肺泡灌洗液IL-8、IL-10、INF-γ水平與兒童難治性支原體肺炎及其治療效果的關系研究

許柏華 胡 婷 梁 燕 劉清彪 楊薇斯 魯巍巍 鐘 亮

1.廣東省東莞東華醫(yī)院有限公司兒二科，廣東東莞 523000；2.廣東省東莞東華醫(yī)院有限公司檢驗科，廣東東莞 523000

支原體肺炎是小兒呼吸系統(tǒng)感染的常見類型，以持續(xù)劇烈咳嗽、高熱、伴或不伴血絲的白色痰液等癥狀為主[1]。其中兒童難治性支原體肺炎（RMPP）病情尤其危重，常規(guī)予以大環(huán)內酯類抗生素治療亦無法有效緩解，晚期極易導致肺不張、閉塞性細支氣管炎等并發(fā)癥[2]，嚴重威脅患兒生命安全。目前多以生理鹽水行支氣管肺泡灌洗術結合給予糖皮質激素治療RMPP，且已有多項研究證實治療前后肺泡灌洗液（BALF）多種細胞因子水平有明顯變化[3]，猜測其與疾病進展及治療效果之間關系密切。本研究旨在探討RMPP患兒治療前后BALF中各類細胞因子水平特征，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2016年10月～2017年12月期間我院收治的45例RMPP患兒臨床資料納入RMPP組，根據(jù)療法與療效不同分為A組（單純肺泡灌洗治療有效，n=27）、B組（肺泡灌洗治療效果欠佳而加用激素治療后有效，n=13）與C組（肺泡灌洗聯(lián)合激素治療無效，n=5）三個亞組，另將同時期接受支氣管肺泡灌洗的45例普通支原體肺炎患兒臨床資料納入普通組。納入標準：（1）符合支原體肺炎診斷標準[4]且確診為雙側肺炎者；（2）予以大環(huán)內酯類抗生素治療≥1周后臨床癥狀及影像學表現(xiàn)未能明顯轉歸者（RMPP組）[5]；（3）年齡3～10歲。排除標準：（1）對研究內藥物有過敏反應者；（2）伴有先天性心、肺功能異常者；（3）診斷為其他病原體感染者。其中RMPP組患兒男26例，女19例；年齡4～9歲，平均（6.7±1.7）歲。普通組兒童男24例，女21例；年齡4～9歲，平均（6.5±1.6）歲。兩組受試兒童性別、年齡比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。A組男16例，女11例；年齡4～9歲，平均（6.4±1.5）歲。B組男8例，女6例；年齡4～8歲，平均（6.1±1.4）歲。C組男3例，女2例；年齡5～9歲，平均（6.6±1.8）歲。三組患兒性別、年齡比較均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

所有患兒常規(guī)禁飲食4h，術前30min開始建立靜脈通道聯(lián)合氣管插管誘導麻醉，利多卡因氣道黏膜表面麻醉后經(jīng)鼻腔進鏡觀察支氣管情況[6]，注入溫生理鹽水1mL/kg進行灌洗，最大灌洗量≤20mL，負壓吸出后保留標本，隨后反復沖洗2～4次。RMPP組經(jīng)過上述治療后效果不佳者予以靜脈滴注注射用甲潑尼龍琥珀酸鈉（Pfizer Manufacturing Belegium NV，規(guī)格：40mg，進口藥品注冊證號H20130301）2mg/kg，qd，持續(xù)治療4d后停藥3d為1個療程，連續(xù)應用2個療程后觀察療效。所有標本分別采用白細胞介素-8（IL-8）、白細胞介素-10（IL-10）、干擾素-γ（INF-γ）對應的試劑盒，經(jīng)由酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測其在BALF中的濃度。

1.3 觀察指標

分析兩組及各亞組間患兒BALF中IL-8、IL-10、INF-γ水平差異，并采用Logistic多元回歸分析模型分析其與治療效果的關系。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用統(tǒng)計學軟件SPSS20.0分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以百分率表示，采用χ2檢驗，計量資料以（±s）表示，兩組間采用獨立樣本t檢驗，相關性分析采用Logistic多元回歸分析模型，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組患兒治療前BALF指標比較

治療前，RMPP組患兒BALF中IL-8、INF-γ水平均明顯高于普通組，而IL-10水平則明顯低于普通組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組患兒BALF中IL-8、IL-10、INF-γ水平比較（±s，ng/L）

表1 兩組患兒BALF中IL-8、IL-10、INF-γ水平比較（±s，ng/L）

組別 n IL-8 IL-10 INF-γ RMPP組 45 15.5±2.7 5.6±2.1 106.8±44.5普通組 45 14.1±3.2 7.5±2.8 84.6±35.7 t 2.243 3.642 2.610 P 0.027 0.000 0.011

2.2 治療后三組患兒BALF指標比較

治療后，三組患兒BALF中IL-8、INF-γ水平比較結果顯示A組＜B組＜C組，而IL-10水平結果顯示A組＞B組＞C組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 三組患兒BALF中IL-8、IL-10、INF-γ水平比較（±s，ng/L）

表2 三組患兒BALF中IL-8、IL-10、INF-γ水平比較（±s，ng/L）

注：與C組比較，*P＜0.05；與B組比較，#P＜0.05。

組別 n IL-8 IL-10 INF-γ A組 27 8.3±2.2*# 18.7±3.2*# 47.4±13.2*#B組 13 11.2±2.5* 11.2±3.6* 81.1±16.3*C組 5 14.6±3.2 6.4±3.4 100.3±15.9 tac 5.488 7.828 7.995 Pac 0.000 0.000 0.000 tab 3.737 6.669 7.005 Pab 0.001 0.000 0.000 tbc 2.400 2.569 2.252 Pbc 0.029 0.021 0.039

2.3 BALF指標水平與治療效果相關性分析

Logistic多元回歸分析顯示，RMPP患兒BALF中IL-8、INF-γ水平與治療效果呈負相關，而IL-10水平與治療效果呈正相關（P＜0.05），見表3。

表3 RMPP患兒BALF中IL-8、IL-10、INF-γ水平與療效相關性分析

3 討論

由于早期RMPP與普通支原體肺炎臨床癥狀差異較小，臨床確診主要依賴于應用大環(huán)內酯類藥物是否令疾病轉歸，在治療過程中RMPP患兒病情可能加重而錯失治療的最佳時機[7]。因此，探索診斷效果尚可且時效性更強的方法是兒科臨床亟待解決的重要課題。

隨著纖維支氣管鏡技術的不斷發(fā)展，其在成人與小兒呼吸系統(tǒng)診治中的應用均已較為成熟，不僅可清晰觀察氣道內部形態(tài)、通氣效果及病變部位[8]，還可應用于注入生理鹽水或稀釋藥物進行治療，所得BALF成分分析亦是臨床研究在發(fā)病機制、預后判斷等方面的重要評估資料[9]。據(jù)相關文獻報道，RMPP較普通支原體肺炎進展更為迅速，除支原體感染造成直接損傷外，還可激活機體免疫反應浸潤損害氣道黏膜[10]，此類免疫損傷在血清及起到分泌物細胞因子水平中表現(xiàn)尤為突出。本研究得到與之相似的結論，發(fā)現(xiàn)RMPP患兒BALF中IL-8、INF-γ水平均明顯高于普通組，而IL-10水平則明顯低于普通組，這表明RMPP患兒與普通支原體肺炎患兒氣道炎癥反應損傷程度存在明顯差異，且前者損害度較高，臨床診治RMPP過程中需引起重視，可針對上述指標采取相應干預措施，以保障患兒轉歸效果。多數(shù)學者認為，這與感染早期大量細胞因子釋放破壞氣道黏膜下血管內皮細胞功能，從而導致局部凝血-纖溶功能紊亂有關[11]。

以甲潑尼龍為代表的糖皮質激素是治療RMPP的首選藥物，靜脈給藥即可迅速有效的調控患兒免疫反應，降低局部炎癥反應以緩解癥狀，聯(lián)合以支氣管肺泡灌洗術，能明顯清除氣道分泌物，改善患兒通氣與氧合效率[12]，促進肺功能復舊。相關研究指出，IL-8可直接影響氣道黏膜表面膠原沉積，是介導受損纖維化的主要細胞因子[13]；而INF-γ則由1型輔助性T細胞（Th1）分泌，可激活巨噬細胞破壞病原體，但過度表達可引發(fā)瀑布級聯(lián)反應損傷肺部組織[14]，不利于疾病轉歸。本研究中，RMPP患兒BALF中IL-8、INF-γ水平與治療效果呈負相關，而IL-10水平與治療效果呈正相關，提示IL-8、INF-γ水平越低且IL-10水平越高可說明針對RMPP的治療措施越有效，可見通過上述BALF細胞因子水平分析能初步評估患兒治療效果，進而簡化臨床預后預測工作，為治療途徑探索可提供指導依據(jù)。楊麗娟等[15]認為，IL-10作為2型輔助性T細胞（Th2）合成的抑炎因子，可通過刺激T細胞亞群增殖比例調節(jié)，控制炎癥反應強度，其水平上升可說明氣道內肉芽組織增生或黏膜糜爛等嚴重病理改變受到抑制。

綜上所述，RMPP與普通支原體肺炎患兒BALF中IL-8、IL-10、INF-γ水平存在明顯差異，能為臨床診斷提供依據(jù)，且上述指標與RMPP患兒治療效果聯(lián)系緊密，可作為評估療效的輔助性證據(jù)。

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