• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于UPLC法測定指標成分結合指紋圖譜評價不同產(chǎn)地川赤芍不同部位的質(zhì)量

    2021-04-07 02:04:10鐘海蓉張紹山海來約布曲別軍長李奕松楊正明
    中草藥 2021年7期
    關鍵詞:赤芍芍藥指紋

    鐘海蓉,張紹山,肖 芳,海來約布,曲別軍長,李奕松,楊正明*,劉 圓

    ? 藥材與資源 ?

    基于UPLC法測定指標成分結合指紋圖譜評價不同產(chǎn)地川赤芍不同部位的質(zhì)量

    鐘海蓉1,張紹山2, 4,肖 芳1,海來約布1,曲別軍長1,李奕松1,楊正明2, 4*,劉 圓3, 4*

    1. 西南民族大學藥學院,四川 成都 610041 2. 西南民族大學青藏高原研究院,四川 成都 610041 3. 西南民族大學民族醫(yī)藥研究院,四川 成都 610041 4. 四川省羌彝藥用資源保護與利用技術工程實驗室,四川 成都 610225

    采用超高效液相色譜法(UPLC)分別對18個產(chǎn)地川赤芍的根、莖和葉中的芍藥苷、氧化芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖3種成分進行含量測定,并建立其指紋圖譜,基于多元統(tǒng)計法綜合分析川赤芍根、莖和葉中主要化學成分的整體分布以及在不同部位中的差異性,并對川赤芍品質(zhì)進行綜合評價。采用UPLC法,色譜條件:C18色譜柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm),流動相為乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脫,柱溫30 ℃,體積流量0.2 mL/min,進樣量1 μL,檢測波長230 nm;采用2012版《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)》軟件建立圖譜;并采用差異分析、相似度分析、主成分分析(PCA)、TOPSIS分析和偏最小二乘法判別分析(PLS-DA)對川赤芍品質(zhì)進行綜合評價。根據(jù)含量測定結果,川赤芍中氧化芍藥苷含量大小為根>莖>葉;芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖含量大小為根>葉>莖。其中,根樣品中的芍藥苷含量均大于1.8%,符合《中國藥典》2020年版規(guī)定;莖、葉中芍藥苷含量與根較為接近。并建立了根、莖、葉的UPLC指紋圖譜,共標定了17個共有峰,并指認出3個共有峰(芍藥苷、氧化芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖)。相似度評價結果顯示,不同產(chǎn)地川赤芍根、莖、葉的相似度均較好,質(zhì)量穩(wěn)定。指紋圖譜可有效評價不同產(chǎn)地川赤芍品質(zhì)。川赤芍莖、葉中芍藥苷含量與根中相近,基于《中國藥典》2020年版以芍藥苷為質(zhì)量控制指標,為綜合評價川赤芍的品質(zhì)和開發(fā)新的入藥部位等研究提供相關理論基礎。

    川赤芍;指紋圖譜;芍藥苷;氧化芍藥苷;主成分分析;品質(zhì)評價;資源開發(fā)

    川赤芍Lynch為毛茛科芍藥屬多年生草本植物,以其根入藥,為《中國藥典》2020年版所收載赤芍的來源之一。赤芍為傳統(tǒng)常用中藥材,用途廣泛,具有清熱涼血、散瘀止痛的功效[1]。川赤芍化學成分主要為苷類、酚類、黃酮類化合物,其質(zhì)量評價多以單萜苷類成分芍藥苷為指標,《中國藥典》2020年版規(guī)定芍藥苷不得少于1.8%[2-3]。

    川赤芍主產(chǎn)地為四川西部,集中生長在青藏高原的邊緣地帶。其生長環(huán)境苛刻,通常為海拔2650~3750 m的高原和峽谷地,在生態(tài)脆弱的青藏高原,川赤芍的自我再生非常緩慢,目前人工種植尚未起步;多個主產(chǎn)區(qū)的川赤芍野生資源蘊藏量逐年減少,上市量隨之銳減,野生川赤芍已呈瀕危之勢[4-5]。

    近年來,指紋圖譜法在中藥研究中應用較多[6-7],作為評價藥材質(zhì)量和穩(wěn)定性的最優(yōu)方法,具有綜合、宏觀、模糊等非線性特點[8-11]。有相關文獻報道[12-14],根據(jù)2種基原的赤芍指紋圖譜,可快速、準確地鑒別2種赤芍,綜合評價二基原赤芍藥材的質(zhì)量。目前,前人對以芍藥為基原的赤芍研究較多,但是對于川赤芍的研究較少。本研究采用指紋圖譜、相似度分析、聚類分析等方法從多角度分析,綜合評價不同產(chǎn)地、不同部位的川赤芍質(zhì)量。從中藥資源的綜合利用和藥材質(zhì)量評價角度出發(fā),采用UPLC法對18批不同產(chǎn)地川赤芍的不同植物部位中芍藥苷、氧化芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖等3種成分進行含量測定,并建立了根、莖、葉的化學成分指紋圖譜,通過多元統(tǒng)計分析,研究川赤芍根、莖、葉中化學成分的整體分布和含量變化及定量比較,以期最大化的綜合利用野生川赤芍資源,對評價川赤芍品質(zhì)和開發(fā)新的入藥部位等研究具有一定的參考意義。

    1 儀器、試劑與材料

    WatersAcquityUPLC?超高效液相色譜儀(美國Waters公司);ACQUITY UPLC?BEH C18色譜柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm);BP211D型電子天平(德國Sartorius公司);KQ-5200E型超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司);METTLERAE240電子分析天平(上海梅特勒-托利多儀器有限公司)。

    對照品芍藥苷(批號18012305)、氧化芍藥苷(批號18082704)、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖(批號19010904)均購自成都格利普生物科技有限公司,質(zhì)量分數(shù)均≥98.0%;乙腈為色譜純(美國Sigma公司);甲醇為分析純(成都市科隆化工試劑廠);水為屈臣氏蒸餾水;其余試劑為分析純。

    本課題組在全國第四次中藥資源普查工作中,對汶川縣和壤塘縣進行中藥資源調(diào)查,分別于2017—2018年于四川省甘孜藏族自治州各地與阿壩藏族羌族自治州沿途采集川赤芍樣品。經(jīng)西南民族大學青藏高原研究院劉圓教授鑒定為毛茛科芍藥屬植物川赤芍Lynch,川赤芍樣品信息見表1。

    表1 川赤芍樣品來源

    2 方法與結果

    2.1 色譜條件

    Waters Acquity UPLC?超高效液相色譜儀(美國Waters公司);ACQUITY UPLC?BEH C18色譜柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm);流動相為乙腈(A)- 0.1%磷酸水溶液(B),梯度洗脫程序:0~5 min,5%~8% A;5~8 min,8%~12% A;8~13 min,12%~15% A;13~23 min,15%~20% A;23~27 min,20%~22% A;27~33 min,22%~75% A;33~34 min,75%~100% A;柱溫30 ℃;體積流量0.2 mL/min;進樣量1 μL;檢測波長230 nm。供試品及對照品色譜圖見圖1。

    2.2 混合對照品溶液制備

    分別精密稱取芍藥苷、氧化芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖對照品適量,加甲醇制成含芍藥苷1.017 mg/mL、氧化芍藥苷0.200 mg/mL、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖0.296 mg/mL的混合對照品溶液,搖勻,即得。

    1-氧化芍藥苷 2-芍藥苷 3-1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄糖

    2.3 供試品溶液制備

    稱取藥材粉末(過3號篩)約0.5 g,精密稱定,置于100 mL錐形瓶中,加入甲醇25 mL,搖勻,密封稱定質(zhì)量,超聲75 min后,冷卻,密封稱定質(zhì)量,用甲醇補足減少的質(zhì)量,濾過,續(xù)濾液用0.22 μm微孔濾膜濾過,備用。

    2.4 方法學考察

    2.4.1 專屬性試驗 分別取供試品溶液(根、莖、葉)和混合對照品溶液“2.1”項下色譜條件測定,得到特征峰,供試品溶液與雜質(zhì)分離良好,無干擾。

    2.4.2 線性關系考察 精密吸取混合對照品溶液,稀釋成6個不同濃度,按“2.1”項下色譜條件測定,并記錄峰面積。以對照品濃度為橫坐標(),峰面積為縱坐標(),繪制標準曲線,并進行線性回歸,得3種成分的回歸方程與線性范圍,見表2。

    表2 回歸方程與線性范圍

    2.4.3 精密度試驗 取混合對照品溶液連續(xù)進樣6次,按“2.1”項下色譜條件測定,計算峰面積的RSD值,氧化芍藥苷、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖峰面積RSD值分別為0.71%、0.26%、1.98%。

    2.4.4 重復性試驗 精密稱取同一藥材樣品,共6份,制備供試品溶液,按“2.1”項下色譜條件測定,得氧化芍藥苷、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖質(zhì)量分數(shù)RSD分別是1.45%、1.31%、1.08%。

    2.4.5 穩(wěn)定性試驗 取同一供試品溶液,分別于6、12、18、24、32、40、48 h進樣,按“2.1”項下色譜條件測定,得氧化芍藥苷、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖峰面積RSD分別是2.75%、0.83%、1.26%。

    2.4.6 加樣回收率試驗 精密稱取已測定的樣品0.25 g,共6份,分別添加一定濃度的芍藥苷、氧化芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖對照品溶液,依照“2.3”項方法制備樣品溶液,按“2.1”項下色譜條件測定,芍藥苷、氧化芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖加樣回收率在98.72%~101.41%,RSD在1.49%~2.68%。

    2.5 不同產(chǎn)地川赤芍多成分含量測定

    2.5.1 川赤芍不同植物部位含量測定結果及化學成分定量比較 18批川赤芍不同植物部位含量測定結果見表3。由表3可知,川赤芍根樣品中氧化芍藥苷、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖含量分別為0.14%~0.85%、1.79%~4.11%、0.20%~0.80%;莖樣品中氧化芍藥苷、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖含量分別為0.10%~0.32%、1.08%~1.96%、0.09%~0.58%;葉樣品中氧化芍藥苷、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖質(zhì)量分數(shù)分別為0.02%~0.18%、1.13%~5.40%、0.11%~0.70%。根中芍藥苷平均含量為3.20%,均大于1.8%,符合藥典規(guī)定;18批次葉樣品的平均含量為2.19%,大部分達到了《中國藥典》2020年版標準,且1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖平均含量與根相近;莖中芍藥苷平均質(zhì)量分數(shù)為1.45%,接近《中國藥典》標準。因此,考慮可將莖葉作為芍藥苷的開發(fā)部位使用。

    2.5.2 差異性分析 川赤芍根、莖、葉樣品中氧化芍藥苷、芍藥苷和1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖含量范圍、均值及差異性分析結果見圖2。

    由圖2可知,川赤芍中氧化芍藥苷含量大小為根>莖>葉,芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖含量大小為根>葉>莖。川赤芍根、莖、葉中氧化芍藥苷和芍藥苷含量差異極顯著,1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖含量差異顯著。

    2.5.3 TOPSIS分析 根據(jù)氧化芍藥苷、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖權重結果(以變異系數(shù)法計算,表4),以標準化的數(shù)據(jù)采用DPS軟件進行TOPSIS分析[15],得川赤芍根(G1~18)、莖(J1~18)、葉(Y1~18)結果見表5。結果表明,以氧化芍藥苷、芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄為評價指標,根據(jù)最優(yōu)值相對接近度(CI)排名,3號川赤芍根樣品質(zhì)量最優(yōu)、6號川赤芍莖樣品質(zhì)量最優(yōu)、6號川赤芍葉樣品質(zhì)量最優(yōu)。

    表3 川赤芍根、莖和葉中3種化學成分的含量測定結果

    A-氧化芍藥苷 B-芍藥苷 C-1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖

    A-oxypaeoniflorin B-paeoniflorin C-1,2,3,4, 6--pentagalloylglucose

    小寫字母表示顯著性α=0.05,大寫字母表示顯著性α=0.01

    2.6 指紋圖譜的建立與分析

    中藥化學成分種類繁多復雜,測定單一成分或幾種成分很難表征其藥材質(zhì)量,因此本研究對18批川赤芍藥材建立指紋圖譜,從整體上分析其化學成分。2.6.1 指紋圖譜的建立 按照“2.1”項下條件依次測定,“2.3”項下條件制備供試品,將18個產(chǎn)地的川赤芍UPLC數(shù)據(jù)以AIA格式導入2012版《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)》軟件中,分別以G1、J1和Y1樣品作為參照圖譜,采用中位數(shù)法,時間窗寬度為0.5,經(jīng)過多點校正后,進行色譜峰的匹配,分別生成川赤芍根、莖和葉指紋圖譜疊加圖(圖3)。以5號峰作為對照峰,共確定17個共有峰,用對照品對所得色譜峰進行比對,共指認出3個峰,分別為氧化芍藥苷(3號峰)、芍藥苷(5號峰)、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖(10號峰)。

    表4 3種成分的含量RSD與權重結果

    表5 川赤芍不同部位TOPSIS分析結果

    G-根 J-莖 Y-葉,下同

    G-root J-stem Y-leaves,same as below

    2.6.2 相似度分析 分別對川赤芍根、莖和葉樣品的指紋圖譜與對照指紋圖譜進行相似度評價(表6),結果顯示,18批川赤芍根、莖和葉UPLC指紋圖譜相似度系數(shù)相似度均在0.905之上,說明各產(chǎn)地產(chǎn)地川赤芍質(zhì)量穩(wěn)定。

    2.6.3 主成分分析 采用SPSS 19.0軟件,以17個共有峰(1~17)峰面積為變量,對川赤芍根、莖、葉樣品進行主成分分析。參考文獻報道[16-17],選取每個主成分因子最大荷載值10%范圍內(nèi)和最高Norm值10%范圍內(nèi)的指標進入品質(zhì)指標評價的最小數(shù)據(jù)庫集(minimum data set,MDS)。將18個產(chǎn)地川赤芍不同部位(根、莖、葉)樣品的共有峰峰面積導入SPSS 19.0軟件,對各共有峰峰面積進行標準化處理,計算主成分特征值、累積貢獻率及主成分綜合得分等[18]。

    川赤芍各樣品主成分因子載荷矩陣、公因子方差和Norm值見表7。川赤芍根樣品各共有峰的公因子方差≥0.518(4的公因子方差最小,為0.518;11的公因子方差最大,為0.965),特征值>1的主成分有3個,且累積貢獻率達84.262%,基本可以客觀反映川赤芍根樣本信息。選取共有峰2、10~17進入MDS,表明這些共有峰可以基本反映川赤芍根的品質(zhì)信息。川赤芍莖樣品各共有峰的公因子方差≥0.539(6的公因子方差最小,為0.539;15的公因子方差最大,為0.986),特征值>1的主成分有4個,且累積貢獻率達88.975%,基本可以客觀反映川赤芍莖樣本信息。選取共有峰2、4、8~17進入MDS,表明這些共有峰可以基本反映川赤芍莖的品質(zhì)信息。川赤芍葉樣品各共有峰的公因子方差≥0.546(7的公因子方差最小,為0.539;11的公因子方差最大,為0.986),特征值>1的主成分有3個,且累積貢獻率達87.922%,基本可以客觀反映川赤芍葉樣本信息。選取共有峰2、4、9~17進入MDS,表明這些共有峰可以基本反映川赤芍葉的品質(zhì)信息。根據(jù)各樣品主成分綜合得分結果(表8),川赤芍根的綜合得分排名為G17>G3>G2>G6>G16……G5>G13>G7,表明崗木達村(G17)、冷冷村(G3)、沙灣村(G2)、學海村(G6)、達日村(G16)這5個產(chǎn)地的川赤芍根樣品質(zhì)量較好。川赤芍莖的綜合得分排名為J12>J6>J16>J8>J3…… J15>J10>J17,表明巴朗山(J12)、學海村(J6)、達日村(J16)、日都村(J8)、冷冷村(J3)這5個產(chǎn)地的川赤芍莖樣品質(zhì)量較好。川赤芍葉的綜合得分排名為Y11>Y15>Y17>Y10>Y7……Y2>Y14>Y4,表明仁達村(Y11)、洞窩村(Y15)、崗木達村(Y17)、塔拖村(Y10)、小同村(Y7)這5個產(chǎn)地的川赤芍葉樣品質(zhì)量較好。

    A-川赤芍根對照圖譜 B-川赤芍根疊加圖 C-川赤芍莖對照圖譜 D-川赤芍莖疊加圖 E-川赤芍葉對照圖譜 F-川赤芍葉疊加圖

    表6 18批川赤芍相似度結果

    2.6.4 TOPSIS分析 根據(jù)川赤芍不同部位共有峰權重結果,將標準化的數(shù)據(jù)采用DPS軟件進行TOPSIS分析[15],以共有峰面積做評價指標,根據(jù)最優(yōu)值相對接近度(CI)排名(表8)。結果表明,14號川赤芍根樣品質(zhì)量最優(yōu)、12號川赤芍莖樣品質(zhì)量最優(yōu)、11號川赤芍葉樣品質(zhì)量最優(yōu)。

    表7 川赤芍各部位樣品主成分因子載荷矩陣、公因子方差和Norm值

    表8 川赤芍不同部位主成分分析與TOPSIS分析結果

    2.6.5 偏最小二乘回歸(PLS-DA)分析 為了進一步篩選引起不同產(chǎn)地川赤芍不同部位(根、莖、葉)質(zhì)量特征差異的標志性成分,采用SIMCA 13.0軟件對18批不同產(chǎn)地川赤芍不同部位(根、莖、葉)UPLC指紋圖譜的原始數(shù)據(jù)進行PLS-DA分析,進而提取PLS-DA模型中17個變量的VIP值(圖4),以變量的VIP>1作為評價標準,篩選引起不同產(chǎn)地川赤芍不同部位(根、莖、葉)質(zhì)量差異的潛在化學成分[19]。篩選結果表明,川赤芍根樣品色譜峰1、15、5、17、4等的VIP值大于1,說明這些峰所代表的成分是造成不同產(chǎn)地川赤芍根樣品差異的主要標志性物質(zhì);川赤芍莖樣品色譜峰12、15、16、17、11、5、13等的VIP值大于1,說明這些峰所代表的成分是造成不同產(chǎn)地川赤芍莖樣品差異的主要標志性物質(zhì);川赤芍葉樣品色譜峰5、7、1、15等的VIP值大于1,說明這些峰所代表的成分是造成不同產(chǎn)地川赤芍葉樣品差異的主要標志性物質(zhì);其中5號峰為芍藥苷,其他幾個還有待鑒別。因此,芍藥苷是影響產(chǎn)地差異的主要評價因素,這與藥典選取芍藥苷為指控標志相一致。

    圖4 川赤芍根(A)、莖(B)、葉(C) 的UPLC指紋圖譜共有色譜峰的PLS-DA VIP值

    3 討論

    本研究為了優(yōu)化供試品制備的提取條件,分別考察了提取溶劑(甲醇、50%甲醇、乙醇、50%乙醇)、提取方法(回流提取法和超聲提取法)、提取時間(30、45、60、75、90、120 min)、料液比(1∶10、1∶25、1∶50、1∶75)對提取效果的影響,確定最佳提取條件為:以甲醇為溶劑,超聲提取75 min。建立的UPLC測定方法操作簡單、準確可靠,精密度、穩(wěn)定性和重復性良好。

    川赤芍主要含有苷類和沒食子酸及其衍生物兩大類成分,具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、擴張血管、抗炎、抗?jié)?、抗癌、抗糖尿病等生物學活性[20-24]。本研究所選芍藥苷、氧化芍藥苷、1,2,3,4,6--五沒食子酰葡萄糖為川赤芍的主要活性成分,根據(jù)劉昌孝院士提出的質(zhì)量標志物原則[25],以上3種成分均與川赤芍功能密切相關,同時可以定性鑒別和定量測定。因此,本研究選擇以上3種成分作為質(zhì)量標志物科學而合理,符合中醫(yī)藥研究理論。

    綜合多元統(tǒng)計分析結果,基于不同產(chǎn)地、不同部位川赤芍定量分析和指紋圖譜,本課題組所建立的多元統(tǒng)計分析方法可用于提高川赤芍的質(zhì)量控制和質(zhì)量標準,可作為不同產(chǎn)地、不同部位中藥材間的質(zhì)量評價方法。

    目前,川赤芍主要為生態(tài)脆弱的青藏高原野生資源,且分布范圍廣,尚未有人工栽培。本研究對不同產(chǎn)地川赤芍不同植物部位化學成分進行了比較。UPLC指紋圖譜相似度評價結果顯示,川赤芍各部位的化學成分極為相似,且莖和葉化學成分含量較接近,說明不同產(chǎn)地川赤芍根藥材質(zhì)量存在顯著差異?!吨袊幍洹?020年版規(guī)定川赤芍主要的入藥部位為根,且以芍藥苷含量作為主要質(zhì)控指標。本研究結果表明,川赤芍根中芍藥苷平均含量為3.20%,均符合藥典規(guī)定。川赤芍莖和葉均含有芍藥苷,其中葉中芍藥苷平均含量高達2.19%,大部分達到藥典規(guī)定;莖中芍藥苷含量雖未達藥典標準,但其含量可觀。因此,建議在對川赤芍莖葉做進一步藥效學研究,考慮是否可將川赤芍莖葉與根同等入藥或者川赤芍的莖葉作為新的入藥部位,綜合有效利用已漸瀕危之勢的川赤芍野生資源。

    利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

    [1] 中國藥典 [S]. 一部. 2020: 87.

    [2] 陸小華, 馬驍, 王建, 等. 赤芍的化學成分和藥理作用研究進展 [J]. 中草藥, 2015, 46(4): 595-602.

    [3] 冀蘭鑫, 黃浩, 李長志, 等. 赤芍藥理作用的研究進展 [J]. 藥物評價研究, 2010, 33(3): 233-236.

    [4] 簡在友, 王文全, 俞敬波. 赤芍野生資源調(diào)查及可持續(xù)利用技術途徑探討 [J]. 中國現(xiàn)代中藥, 2010, 12(5): 10-11.

    [5] 向楚兵, 劉友平, 陳鴻平, 等. 赤芍二基源藥材的HPLC指紋圖譜鑒別及質(zhì)量評價 [J]. 中國實驗方劑學雜志, 2011, 17(23): 43-48.

    [6] 瞿領航, 曹國勝, 涂濟源, 等. 基于灰色關聯(lián)度與正交偏最小二乘法分析的蒼術揮發(fā)油燥性譜效關系研究 [J]. 中草藥, 2019, 50(1): 150-156.

    [7] 徐珍珍, 史星星, 樊旭蕾, 等. 基于灰色關聯(lián)度法和FCM算法的木香質(zhì)量評價研究 [J]. 中草藥, 2018, 49(24): 5916-5922.

    [8] 聶磊, 胡震, 羅國安, 等. 中藥指紋圖譜的融合技術 [J]. 分析化學, 2005, 33(6): 898.

    [9] 曹瑞竹. 木香順氣丸HPLC特征指紋圖譜研究及多成分含量測定 [J]. 藥物分析雜志, 2017, 37(6): 1127-1134.

    [10] 黃萌萌, 唐頌豪, 陳彥, 等. 排石顆粒HPLC指紋圖譜及化學模式識別分析 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2017, 32(6): 2768-2772.

    [11] 李莉娜, 楊淑婷, 楊健, 等. 生芪消渴膠囊UPLC指紋圖譜建立及6種成分含量測定 [J]. 中國新藥雜志, 2018, 27(18): 2196-2202.

    [12] 付士朋, 沈宏偉, 王謙博, 等. 指紋圖譜結合灰色關聯(lián)度分析法對不同產(chǎn)地赤芍質(zhì)量的評價研究 [J]. 中草藥, 2019, 50(23): 5865-5871.

    [13] 孫冬梅, 陳秋谷, 畢曉黎, 等. 二基原赤芍HPLC指紋圖譜的建立和5種成分的含量測定 [J]. 中藥材, 2018, 41(4): 898-903.

    [14] 向楚兵, 劉友平, 陳鴻平, 等. 赤芍二基源藥材的HPLC指紋圖譜鑒別及質(zhì)量評價 [J]. 中國實驗方劑學雜志, 2011, 17(23): 43-48.

    [15] 楊正明, 劉哲, 鄧秋林, 等. 四川道地產(chǎn)區(qū)江油附子和川烏中4種核苷類成分含量測定及多元統(tǒng)計分析 [J]. 中草藥, 2018, 49(23): 5657-5664.

    [16] 吳玉紅, 田霄鴻, 同延安, 等. 基于主成分分析的土壤肥力綜合指數(shù)評價 [J]. 生態(tài)學雜志, 2010, 29(1): 173-180.

    [17] 楊正明. 川產(chǎn)道地藥材江油附子和川烏品質(zhì)及其與土壤養(yǎng)分相關性研究 [D]. 雅安: 四川農(nóng)業(yè)大學, 2019.

    [18] 張文霖. 主成分分析在SPSS中的操作應用 [J]. 市場研究, 2005(12): 31-34.

    [19] 陶曉賽, 龔海燕, 謝彩俠, 等. 基于UPLC指紋圖譜結合化學計量學評價不同產(chǎn)地盾葉薯蕷藥材質(zhì)量 [J]. 中草藥, 2021, 52(1): 227-233.

    [20] 張曄, 文繼紅. 芍藥苷抗抑郁作用及機制的實驗研究進展 [J]. 云南中醫(yī)中藥雜志, 2018, 39(12): 78-81.

    [21] 李惠晨, 胡偉, 丁井永. 五沒食子酰基葡萄糖抗腫瘤的作用研究進展 [J]. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學, 2014, 22(9): 2255-2258.

    [22] 張建博, 謝雨, 楊浩然, 等. 五沒食子?;咸烟侵委?型糖尿病及其并發(fā)癥藥效機制研究進展 [J]. 藥學研究, 2015, 34(6): 344-348,352.

    [23] Wang D, Tan Q R, Zhang Z J. Neuroprotective effects of paeoniflorin, but not the isomer albiflorin, are associated with the suppression of intracellular calcium and calcium/calmodulin protein kinase II in PC12 cells [J]., 2013, 51(2): 581-590.

    [24] Hino H, Takahashi H, Suzuki Y,. Anticonvulsive effect of paeoniflorin on experimental febrile seizures in immature rats: Possible application for febrile seizures in children [J]., 2012, 7(8): e42920.

    [25] 劉昌孝, 陳士林, 肖小河, 等. 中藥質(zhì)量標志物(Q-Marker): 中藥產(chǎn)品質(zhì)量控制的新概念 [J]. 中草藥, 2016, 47(9): 1443-1457.

    Comprehensive evaluation on quality of different habitats and parts ofbased on UPLC fingerprint and multicomponent determination

    ZHONG Hai-rong1, ZHANG Shao-shan2, 4, XIAO Fang1, HAILAI Yue-bu1, QUBIE Jun-zhang1, LI Yi-song1, YANG Zheng-ming2, 4, LIU Yuan3, 4

    1. College of Pharmacy, Southwest Minzu University, Chengdu 610041, China 2. Institute of Qinghai-Tibetan Plateau, Southwest Minzu University, Chengdu 610041, China 3. Ethnic Medicine Institute, Southwest University for Nationalities, Chengdu 610041, China 4. Sichuan Provincial Qiang-Yi Medicinal Resources Protection and Utilization Technology and Engineering Laboratory, Chengdu 610225, China

    To determine the content of paeoniflorin, oxypaeoniflorin and 1,2,3,4,6--pentagalloyl glucose in different parts of 18 batches ofand establish an UPLC method for the fingerprint analysis to make a comprehensive analysis on the overall distribution and the differences of the main chemical components in different parts based on the multivariate statistical analysis, which was used to evaluate the medicinal materials quality of.The separation was performed on a chromatographic Diamonsil C18column (100 mm×2.1 mm, 1.8 μm), with acetonitrile-0.1% phosphoric acid as the mobile phase for gradient elution. Column temperature was 30 ℃. Volume flow rate was 0.2 mL/min. Injection was 1 μL and the detection wavelength was 230 nm. The fingerprints were established and evaluated by the Similarity Evaluation System of TCM (version 2012). Difference analysis, similarity analysis (SA), principal component analysis (PCA), TOPSIS analysis, and orthogonal partial least squares-discriminant analysis (OPLS-DA) were used to comprehensively evaluate the quality of.According to the content determination results, the content of oxypaeoniflorin inwas as follows: root>stem>leaf, and the content of paeoniflorin, 1,2,3,4,6--pentagalloyl glucose was as follows: root>leaf>stem. Among them, the content of paeoniflorin in root samples was more than 1.8%, which was in line with the provisions of the 2020 edition of China Pharmacopoeia. The content of paeoniflorin in stems and leaves was close to that of in roots. In this study, the UPLC fingerprint of roots, stems and leaves was established, a total of 17 common peaks were identified, and three common peaks (paeoniflorin, paeoniflorin, 1,2,3,4,6--pentagalloyl glucose) were identified. The results of similarity evaluation showed that the similarity of roots, stems and leaves offrom different habitats was good and the quality was stable.Fingerprint could effectively evaluate the quality offrom different habitats. Based on the quality control index of paeoniflorin (C23H28O11) in the 2020 edition of the China Pharmacopoeia, the content of paeoniflorin in the stems and leaves ofwas similar to that of in the roots, this study provided relevant theoretical basis for the comprehensive evaluation of the quality ofand the development of new medicinal parts.

    Lynch; fingerprints; oxypaeoniflorin; principal component analysis; quality evaluation; resource development

    R286.2

    A

    0253 - 2670(2021)07 - 2062 - 10

    10.7501/j.issn.0253-2670.2021.07.023

    2020-08-09

    國家重點研發(fā)計劃(2018YFC1708005);四川省科技農(nóng)村領域重點研發(fā)(2019YFN0089);中央高校基本科研業(yè)務費專項資金研究類項目(2020NGD01)

    鐘海蓉(1994—),女,在讀碩士,主要從事民族藥品種、品質(zhì)評價及新藥資源開發(fā)與利用研究。Tel: 18328092180 E-mail: 392009773@qq. com

    楊正明,助理研究員,主要從事民族藥資源品質(zhì)評價及其生理生態(tài)與栽培研究。Tel: (028)85528812 E-mail: 790721918@qq.com

    劉 圓,教授,博士生導師,從事民族藥品種、品質(zhì)評價及新藥資源開發(fā)與利用研究。Tel: (028)85528812 E-mail: 499769896@qq.com

    [責任編輯 時圣明]

    猜你喜歡
    赤芍芍藥指紋
    芍藥鮮切花 美景變“錢”景
    陸抑非《芍藥》
    基于網(wǎng)絡藥理學和分子對接技術研究黃芪-赤芍治療COPD的作用機制
    像偵探一樣提取指紋
    為什么每個人的指紋都不一樣
    美麗芍藥化學成分的研究
    中成藥(2019年12期)2020-01-04 02:02:44
    大黃、赤芍對肝衰竭大鼠血清NO合成和分泌影響研究
    新疆赤芍
    基于自適應稀疏變換的指紋圖像壓縮
    自動化學報(2016年8期)2016-04-16 03:39:00
    可疑的指紋
    波多野结衣av一区二区av| 亚洲欧美一区二区三区久久| 色播在线永久视频| www.自偷自拍.com| 亚洲人成77777在线视频| 久久性视频一级片| 国产成人av激情在线播放| 久久久久网色| 免费少妇av软件| 最近中文字幕2019免费版| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 亚洲一区中文字幕在线| 国产亚洲精品第一综合不卡| 国产亚洲精品久久久久5区| 人人妻人人澡人人看| 久久热在线av| 蜜桃国产av成人99| 国产精品国产av在线观看| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 免费在线观看黄色视频的| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 国产片特级美女逼逼视频| 一个人免费看片子| 天堂中文最新版在线下载| 99精品久久久久人妻精品| 中国国产av一级| 久久久久网色| 亚洲视频免费观看视频| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 99久久人妻综合| 久久鲁丝午夜福利片| 国产精品偷伦视频观看了| 国产精品三级大全| 久久人人爽人人片av| 青春草视频在线免费观看| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 欧美日韩一级在线毛片| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 国精品久久久久久国模美| 91麻豆av在线| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产99久久九九免费精品| av在线播放精品| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 午夜日韩欧美国产| 亚洲欧美清纯卡通| 中文字幕精品免费在线观看视频| 在线观看免费视频网站a站| 久久99一区二区三区| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 好男人视频免费观看在线| 亚洲专区中文字幕在线| 人体艺术视频欧美日本| 亚洲精品国产一区二区精华液| 亚洲一区中文字幕在线| 久久狼人影院| 18在线观看网站| 久久久精品94久久精品| 另类精品久久| 男女床上黄色一级片免费看| 亚洲熟女精品中文字幕| 大片免费播放器 马上看| 美国免费a级毛片| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 国产爽快片一区二区三区| 亚洲国产日韩一区二区| 少妇人妻久久综合中文| 五月天丁香电影| 美女中出高潮动态图| 免费观看av网站的网址| 亚洲伊人久久精品综合| 精品久久久精品久久久| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 久久久精品免费免费高清| 一二三四社区在线视频社区8| 男女免费视频国产| 亚洲av男天堂| 欧美精品啪啪一区二区三区 | 久久久精品区二区三区| 国产成人精品在线电影| 亚洲伊人久久精品综合| a 毛片基地| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲精品国产av蜜桃| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 午夜福利在线免费观看网站| cao死你这个sao货| 免费在线观看完整版高清| 蜜桃在线观看..| 热99久久久久精品小说推荐| 三上悠亚av全集在线观看| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 午夜日韩欧美国产| 国精品久久久久久国模美| 高清av免费在线| 在线av久久热| 国产一区亚洲一区在线观看| 99精品久久久久人妻精品| 老司机影院毛片| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 国产成人免费无遮挡视频| 婷婷色av中文字幕| 成在线人永久免费视频| www.精华液| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 午夜福利,免费看| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 久久国产亚洲av麻豆专区| 好男人电影高清在线观看| 国产男女超爽视频在线观看| 国产成人欧美在线观看 | 国产精品一国产av| 咕卡用的链子| 成人午夜精彩视频在线观看| 婷婷色综合大香蕉| 日本欧美国产在线视频| 久久亚洲精品不卡| 只有这里有精品99| 一本综合久久免费| 久久久精品免费免费高清| 久久精品亚洲av国产电影网| 好男人视频免费观看在线| 波多野结衣av一区二区av| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 人人妻人人澡人人看| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲欧美一区二区三区国产| 国产91精品成人一区二区三区 | 又大又爽又粗| 中文字幕高清在线视频| 国产xxxxx性猛交| 中国美女看黄片| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 日本91视频免费播放| 性色av乱码一区二区三区2| 国产成人91sexporn| 大片免费播放器 马上看| 婷婷色综合www| 亚洲国产精品国产精品| 丰满饥渴人妻一区二区三| 十八禁高潮呻吟视频| 国产一级毛片在线| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 国产精品久久久久成人av| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 丝袜美腿诱惑在线| 日韩伦理黄色片| 国产成人一区二区三区免费视频网站 | 日韩一本色道免费dvd| 国产精品 欧美亚洲| 一级毛片我不卡| 下体分泌物呈黄色| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲中文日韩欧美视频| 大片免费播放器 马上看| av国产久精品久网站免费入址| 热99国产精品久久久久久7| 狂野欧美激情性bbbbbb| 美女国产高潮福利片在线看| 一区二区三区激情视频| 丁香六月天网| 人妻 亚洲 视频| 在线精品无人区一区二区三| 大话2 男鬼变身卡| 制服诱惑二区| 咕卡用的链子| 日韩精品免费视频一区二区三区| 国产成人av教育| 欧美国产精品va在线观看不卡| 考比视频在线观看| 七月丁香在线播放| 亚洲av综合色区一区| 性高湖久久久久久久久免费观看| 啦啦啦在线观看免费高清www| 一级黄片播放器| 五月开心婷婷网| 91麻豆av在线| 国产成人欧美| 日韩av不卡免费在线播放| 久久青草综合色| av在线app专区| 久久免费观看电影| 高清不卡的av网站| 午夜免费男女啪啪视频观看| 女警被强在线播放| 曰老女人黄片| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 国产免费福利视频在线观看| 电影成人av| 在线观看免费午夜福利视频| 国产片内射在线| 热re99久久国产66热| 黄色视频不卡| 日本a在线网址| 亚洲五月婷婷丁香| 国产成人免费观看mmmm| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 久久综合国产亚洲精品| 精品久久久精品久久久| 麻豆乱淫一区二区| 少妇粗大呻吟视频| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 精品少妇黑人巨大在线播放| 视频区欧美日本亚洲| 国产成人精品久久二区二区91| 欧美日韩视频精品一区| 久久九九热精品免费| 亚洲伊人久久精品综合| 一级毛片 在线播放| 亚洲欧美清纯卡通| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 久久久久久久久久久久大奶| 搡老乐熟女国产| 乱人伦中国视频| 亚洲国产欧美一区二区综合| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 亚洲综合色网址| 99热全是精品| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 老汉色av国产亚洲站长工具| svipshipincom国产片| 久久久久久久国产电影| 亚洲国产欧美一区二区综合| 超碰成人久久| 成人亚洲欧美一区二区av| 欧美大码av| 丁香六月天网| 亚洲天堂av无毛| 老司机亚洲免费影院| 亚洲久久久国产精品| 国产一区亚洲一区在线观看| av天堂在线播放| 亚洲人成电影观看| 免费日韩欧美在线观看| 人体艺术视频欧美日本| 精品高清国产在线一区| 亚洲,欧美,日韩| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 纯流量卡能插随身wifi吗| 亚洲黑人精品在线| 91九色精品人成在线观看| 国产一卡二卡三卡精品| 亚洲国产中文字幕在线视频| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 极品人妻少妇av视频| 麻豆乱淫一区二区| 久久免费观看电影| 五月天丁香电影| 亚洲成色77777| 亚洲国产精品一区三区| 国产av一区二区精品久久| 两人在一起打扑克的视频| 在线观看www视频免费| 大话2 男鬼变身卡| 亚洲精品国产av成人精品| www.999成人在线观看| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| av天堂在线播放| 亚洲熟女精品中文字幕| 久久久久国产精品人妻一区二区| 久久99一区二区三区| 中文字幕高清在线视频| 久久久久精品人妻al黑| 欧美久久黑人一区二区| av视频免费观看在线观看| 国产成人免费观看mmmm| 99久久人妻综合| 国产一区二区三区av在线| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 国产成人精品在线电影| 国产成人免费无遮挡视频| 国产不卡av网站在线观看| 爱豆传媒免费全集在线观看| 亚洲国产精品国产精品| 一区二区av电影网| 18禁观看日本| 嫁个100分男人电影在线观看 | 亚洲人成电影观看| 亚洲欧美日韩另类电影网站| cao死你这个sao货| 在线 av 中文字幕| 国产免费福利视频在线观看| 人妻人人澡人人爽人人| 大陆偷拍与自拍| 精品一区二区三区av网在线观看 | 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 大话2 男鬼变身卡| 国产精品熟女久久久久浪| 久久女婷五月综合色啪小说| 国产99久久九九免费精品| kizo精华| 久久久久精品国产欧美久久久 | 深夜精品福利| 两个人看的免费小视频| 久久天堂一区二区三区四区| 男女高潮啪啪啪动态图| 午夜福利乱码中文字幕| 2018国产大陆天天弄谢| 国产又爽黄色视频| 爱豆传媒免费全集在线观看| 欧美精品高潮呻吟av久久| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 老司机靠b影院| 这个男人来自地球电影免费观看| 亚洲精品第二区| 欧美在线一区亚洲| 丝袜脚勾引网站| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 亚洲欧美清纯卡通| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产成人a∨麻豆精品| 99re6热这里在线精品视频| av天堂久久9| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 狂野欧美激情性xxxx| 国产深夜福利视频在线观看| 成人黄色视频免费在线看| 我要看黄色一级片免费的| 国产成人啪精品午夜网站| 日本av免费视频播放| 黄色a级毛片大全视频| www.自偷自拍.com| 亚洲一码二码三码区别大吗| 一本色道久久久久久精品综合| 9热在线视频观看99| 亚洲人成网站在线观看播放| 美女主播在线视频| 日本91视频免费播放| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 亚洲人成网站在线观看播放| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 亚洲成人手机| 国产精品久久久人人做人人爽| 免费在线观看黄色视频的| 在线 av 中文字幕| 91麻豆精品激情在线观看国产 | www.av在线官网国产| 精品久久蜜臀av无| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产精品av久久久久免费| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲精品成人av观看孕妇| 啦啦啦 在线观看视频| 亚洲av男天堂| 亚洲欧美激情在线| 国产成人精品在线电影| 国产精品三级大全| 国产高清视频在线播放一区 | 色精品久久人妻99蜜桃| 日本av手机在线免费观看| 丝瓜视频免费看黄片| 亚洲av欧美aⅴ国产| 久久久久久久精品精品| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 大陆偷拍与自拍| 美女扒开内裤让男人捅视频| 欧美日韩av久久| 99国产精品免费福利视频| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 日韩免费高清中文字幕av| 成年动漫av网址| 欧美精品一区二区免费开放| 精品卡一卡二卡四卡免费| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 久久九九热精品免费| 欧美人与性动交α欧美软件| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 深夜精品福利| 最新在线观看一区二区三区 | 午夜福利一区二区在线看| 一区在线观看完整版| 又黄又粗又硬又大视频| 国产欧美日韩一区二区三 | 亚洲久久久国产精品| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| www日本在线高清视频| 91精品三级在线观看| 日韩制服骚丝袜av| 国产精品99久久99久久久不卡| 1024香蕉在线观看| 精品久久久久久电影网| 狂野欧美激情性bbbbbb| www.999成人在线观看| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲精品在线美女| 成人亚洲欧美一区二区av| 亚洲欧洲日产国产| 中文字幕制服av| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 黑人猛操日本美女一级片| 亚洲国产精品国产精品| 日本a在线网址| 亚洲情色 制服丝袜| 精品人妻一区二区三区麻豆| 视频在线观看一区二区三区| 中文字幕av电影在线播放| av天堂在线播放| 国产精品成人在线| 五月天丁香电影| 1024香蕉在线观看| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 成人午夜精彩视频在线观看| 操出白浆在线播放| 欧美精品啪啪一区二区三区 | 999久久久国产精品视频| 亚洲九九香蕉| 制服人妻中文乱码| 老司机靠b影院| 国产伦人伦偷精品视频| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 欧美黑人精品巨大| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 欧美乱码精品一区二区三区| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 国产麻豆69| 水蜜桃什么品种好| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产国语露脸激情在线看| 中文字幕高清在线视频| 男人添女人高潮全过程视频| 国产在线视频一区二区| 一本色道久久久久久精品综合| 国产一级毛片在线| 欧美精品一区二区大全| 日日爽夜夜爽网站| 国产av一区二区精品久久| 欧美黄色淫秽网站| 久久精品久久久久久久性| 国产有黄有色有爽视频| 91老司机精品| 欧美黑人精品巨大| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 久久鲁丝午夜福利片| 亚洲国产中文字幕在线视频| 日本五十路高清| 亚洲人成电影观看| 丝袜脚勾引网站| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 搡老乐熟女国产| 欧美av亚洲av综合av国产av| 后天国语完整版免费观看| 97精品久久久久久久久久精品| 女人久久www免费人成看片| www.熟女人妻精品国产| 男女午夜视频在线观看| 日本午夜av视频| 国产日韩欧美视频二区| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 青春草亚洲视频在线观看| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 嫁个100分男人电影在线观看 | 纵有疾风起免费观看全集完整版| 国产成人免费无遮挡视频| 熟女av电影| 夫妻午夜视频| 国产日韩欧美亚洲二区| 黄片小视频在线播放| 国产成人影院久久av| 99国产精品一区二区三区| 波野结衣二区三区在线| 久久综合国产亚洲精品| h视频一区二区三区| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 一级黄色大片毛片| cao死你这个sao货| 最近手机中文字幕大全| 亚洲中文av在线| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 韩国精品一区二区三区| 久久免费观看电影| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 久久久精品免费免费高清| 91麻豆av在线| 午夜福利视频在线观看免费| 亚洲人成电影免费在线| 久久久精品区二区三区| 电影成人av| 我要看黄色一级片免费的| 90打野战视频偷拍视频| 高清不卡的av网站| 一区福利在线观看| 免费不卡黄色视频| 亚洲精品中文字幕在线视频| 免费看十八禁软件| 国产片特级美女逼逼视频| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 久久99热这里只频精品6学生| 考比视频在线观看| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 久久性视频一级片| 欧美日韩av久久| 久久中文字幕一级| av在线播放精品| 亚洲人成网站在线观看播放| 久久久久视频综合| 国产深夜福利视频在线观看| 日本午夜av视频| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 欧美国产精品va在线观看不卡| 波野结衣二区三区在线| 亚洲 欧美一区二区三区| 一区福利在线观看| 午夜激情久久久久久久| 在线观看人妻少妇| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 妹子高潮喷水视频| 日韩av不卡免费在线播放| 在现免费观看毛片| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 丰满少妇做爰视频| 免费高清在线观看日韩| 午夜日韩欧美国产| 美女高潮到喷水免费观看| 亚洲精品av麻豆狂野| 欧美激情极品国产一区二区三区| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产又色又爽无遮挡免| 国产精品免费大片| 日韩视频在线欧美| 一边亲一边摸免费视频| 精品一区二区三卡| 色综合欧美亚洲国产小说| 日韩视频在线欧美| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 成年动漫av网址| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 爱豆传媒免费全集在线观看| 涩涩av久久男人的天堂| 国产一区二区在线观看av| 国产在线一区二区三区精| 后天国语完整版免费观看| 妹子高潮喷水视频| 最黄视频免费看| 在线观看www视频免费| 国产精品国产三级专区第一集| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产精品一区二区精品视频观看| 成年美女黄网站色视频大全免费| 欧美人与性动交α欧美软件| 中文字幕人妻丝袜制服| 精品久久久精品久久久| 亚洲九九香蕉| 2021少妇久久久久久久久久久| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 一区二区三区乱码不卡18| 国产男女超爽视频在线观看| 丝袜美足系列| 免费观看人在逋| 五月天丁香电影| 精品免费久久久久久久清纯 | 久久人人97超碰香蕉20202| 亚洲国产av新网站| videos熟女内射| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 极品少妇高潮喷水抽搐| 少妇的丰满在线观看| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 婷婷丁香在线五月| 午夜福利乱码中文字幕| 欧美另类一区| 久久亚洲国产成人精品v| 久久影院123| 久久亚洲国产成人精品v| 亚洲情色 制服丝袜| 亚洲久久久国产精品| 黄色a级毛片大全视频| 老汉色av国产亚洲站长工具| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产在线视频一区二区| av国产精品久久久久影院| 国产精品.久久久| netflix在线观看网站| 国产成人精品在线电影| 亚洲国产欧美网| 久久女婷五月综合色啪小说| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 精品高清国产在线一区| 成人亚洲欧美一区二区av| 电影成人av| 日韩 亚洲 欧美在线| 大型av网站在线播放| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 久久性视频一级片| 亚洲国产成人一精品久久久| 一区二区av电影网| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 日韩大片免费观看网站| 少妇精品久久久久久久| 狂野欧美激情性xxxx| 亚洲国产看品久久| 亚洲国产中文字幕在线视频| 欧美变态另类bdsm刘玥| 中文字幕最新亚洲高清| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 精品少妇久久久久久888优播| 女性生殖器流出的白浆| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 成年美女黄网站色视频大全免费| 五月天丁香电影| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 1024视频免费在线观看| 亚洲中文字幕日韩| 中文字幕人妻熟女乱码| 三上悠亚av全集在线观看| 日本vs欧美在线观看视频| 日本91视频免费播放|