慢性乙型肝炎患者HBV DNA載量與血小板及APRI的相關(guān)研究

郭 靜， 李從榮

（武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北 武漢 430060）

據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)道，全球約20億人有過乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染史，其中每年有近100萬人逐步發(fā)展成慢性肝衰竭、肝硬化和原發(fā)性肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）而死亡[1-2]。2006年全國(guó)乙型肝炎流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，我國(guó)1～59歲一般人群乙型肝炎表面抗原攜帶率為7.18%，由此推算，我國(guó)現(xiàn)有約9 300萬例慢性HBV感染者，其中約2 000萬例為慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）患者[3]。有研究表明，持續(xù)的HBV DNA高載量是CHB患者肝硬化和HCC疾病進(jìn)展的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[4-5]。而外周血血小板（platelet，PLT）檢測(cè)作為一種簡(jiǎn)單、易行的方法，對(duì)于評(píng)估CHB患者的肝纖維化程度有著重要的意義。本研究旨在分析CHB患者外周血PLT相關(guān)參數(shù)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶/血小板比值指數(shù)（aspartate aminotransferase-to-platelet ratio index，APRI）與HBV DNA載量的關(guān)系。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象

選取2016年6月—2017年2月就診于武漢大學(xué)人民醫(yī)院感染科的CHB患者55例，其中男37例、女18例，年齡為23～70歲。同時(shí)選取武漢大學(xué)人民醫(yī)院體檢健康者50名作為正常對(duì)照組，其中男30名、女20名，年齡為20～75歲。CHB組與正常對(duì)照組的年齡、性別差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。參考相關(guān)文獻(xiàn)[6-8]，將CHB患者按HBV DNA載量分為3個(gè)組：HBV DNA載量拷貝數(shù)＜105為低載量組（20例），拷貝數(shù)105～107為中載量組（20例），拷貝數(shù)＞107為高載量組（15例）。

1.2 方法

采用XN-20血液分析儀及配套試劑（日本Sysmex公司）檢測(cè)PLT相關(guān)參數(shù)[PLT計(jì)數(shù)、平均血小板體積（mean platelet volume，MPV）、血小板分布寬度（platelet distribution width，PDW）]。采用ADVIA 2400全自動(dòng)生化分析儀（德國(guó)西門子公司）及配套試劑檢測(cè)天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（aspartate aminotransferase，AST）。HBV DNA載量采用Lightcycler1.2 ABI ViiA7實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增儀測(cè)定（美國(guó)ABI公司）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。呈正態(tài)分布的數(shù)據(jù)采用±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；呈非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)采用中位數(shù)（M）[四分位數(shù)（P25～P75）]表示，組間比較采用Kruskal-Wallis秩和檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CHB組與正常對(duì)照組PLT參數(shù)的比較

與正常對(duì)照組比較，CHB組PLT計(jì)數(shù)降低（P＜0.05），MPV和PDW升高（P＜0.05）。隨著CHB患者HBV DNA載量的升高，PLT計(jì)數(shù)呈降低趨勢(shì)，而MPV和PDW呈升高趨勢(shì)，但不同HBV DNA載量之間3項(xiàng)指標(biāo)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 CHB組與正常對(duì)照組PLT參數(shù)的比較 （±s）

注：與正常對(duì)照組比較，*P＜0.05、**P＜0.01

組別 例數(shù) PLT（×109/L） MPV（fL） PDW（%）CHB組 55 152.98±54.94** 11.98±1.22** 15.05±2.84**低載量組 20 156.10±65.06** 11.73±0.95** 14.84±2.53*中載量組 30 152.50±54.26** 12.02±1.30** 15.04±3.08*高載量組 15 149.40±43.30** 12.27±1.43** 15.36±3.07*正常對(duì)照組 50 228.70±56.09 10.49±1.48 13.13±3.13

2.2 CHB組與正常對(duì)照組AST水平及APRI的比較

與正常對(duì)照組比較，CHB組AST水平及APRI明顯升高（P＜0.05）。隨著CHB患者HBV DNA載量的升高，AST水平和APRI均明顯升高，不同HBV DNA載量之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 CHB組與正常對(duì)照組AST水平及APRI的比較[M（P25～P75）]

3 討論

CHB在我國(guó)分布廣泛，是臨床上最常見的傳染病之一。CHB治療的主要目標(biāo)是預(yù)防肝病的進(jìn)展，即減緩肝纖維化和肝硬化進(jìn)程。而肝纖維化是肝細(xì)胞受到細(xì)胞免疫等損傷后發(fā)生的病理反應(yīng)。大部分CHB患者存在程度不一的肝纖維化。早期肝纖維化尚可逆，但晚期肝纖維化則不可逆轉(zhuǎn)，可發(fā)展成肝硬化，因此對(duì)于CHB患者來說，肝纖維化早期診斷和治療就顯得極為重要。為減少“經(jīng)皮肝穿”給患者帶來的痛苦，近年建立了許多預(yù)測(cè)肝纖維化程度的無創(chuàng)模型，在這些模型中均有PLT指標(biāo)，且均顯示肝纖維化嚴(yán)重程度與PLT計(jì)數(shù)呈負(fù)相關(guān)[9-12]。

肝纖維化通過以下機(jī)制影響PLT數(shù)量：（1）CHB患者發(fā)生肝纖維化、肝硬化到一定程度后，會(huì)引起脾大和脾功能亢進(jìn)，脾臟吞噬PLT增多，同時(shí)抗PLT免疫球蛋白也增多，使得PLT破壞增多[13]；（2）CHB患者被HBV感染后抑制骨髓造血，肝功能受損后PLT生成素減少；（3）肝硬化患者體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生PLT儲(chǔ)存池，使得外周血PLT衰竭[14]。關(guān)于CHB相關(guān)指標(biāo)的研究很多[15-16]，尤其是外周血PLT計(jì)數(shù)與慢性肝炎的關(guān)系，但對(duì)PLT相關(guān)參數(shù)進(jìn)一步的探討卻較少。本研究結(jié)果顯示，CHB患者3個(gè)PLT相關(guān)參數(shù)均明顯高于正常對(duì)照者（P＜0.05）；雖然不同HBV DNA載量的CHB患者之間3個(gè)PLT相關(guān)參數(shù)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但均有隨HBV DNA載量增加而升高或降低的趨勢(shì)。這與高改云等[17]研究結(jié)果略有不同，但仍可推測(cè)HBV DNA載量對(duì)這3項(xiàng)指標(biāo)的變化有較大的影響。

除乙型肝炎e抗原外，HBV DNA載量是HBV 復(fù)制活躍程度的一個(gè)重要指標(biāo)。目前，國(guó)內(nèi)外關(guān)于CHB患者血清中HBV DNA含量與肝臟炎癥、纖維化關(guān)系的研究頗多，但還沒有統(tǒng)一的定論[18-19]。在評(píng)估肝纖維化程度無創(chuàng)診斷模型的研究中，有多項(xiàng)指數(shù)被應(yīng)用于這些模型中，包括APRI、Forns指標(biāo)、Fibro值、Fibro指標(biāo)等[9-12]，其中APRI涉及的2項(xiàng)指標(biāo)PLT計(jì)數(shù)和AST是臨床常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目，且計(jì)算簡(jiǎn)便，在診斷肝纖維化方面顯示出良好的診斷價(jià)值，易在臨床實(shí)踐中推廣應(yīng)用[20]，其也多被用于預(yù)測(cè)慢性丙型肝炎（chronic hepatitis C，CHC）顯著肝纖維化和肝硬化。因此，盡管有許多研究評(píng)估了該指數(shù)在CHC患者肝纖維化和肝硬化發(fā)展中的作用，但用于CHB患者的研究卻并不多見。由于CHC和CHB這2種疾病發(fā)病機(jī)制并不相同，所以不能將CHC患者的APRI評(píng)估結(jié)果直接用于CHB的患者[21]。本研究結(jié)果顯示，APRI與HBV DNA載量有關(guān)，HBV DNA載量越高，APRI越大（P＜0.05）。

綜上所述，CHB患者PLT相關(guān)參數(shù)、AST、APRI均明顯高于正常對(duì)照者，且HBV DNA載量對(duì)其影響較大，但尚需更多的研究來支持此結(jié)論，并綜合應(yīng)用于臨床。

[1]GANEM D，PRINCE A M. Hepatitis B virus infection-natural history and clinical consequences[J].N Engl J Med，2004，350（11）：1118-1129.

[2]World Health Organization. Hepatitis B [EB/OL].（2016-04-01）[2017-02-01]. http：//www.who.int/mediacentre/factsheets/fs204/en/.

[3]LU F M，ZHUANG H. Management of hepatitis B in China[J]. Chin Med J（Engl），2009，122（1）：3-4.

[4]CHEN C J，YANG H I，SU J，et al. Risk of hepatocellular carcinoma across a biological gradient of serum hepatitis B virus DNA level[J]. JAMA，2006，295（1）：65-73.

[5]ILOEJE U H，YANG H I，SU J，et al. Predicting cirrhosis risk based on the level of circulating hepatitis B viral load[J]. Gastroenterology，2006，130（3）：678-686.

[6]賴婭芳，楊巖，盛慧萍. 慢性乙型肝炎患者血清中IFN-γ、IL-10、TGF-β1水平與 HBV-DNA 載量的關(guān)系[J]. 寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，32（2）：211-213.

[7] 牛繼華，曹輝，侯彥強(qiáng). 乙型肝炎病毒DNA載量與血小板參數(shù)相關(guān)性分析[J]. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016，37（2）：280.

[8]李雙杰，覃小梅，范宸穎，等. 慢性乙型肝炎患兒HBV DNA載量與肝臟病理、肝功能、肝纖維化血清學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性分析[J]. 臨床肝膽病雜志，2016，32（3）：472-475.

[9]WAI C T，GREENSON J K，F(xiàn)ONTANA R J，et al. A simple noninvasive index can predict both significant fibrosis and cirrhosis in patients with chronic hepatitis C[J]. Hepatology，2003，38（2）：518-526.

[10]FORNS X，AMPURDANèS S，LLOVET J M，et al.Identif i cation of chronic hepatitis C patients without hepatic fibrosis by a simple predictive model[J].Hepatology，2002，36（4 Pt 1）：986-992.

[11]IMBERT-BISMUT F，RATZIV V，PIERONI L，et al. Biochemical markers of liver fi brosis in patients with hepatitis C virus infection：a prospective study[J]. Lancet，2001，357（9262）：1069-1075.

[12]KODA M，MATUNAGA Y，KAWAKAMI M，et al. FibroIndex：a practical index for predicting significant fibrosis in patients with chronic hepatitis C[J]. Hepatology，2007，45（2）：297-306.

[13]LEE C M，LEUNG T K，WANG H J，et al.Evaluation of the effect of partial splentic embolization on platelet values for liver cirrhosis patients with thrombocytopenia[J]. World J Gastroenterol，2007，13（4）：619-622.

[14]LAFFI G，MARRA F，GRESELE P，et al.Evidence for a storage pool defect in platelets from cirrhotic patients with defective aggregation[J].Gastroenterology，1992，103（2）：641-646.

[15]歐宏杰，潘業(yè)，劉家俊，等. 慢性乙型肝炎患者外周血小板參數(shù)與肝臟組織病理的相關(guān)性分析[J]. 肝臟，2016，21（11）：915-919.

[16]都泓蓮，彭穎，李燁，等. 慢性乙型肝炎患者血清肝纖維化指標(biāo)與APRI指數(shù)及PLT的相關(guān)研究[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2017，14（3）：357-360.

[17]高改云，李海中，樊宏偉，等. 乙肝患者血小板指標(biāo)及生長(zhǎng)激素-胰島素樣生長(zhǎng)因子軸的變化觀察[J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2016，26（23）：5348-5350.

[18]FELD J J，WONG D K，HEATHCOTE E J.Endpoints of therapy in chronic hepatitis B[J].Hepatology，2009，49（5 Suppl）：S96-S102.

[19]冼永超，徐茹，楊景毅，等. 慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA 載量與肝組織病理的關(guān)系[J]. 中國(guó)臨床醫(yī)學(xué)，2007，14（3）：337-338.

[20]LIN Z H，XIN Y N，DONG Q J，et al. Performance of the aspartate aminotransferase-to-platelet ratio index for the staging of hepatitis C-related fi brosis：an updated meta-analysis[J]. Hepatology，2011，53（3）：726-736.

[21]GüZELBULUT F，SEZIKLI M，AKKANCETINKAYA Z，et al. AST-platelet ratio index in the prediction of significant fibrosis and cirrhosis in patients with chronic hepatitis B[J]. Turk J Gastroenterol，2012，23（4）：353-358.