2015—2017年甘肅省豬瘟抗體監(jiān)測(cè)及免疫效果分析

陳冬梅 李曉霞 孫劍峰 文立波

摘 要：為評(píng)估甘肅省豬瘟免疫效果，對(duì)2015-2017年甘肅省豬瘟免疫抗體水平進(jìn)行了監(jiān)測(cè)，三年中分別在甘肅各地州市種豬場(chǎng)、規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)、散養(yǎng)戶和其他場(chǎng)地采集樣本共23 051份，采用阻斷酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（Enzyme-linked Immuno Sorbent Assay，ELISA）方法進(jìn)行監(jiān)測(cè)。結(jié)果表明：三年間甘肅省豬場(chǎng)豬瘟抗體總陽(yáng)性率為79.04%：2015年場(chǎng)豬瘟抗體陽(yáng)性率為78.96%，2016年豬瘟抗體陽(yáng)性率為78.97%，2017年豬瘟抗體陽(yáng)性率為79.19%。三年間種豬場(chǎng)豬瘟抗體陽(yáng)性率均高于90%，規(guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)的豬瘟抗體陽(yáng)性率達(dá)82%以上，散養(yǎng)戶豬瘟抗體陽(yáng)性率只有73%，其他場(chǎng)地豬瘟抗體陽(yáng)性率72%～78%。通過(guò)對(duì)近三年豬瘟抗體水平的監(jiān)測(cè)，為研究制定甘肅省豬瘟凈化策略，加強(qiáng)豬場(chǎng)防疫監(jiān)管提供了技術(shù)支持。

關(guān)鍵詞：甘肅?。回i瘟；抗體檢測(cè)；免疫效果

中圖分類號(hào)：S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1001-0769（2018）04-0067-04

豬瘟是由豬瘟病毒引起豬的一種急性、高熱性、高傳染性、高致死性疾病，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)的危害極大，本病遍布全世界，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織將此病列為A類傳染病，是影響?zhàn)B豬業(yè)的頭號(hào)傳染病。就目前養(yǎng)豬生產(chǎn)條件和動(dòng)物疫病控制水平看，豬瘟仍然是我國(guó)生豬生產(chǎn)的主要難題，豬瘟防治效果決定養(yǎng)豬的成敗。免疫接種是防治豬瘟的主要措施。因此，通過(guò)對(duì)免疫豬群進(jìn)行抗體水平檢測(cè)，及時(shí)掌握豬群的免疫水平，了解免疫狀況，建立科學(xué)的免疫程序，將對(duì)控制豬瘟的防控起著至關(guān)重要的作用。

1 材料方法

1.1 材料

1.1.1 被檢血清樣本

2015-2017年三年間從甘肅全省3 207個(gè)采樣點(diǎn)（種豬場(chǎng)51個(gè)、商品代豬場(chǎng)1 661個(gè)、散養(yǎng)戶1 354個(gè)、其他場(chǎng)點(diǎn)141個(gè)）共采集樣本23 051份。

1.1.2 試劑

豬瘟病毒抗體檢測(cè)試劑盒（CSFV-AB），由北京愛(ài)德士元亨生物科技有限公司提供。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 檢測(cè)原理及方法

利用阻斷酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（Enzyme-linked Immuno Sorbent Assay，ELISA）原理來(lái)檢測(cè)豬血清或血漿中豬瘟病毒抗體，如果被檢樣本中存在豬瘟病毒抗體，它們就會(huì)阻斷辣根過(guò)氧化物酶（Horseradish Peroxidase，HRPO）標(biāo)記的抗豬瘟病毒的單克隆抗體。單克隆抗體與豬瘟病毒抗原的結(jié)合可以通過(guò)辣根過(guò)氧化物酶與底物的顯色程度進(jìn)行判定，即用酶標(biāo)儀在單波長(zhǎng)450 nm或雙波長(zhǎng)450 nm與620 nm測(cè)定該反應(yīng)體系的吸光度。當(dāng)被檢樣本中含有豬瘟病毒抗體（陽(yáng)性結(jié)果）時(shí)，顯色就會(huì)變淺，當(dāng)被檢樣本中不含有抗豬瘟病毒抗體（陰性結(jié)果）時(shí)，顯色就會(huì)變深。樣本的阻斷率可以通過(guò)450 nm波長(zhǎng)樣本吸光度與陰性對(duì)照吸光度的比值來(lái)確定。本實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照豬瘟抗體檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書操作。

1.2.2 判定標(biāo)準(zhǔn)

在陰、陽(yáng)性對(duì)照血清成立的前提下，即當(dāng)陰性對(duì)照的平均OD450>0.50，陽(yáng)性對(duì)照的阻斷率大于50%時(shí)，試驗(yàn)結(jié)果有效。如果被檢測(cè)樣本的阻斷率大于或等于40%，該樣本就可以判斷為陽(yáng)性；如果被檢測(cè)樣本的阻斷率小于或等于30%，該樣本就可以判斷為陰性；如果被檢測(cè)樣本的阻斷率介于30%～40%之間，判為可疑，該樣本需數(shù)日后重新檢測(cè)。

2 結(jié)果與分析

2015-2017年在甘肅省進(jìn)行豬瘟免疫抗體水平監(jiān)測(cè)，三年中分別在各地州市種豬場(chǎng)、規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)、散養(yǎng)戶和其他場(chǎng)地采集樣本共23 051份，豬瘟免疫抗體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。

2.1 不同年份血清樣本抗體總陽(yáng)性率比較

2015-2017年，對(duì)甘肅省進(jìn)行豬瘟免疫抗體水平監(jiān)測(cè)結(jié)果表明：2015-2017年三年間甘肅省豬場(chǎng)豬瘟抗體總陽(yáng)性率為79.04%：2015年場(chǎng)豬瘟抗體陽(yáng)性率為78.96%，2016年豬瘟抗體陽(yáng)性率為78.97%，2016年豬瘟抗體陽(yáng)性率為79.19%。豬瘟抗體總陽(yáng)性率呈逐年上升的趨勢(shì)，均超國(guó)家規(guī)定的70%標(biāo)準(zhǔn)，表明甘肅省對(duì)豬場(chǎng)的豬瘟疫苗免疫情況較好，免疫效果達(dá)到較高水平（圖1）。

2.2 不同來(lái)源、不同年份樣本陽(yáng)性率比較

2015-2017年在甘肅省各地州市采集豬血清樣本23 051份，用ELISA方法進(jìn)行豬瘟抗體檢測(cè)，結(jié)果顯示：2015-2017年甘肅省種豬場(chǎng)豬瘟抗體陽(yáng)性率均高于90%，規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)的豬瘟抗體陽(yáng)性率達(dá)82%以上，散養(yǎng)戶豬瘟抗體陽(yáng)性率只有73%，其他場(chǎng)地豬瘟抗體陽(yáng)性率72%～78%。不同群體間的數(shù)據(jù)差異較大 （圖2和表1）。種豬場(chǎng)豬瘟免疫的整體效果很好，散養(yǎng)戶豬群豬瘟免疫效果不太理想，種豬場(chǎng)豬瘟抗體陽(yáng)性率達(dá)92%左右，顯著高于其他豬場(chǎng)；規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)的抗體陽(yáng)性率均達(dá)到80%以上，而散養(yǎng)戶的抗體陽(yáng)性率相對(duì)較低，陽(yáng)性率僅為73%，其原因可能是不同規(guī)模化豬場(chǎng)的飼養(yǎng)管理和免疫方案等存在差異，但所有豬群豬瘟免疫抗體合格率均達(dá)到了國(guó)家農(nóng)業(yè)部的免疫要求。

3 討論

豬瘟是我國(guó)中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）優(yōu)先凈化的12種動(dòng)物疫病之一，國(guó)內(nèi)大部分規(guī)?；i場(chǎng)雖然通過(guò)規(guī)范疫苗免疫程序和逐步完善綜合防控措施，使豬瘟得到一定程度的控制，但仍然不能徹底清除，其根源主要在于隱性感染的種豬通過(guò)水平傳播和垂直感染的方式不斷散播豬瘟病毒，近年來(lái)，豬瘟在我國(guó)以慢性、非典型特征為主，影響母豬繁殖性能，并引起豬體免疫抑制，從而加重了豬場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)損失。

豬瘟在我國(guó)已實(shí)行計(jì)劃免疫多年，特別是2007年國(guó)家將豬瘟免疫納入重大動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫的范疇，使得豬瘟的免疫步入科學(xué)化、規(guī)?；能壍?。我國(guó)主要用弱毒疫苗來(lái)免疫接種預(yù)防豬瘟，但目前在疫苗免疫接種上普遍存在一個(gè)很大的誤區(qū)，即僅僅注重免疫密度，卻忽視了免疫接種的質(zhì)量。養(yǎng)豬場(chǎng)按照免疫接種計(jì)劃定期應(yīng)用豬瘟病毒ELISA 抗體檢測(cè)試劑盒監(jiān)測(cè)豬群免疫抗體水平，可科學(xué)地評(píng)估豬瘟疫苗免疫抗體水平和免疫效果，為合理制定和調(diào)整豬瘟疫苗免疫程序提供可靠依據(jù)，對(duì)防控與消滅豬瘟具有重要意義。

為有效做好豬瘟的防疫工作，切實(shí)了解近幾年我省豬瘟疫苗免疫實(shí)施情況和評(píng)估免疫效果。我們?cè)?015-2017年對(duì)甘肅省部分種豬場(chǎng)、規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)、散養(yǎng)戶和其他場(chǎng)地采集的血清樣本，采用豬瘟病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒進(jìn)行豬瘟抗體水平監(jiān)測(cè)分析。

2015-2017年三年中分別在各地州市種豬場(chǎng)、規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)、散養(yǎng)戶和其他場(chǎng)地采集樣本共23 051份，豬瘟免疫抗體水平監(jiān)測(cè)結(jié)果表明：三年間甘肅省所用豬場(chǎng)豬瘟抗體總陽(yáng)性率為79.04%：2015年場(chǎng)豬瘟抗體陽(yáng)性率為78.96%，2016年豬瘟抗體陽(yáng)性率為78.97%，2016年豬瘟抗體陽(yáng)性率為79.19%。豬瘟抗體總陽(yáng)性率呈逐年上升的趨勢(shì)，均超國(guó)家規(guī)定的70%標(biāo)準(zhǔn)。表明甘肅省豬場(chǎng)的豬瘟防控已經(jīng)取得較好成效。

不同來(lái)源、不同年份豬瘟樣本陽(yáng)性率結(jié)果表明：2015-2017年甘肅省種豬場(chǎng)豬瘟抗體陽(yáng)性率均高于90%，規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)的豬瘟抗體陽(yáng)性率達(dá)82%以上，散養(yǎng)戶豬瘟抗體陽(yáng)性率只有73%，其他場(chǎng)地豬瘟抗體陽(yáng)性率72%～78%。不同群體間的數(shù)據(jù)差異較大。但同一豬群在三年內(nèi)的抗體陽(yáng)性率比較平穩(wěn)，沒(méi)有太大的起伏變化。分析原因可能與豬場(chǎng)的重視程度及較大規(guī)模豬場(chǎng)免疫程序、方案科學(xué)，免疫操作合理，免疫頻率合適有關(guān)。種豬場(chǎng)和規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)對(duì)防疫比較重視，加之都有嚴(yán)格的免疫程序和操作規(guī)程，所以免疫抗體水平普遍較高。散養(yǎng)戶相對(duì)重視眼前利益，近三年全省豬瘟發(fā)病較低，沒(méi)有大規(guī)模豬瘟流行，所以散養(yǎng)戶存在應(yīng)付免疫的情況，相對(duì)免疫抗體合格率較低。

豬瘟群體免疫合格率在一定程度上可以反映豬場(chǎng)豬瘟抗體的免疫效果，因此，要提高豬場(chǎng)的生產(chǎn)效益與經(jīng)濟(jì)效益，必須要有科學(xué)的防控疫病制度，重視豬場(chǎng)的疫病監(jiān)測(cè)工作，并使之制度化、合理化、 常態(tài)化是科學(xué)防控疫病的一種重要措施。加強(qiáng)免疫監(jiān)測(cè)，對(duì)監(jiān)控豬瘟發(fā)展方向，根除豬瘟具有重要作用。我國(guó)已把豬瘟的凈化提到了議事日程，農(nóng)業(yè)部明確要求豬瘟2020年達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)，豬瘟抗體的免疫監(jiān)測(cè)是凈化的嚴(yán)格重要環(huán)節(jié)。

近年來(lái)甘肅省大力推行豬瘟強(qiáng)制免疫，豬瘟防控水平取得了顯著成效。每年在全省開展豬瘟免疫抗體水平監(jiān)測(cè)，及時(shí)掌握豬瘟群體免疫力，對(duì)于豬瘟的預(yù)防、控制和凈化具有積極的推動(dòng)作用。但是，要到2020年底全省豬場(chǎng)豬瘟達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)，還面臨著嚴(yán)峻考驗(yàn)，需繼續(xù)在各地州市縣持續(xù)開展豬瘟疫情監(jiān)測(cè)工作，同時(shí)需要對(duì)養(yǎng)殖戶推廣科學(xué)的免疫程序和豬瘟防疫知識(shí)，保障甘肅省養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。