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    響應面法優(yōu)化仙人掌多天的提取工藝研究

    2018-05-14 17:05:48修維孫麗娜黃占吉潘磊趙志亮王彥章
    農村經濟與科技 2018年10期
    關鍵詞:響應面分析提取仙人掌

    修維 孫麗娜 黃占吉 潘磊 趙志亮 王彥章

    [摘 要]利用響應面分析法,來優(yōu)化仙人掌多糖的提取工藝。在單因素實驗基礎上選取實驗因素與水平構建數學模型,運用響應面設計和中心組合實驗原理,采用三因素三水平的響應面分析法,來分析料液比、提取時間、提取溫度對仙人掌多糖提取率的影響,并優(yōu)化了水浸提法提取仙人掌多糖的工藝。

    [關鍵詞]仙人掌;多糖;提??;響應面分析

    [中圖分類號]TS241 [文獻標識碼]A

    仙人掌多糖擁有明顯的延緩機體衰老的功能,抗菌消炎的功能,對腫瘤具有良好的抗性和降低血糖的功能。這些年來,對仙人掌多糖及其藥理方面研究進入了人們的視線,并對其進行了初步的研究。但是,關于仙人掌多糖的研究報告卻很少,所以為了能夠對仙人掌多糖進行更加深入的研究,我們將通過實驗方法,在以前提取仙人掌多糖的方法的基礎上,對仙人掌多糖的提取工藝進行優(yōu)化研究。

    1 仙人掌多糖的提取工藝

    1.1 仙人掌多糖的提取工藝流程

    新鮮仙人掌莖(挖除刺狀葉)→切碎→石油醚(沸程60-90℃)回流脫脂(料液比1:5 g/ml)→揮干石油醚的濾渣→濾渣60℃烘干→水浴提取→上清液→蒸發(fā)濃縮至原體積的1/4→取上清液Saveg法除蛋白→活性炭除色素→上清液無水乙醇溶液沉淀→乙醇、丙酮清洗沉淀→真空干燥沉淀→粗多糖→稱重。

    1.2 仙人掌多糖的提取率計算

    采用苯酚-硫酸法對仙人掌多糖的含量進行測定,并計算仙人掌多糖的提取率。粗多糖提取率(%)=[粗多糖干品質量(g)/原料質量(g)] ×l00%

    1.3 單因素實驗

    精密稱取仙人掌粉末5g,采用固定變量法來考察料液比(g/ml)(1:2、1:3、1:4、1:5、1:6和1:7)、提取溫度(40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃)和提取時間(0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h)對仙人掌多糖提取率的影響,其他實驗條件相同的情況下按照試驗流程進行試驗。

    1.4 響應面法對水提取法提取仙人掌多糖的條件優(yōu)化

    根據單因素實驗的結果,選取的響應面試驗的料液比分別為1:4、1:5、1:6,響應面試驗的提取溫度分別為60℃、70℃、80℃,響應面試驗的提取時間分別為1h、2h、3h。以上述三個影響因素作為自變量,以仙人掌多糖的提取率作為響應值設計實驗。進行Box-Behnken中心組合實驗,見表1。

    2 實驗結果與分析

    2.1 單因素實驗結果及分析

    合適的料液比應該在1:4~1:6區(qū)間之內,在70℃左右多糖的提取率最高,提取時間在2~3h區(qū)間內,多糖的提取率最大。

    2.2 采用響應面法優(yōu)化仙人掌多糖提取工藝

    2.2.1 多糖提取實驗方案。依據單因素實驗結果,選取的響應面試驗的料液比分別為1:4、1:5、1:6,響應面試驗的提取溫度分別為60℃、70℃、80℃,響應面試驗的提取時間分別為1h、2h、3h。以上三個影響因素作為自變量,以仙人掌多糖的提取率作為響應值設計實驗。根據單因素實驗設計三因素三水平響應面分析實驗。

    2.2.2 響應面分析方案及結果。以料液比、提取溫度、提取時間為自變量,以仙人掌多糖提取率為響應值,建立仙人掌多糖提取率擬合最優(yōu)的回歸方程模型。多糖產率=0.81+0.025A-3.625E-0.04B+0.013C-5.500E-0.04AB-0.024AC-2.475E-0.03BC-0.034A2-2.485E-0.03B2-0.027C2(A提取溫度,單位為℃;B—提取時間,單位為h;C—料液比,單位為g/ml)

    2.2.3 因素間的交互影響

    根據回歸方程,由兩個提取因素和提取率繪制成的三維圖像可以分析出,如圖1、圖2所示;三個因素對于提取率的影響均為先增大后減小。按照各因素對結果的總體的影響順序為料液比影響最大、提取溫度次之、提取時間最小。

    2.3 最佳提取工藝及實驗模型的合理性驗證

    通過軟件Design -Expert6.0求解方程,給出了最優(yōu)提取工藝條件為:料液比1:5.1,提取溫度73.43℃,提取時間1.84h,此時的實驗預計提取率為0.8166%。因為,在實際操作中,不可能達到這樣的理想條件,另外,在提取效果較好的前提下,還應該考慮到實驗所需試劑、試劑、所需環(huán)境能否達到,因此需要對提取條件進行修正,所得結果為:料液比1:5,提取溫度70℃,提取時間2.0h。同時為檢驗結果的可靠性,利用修正所得的條件來進行浸提實驗,同時進行3組實驗,得出3組實驗所得提取率的平均值為0.80%,與理論預測值基本吻合。可以看出預測值和實驗所得結果是比較接近的,所以可以得出由實驗擬合的結果是符合實際的,在實際應用中是切實可行的。

    3 結論

    本實驗用響應面法進行三因素三水平共17組實驗測定仙人掌多糖的最佳提取工藝,綜合考慮提取工藝的料液比,提取溫度,提取時間等重要影響因素對仙人掌多糖提取率的影響,根據Design-Expert V8.0.6數據分析的最優(yōu)條件為料液比1:5.1,提取溫度73.43℃,提取時間1.84h,仙人掌多糖的提取率為0.8166%。因此在最佳工藝條件下,進行3組重復試驗。驗證結果表明:在此條件下仙人掌多糖實際平均提取率為0.80%,可以看出由實驗擬合的結果是符合實際的。本實驗應用響應面分析法優(yōu)化仙人掌多糖的浸提工藝,通過模型方差分析和響應面法的分析表明,預測值和實驗所得結果是比較接近,該模型回歸顯著,對實驗的擬合性較好,整個試驗方法先進、合理、實驗數據可靠。

    [參考文獻]

    [1] 顧文松,Li-Wen Hsu,劉建,等.仙人掌提取物對斷奶仔豬生產性能、抗氧化能力及免疫功能的影響[J].飼料工業(yè),2011(04).

    [2] 沈寶榮.甘草酸臨床應用及藥理作用[J].職業(yè)與健康,2008(16).

    [3] 石小楓.中西藥合用治療腫瘤研究進展[J].中國藥學雜志,1993(07).

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