紫芽茶樹不同季節(jié)主要生化成分變化分析

周喆 孫威江 唐秀華 陳志丹

摘 要 以紫芽茶樹武夷奇種C18-1的一芽二葉為試驗(yàn)材料，采用單因素分析優(yōu)化茶樹花青素總量的提取方法，并分析其不同季節(jié)主要生化成分差異。結(jié)果表明：溶劑濃度、浸提時(shí)間、浸提溫度等因素對(duì)茶樹花青素總量提取均有影響，本研究獲得花青素最佳提取方法為：采用3%的鹽酸乙醇溶液，在80 ℃條件下回流浸提1 h。水浸出物、咖啡堿、茶多酚、花青素及游離氨基酸含量均隨季節(jié)不同而呈現(xiàn)不同的變化規(guī)律，且季節(jié)性差異顯著；水浸出物、咖啡堿、游離氨基酸均在春季中含量最高，茶多酚和花青素均在夏季中含量最高。

關(guān)鍵詞 紫芽茶樹；花青素；提取方法；生化成分

中圖分類號(hào) S571.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

Abstract One bud with two leaves of C18-1 was selected as the experimental material. A single-factor analysis was adopted to optimize the extraction method of anthocyanin in tea plants. The differences of main biochemical components in different seasons of C18-1 were studied. The results showed that the factors such as solvent type， solvent concentration， extraction time and temperature had significant effects on anthocyanin extraction. In this experiment， the optimum extraction method of anthocyanin is： ethanol solution with 3% hydrochloric acid， reflux extraction 1 hour under 80 ℃. The contents of water extracts， caffeine， tea polyphenols， anthocyanin and free amino acids showed different changes with different seasons， and the seasonal differences were significant. The contents of water extracts， caffeine and free amino acids were the highest in spring， and the contents of tea polyphenols and anthocyanin in summer were the highest.

Key words purple shoots of tea plant； anthocyanin； extraction method； biochemical components

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2018.05.009

茶樹（Camellia sinensis.（L.） O.Kuntze），為山茶科山茶屬茶種植物，屬于異花授粉植物。我國(guó)茶樹種質(zhì)資源豐富，幼嫩葉片發(fā)生紫化是較為常見的現(xiàn)象。紫化茶樹近年來因其呈現(xiàn)紅紫化新梢和高花青素的保健功效而備受青睞。相關(guān)理化研究顯示，高花青素是紫化茶樹呈“紅紫色”的主要原因。隨著花青素合成相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因表達(dá)量增加，可促進(jìn)花青素合成與積累，進(jìn)而形成了豐富的紫化茶樹品

種[1-2]，同時(shí)其葉色轉(zhuǎn)變機(jī)理及相關(guān)保健功能的研究成為熱點(diǎn)。花青素作為紫化茶樹的特異性成分，在被子植物中含量較多，根據(jù)相關(guān)介紹，花青素存在于27個(gè)科72個(gè)屬的植物中[3]?；ㄇ嗨刈鳛椴豢扇鄙俚拇紊x物，又被稱之為花色素，是水溶性色素，屬類黃酮化合物[4-5]。一般茶葉中的花青素含量占干物質(zhì)含量的0.01%左右，而在紫化茶樹中可以達(dá)到0.5%～1.0%[6]。某些茶樹品種新梢紅紫化程度較高，且主要集中于幼嫩芽葉，成熟葉片含花青素較少。周瓊瓊等[7]比較了茶樹紫芽和成熟綠色葉片的基本生化和成分差異，得出紅紫色芽葉中咖啡堿、茶多酚、兒茶素總量都要高于成熟綠色葉片，且呈極顯著的差異。紅紫色芽葉中類胡蘿卜素的含量、葉綠素總量及葉綠素a、b的含量都極顯著低于成熟綠色葉片，但是其花青素含量相對(duì)于綠色成熟葉片較高。花青素在茶樹葉片中主要以3種形式存在，即飛燕草素、矢車菊素、天竺葵素[8]。此外，在酸性條件下可轉(zhuǎn)變成花青素的還有花白素和原花色素（由兒茶素聚合而成）[9-10]?；ㄇ嗨赜兄诟纳迫梭w健康，具有防癌抗癌、保護(hù)肝臟、預(yù)防阿爾茨海默癥、增進(jìn)視力等功效。近年來，花青素功能性研究取得較大進(jìn)展，但是茶葉中花青素的利用甚少，花青素提取的研究引起了廣大學(xué)者的關(guān)注[11]。王秋霜等[12]優(yōu)化茶葉花青素提取方案，認(rèn)為花青素提取的最優(yōu)條件為：80%的乙醇、0.6%的鹽酸濃度、料液比1/25、提取3次。陳長(zhǎng)應(yīng)[13]采用高效液相色譜法測(cè)定黑綠豆中花青素的主要成分及其含量，色譜柱：250 mm×4.6 mm ZORBAXSB-C18，5 ?m；柱溫：室溫；流動(dòng)相：甲醇+水，按甲醇∶水=5∶1（體積比）；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：10 ?L，檢測(cè)波長(zhǎng)：520 nm。黑綠豆中花青素的含量在1.50～13.5 g/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.25%（N=6），平均回收率達(dá)98.4%。該方法簡(jiǎn)便快速，結(jié)果重現(xiàn)性好，定量準(zhǔn)確，準(zhǔn)確度、精密度高，適用于黑綠豆提取物中花青素的高效液相色譜分析。李智等[14]以山東黃山群體種茶樹紫色芽葉為材料，通過篩選流動(dòng)相、優(yōu)化洗脫梯度，建立茶樹紫色芽葉花青素組分鑒定和含量檢測(cè)的HPLC分析法，并采用HPLC-DAD-MS/MS聯(lián)用技術(shù)對(duì)茶樹紫色芽葉中花青素組分進(jìn)行了分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定，并從提取的花青素粗制品中分離出9個(gè)主要色譜峰；運(yùn)用HPLC-DAD-MS/MS 聯(lián)用技術(shù)，獲得了其中7個(gè)組分的紫外-可見光譜信息、質(zhì)譜數(shù)據(jù)，結(jié)合文獻(xiàn)資料，初步推測(cè)了茶樹紫色芽葉花青素中5個(gè)主要組分。此外，采用外標(biāo)法對(duì)各組分進(jìn)行了定量分析，并獲得了粗提物，純度為32%。該方法簡(jiǎn)便快捷，結(jié)果重現(xiàn)性好，可用于茶樹紫色芽葉中花青素組分的分析與鑒定，為茶樹紫色芽葉的發(fā)生機(jī)理、高含量花青素茶樹品種的選育、花青素單體藥理與生物學(xué)作用的深入研究和利用提供依據(jù)。

鑒于周瓊瓊等[7]研究紫芽茶樹在同一時(shí)期幼嫩紫芽和成熟綠葉的生化成分差異，進(jìn)一步證明了茶樹芽葉呈紫色是由其高含量的花青素組分引起的。本實(shí)驗(yàn)在其基礎(chǔ)上研究紫芽茶樹不同季節(jié)主要生化成分變化，探究不同季節(jié)下生化成分的變化規(guī)律，可較全面驗(yàn)證紫芽茶樹芽葉紫化是由于花青素積累。并且，本研究在Pang等[15]的方法上進(jìn)一步優(yōu)化茶樹花青素提取方法，為后續(xù)研究茶樹花青素提供可行的提取方法，為茶樹花青素代謝合成途徑奠定基礎(chǔ)，為培育高花青素茶樹品種提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 材料 供試材料為紫芽茶樹武夷奇種C18-1一芽二葉時(shí)期，鮮葉原料采自武夷星茶業(yè)，每個(gè)季節(jié)茶樣分成3份。采用120 ℃固樣，并用球磨機(jī)磨碎試樣，待測(cè)。夏茶取于2016年6月28日，暑茶取于2016年8月28日，秋茶取于2016年9月30日，春茶取于2017年4月6日。

1.1.2 主要儀器與設(shè)備 電熱恒溫水浴鍋（常州市人和儀器廠、HWS24型）、紫外可見分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司、TU-1810）、離心機(jī)（上海盧湘儀TDZ5B-WS）、循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司、SHB-Ⅲ型）、電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）、通風(fēng)櫥、球磨機(jī)（FRITSCH Pulverisette 23）、分析天平（賽多利斯科學(xué)儀器有限公司、BSA124S）、超純水機(jī)（Spring-S20）、快速水分測(cè)定儀（sartorious）等。

1.1.3 主要藥品及試劑 碳酸鈉、濃鹽酸、乙醇、甲醇、丙酮、水合茚三酮、堿式乙酸鉛、濃硫酸、福林酚試劑、沒食子酸、十二水磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化亞錫、谷氨酸等。

1.2 方法

1.2.1 生化成分測(cè)定方法 茶葉中水分測(cè)定采用快速水分測(cè)定儀進(jìn)行[16]；茶葉中水浸出物測(cè)定參照GB/T 8305-2013《茶 水浸出物》進(jìn)行；茶葉中咖啡堿含量測(cè)定參照GB/T 8312-2013《茶 咖啡堿》進(jìn)行；茶葉中游離氨基酸含量測(cè)定參照GB/T 8314-2008《茶 游離氨基酸》總量進(jìn)行；茶葉中茶多酚含量測(cè)定參照GB/T 8313-2008《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的檢測(cè)方法》進(jìn)行。

1.2.2 茶葉中花青素含量測(cè)定方法及優(yōu)化 花青素含量測(cè)定方法采用Pang等[15]的方法：準(zhǔn)確稱取不同季節(jié)茶粉各1.000 g，放入圓底燒瓶中，取20 mL的3%鹽酸乙醇溶液于圓底燒瓶中，在水浴鍋中以60 ℃回流浸提1 h?；亓鹘Y(jié)束后，用3%鹽酸乙醇溶液定容至25 mL。以3%的鹽酸乙醇溶液作為參比液，分別于530 nm和657 nm的波長(zhǎng)下測(cè)定吸光值。

花青素的計(jì)算方法（OD/g，鮮重）：OD=（OD530-0.25伊OD657）/M。

（1）提取溶劑類型的優(yōu)化：設(shè)置1%鹽酸甲醇溶液、1%鹽酸乙醇溶液、1%鹽酸丙酮溶液進(jìn)行比較。鹽酸濃度為75%，甲醇為分析純，乙醇濃度為100%，丙酮為分析純。準(zhǔn)確稱取1.000 g茶粉9份，放入圓底燒瓶中，再分別加入20 mL的1%鹽酸甲醇溶液、1%鹽酸乙醇溶液、1%鹽酸丙酮溶液，在60 ℃的條件下回流浸提1 h?；亓鹘Y(jié)束后，用相應(yīng)濃度的不同溶液定容至25 mL。以各自對(duì)應(yīng)的有機(jī)溶劑作為參比液，分別于530、657 nm的波長(zhǎng)下測(cè)定吸光值。

（2）鹽酸乙醇濃度的優(yōu)化：設(shè)置1%、1.5%、2%、2.5%、3%、4%等6個(gè)濃度的鹽酸乙醇溶液進(jìn)行比較。準(zhǔn)確稱取1.000 g的茶粉18份，放入圓底燒瓶中，再分別加入20 mL的1%、1.5%、2%、2.5%、3%、4%的鹽酸乙醇溶液，在60 ℃的條件下回流浸提1 h?；亓鹘Y(jié)束后，用相應(yīng)濃度的鹽酸乙醇溶液定容至25 mL。以各自對(duì)應(yīng)的有機(jī)溶劑作為參比液，分別于530、657 nm的波長(zhǎng)下測(cè)定吸光值。

（3）浸提時(shí)間的優(yōu)化：設(shè)置30、60、90 min等3個(gè)不同回流浸提時(shí)間進(jìn)行比較。準(zhǔn)確稱取1.000 g的茶粉9份，放入圓底燒瓶中，再分別加入20 mL的3%的鹽酸乙醇溶液，在60 ℃的條件下分別回流浸提30、60、90 min。回流結(jié)束后，用3%的鹽酸乙醇溶液定容至25 mL。以3%的鹽酸乙醇溶液作為參比液，分別于530、657 nm的波長(zhǎng)下測(cè)定吸光值。

（4）浸提溫度的優(yōu)化：設(shè)置60、70、80、90 ℃等4個(gè)不同溫度進(jìn)行比較。準(zhǔn)確稱取1.000 g的茶粉12份，放入圓底燒瓶中，再分別加入20 mL的3%的鹽酸乙醇溶液，在60、70、80、90 ℃的水浴鍋分別回流浸提1 h?；亓鹘Y(jié)束后，用3%鹽酸乙醇溶液定容至25 mL。以3%的鹽酸乙醇溶液作為參比液，分別于530、657 nm的波長(zhǎng)下測(cè)定吸光值。

（5）不同季節(jié)花青素總量的測(cè)定：準(zhǔn)確稱取不同季節(jié)的茶粉各1.000 g，放入圓底燒瓶中，取20 mL的3%鹽酸乙醇溶液于圓底燒瓶中，在水浴鍋中以80 ℃回流浸提1 h?；亓鹘Y(jié)束后，用3%鹽酸乙醇溶液定容至25 mL。以3%的鹽酸乙醇溶液作為參比液，分別于530、657 nm的波長(zhǎng)下測(cè)定吸光值。

1.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2010和SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 花青素提取優(yōu)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

2.1.1 提取溶劑對(duì)花青素提取效果的影響 從圖1可知，1%鹽酸乙醇溶液提取的花青素含量較高，達(dá)（1.607 75±0.08） mg/g。

2.1.2 不同鹽酸乙醇濃度對(duì)花青素提取效果的影響 從圖2可知，3%的鹽酸乙醇溶液提取的花青素含量最高，達(dá)（1.976 75±0.24） mg/g，其次是4.0%的鹽酸乙醇溶液，提取量為（1.905 80±0.13）mg/g。

2.1.3 不同提取時(shí)間對(duì)花青素提取效果的影響 從圖3可知，提取時(shí)間為60 min時(shí)花青素含量最高，為（1.976 75±0.11） mg/g。

小寫字母表示不同季節(jié)之間存在顯著差異（p<0.05）。下同。

2.1.4 不同提取溫度對(duì)花青素提取效果的影響 從圖4可知，4個(gè)提取溫度下，以溫度為80 ℃時(shí)花青素的提取量最高，為（2.188 5±0.14）mg/g。

2.2 紫化茶樹武夷奇種C18-1花青素含量檢測(cè)分析

由圖5可知，夏季花青素含量最高，為（3.12±0.03）mg/g，秋季花青素含量最低，為（2.09±0.20）mg/g。花青素含量呈秋季<春季<暑季<夏季遞增趨勢(shì)。顯著性分析顯示，夏、暑季花青素含量變化顯著；春、秋季變化不顯著，但是，春、秋季與夏、暑季變化呈極顯著。

大小寫字母表示不同季節(jié)之間存在極顯著（p<0.01）或顯著（p<0.05）差異。

2.3 紫芽茶樹武夷奇種C18-1主要生化成分檢測(cè)分析

2.3.1 水浸出物含量變化分析 由表1可知，武夷奇種C18-1水浸出物含量春季最高，為（49.68±0.30）%；夏季最低，為（45.03±0.18）%。水浸出物含量呈夏季<暑季<秋季<春季遞增趨勢(shì)。顯著性分析顯示，春季、秋季水浸出物含量變化不顯著，但是，春、秋季與夏、暑季比較呈極顯著，夏季與秋季水浸出物含量變化也呈極顯著。

2.3.2 咖啡堿含量變化分析 由表1可知， 武夷奇種C18-1咖啡堿含量春季最高，為（2.83±0.20）%；夏季最低，為（2.19±0.41）%。咖啡堿含量呈夏季<暑季<秋季<春季遞增趨勢(shì)。顯著性分析顯示，夏、暑、秋季咖啡堿含量變化不顯著，春季與夏、暑季咖啡堿含量變化顯著。

2.3.3 游離氨基酸含量變化分析 由表1可知， 武夷奇種C18-1游離氨基酸含量春季最高，為（2.98±0.08）%；夏季最低，為（2.14±0.14）%。游離氨基酸含量呈夏季<暑季<秋季<春季遞增趨勢(shì)。顯著性分析顯示，夏、暑季變化不顯著，春季與秋季變化顯著，春、秋季與夏、暑季變化呈極顯著。

2.3.4 茶多酚含量變化分析 由表1可知，武夷奇種C18-1茶多酚含量夏季最高，為（23.95±0.10）%；春季最低，為（21.21±0.35）%。茶多酚含量呈春季<秋季<暑季<夏季遞增趨勢(shì)。顯著性分析顯示，春、秋季變化不顯著，但是，春、秋季與夏、暑季變化呈極顯著，夏季與暑季變化也呈極顯著。

3 討論

本研究對(duì)提取茶樹花青素總量的條件進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果顯示，稱取1.000 g茶粉溶于20 mL的3%的鹽酸乙醇溶液，在80 ℃水浴中進(jìn)行回流浸提1 h的條件最佳?；ㄇ嗨睾卸鄠€(gè)羥基，所以選擇親水性溶劑如甲醇、乙醇、丙酮、稀酸、稀堿等極性較大且能與水互相混溶的有機(jī)溶劑較好[17]。雖然鹽酸乙醇的穩(wěn)定性不如鹽酸甲醇，但是乙醇作為有機(jī)溶劑，安全度高，使用頻率高，且提取率較高，溶劑殘留較少，同時(shí)用鹽酸酸化處理能夠使其pH值始終維持在一個(gè)較低的數(shù)值，防止在浸提過程中非酰基化的花青素降解[18]。所以本研究采用鹽酸乙醇溶液來提取花青素。

紫芽種質(zhì)資源中花青素含量相對(duì)一般茶葉較高。其產(chǎn)生和累積離不開茶樹生長(zhǎng)狀態(tài)及栽培條件?；ㄇ嗨氐姆e累需要較強(qiáng)的光照和較高的氣溫，故而夏季的花青素含量最高，使芽葉紅紫化明顯；光照較弱、氣溫溫和的春季和秋季，二者的花青素含量相對(duì)較低。因?yàn)榛ㄇ嗨貙儆诙喾宇?，與多酚類代謝和糖代謝密切相關(guān)。所以花青素含量呈秋季<春季<暑季<夏季遞增趨勢(shì)。

茶葉水浸出物即為茶葉中能被熱水溶解的物質(zhì)[19]，水浸出物的主要成分是水溶性果膠、氨基酸、茶多酚、咖啡堿等[20]。水浸出物含量與茶葉中可溶性物質(zhì)的量相關(guān)，茶湯醇厚與否取決于此。不同季節(jié)茶葉水浸出物有極顯著的差異，可能是由于春季氮素代謝快，作為含氮化合物的咖啡堿、氨基酸等物質(zhì)含量高，所以水浸出物含量高。夏季高溫、少雨，糖類代謝旺盛，而在此前提下進(jìn)行了多酚類的代謝。因此夏、暑季茶多酚、可溶性糖的含量較高，但是總水浸出物含量不及春、秋季。水浸出物含量呈夏季<暑季<秋季<春季的遞增趨勢(shì)。

咖啡堿作為可溶性含氮化合物，決定著茶葉的品質(zhì)。春茶多于夏、暑、秋茶。在正常情況下，光照強(qiáng)度和光照量大，有利于碳代謝，但同時(shí)對(duì)氮化合物代謝的抑制程度也不同。所以光照適宜有利于氮代謝，可以促進(jìn)咖啡堿的合成。水分和溫度也影響著咖啡堿的合成，春季、秋季光照較弱，溫度適宜，水分較充足，咖啡堿含量高；夏、暑季光照強(qiáng)，高溫少雨，影響氮代謝的進(jìn)行，因此咖啡堿含量較低。此外，咖啡堿含量也受施肥條件的影響?？Х葔A含量呈夏季<暑季<秋季<春季的遞增趨勢(shì)。

氨基酸也是茶湯主要的呈味物質(zhì)之一，其含量高則成茶具有鮮爽的口感、馥郁的香氣。游離氨基酸的含量呈夏季<暑季<秋季<春季遞增，可能是因?yàn)楹衔锏淖饔?。春季溫濕度適宜，光照相對(duì)較弱，氮代謝較快，氮肥供給多，茶樹含氮量高，且春季水分充足，雨水多，從而使氨基酸含量也升高。由于夏、暑季高溫少雨，高光照，蒸騰作用強(qiáng)烈，氮代謝被抑制，氮肥供應(yīng)量少于春季，且又容易被分解和轉(zhuǎn)化，造成含量低；而到了秋季，光照強(qiáng)度和日照量相較于夏、暑季低，雨水量較之高。所以，氮代謝又活躍起來，含氮量回升，氨基酸又積累。施肥也影響游離氨基酸的含量。12月初施肥可促進(jìn)氨基酸含量增多，有利于春茶滋味等；而夏、暑季不施肥減少了氨基酸的合成，致使氨基酸含量減少，形成了不同季節(jié)的差異變化。

茶葉中多酚類含量占干物質(zhì)量的20%～25%，對(duì)成品茶色澤、香氣、滋味等品質(zhì)的形成有重要影響，影響茶湯口感和色澤[21]。茶多酚含量呈春季<秋季<暑季<夏季的遞增趨勢(shì)。夏、暑季光照強(qiáng)烈，日照時(shí)間長(zhǎng)，兒茶素合成加快，積累多于分解；高溫少雨，導(dǎo)致茶樹體內(nèi)酶活性增強(qiáng)，有機(jī)物質(zhì)的運(yùn)輸加快，呼吸強(qiáng)度大，茶樹糖代謝速度快，次級(jí)代謝產(chǎn)物多，且空氣濕度較低，水分蒸發(fā)量大，導(dǎo)致茶樹葉片氣孔關(guān)閉，CO2進(jìn)入葉片難度大，光合作用受抑制，因此多酚類積累較多。春、秋兩季，光照強(qiáng)度較夏、暑季弱，日照時(shí)間相對(duì)較短，氣溫較溫和，雨水充沛，光合作用等活動(dòng)正常進(jìn)行，生理機(jī)能正常，多酚類正常合成。因此夏、暑季茶多酚含量高于春、秋季。

季節(jié)不同，其環(huán)境條件（光照、溫度、水分等）和施肥情況也不同。光照強(qiáng)度和時(shí)長(zhǎng)、溫度和水分，影響著光合作用和茶樹的碳氮代謝。光照強(qiáng)，時(shí)間長(zhǎng)，氮代謝被抑制，碳代謝加快；光照弱，時(shí)間短，則相反。高溫少雨則抑制氮代謝，增強(qiáng)碳代謝。因此，作為含氮化合物的咖啡堿及游離氨基酸春季含量最高，夏、暑季含量低；作為碳代謝產(chǎn)物的茶多酚則在夏季達(dá)到最高，春、秋季則降低。冬季施肥可促進(jìn)春季茶樹含氮量增加，提高春茶品質(zhì)。本研究可為紫化茶樹成品茶的加工提供一定理論依據(jù)，可適當(dāng)?shù)剡x擇采摘特定季節(jié)下的鮮葉進(jìn)行加工，滿足生產(chǎn)和市場(chǎng)上的需要。

花青素因其保健功能，近年來被廣大學(xué)者所關(guān)注，高花青素茶樹種質(zhì)也因其特異性而成為研究熱點(diǎn)[6-7]。羅正飛等[22]得到“紫鵑”茶中花青素的最佳醇提條件為：70%乙醇溶劑、回流提取30 min、回流溫度80 ℃、研究料液比1：10，但未對(duì)提取溶劑做出研究?jī)?yōu)化。本研究選取了鹽酸甲醇、鹽酸乙醇及鹽酸丙酮來做提取優(yōu)化。李智等[14]采用酸性甲醇作為提取溶劑。甲醇具有一定毒性，考慮到其在食品中的適用性，因此本研究采用酸性乙醇溶液作為提取溶劑。本研究?jī)?yōu)化的花青素提取方法能有效提取茶葉花青素，可為后續(xù)研究提供一定參考。

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