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    文冠果落果黃酮成分分析及抑菌性評(píng)價(jià)

    2018-05-23 01:27:11楊小慧石光波拜曉彬趙晨煊李博生
    食品科學(xué) 2018年10期
    關(guān)鍵詞:文冠果落果蘆丁

    楊小慧,石光波,拜曉彬,趙晨煊,李博生*

    (1.北京林業(yè)大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,北京 100083;2.北京林業(yè)大學(xué) 林業(yè)食品加工與安全北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100083;3.北京林業(yè)大學(xué)螺旋藻研究所,北京 100083)

    文冠果(Xanthoceras sorbifolia Bunge)又名文燈果、山木瓜、僧燈木道等[1],隸屬無患子科文冠果屬,廣泛分布在內(nèi)蒙、陜西、山西等14 個(gè)省市[2],是我國(guó)特有的珍稀木本油料作物[3]。因其籽油[4]、種仁[5-6]、種皮[7-8]、果殼[9-12]中含有大量生物活性物質(zhì)而被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥和食品行業(yè)[13]。然而文冠果在實(shí)際生產(chǎn)中存在很多問題,其中之一便是幼果期落果嚴(yán)重,座果率很低,有“千花一果”之稱[14];丁明秀等[15]曾發(fā)現(xiàn)赤峰地區(qū)翁牛特旗文冠果的落果率高達(dá)72.3%,可見文冠果落果資源十分豐富,然而目前有關(guān)文冠果落果成分和功效的科學(xué)研究報(bào)道極少。

    黃酮類物質(zhì)具有降血糖、抑菌[16]、抗腫瘤[17]、抗癌[18-19]、抗氧化[20]、調(diào)節(jié)免疫能力及治療糖尿病[21-22]等多種生理功能,目前人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了9 000多種黃酮類物質(zhì)[23],其中研究較多的有槲皮素、山柰酚等[24-26]。目前關(guān)于文冠果黃酮類化合物的研究多局限于其成熟果實(shí)的果殼和種皮,而對(duì)于文冠果落果黃酮的單體成分研究鮮見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用紫外分光光度法檢測(cè)到文冠果落果中含有生物活性物質(zhì)黃酮,應(yīng)用顯色反應(yīng)、傅里葉變換紅外光譜和高效液相色譜相結(jié)合的方法對(duì)文冠果落果中黃酮的單體物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)分析,并比較文冠果落果黃酮對(duì)枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌的抑菌活性。本實(shí)驗(yàn)將為文冠果落果的開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù),推動(dòng)文冠果產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

    1 材料與方法

    1.1 材料、試劑與儀器

    文冠果落果、文冠果中期果實(shí)(生長(zhǎng)期為30 d)、文冠果成熟果實(shí)(生長(zhǎng)期為60 d)由內(nèi)蒙古赤峰市林業(yè)科學(xué)研究院苗圃提供;槲皮苷標(biāo)準(zhǔn)品、蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品上海源葉生物科技有限公司;乙腈、甲醇、甲酸(均為色譜純) 美國(guó)Tedia公司;HPD-400型大孔樹脂北京科百奧生物技術(shù)有限公司;枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) 北京林業(yè)大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室。

    722型分光光度計(jì) 上海舜宇恒平科學(xué)儀器公司;RE-2000A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠;1730型傅里葉變換紅外光譜儀 美國(guó)Perkin-Elmer公司;LC-2010AHT型液相色譜儀 日本島津公司。

    1.2 方法

    1.2.1 文冠果落果及不同發(fā)育階段果實(shí)中黃酮含量的比較

    1.2.1.1 文冠果黃酮提取液制備

    將干燥后的文冠果落果、中期果皮、中期種子和成熟果皮分別粉碎后過60 目篩。按料液比1∶40(g/mL)加入體積分?jǐn)?shù)40%乙醇溶液,70 ℃熱回流4 h,對(duì)文冠果落果和不同發(fā)育階段果實(shí)的黃酮物質(zhì)進(jìn)行浸提,進(jìn)行3 次平行實(shí)驗(yàn)以減小實(shí)驗(yàn)誤差。

    1.2.1.2 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

    精密稱取10 mg蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品,置于100 mL容量瓶中,去離子水定容,配成質(zhì)量濃度為0.1 mg/mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別取0.2、0.6、1.0、1.5、2.0 mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液,加入0.3 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%的亞硝酸鈉溶液,搖勻后靜置6 min。加入0.3 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%的氯化鋁溶液,搖勻后靜置6 min。加入2.0 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)4%的氫氧化鈉溶液,定容至10 mL,搖勻后靜置15 min。在波長(zhǎng)510 nm處測(cè)其吸光度。以蘆丁質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),溶液吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    1.2.1.3 氯化鋁比色法測(cè)黃酮含量

    取2 mL經(jīng)稀釋的文冠果落果黃酮粗液加入0.3 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%的亞硝酸鈉溶液,搖勻后靜置6 min。加入0.3 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%的氯化鋁溶液,搖勻后靜置6 min。加入2.0 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)4%的氫氧化鈉溶液,定容至10 mL,搖勻后靜置15 min。在波長(zhǎng)510 nm處測(cè)其吸光度,并依據(jù)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算黃酮含量。

    1.2.2 文冠果落果黃酮的單體成分分析

    1.2.2.1 文冠果落果黃酮的純化

    準(zhǔn)確稱取文冠果落果粉末300 g放入500 mL的三頸燒瓶中,按料液比1∶50(g/mL)加入體積分?jǐn)?shù)50%乙醇溶液,85 ℃水浴回流提取3 h,將提取液4 000 r/min離心15 min后將濾液在40 ℃條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后烘干,加少量去離子水溶解制備文冠果落果黃酮原液。將預(yù)處理好的HPD-400型大孔樹脂濕法裝柱,層析柱規(guī)格為20 cm×φ10 mm,加入20 mL質(zhì)量濃度為2.64 mg/mL文冠果落果黃酮原液,調(diào)節(jié)pH值為3.0,上樣流速為2 BV/h,以同樣流速用2 BV去離子水清洗除雜,再用4 BV體積分?jǐn)?shù)40%乙醇溶液洗脫,收集洗脫液,在40 ℃條件下蒸發(fā)濃縮干燥,得到純化的文冠果落果黃酮粉末。

    1.2.2.2 文冠果落果黃酮顯色反應(yīng)

    鹽酸-鎂粉顯色反應(yīng):取純化后的文冠果落果黃酮少許用乙醇溶液溶解,取3 mL該溶液于試管中,設(shè)置乙醇溶液空白對(duì)照組,加入少許鎂粉,振蕩搖勻后加入5 滴鹽酸,沸水浴加熱2 min后觀察顏色變化。

    氯化鐵顯色反應(yīng):取純化后的文冠果落果黃酮少許用水溶解后,取3 mL該溶液于試管中,加1 mL質(zhì)量濃度10 mg/mL的氯化鐵-乙醇溶液,觀察顏色變化。

    氫氧化鈉顯色反應(yīng):取純化后的文冠果落果黃酮少許用水溶解后,取3 mL該溶液于試管中,加入2%的氫氧化鈉溶液,觀察顏色變化。

    1.2.2.3 文冠果落果黃酮紅外光譜分析

    取HPD-400型大孔樹脂純化后的文冠果落果黃酮少許烘干,混合一定量的溴化鉀粉末,壓片制成固體,用傅里葉變換紅外光譜儀在掃描范圍為4 000~400 cm-1、分辨率為4 cm-1條件下平行掃描3 次,繪制文冠果落果黃酮傅里葉變換紅外光譜圖,再用上述相同的處理方法繪制標(biāo)準(zhǔn)品蘆丁的紅外光譜圖,進(jìn)行對(duì)比分析鑒定。

    1.2.2.4 文冠果落果黃酮高效液相色譜分析

    色譜條件:色譜柱為C18(250 mm×4.6 mm,5.0 μm);采用乙腈-0.2%甲酸溶液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫,流速1 mL/min,柱溫25 ℃,進(jìn)樣量20 μL,設(shè)置340、365 nm雙波長(zhǎng)同時(shí)檢測(cè)。梯度洗脫程序:0~5 min,5%乙腈;5~15 min,乙腈由5%增加到15%;15~35 min,乙腈由15%增加到18%;35~42 min,乙腈由18%增加到25%;42~45 min,乙腈由25%減少到5%;45~90 min清洗色譜柱。蘆丁、槲皮苷及其他被檢測(cè)物質(zhì)要求達(dá)到與基線分離,最低理論塔板數(shù)為3 000。

    蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:精密稱取5 mg蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品用去離子水配制質(zhì)量濃度為50 μg/mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品溶液,用微量注射器分別準(zhǔn)確吸取5、10、15、20、25 μL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品溶液,加去離子水配制成相同的體積,稀釋成各個(gè)梯度的溶液,注入液相色譜儀。然后分別測(cè)量各個(gè)色譜的峰面積,以峰面積為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)蘆丁質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    標(biāo)準(zhǔn)溶液高效液相色譜分析:分別精密稱取槲皮苷標(biāo)準(zhǔn)品和蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品各5.0 mg,分別置于100 mL容量瓶中,加甲醇溶解配制成0.05 mg/mL的槲皮苷標(biāo)準(zhǔn)溶液和蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液,各精密稱取50 mL槲皮苷標(biāo)準(zhǔn)溶液和50 mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液置于100 mL容量瓶中,混合均勻,過0.45 μm微孔濾膜,在365 nm和340 nm兩組波長(zhǎng)處進(jìn)行高效液相色譜分析。

    樣品溶液高效液相色譜分析:準(zhǔn)確稱取大孔樹脂純化后的文冠果落果黃酮凍干粉10 mg置于10 mL容量瓶中,加甲醇溶解后低頻超聲處理10 min,使黃酮凍干粉完全溶解,冷卻后用甲醇定容,然后用0.45 μm濾膜除雜,在365 nm和340 nm兩組波長(zhǎng)處進(jìn)行高效液相色譜分析,通過測(cè)峰面積從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)于此面積的蘆丁含量。

    1.2.3 文冠果落果黃酮的抑菌能力測(cè)定

    1.2.3.1 培養(yǎng)基的配制

    稱取3 g牛肉膏,10 g蛋白胨,15 g瓊脂,5 g NaCl,1 000 mL水加入到2 L燒杯中,加熱溶解,分裝至三角瓶中密封滅菌備用。

    1.2.3.2 細(xì)菌的活化和菌懸液的制備

    將6 支滅菌試管、培養(yǎng)基置于超凈工作臺(tái)上,待培養(yǎng)基冷卻至50 ℃左右,取部分培養(yǎng)基置于試管中,形成30°的斜面放置,等待培養(yǎng)基凝固。分別挑取3 環(huán)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的保藏菌體,在試管斜面培養(yǎng)基上劃線,每種菌平行接種2 支試管。將接種后的試管置于37 ℃培養(yǎng)箱中連續(xù)培養(yǎng)24 h。依據(jù)徐鳳等[27]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知在波長(zhǎng)600 nm處菌懸液OD值為0.1即為菌體濃度達(dá)到1×106~1×107個(gè)/mL。參照此數(shù)據(jù)進(jìn)行菌懸液濃度的確定。取4 個(gè)裝有等量0.9%生理鹽水的三角瓶滅菌后置于超凈工作臺(tái)上,各挑取3 環(huán)經(jīng)培養(yǎng)活化菌接種溶于上述三角瓶中,振蕩搖勻,于波長(zhǎng)600 nm處測(cè)其OD值,確保OD值達(dá)到0.1。

    1.2.3.3 抑菌實(shí)驗(yàn)

    將無菌培養(yǎng)基加熱融化后置于超凈工作臺(tái)中冷卻到50 ℃左右,按15~20 mL每平皿的量加入培養(yǎng)基制成培養(yǎng)基平板。待培養(yǎng)基平板凝固后編號(hào),冷卻后加入各菌懸液0.1 mL,用涂布棒涂布均勻。用滅菌的不銹鋼打孔器在平板上打孔,孔徑7 mm。將0.1 mL質(zhì)量濃度梯度為0.5、1、5、10、15、20 mg/mL的經(jīng)生理鹽水溶解的文冠果落果黃酮溶液加入各孔,將生理鹽水作為陰性對(duì)照。所有實(shí)驗(yàn)平行重復(fù)3 次,置于37 ℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),24 h后觀察統(tǒng)計(jì)抑菌圈大小,并評(píng)價(jià)其抑菌效果。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 文冠果落果及不同發(fā)育時(shí)期果實(shí)各部分黃酮含量比較

    圖1 文冠果落果及不同發(fā)育時(shí)期果實(shí)各部分黃酮含量比較Fig. 1 Comparison of flavonoids content between X. sorbifolia fruit drop and different fruit parts at different developmental stages

    由圖1可知,文冠果中期種子黃酮含量最高,其次為文冠果落果中黃酮含量為18.4 mg/g,中期果皮與成熟果皮中黃酮含量差異較小,本實(shí)驗(yàn)選用的文冠果落果和不同發(fā)育時(shí)期的果實(shí)在發(fā)育過程中,文冠果落果黃酮含量較高,發(fā)育中期時(shí)黃酮集中積累于種子中,整個(gè)發(fā)育過程中果皮部分黃酮積累量較小。這種現(xiàn)象是否普遍存在于文冠果中需要更多的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行證實(shí)。

    2.2 文冠果落果黃酮的單體成分分析

    2.2.1 文冠果落果黃酮顯色反應(yīng)

    表1 文冠果落果黃酮不同顯色反應(yīng)結(jié)果Table 1 Results of color reaction of flavonoidss from X. sorbifolia fruit drop

    文冠果落果黃酮在鹽酸-鎂粉、氫氧化鈉、氯化鐵三項(xiàng)顯色測(cè)試實(shí)驗(yàn)中均成陽性反應(yīng),見表1。鹽酸-鎂粉顯色反應(yīng)中出現(xiàn)磚紅色沉淀,說明文冠果落果黃酮中可能含有黃酮、黃酮醇、二氫黃酮及二氫黃酮醇中的一種或多種;氫氧化鈉顯色反應(yīng)中出現(xiàn)橙色和黃褐色,說明落果黃酮中含有黃酮醇、二氫黃酮類和查耳酮中的一種或多種,因?yàn)樵趬A性溶液中二氫黃酮類可轉(zhuǎn)變?yōu)椴槎惢衔锸谷芤撼尸F(xiàn)橙色到黃色的顏色變化,黃酮醇類化合物會(huì)使溶液呈現(xiàn)黃色到棕色的顏色變化;氯化鐵顯色反應(yīng)中溶液中出現(xiàn)墨綠色沉淀,說明有氫鍵締合的酚羥基存在,因?yàn)橐话闱闆r下氯化鐵溶液與多數(shù)黃酮類化合物生成黃綠等色的絡(luò)合物僅在有氫鍵締合的酚羥基存在時(shí)才會(huì)出現(xiàn),說明文冠果落果中一定含有黃酮醇。綜合3 種顯色反應(yīng)結(jié)果,可以得出結(jié)論即文冠果落果黃酮中一定含有黃酮醇,可能含有黃酮、查耳酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇中的一種或多種。

    初步推測(cè)文冠果落果中含有芹菜素、黃芩素、野黃芩素、白楊素、漢黃芩素等黃酮單體;蘆丁、木犀草素、槲皮素、高良姜黃素、山柰酚、槲皮苷、漆黃素、楊梅黃酮、鼠李素、異鼠李素等黃酮醇單體;橙皮素、柚皮素、甘草素等二氫黃酮單體。

    2.2.2 文冠果落果黃酮紅外光譜分析

    圖2 文冠果落果黃酮(A)和蘆?。˙)紅外光譜掃描圖Fig. 2 Infrared spectra of flavonoids (A) and rutin (B) from Xanthoceras sorbifolia Bunge fruit drop

    當(dāng)樣品處于頻率連續(xù)變化的紅外線輻照時(shí),其分子吸收了某些頻率的光波,獲得能量后分子產(chǎn)生振動(dòng)或由基態(tài)向激發(fā)態(tài)進(jìn)行能級(jí)躍遷,使得被吸收波段的透射光強(qiáng)度減弱,從而進(jìn)行對(duì)應(yīng)官能團(tuán)分析,紅外光譜掃描結(jié)果見圖2。由圖2A可以看出,在3 000~400 cm-1范圍內(nèi)有多個(gè)明顯的吸收峰值??芍墓诠涔S酮的單體物質(zhì)中含有以下官能團(tuán):C=C(1 607.10、1 514.04、1 536.83、1 443.77 cm-1)、C=O(1 198.77 cm-1)、C—O—C(1 063.92 cm-1)、Ar—OH(733.46 cm-1)、—CH3(1 143.69、879.70 cm-1)、—CH2(298.96、2 856.79 cm-1)、—RNH(1 043.53、820.82 cm-1)[28]。初步推測(cè)文冠果落果黃酮含有蘆丁、漢黃芩素、異鼠李素、橙皮素等含—CH3的黃酮單體以及蘆丁、葛根素等含—CH2的黃酮單體。

    對(duì)比圖2A、B可知,實(shí)驗(yàn)用蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品純度高,振動(dòng)吸收峰形呈尖峰,特征明顯,而文冠果落果黃酮是混合物,振動(dòng)吸收峰形受多種結(jié)構(gòu)影響,特征性略差[29]。蘆丁和文冠果落果黃酮的吸收峰在1 597.61、1 572~1 501、1 455.16、1 360.20、1 058.23、877.80 cm-1六處重合或接近,說明在這些位置有相同的官能團(tuán)結(jié)構(gòu),由此初步判定文冠果落果黃酮中可能具有蘆丁單體。為了進(jìn)一步驗(yàn)證文冠果落果黃酮中是否有蘆丁單體的存在,實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法對(duì)文冠果落果黃酮單體的成分進(jìn)行了定性和定量分析。

    2.2.3 文冠果落果黃酮高效液相色譜分析結(jié)果

    圖3 蘆丁、槲皮苷混合對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)品365 nm(A)和340 nm(B)HPLC圖Fig. 3 HPLC chromatograms of rutin and quercetrin at 365 nm (A)and 340 nm (B)

    由圖3可以看出,蘆丁在波長(zhǎng)365 nm與340 nm處的檢測(cè)信號(hào)強(qiáng)度無差異,槲皮苷在波長(zhǎng)340 nm處的檢測(cè)信號(hào)強(qiáng)度明顯高于365 nm處;從圖4可以看出,文冠果落果黃酮在38.35 min處的檢測(cè)信號(hào)峰與混合對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)品中蘆丁的出峰時(shí)間相同,由此確定文冠果落果黃酮中含有蘆丁單體,而在18.22 min處無槲皮苷單體被檢測(cè)出來。除了蘆丁之外,文冠果落果黃酮在波長(zhǎng)365 nm與340 nm處還有其他14 種單體物質(zhì)被檢測(cè)出來,其中在28.57 min處檢測(cè)出的尖峰信號(hào)強(qiáng)度高于蘆丁單體,該化合物的結(jié)構(gòu)和生理活性有待進(jìn)一步研究。

    圖4 文冠果落果黃酮于365 nm(A)和340 nm(B)HPLC圖Fig. 4 HPLC chromatograms of flavonoids from X. sorbifolia fruit drop at 365 nm (A) and 340 nm (B)

    由蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制得出進(jìn)樣體積(X)與峰面積(Y)的線性回歸方程:Y=58 954X-5 550.8(R2=1)。結(jié)合蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線通過計(jì)算得出樣品中蘆丁單體的含量為27 mg/g。有研究表明經(jīng)純化后的文冠果落果中總黃酮含量可達(dá)458 mg/g[30],可知實(shí)驗(yàn)用樣品中蘆丁質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為6%。

    2.3 文冠果落果黃酮抑菌作用效果

    表2 文冠果落果黃酮質(zhì)量濃度對(duì)菌種抑菌圈直徑的影響Table 2 Antibacterial effect of flavonoids from X. sorbifolia fruit drop mm

    由表2可知,文冠果落果黃酮對(duì)大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌抑制效果不同。按敏感程度評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)分析,對(duì)大腸桿菌抑制效果最佳,黃酮質(zhì)量濃度為15~20 mg/mL時(shí),大腸桿菌對(duì)其高敏感(抑菌圈直徑15~20 mm),黃酮質(zhì)量濃度為0.5~10 mg/mL時(shí),大腸桿菌對(duì)其中敏感(抑菌圈直徑10~14 mm);枯草芽孢桿菌在測(cè)試范圍內(nèi)對(duì)其中敏感(抑菌圈直徑10~14 mm);黃酮質(zhì)量濃度為15~20 mg/mL時(shí),金黃色葡萄球菌對(duì)其中敏感(抑菌圈直徑10~14 mm),文冠果落果黃酮的抑菌效果為大腸桿菌>枯草芽孢桿菌>金黃色葡萄球菌。有研究表明當(dāng)黃酮質(zhì)量濃度同為1 mg/mL時(shí),對(duì)大腸桿菌和枯草芽孢桿菌而言,苦瓜黃酮的抑菌活性要小于文冠果落果黃酮的抑菌活性,而對(duì)金黃色葡萄球菌而言,苦瓜黃酮的抑菌活性要大于文冠果落果黃酮的抑菌活性,說明黃酮的抑菌活性除了與抑菌機(jī)理有關(guān)外,還可能與組成黃酮的單體成分有關(guān)。

    3 討論與結(jié)論

    文冠果落果中黃酮含量豐富,作為同樣富含黃酮的銀杏現(xiàn)在已開發(fā)出一系列銀杏化妝品,例如銀杏護(hù)膚水、銀杏潔面乳等,因此,作為一種極具潛力的提取黃酮類物質(zhì)的資源,以文冠果落果為原料探索新型的應(yīng)用領(lǐng)域,加大其在保健食品、醫(yī)學(xué)及工業(yè)用品領(lǐng)域的研究力度,促進(jìn)文冠果落果制品的開發(fā)研究,對(duì)提高文冠果落果資源的綜合經(jīng)濟(jì)效益具有重要意義。

    文冠果落果黃酮中蘆丁含量為27 mg/g,占文冠果落果總黃酮的6%左右,不存在槲皮苷單體。除蘆丁外,文冠果落果黃酮中還檢測(cè)到其他14 種未知的單體物質(zhì),經(jīng)顯色反應(yīng)分析和傅里葉變換紅外光譜分析初步推測(cè)可能含有漢黃芩素、異鼠李素、橙皮素、葛根素,其中異鼠李素有止咳祛痰、活血散瘀等重要藥理作用;橙皮素有健胃、利尿、抗病毒和止胃痛的功效,所以對(duì)文冠果落果黃酮單體成分的進(jìn)一步研究是十分必要的。

    文冠果落果黃酮對(duì)大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌均有抑制作用,說明文冠果落果黃酮具有明顯的抑菌活性。與苦瓜黃酮相比文冠果落果黃酮抑菌效果更好,說明文冠果落果的抑菌活性除了與抑菌機(jī)理、菌種本身的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有關(guān)外,還可能與組成文冠果落果黃酮類物質(zhì)的單體成分有關(guān),所以本實(shí)驗(yàn)中對(duì)于文冠果落果黃酮單體的研究也顯得尤為重要,我國(guó)西北地區(qū)文冠果落果資源豐富,后續(xù)將開展其抗菌活性成分的研究,為落果資源的充分利用提供理論基礎(chǔ)。

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