)獲得各農(nóng)藥的線性方程，結(jié)果表明0.01～1.0 mg/L具有良好的線性關(guān)系。將0.1、0.2、0.4 mL混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液分別加在2 g的菜籽油中，對(duì)各農(nóng)藥的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差及平均回收率進(jìn)行計(jì)算。29種農(nóng)藥的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.35%～10.2%，平均回收率為82%～119%；根據(jù)3倍信噪比設(shè)定儀器檢出限，定量下限的設(shè)定以10倍信噪比為依據(jù)，各農(nóng)藥的定量下限、方法檢出限分別為0.4～33.0 μg/kg、0.1 ～ 10.0 μg/kg。

第四，樣品測(cè)定。測(cè)定5種食用植物油中的農(nóng)藥殘留，其中茶油中含有0.027 mg/kg的氰戊菊酯、0.028 mg/kg的抗蚜威；大豆油中含有0.019 mg/kg的三氟氯氰菊酯、0.014 mg/kg的克螨特、0.027 mg/kg的抗蚜威；菜籽油中含有0.028 mg/kg的克螨特、0.016 mg/kg的仲丁威；花生調(diào)和油中含有0.095 mg/kg的甲氰菊酯；食用調(diào)和油中含有0.03 mg/kg的β硫丹。

3 結(jié)束語(yǔ)

綜上所述，本文利用GPC-GC-MS同步測(cè)定食用植物油中的多種農(nóng)藥殘留，借助凝膠滲透色譜儀來(lái)自動(dòng)化收集、上樣、洗脫流出液，最大限度簡(jiǎn)化樣品前處理的過(guò)程。根據(jù)分析結(jié)果可知，29種農(nóng)藥的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差低于10.2%，平均回收率為82%～119%，方法檢出限處于0.1～10.0 μg/kg。這說(shuō)明該方法能同步分析食用植物油中的多種類型農(nóng)藥殘留，分析過(guò)程相對(duì)較快，對(duì)農(nóng)藥殘留分析有著積極的作用。

[1]黃惠玲,張薇君,丁慧瑛.氣相色譜-質(zhì)譜大體積進(jìn)樣法測(cè)定蔬菜、水果中17種農(nóng)藥殘留[J].分析測(cè)試學(xué)報(bào),2006(4).